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방법 논문

반복되는 자기 자극 하에서 체외 에서 Myelin 파편의 미세아교세포 형성 평가

1.6K 조회수

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DOI:

10.3791/67642

⸱

2025년 6월 17일

 ,  ,  ,  , 
1Department of Rehabilitation Medicine, The Affiliated Suzhou Hospital of Nanjing Medical University, 2Rehabilitation Medicine Center, The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, 3Department of Children's Rehabilitation, Linyi People's Hospital, 4Department of Endocrinology, People's Hospital of Dongxihu District, 5Department of Rehabilitation, Hengyang Medical School, The First Affiliated Hospital, University of South China

이 논문에서

요약

본 프로토콜은 미세아교세포의 미세세포세포 파편에 대한 반복적인 자기 자극의 효과를 평가하기 위해 고안되었습니다. 이를 위해 체외 미세아교세포와 미엘린 파편 공동 배양 시스템이 구축되었습니다.

초록

중추신경계(CNS)에 상주하는 식세포인 미세아교세포(Microglia)는 손상된 세포, 세포 파편 및 미엘린 잔여물을 제거하여 중추신경계의 무결성과 항상성을 유지하는 데 중추적인 역할을 합니다. 미엘린 파편의 축적은 다발성 경화증, 알츠하이머병, 외상성 뇌 손상 및 척수 손상을 포함한 다양한 CNS 장애와 관련이 있습니다. 미엘린 파편이 있으면 신경 염증이 악화될 뿐만 아니라 미엘린의 재생 잠재력이 저하됩니다. 그러므로, 식세포작용을 통해 미엘린 파편을 제거하는 미세아교세포의 능력을 향상시키는 것은 유망한 치료 전략을 나타냅니다. 자기 자극은 중추신경계 질환에 대한 혁신적인 치료 방식으로 부상했으며, 미세아교세포 식세포작용을 촉진하고 중추신경계 회복을 지원할 수 있는 잠재력을 시사하는 증거가 증가하고 있습니다. 미엘린 파편의 미세아교세포 청소에 대한 자기 자극의 효과를 추가로 설명하기 위해 미세아교세포와 미엘린 파편의 공동 배양을 포함하는 체외 실험을 설계했습니다. 공동 배양은 CNS 병리학의 맥락에서 미세아교세포 형성 활성에 미치는 영향을 평가하기 위해 반복적인 자기 자극을 받았습니다.

서론

미엘린(Myelin)은 중추신경계(CNS)에서 희소돌기아교세포(oligodendrocyte)에 의해 생성되는 축삭돌기를 둘러싸고 있는 안정적인 관형 막 구조입니다. 이 수초는 활동 전위1의 빠르고 효율적인 전파를 촉진하는 데 중요한 역할을 합니다. 그러나 다발성 경화증(MS), 뇌졸중과 같은 다양한 신경 장애와 척수 손상(SCI) 및 외상성 뇌 손상(TBI)을 포함한 외상성 손상은 미엘린 무결성의 상실로 이어질 수 있습니다. 이로 인해 미엘린 수초(myelin sheath)의 붕괴로 인해 미엘린 파편(myelin debris)이 생성되고 수초(myelin structure) 2,3,4에 대한 직접적인 손상이 발생합니다. 미엘린 파편이 쌓이면 재수초화와 기능 회복을 방해할 뿐만 아니라 신경염증을 악화시킬 수 있습니다 5,6. 따라서 미엘린 파편을 효과적으로 제거하는 것은 신경 염증을 해결하고, 축삭 재생을 촉진하며, 신경 질환 후 신경계의 항상성을 회복하는 데 필수적입니다.

