제한된 침구와 둥지는 생쥐의 초기 삶의 역경에 대한 모델입니다.

요약

이 프로토콜은 출생 후 초기에 빈곤한 환경과 예측할 수 없는 산모의 보살핌으로 인한 초기 삶의 역경이 뇌 발달과 정신 장애의 미래 위험에 어떻게 영향을 미치는지 연구하기 위한 동물 모델을 설명합니다.

초록

학대, 방치, 자원 부족, 예측할 수 없는 가정 환경과 같은 초기 삶의 역경(ELA)은 우울증과 같은 신경 정신 질환 발병의 위험 요인으로 알려져 있습니다. ELA에 대한 동물 모델은 만성 스트레스가 뇌 발달에 미치는 영향을 연구하는 데 사용되어 왔으며, 일반적으로 인간을 포함한 포유류의 초기 생활 경험의 주요 원인이기 때문에 모성 관리의 품질 및/또는 양을 조작하는 데 의존합니다. 여기에서는 마우스에 LBN(Limited Bedding and Nesting) 모델을 사용하기 위한 자세한 프로토콜이 제공됩니다. 이 모델은 새끼를 위한 둥지를 짓기 위해 댐에 제공되는 둥지 재료의 양을 제한하고 케이지의 메쉬 플랫폼을 통해 쥐를 침대에서 분리함으로써 중요한 발달 기간(출생 후 2-9일) 동안 단편적이고 예측할 수 없는 모성 관리 패턴을 유발하는 자원이 부족한 환경을 모방합니다. LBN 모델로 인한 모성 행동의 변화, 강아지 체중 감소 및 기저 코르티코스테론 수치의 장기적 변화를 설명하기 위해 대표 데이터가 제공됩니다. 성인이 되었을 때 LBN 환경에서 자란 자손은 비정상적인 스트레스 반응, 인지 결핍 및 무쾌감증과 같은 행동을 보이는 것으로 나타났습니다. 따라서 이 모델은 스트레스에 민감한 뇌 회로의 성숙이 ELA에 의해 어떻게 변화되고 정신 장애에 취약성을 부여하는 장기적인 행동 변화를 초래하는지 정의하는 중요한 도구입니다.

서론

출생 후 초기는 환경적 영향이 발달 궤도를 바꿀 수 있는 중요한 발달 시기입니다. 예를 들어, 어린 시절의 역경(ELA)은 뇌 발달을 변화시켜 인지 및 정서적 기능의 장기적인 변화를 유발할 수 있습니다. ELA의 예로는 신체적 또는 정서적 학대, 방치, 부적절한 자원, 아동기 또는 청소년기에 발생하는 예측할 수 없는 가정 환경^{등이 있다 1}. ELA는 우울증, 약물 사용 장애, 외상 후 스트레스 장애(PTSD) 및 불안과 같은 장애를 발병시키는 위험 요인으로 알려져 있습니다 2,3,4,5. 이는 미국의 아동 빈곤 수준이 2021년 5.2%에서 2022년 12.4%로 최근 두 배 이상 증가했다는 점을 감안할 때 중요합니다⁶, 빈곤 자체가 반드시 ELA는 아니지만 다양한 유형의 ELA의 가능성을 증가시킵니다⁷.

동물 모델은 어린 시절의 스트레스가 뇌 발달과 성인의 결과에 미치는 영향을 이해하는 ....

프로토콜

동물과 관련된 모든 절차는 미국 국립보건원(National Institutes of Health)의 실험동물 관리 및 사용 가이드(National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)에 따라 수행되었으며, 조지아 주립 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았습니다(승인 번호 A24011). 생쥐는 조지아 주립 대학의 동물 시설에서 사육되고 관리되었습니다. 실험은 주산기(출생 후 일[P] 2-10) 동안 C57BL/6J 균주에 대해 수행되었으며 남성과 여성을 포함했습니다. 이 연구에 사용된 시약 및 장비는 재료 표에 나열되어 있습니다.

1. 재료 설정

1. 케이지의 치수에 따라 메쉬 디바이더를 자르고 긴 쪽에 3cm를 초과하여 남겨 둡니다.
   알림: 재료 표에 제공된 메쉬는 제조업체에서 절단한 것입니다.
2. 초과분을 포함하여 가장자리를 케이지 가장자리에 정확하게 맞고 바닥에서 ~2.5cm 높이로 플랫폼을 만드는 방식으로 접습니다. 이렇게 하면 소변과 대변이 그물망 칸막이를 통....

결과

대표적인 결과는 LBN 케이지의 빈곤한 환경으로 인해 부과된 ELA가 댐에서의 모성 보호와 자손의 생리적 결과에 어떻게 영향을 미치는지를 보여줍니다. 모성 돌봄 행동의 일일 엔트로피는 P3-P6일에 걸쳐 LBN에서 더 높습니다(F_1,58 = 7.21, p = 0.0094; 그림 2A), 이 기간 동안 각 댐의 평균 엔트로피(t₁₅ = 3.03, p = 0.0085; 그림 2B). 주목할 만한 점은, 동일한 처리군 내에서 유지될 경우 동일한 댐의 다른 깔짚 간에 평균 엔트로피 속도에는 유의한 차이가 없다는 점이다(F_1.699,4.247 = 0.57, p = 0.58; 그림 2C), 엔트로피 속도가 각 댐에 대해 다소 안정적인 특성일 수 있음을 시사합니다. 모든 행동 .......

토론

이 기사에서는 마우스에 LBN 모델을 적용하기 위한 자세한 프로토콜을 제공합니다. 이 모델은 어린 시절의 만성 스트레스의 행동학적, 번역학적으로 관련된 형태가 어떻게 자손의 신경정신질환 발병에 기여하는지 이해하는 데 중요한 도구이다¹³. 또한 분자, 신경내분비 또는 회로 기반 관점에서 모성 행동과 댐 뇌의 변화를 연구하는 데 유용하다²⁴. 이러한 유형의 질문의 경우 다중성이 고려해야 할 더 중요한 변수일 수 있습니다. 우리는 모성 행동 엔트로피 점수가 동일한 댐 내의 여러 새끼에서 일관되게 유지되는 것을 관찰했으며(그림 2C), 이는 엔트로피가 각 댐에서 다소 안정적인 특성일 수 있음을 시사합니다. 이 발견은 비용이 많이 들거나 희귀한 형질전환 마우스의 경우와 같이 무효 암컷만을 사용하는 것이 불가능할 때 다발성 암컷 마우스의 사용을 정당화할 수 있다. 다른 변수(예: 자궁 내 환경)에 대한.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

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