Erratum: In vitro에서 osteoclastic Resorption을 시각화하고 정량화하기 위한 간단한 Pit Assay 프로토콜

Summary

체외에서 골쇄설 흡수를 시각화하고 정량화하기 위한 간단한 구덩이 분석 프로토콜에 대한 정오표가 발행되었습니다. 프로토콜 섹션이 업데이트되었습니다.

Abstract

이것은 10.3791/64016

Protocol

체외에서 골쇄설 흡수를 시각화하고 정량화하기 위한 간단한 구덩이 분석 프로토콜에 대한 정오표가 발행되었습니다. 프로토콜 섹션이 업데이트되었습니다.

프로토콜의 1.1단계가 다음과 같이 업데이트되었습니다.

칼슘 원액 (트리스 완충액에서 25 mM CaCl₂·2H₂O, 1.37 mM NaCl, 15 mM MgCl₂·6H₂O)의 제조

받는 사람:

칼슘 원액 (Tris 완충액에서 25 mM CaCl₂·2H₂O, 1.37 M NaCl, 15 mM MgCl₂·6H₂O)의 제조

프로토콜의 1.1.1단계가 다음과 같이 업데이트되었습니다.

1.0M Tris 버퍼를 준비하고 1M HCl을 사용하여 pH를 7.4로 조정합니다.

받는 사람:

50mM Tris 버퍼를 준비하고 1M HCl을 사용하여 pH를 7.4로 조정합니다.

프로토콜의 1.1.2단계가 다음과 같이 업데이트되었습니다.

자석 교반기에 유리 비커를 설정하고 100mL의 1.0M Tris 버퍼를 추가합니다.

받는 사람:

자석 교반기에 유리 비커를 설정하고 100mL의 50mM Tris 버퍼를 추가합니다.

프로토콜의 1.2단계가 다음과 같이 업데이트되었습니다.

인산염 원액 (11.1 mM Na2HPO4·H2O, 트리스 완충액 내 42 mM NaHCO3)

준비

받는 사람:

인산염 원액 (트리스 완충액의 11.1 mM Na2HPO4, 42 mM NaHCO3) 준비

프로토콜의 1.2.1단계가 다음과 같이 업데이트되었습니다.

자석 교반기에 유리 비커를 설정하고 100mL의 1.0M Tris 버퍼를 추가합니다.

받는 사람:

자석 교반기에 유리 비커를 설정하고 100mL의 50mM Tris 버퍼를 추가합니다.

프로토콜의 1.2.2단계가 다음과 같이 업데이트되었습니다.

0.158g의 Na2HPO4·H2O와 0.353g의 NaHCO3의 무게를 달아 Tris buffer에 하나씩 녹입니다.

받는 사람:

0.158g의 Na2HPO4와 0.353g의 NaHCO3의 무게를 달아 Tris buffer에 하나씩 용해시킵니다.

프로토콜의 1.3.1단계가 다음과 같이 업데이트되었습니다.

1.0M Tris 완충액 15mL, 칼슘 원료 용액 7.5mL(단계 1.1.4) 및 인산염 원료 용액 7.5mL(단계 1.2.3)를 혼합하여 30mL의 작업 용액을 준비합니다. 0.2μm 필터로 용액을 여과합니다.

받는 사람:

15mL의 50mM Tris 완충액, 7.5mL의 칼슘 스톡 용액(1.1.4단계) 및 7.5mL의 인산염 원액(1.2.3단계)을 혼합하여 30mL의 작업 용액을 준비합니다. 0.2μm 필터로 용액을 여과합니다.

프로토콜의 1.4단계가 다음과 같이 업데이트되었습니다.

인산칼슘 용액의 제조 (2.25 mM Na2HPO4·H2O, 4 mM CaCl2·2H2O, 0.14 M NaCl, ddH2O의 50 mM 트리스 염기)

받는 사람:

인산칼슘 용액의 제조(2.25 mM Na2HPO4, 4 mM CaCl2·2H2O, 0.14 M NaCl, ddH2O의 50 mM 트리스 염기)

프로토콜의 1.4.1단계가 다음과 같이 업데이트되었습니다.

자성 교반 비드가 있는 비이커에 탈이온수 40mL에 1M HCl 2mL를 넣고 Na2HPO4·H2O 0.016g, CaCl2·2H2O 0.0295g, NaCl 0.409g, 트리스 염기 0.303g을 하나씩 용해합니다.

받는 사람:

자성 교반 비드가 있는 비이커에 탈이온수 40mL에 1M HCl 2mL를 넣고 Na2HPO4 0.016g, CaCl2·2H2O 0.0295g, NaCl 0.409g, 트리스 염기 0.303g을 하나씩 녹입니다.