미엘린 파편은 주로 중추신경계(CNS)의 대식세포 및 미세아교세포와 같은 식세포에 의해 제거됩니다. 중추신경계의 상주 면역 세포인 미세아교세포는 잠재적인 위협이 있는지 지속적으로 환경을 조사하고 손상된 미엘린과 미엘린 파편을 제거하여 중추신경계를 보호합니다. 또한, 미세아교세포 형성(microglial phagocytosis)은 파편 제거를 통해 신경 발생을 촉진하는 데 중요한 역할을 합니다 7,8. 미엘린 파편의 미세아교세포 형성을 강화하면 염증의 유해한 영향을 완화하고 중추신경계 손상을 줄이며 신경 손상 후 축삭 재생을 촉진할 수 있다는 증거가 증가하고 있습니다. 4,9,10.

비침습적 신경조절 기법인 자기자극요법(magnetic stimulation therapy)은 다양한 신경질환 치료에 널리 사용되고 있다11. 특히, 반복적인 경두개 자기 자극(rTMS)은 알츠하이머병(AD), 뇌 손상 및 뇌졸중에 대한 치료법으로 유망한 것으로 나타났습니다 12,13,14. 최근 연구에 따르면 rTMS는 아밀로이드-베타(Aβ) 및 아포지단백 E(ApoE)의 미세아교세포작용(microglial phagocytosis)을 향상시켜 동물 모델에서 알츠하이머병의 병리학적 진행을 억제할 수 있음이 입증되었습니다15. 유사하게, 우리의 최근 연구는 반복적인 경척추 자기 자극(rTSMS)이 쥐의 척수 손상 후 미엘린 파편의 미세아교세포작용(microglial phagocytosis)을 촉진한다는 것을 발견했다16.

그럼에도 불구하고, 미세아교세포에 대한 반복적인 자기 자극의 영향은 동물 17,18,19의 실험 모델을 통해 주로 입증되었습니다. 실제로, 자기 자극은 전류의 유도를 통해 뉴런 흥분성을 조절하는 것으로 입증되었습니다20. 결과적으로, 뉴런과 미세아교세포 사이의 상호 작용이 미세아교세포 기능에 영향을 미칠 수 있다는 것을 무시할 수 없습니다. 결과적으로, 미세아교세포에 대한 자기 자극의 영향이 신경 흥분성의 변화와 무관한지 여부를 확인하기 위해 시험관 내 실험이 필요합니다. 최근 연구에서는 실험 모델에서 미세아교세포에 대한 반복적인 자기 자극의 조절 효과를 확인했습니다. 일부 연구에서는 반복적인 자기 자극이 M2에 대한 미세아교세포 분극을 촉진할 수 있음을 보여주었습니다19,21. 그러나 미세아교세포 기능에 대한 추가 연구는 아직 밝혀지지 않았습니다. 특히, 아멜리 아이클러(Amelie Eichler) 등은 10Hz 자기 자극을 사용하여 체외에서 뇌 조직 절편에 개입하여 10Hz 자기 자극이 미세아교세포에서 사이토카인의 방출을 촉진하여 신경 흥분성과 가소성에 영향을 미칠 수 있음을 발견했다22. 이 연구는 미세아교세포에 대한 자기 자극의 영향에 대한 이해를 확장시켰지만, 그 메커니즘을 완전히 규명하기 위해서는 세포 수준에서의 추가 조사가 필요합니다.

따라서 우리는 자기 자극이 in vitro에서 미엘린 파편의 식세포작용을 촉진할 수 있는지 여부를 확인하기 위한 프로토콜을 수립했습니다. 질병 후의 미엘린 파편이나 손상의 산물인 조직 손상과 달리, 본 실험에서 사용된 미엘린 파편은 수초가 분해된 후의 형태입니다. 또한, 미엘린 파편(myelin debris)의 개념은 미엘린 붕괴(myelin disintegration)의 산물입니다. 뇌의 주요 식세포 세포로서, 미세아교세포는 손상된 세포와 수초성 파편을 제거하는 데 중추적인 역할을 합니다23, 이는 다발성 경화증 및 알츠하이머병과 같은 질병과 관련이 있습니다24,25. 미엘린 파편이 축적되면 신경염증이 악화되고 재생이 저해되는 것으로 입증되었다26. 이 연구의 목적은 미엘린 파편의 미세아교세포작용(microglial phagocytosis)을 강화하기 위한 자기 자극의 잠재력을 조사하여 신경염증을 줄이고 신경퇴행성 및 외상성 상태에서 중추신경계 회복을 지원하는 것입니다. 요약하면, 이 연구는 미세아교세포를 미엘린 파편과 함께 공동 배양하고 반복적인 자기 자극이 미세아교세포의 식세포력에 미치는 영향을 확인하기 위해 반복적인 자기 자극을 수행하는 공동 배양 접근 방식을 사용합니다.

