생쥐에서 원위 안와하부 신경의 만성 수축 손상은 촉각 자극에 대한 반응으로 자발적 행동(얼굴 손질 활동 증가)과 통각 행동(von Frey 모발 자극에 대한 과민성)의 변화를 유발하며, 이는 지속적인 통증 및 이질증의 징후이며 삼차신경병증성 통증의 모델 역할을 합니다.
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이 논문에서
요약
초록
동물 모델은 신경병증성 통증을 연구하는 데 필요한 도구로 남아 있습니다. 이 원고는 마우스의 삼차신경병증성 통증을 연구하기 위한 원위 안와하부 신경 만성 수축 손상(DIoN-CCI) 모델에 대해 설명합니다. 여기에는 만성 수축 손상을 수행하기 위한 외과적 절차와 진행 중인 통증 및 기계적 이질증의 징후인 자발적 및 유발적 행동의 변화를 평가하기 위한 수술 후 행동 검사가 포함됩니다. 이 방법과 행동 판독은 쥐의 안와하신경 만성 수축 손상(Infraorbital Nerve chronic constriction injury, IoN-CCI) 모델과 유사합니다. 그러나 IoN-CCI 모델을 마우스에 적용하기 위해서는 중요한 변경이 필요합니다. 첫째, 안와 내 접근법은 눈과 수염 패드 사이를 절개하는 보다 로스트랄 접근법으로 대체됩니다. 따라서 IoN은 안와강 외부에서 원위부로 결찰됩니다. 둘째, 생쥐의 운동 활동이 더 높기 때문에 쥐가 작은 우리에서 자유롭게 움직일 수 있도록 하는 것은 맞춤형으로 설계되고 제작된 구속 장치에 쥐를 넣는 것으로 대체됩니다. DIoN 결찰 후, 마우스는 자발적인 행동과 폰 프레이 모발 자극에 대한 반응에서 IoN-CCI 랫트와 유사한 변화, 즉 IoN 영역의 폰 프레이 모발 자극에 대한 지시성 얼굴 그루밍 증가 및 과민 반응을 보입니다.
서론
신경병증성 통증은 체성 감각 신경계의 손상으로 인해 발생하며, 이로 인해 감각 신호가 뇌에 비정상적으로 전달됩니다. 체성 감각 신경 손상이 항상 신경병증성 통증으로 이어지는 것은 아니지만, 임상적 신경병증의 중증도에 따라 유병률이 증가한다 1,2. 신경병증성 통증 환자는 자발적인 감각(작열감, 바늘로 찌르는 느낌, 전기 감각)과 비정상적으로 강렬하거나 오래 지속되는 통증, 무해하거나 유해한 자극과 같은 특정 증상을 경험하며, 이러한 증상은 만성화되고 기존 진통제 치료에 내성이 생기는 경향이 있다3. 신경병증성 통증 연구 분야에서 중요한 진전은 쥐의 좌골 신경 주위의 합자를 느슨하게 수축시키면 인간의 신경병증성 통증 상태와 유사한 행동이 발생한다는 발견에서 비롯된다4. 동물들은 열, 추위, 기계적 자극에 대한 역치가 감소하고 통각적 행동을 보인다. 인간과 설치류 사이의 통증 처리에 내재된 생물학적 차이에도 불구하고 동물 모델은 신경병증성 통증 발병의 기본 메커니즘을 연구하고 새로 제안된 치료 전략을 테스트하는 데 유용한 도구입니다.
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프로토콜
동물은 국제 통증 연구 협회(International Association for the Study of PAIN)의 의식 있는 동물의 통증 연구 지침과 동물 연구에 대한 플랑드르 및 유럽 규정 및 ARRIVE 지침에 따라 치료되고 보살핌을 받습니다. 이 프로토콜은 기관 윤리 위원회(institutional Ethical Committee)의 승인을 받습니다.
1. 동물
- 수컷 및 암컷 C57BL/6J 마우스(Janvier, 도착 시 10주령)를 사용하십시오.
