Pulpitis 연구를 위한 새로운 구강 개그를 이용한 Murine Pulp Exposure Model 구축

요약

이 기사에서는 혁신적인 구강 재갈을 사용하여 마우스에서 치수염 모델을 확립하기 위한 간소화된 프로토콜을 제시한 후 후속 조직학적 분석을 제공합니다.

초록

자연 치아 상실의 흔한 원인인 치수염은 염증이 있는 치수의 괴사와 생체 활성 상실을 초래합니다. 치수염의 기저와 효율적인 치료의 기전을 밝히는 것은 근관 치료 연구의 지속적인 초점입니다. 따라서 치수대 내의 염증 과정을 이해하는 것은 치수대 보존을 개선하는 데 매우 중요합니다. 다른 in vitro 실험과 비교했을 때, murine pulpitis 모델은 치수염의 병리학적 진행을 관찰하기 위해 보다 확실하고 유전적으로 다양한 맥락을 제공합니다. 그러나 마우스를 사용하는 것은 비용 효율성과 접근성에도 불구하고 작은 크기, 협응력이 좋지 않고 내성이 낮아 구강 내 및 치과 시술을 복잡하게 만드는 데 어려움이 있습니다. 이 프로토콜은 마우스 펄프를 노출시키는 구강 재갈의 새로운 설계 및 적용을 도입하여 보다 효율적인 구강 내 절차를 용이하게 합니다. 대부분의 치과 의사가 쉽게 사용할 수 있는 치과 아치로 구성된 구강 재갈은 처음 시술하는 경우에도 수술 준비를 크게 단축할 수 있습니다. Micro-CT, hematoxylin-eosin(HE) 염색 및 면역형광 염색을 사용하여 형태 및 세포 발현의 변화를 확인했습니다. 이 기사의 목적은 연구자들이 이 새로운 구강 재갈을 사용하여 치수염 염증 모델을 만들기 위한 보다 재현 가능하고 덜 까다로운 절차를 확립하도록 돕는 것입니다.

서론

치아의 필수적인 부분인 치수는 영양 공급, 상아질 형성, 감각 기능 및 방어 반응과 같은 여러 필수 기능을 담당합니다¹. 그럼에도 불구하고, 단단한 조직으로 둘러싸인 치수는 깊은 우식증, 치수염, 외상 또는 후속 치료로 인한 부상 및 손상에 취약하다 ^2,3. 기능성 치수가 없으면 치아 취약성의 위험이 증가합니다⁴. 더욱이, 젊은 영구치에서 치수의 활력 상실은 치아 성숙에 부정적인 영향을 미칠 수 있으며, 현재의 의치 기술은 건강한 치수가 제공하는 신경 피드백을 복원하지 못합니다⁴. 이러한 상황으로 인해 연구자들은 단순한 제거를 넘어 염증이 있는 치수를 관리하기 위한 대체 솔루션을 모색하게 되었습니다.

2007년 Murray et al.은 재생 근관 치료에 조직 공학을 적용하기 시작했으며, 이로 인해 치수량 보존 및 재생에 대한 관심이 높아졌습니다⁵. 그러나 염증이 있는 치수는 세포가 염증 세포를 모집하는 IL-6와 같은 염증 인자를 방출하여 세포 괴사, 치수 활력 상실 ....

프로토콜

이 연구의 실험 절차는 쓰촨 대학교 화화서부 구강학 학교 윤리위원회(WCHSIRB-D-2021-125)의 승인을 받았습니다. 성체 C57BL/6 마우스는 중국 청두에 있는 Gempharmatech Experimental Animals Company에서 수득하였다. 상악 제1대구치의 크라운 전체는 출생 후 21일 후에 맹출합니다. 수술용 마우스는 생후 21일 이상이어야 하며 생명력이 정상이어야 한다¹¹. 여기에서는 6주에서 8주 된 쥐를 모델링에 사용했습니다. 그림 1 은 사용된 프로토콜을 보여주는 흐름도입니다.