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프로토콜

여기서, 3마리의 SD 암컷 쥐(2-3주령)를 사용하여 자당-구배 원심분리에 의해 수초체 파편을 추출했습니다. 모든 쥐는 중국 난징에 있는 난징 의과대학의 동물 핵심 시설에서 구입했습니다(동물 면허: SYXK (Su) 2021-0023). 모든 쥐는 대조 조건 (온도 22 ± 2 ° C, 12 h / 12 h 라이트 / 다크 기간, 55 % ± 5 % 상대 습도)에서 사육되었습니다. 모든 동물 실험은 난징 의과 대학 동물 관리 및 사용 위원회(No. IACUC-1903031 및 No. IACUC-2005001)에 의해 개발되었으며, 고통을 최소화하고 사용되는 동물의 수를 최소화하는 것을 목표로 하였다.

1. 수초(Myelin) 격리

참고: 앞서 설명한 대로 미엘린 파편을 추출했으며 일부 수정이 수행되었습니다27. 모든 단계가 4°C 및 멸균 조건에서 수행되었는지 확인합니다.

  1. 조잡한 수초의 분리
    1. 뇌 조직 추출
      1. 펜토바르비탈(50mg/kg, 복강내 주사)로 마취한 후 발가락 꼬집음 반응으로 마취 깊이를 평가합니다. 암컷 쥐의 목을 베십시오. 얼음 위에서 머리 전체를 해부하고 가위로 두개골을 이등분하여 뇌를 완전히 드러내고 뇌 전체를 쉽게 제거할 수 있습니다.
      2. 뇌 조직 자당 혼합물의 오염을 방지하기 위해 가위와 집게로 막, 소뇌 및 해마를 꼼꼼하고 무균적인 방식으로 절제합니다. PBS로 뇌를 3번 청소하여 잔여 혈액이나 조직을 제거합니다.
      3. 세척한 뇌를 0.32M 멸균 자당 용액 10mL에 옮기고 미세수술 가위로 뇌 조직을 5mm3 조각으로 절단하여 뇌 조직 자당 혼합물을 얻습니다.
    2. 뇌 조직 균질화
      1. 뇌 조직 자당 혼합물을 50mL 멸균 균질기로 옮기고 30mL의 0.32M 멸균 자당 용액을 첨가합니다. 50mL 유리 균질기를 사용하여 2분 동안 균질화하여 부드러운 뇌 조직 균질화를 얻습니다.
      2. 균질화된 뇌 조직을 0.32M 멸균 자당 용액으로 90mL로 희석하고 혼합한 후 0.83M 멸균 자당 용액 20mL를 포함하는 6개의 38.5mL 멸균 얇은 벽 폴리프로필렌 초원심분리기 튜브의 상부에 천천히 분배합니다. 각 원심분리 튜브에 15mL의 균질산염을 첨가한 다음 0.32M 멸균 자당 용액으로 수평을 이룹니다.
    3. 미정제 파편 수집
      1. 초원심분리기 로터를 4°C에서 예냉각하고 75,000 x g 에서 45분 동안 시료를 원심분리합니다. 원심분리 과정에 따라 멸균 파스퇴르 튜브를 사용하여 두 자당 밀도 사이의 계면에서 미엘린 파편을 수집합니다.
        알림: 수집 과정에서 주의를 기울이고 오염된 샘플의 다른 성분을 실수로 수집하지 않도록 하는 것이 중요합니다.
  2. 최초의 등장성 분리 및 정제
    1. 수집된 미엘린 파편 용액을 50mL 원심분리 튜브로 옮기고 사전 냉각된 멸균 인산염 완충 식염수(PBS) 완충액을 사용하여 부피를 35mL로 조정합니다. 용액을 새로운 50mL 멸균 균질기로 옮기고 2분 동안 균질화하여 균질화를 얻습니다.
    2. 6개의 38.5mL 얇은 벽의 멸균 폴리프로필렌 초원심분리 튜브에 균질화된 미엘린 잔해를 고르게 분배하고 멸균 PBS 완충액을 추가합니다. 튜브를 75,000 x g 에서 4°C에서 45분 동안 원심분리합니다.
  3. 두 번째 등장성 분리 및 정제
    1. 원심분리 후 상층액을 버리고 미엘린 파편 현탁액을 얻기 위해 10mL의 사전 냉각된 멸균 PBS 완충액에 고체 흰색 펠릿을 재현탁합니다. 2개의 38.5mL 얇은 벽의 멸균 폴리프로필렌 초원심분리기 튜브에 현탁액을 고르게 분배하고, 멸균 PBS 완충액을 추가하여 부피의 균형을 맞춥니다.
    2. 4°C에서 75,000 x g 로 45분 동안 시료를 원심분리합니다.
  4. 정제된 미엘린 수집
    1. 원심분리 후 상등액을 버리고 고체 백색 펠릿을 6mL의 멸균 PBS 완충액에 재현탁합니다. 미엘린 파편 현탁액을 6개의 1.5mL 원심분리 튜브로 나눈 다음 4°C 및 12,000 x g 에서 10분 동안 원심분리합니다.
    2. 원심분리 후 상층액을 버리고 고체 백색 펠릿을 100μL의 사전 냉각된 멸균 인산염 완충 식염수(PBS)에 재현탁합니다.
  5. 미엘린 파편(myelin debris)의 정량화
    1. BCA 단백질 정량화 키트를 사용하여 단백질 함량을 정량화하기 위해 3 μL의 미엘린 파편 현탁액을 취합니다. 나머지 미엘린 파편 현탁액은 -80 °C에서 보관하십시오.