- 습도가 40%-60%이고 실온(RT)이 21 ± 1 °C인 식민지 방의 표준 단단한 바닥 마우스 케이지에 수컷과 암컷 마우스를 따로 수용합니다.
- 물과 음식을 즉시 제공 하십시오.
- 정상적인 12:12 h 어둡고 밝은 주기(08:00에 켜짐)로 마우스를 유지하십시오.
2. 수술
- 마우스 당 약 6cm 길이의 크롬 내장 합자(6-0) 한 조각을 준비하고 건조 및 뻣뻣하고 부서지기 쉬운 것을 방지하기 위해 멸균 식....
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결과
DIoN-CCI 마우스는 수술 후 고립된 얼굴 그루밍에 소요되는 시간과 고립된 얼굴 그루밍 에피소드 횟수가 크게 증가한 것으로 나타났습니다(그림 3). 가장 강한 증가는 수술 후 첫 주에 발생하고 그 다음 주에 작아지지만 적어도 6주 동안은 크게 증가합니다. 바디 그루밍 중 얼굴 그루밍은 거의 영향을 받지 않습니다.
DIoN-CCI 마우스는 DioN-CCI 후 첫 주 동안 동측 IoN 영역의 동측 기계적 자극에 거의 완전히 반응하지 않았습니다(그림 4). 다음 몇 주 동안, 이러한 과민반응은 적어도 6주 동안 지속되는 과민반응으로 대체됩니다. 또한 반대측 기계적 자극에 대한 반응이 약간 증가할 수 있습니다.
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토론
랫트의 경우, 진동촉각 판별에서 복잡한 휘젓는 패턴을 제어하는 온전한 미세한 근육 조직의 중요성과 피부 안와하 신경 영역까지의 정중선 절개의 상대적 거리를 고려할 때, IoN에 대한 안와내 접근법이 바람직하다는 주장이 이전에 제기되어 왔다10. 다른 사람들은 털이 많은 피부, 꼬리에서 진동 패드까지 절개를 통한 원위 접근법이 여러 가지 이점이 있다고 주장했습니다13,14. 외과적으로, 이것은 최소한으로 침습적인 더 쉬운 기술이다. 입체 프레임을 사용하지 않고 더 짧은 시간에 수행 할 수 있습니다. 두 기술 모두 유발된 통증 행동과 유발되지 않은 통증 행동 모두에서 유사한 수술 후 행동 효과를 가져옵니다. 또한, 이 시술은 시술 중 안와 내용물을 편향시켜 발생할 수 있는 눈의 불편함과 신경 결찰과 눈 사이의 접촉을 잠재적으로.......
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공개 사항
저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.
감사의 글
저자는 인정서가 없습니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 크롬 캣거트 (6-0) | Dynek | CG602D | 합자 |
| 면 어플리케이터 | 약국 | ||
| 디지털 비디오 카메라 | Sony | HDR-CX330E | |
| Dumont #5 집게 | Fine Science Tools | 11251-10 | |
| Dumont 집게 - 마이크로 뭉툭한 팁 (#5/45) | Fine Science Tools | 11253-25 | |
| Duratears | Alcon | 0037-820 | 안과 연고 |
| 갈고리 결찰 보조기 | Fine Science Tools | 18062-12 | |
| Ketalar | Pfizer | 케타민 (50 mg/mL) | |
| 작동 현미경 | Kaps | SOM 62 | |
| 정밀 면봉 | Qosina | 10225 | |
| 정밀 트리머 | Philips | HP6392/00 | |
| Rompun | Bayer | xylazine (2의 %) | |
| 가위 - 무딘 팁 | Fine Science Tools | 14574-09 | |
| Semmes-Weinstein Von Frey 감각 측정기 키트 | Stoelting | 58011 | |
| Vicryl Rapide | Ethicon | MPVR489H | 봉합사 |
참고문헌
- Costigan, M., Scholz, J., Woolf, C. J. Neuropathic pain: a maladaptive response of the nervous system to damage. Annu Rev Neurosci. 32, 1-32 (2009).
- Torrance, N., Smith, B. H., Bennett, M. I., Lee, A. J. The epidemiology of chronic pa....
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재인쇄 및 허가