1. 수술 전 준비(그림 2)

1. 다음 기구를 얻을 수 있습니다: 입체 현미경, 고정판, 의료용 테이프, 구강 재갈, 직경 0.6mm의 최소 침습 치과용 버, 치과용 고속 치과용 핸드피스, 8# C+ 파일, 가열 패드, 1mL 주사기, 멸균 면봉, 안구 집게.
2. 다음 약물을 얻으십시오 : 마취 믹스, 수의학 연고.

결과

상술한 시술은 3주령, 6-8주령 C57BL/6 마우스의 우측 상악 제1대구치에 수행하였고, 좌측 상악 제1대구치는 대조군으로 보존하였다. 블랭크 대조군, 12시간 치수염 및 24시간 치수염 샘플의 조직학 및 면역형광 결과를 시연에 활용했습니다.

Goldman et ^al.15의 CT 분석 프로토콜에 따라, 도 4 A-C의 micro-CT 및 재구성 모델링을 통해 펄프 노출을 확인하였다. 대조군과 수술 측 모두에서 상악 첫 번째 어금니의 시상 절편은 HE 염색을 받았습니다(그림 5). 상처 가장자리에서 치수조직 괴사와 세포 형태 붕괴가 나타났습니다. 괴사는 주로 천공 부근의 치수조직에 집중되어 있었으며, 미개봉 쪽의 치수조직의 형태는 정상이었다. 24시간에서, 뿌리 펄프를 포함한 대부분의 펄프 조직은 형.......

토론

치아 내의 유일한 연조직인 치수는 치아의 생체 활성을 유지하는 데 중요한 역할을 하지만 여전히 매우 민감합니다. 이 중요한 치수의 보존은 최근 근관 치료에서 선호되는 초기 접근법이 되었으며, 이에 따라 치수의 염증 메커니즘에 대한 포괄적인 이해가 필요하게 되었다¹⁶. 염증성 미세환경의 시공간 변동과 치수염에서 상주 세포 유형 간의 상호 작용은 in vitro 연구를 통한 연구를 복잡하게 만듭니다¹¹. 대신, in vivo 연구는 인간에서 발견되는 생리적 환경을 복제함으로써 이점을 제공합니다. 실험용 마우스, 특히 유전자가 과발현되거나 다운된 마우스를 활용하면 가설 검증을 위한 효과적인 도구를 제공할 수 있습니다. 그러나 실험실에서 자주 사용되는 C57 마우스는 크기가 작고 협응력이 부족하여 치아에 자극을 가하는 데 문제가 있습니다¹⁷. 이 문제를 해결하기 위해서는 연구자.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
Animal
C57/B6J 쥐	Gempharmatech Experimental Animals Company	C57/B6J	펄프 노출 설립을 위해
Equipment
1 mL 주사기	Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & 악기 (주)	SB1-074(IV)	약물 주입에 도포한다.
8 # C + 파일	Readysteel	0010047	펄프 챔버의 지붕을 노출시키는 데 적용하십시오.
마취 믹스 용액			10% 케타민 염산염+ 5% 자일라진 + 85% 멸균 등장성 식염수.
DAPI 염색 용액	Beyotime	C1005	핵 반대 염색을 위한 면역형광 염색에 적용하십시오.
치과 고속 치과 handpiece	Jing yuan 전자 상거래 기술	WJ-422	펄프 노출에서 적용한다.
헤비 와이어 커터	Jirui Medical Instrument Co., Ltd.	없음	inarc 절단을 적용합니다.
Hematoxylin 및 Eosin 염색 키트	Biosharp	BL700B	슬라이드의 조직학적 분석용.
IL-6 항체	Novus	NBP2-89149	면역형광 염색에 적용하여 치수의 염증을 감지합니다.
케타민(케타민 염산염)	Vet One, Boise, Idaho, USA	C3N VT1	100mg/kg, IP. 네스테화에 적용하십시오.
의료 탭	3M	1530	마우스 고정에 적용하십시오.
교정 아치 와이어	상해 Wei 룽 의학 기구 Co. 주식 회사.	K417	8&마이크로의 직경; m
라운드 치과 버 (0.6mm)	Shofu 글로벌	072208	법랑질과 상아질의 얕은 층을 제거 할 때 도포합니다.
젊은 루프 벤딩 플라이어	Jirui Medical Instrument Co., Ltd.	없음	아크 벤딩에 적용됩니다.

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