2. 미엘린 파편의 형광 표지

  1. Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl 에스테르의 배양
    1. 필요한 미엘린 잔해물을 4°C 또는 얼음물과 원심분리기를 12,000 x g 에서 4°C에서 10분 동안 해동합니다. 상층액을 버리고 200μL의 Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl 에스테르 용액(CFSE, 50μM)에 미엘린 파편을 재현탁합니다.
    2. 어두운 곳에서 실온에서 30분 동안 배양합니다. 배양 기간 후 12,000 x g 에서 4°C에서 10분 동안 원심분리합니다.
    3. 상층액을 버리고 500μL의 멸균 PBS 완충액으로 샘플을 3배 세척합니다. 세척 과정 후, -80°C에서 보관할 수 있는 형광 표지된 미엘린 잔해의 현탁액을 얻기 위해 100μL의 사전 냉각된 멸균 PBS 완충액에 미엘린 잔해를 재현탁합니다.

3. 미세아교세포 배양

  1. 10%(v/v) FBS, 페니실린(100 U/mL) 및 스트렙토마이신(100 U/mL)이 보충된 Dulbecco의 변형된 Eagle's medium(DMEM)에서 37°C에서 5%CO2 를 가습한 BV-2 세포를 배양합니다. 추가 테스트를 위해 12웰 플레이트와 24웰 플레이트에 거의 50%의 Bv-2 세포를 파딩합니다.

4. 시험관 내 반복 자기 자극

  1. 다음 설정으로 체외 반복 자기 자극 중재를 수행합니다: 치료 빈도 20Hz, 치료 강도 최대 출력 강도의 1%(즉, 0.035 Tesla), 자극 시간 5초, 휴식 시간 20초. 2.5분의 단일 치료 시간으로 600펄스를 투여합니다.
  2. 자기 자극 중에는 코일의 중심을 배양 플레이트의 중심과 정렬되도록 배치하고 코일이 배양 플레이트의 바닥에 꼭 맞는지 확인합니다.
    1. 자기 자극의 매개변수를 미리 결정하고 자기 자극 코일의 방향이 지면에 수직이 되고 위쪽 방향을 향하도록 고정합니다. 자기 자극 코일을 알코올로 살균하여 세포의 오염을 방지합니다.
    2. 그런 다음 인큐베이터에서 세포 배양 플레이트를 꺼내 자기 자극을 위해 자기 자극 코일 위에 놓습니다. 플레이트에 알코올을 뿌려 소독한 다음 인큐베이터에 다시 넣으십시오. 프로세스 전반에 걸쳐 접시를 덮으십시오.

5. 미엘린 파편의 미세아교세포작용(microglial phagocytosis) 시험

  1. LPS+rMS군에 대한 반복자기자극 치료
    1. CFSE(50μM)를 사용하여 미엘린 파편을 라벨링하고 식세포작용을 평가합니다. 플레이트: 1 x 10,4 BV-2 셀을 24웰 플레이트에서 하룻밤 동안 플레이트합니다. 배지를 무혈청 배지로 변경하고 12시간 동안 지질다당류(LPS, 1μg/mL)로 세포를 처리합니다. 피펫을 사용하여 기존 배지를 부드럽게 흡입한 다음 피펫을 사용하여 즉시 새 무혈청 배지를 추가합니다.
    2. 12시간의 LPS 개입 후 어두운 조건에서 공동 배양을 위해 미엘린 파편(100μg/mL)을 배지에 추가합니다. 4.2단계에서 설명한 대로 세포에 반복적인 자기 자극 개입을 적용합니다.
  2. 면역형광 및 이미징
    1. PBS로 흡착되지 않은 미엘린 파편을 부드럽게 세척하고 4% PFA로 세포를 15분 동안 고정합니다. 당나귀 혈청 알부민 10%와 트리톤 X-100 0.3%가 함유된 PBS로 실온에서 1시간 동안 세포를 차단한 후 PBS로 세척하고 1차 항체(IBA-1, 1:200)를 4°C에서 하룻밤 동안 배양합니다.
    2. 세포를 2차 항체(1:300, mouse)로 실온에서 2시간 동안 배양합니다. 컨포칼 현미경을 사용하여 40x 및 20x에서 이미지를 캡처합니다.

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결과

이 연구에서는 초기에 뇌 유래 미엘린 파편을 추출하고 반복적인 자기 자극을 활용하여 식세포 능력을 향상시켜 BV-2 미세아교세포를 체외 에서 공급했습니다. 그 후, BV-2 미세아교세포를 배양하고 자기 자극 전에 LPS 개입을 실시하여 엄격한 신경학적 검증하에 미세아교세포의 생체 내 상태를 모방했습니다. 그 후, LPS 자극 후 rMS 중재가 적용되었습니다. 세포의 식균작용을 검증하기 위해 IBA-1을 사용하여 미세아교세포를 표지하고 CFSE를 사용하여 미엘린 파편을 표지하는 면역형광을 사용했습니다(그림 1). 면역형광 결과는 대조군에 비해 LPS 그룹에서 포위된 외부 미엘린 파편(CFSE)의 면적과 IBA+/미엘린+ 세포의 수가 모두 유의하게 감소한 것으로 나타났습니다. 더욱이, 자기 자극 후, 삼켜진 외부 미엘린 파편의 면적과 IBA+/미엘린+ 세포의 수는 LPS...

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토론

반복적 자기자극법(rMS)은 인지장애, 알츠하이머병(AD), 뇌졸중, 뇌손상, 척수손상(SCI) 등 다양한 신경 및 정신 질환의 치료에 널리 적용되고 있는 비침습적 신경자극 기법입니다. rMS는 펄스 자기장을 활용하여 뉴런의 막 전위를 조절하여 신경계11 내의 신경 흥분성에 선택적으로 영향을 미칩니다. rMS는 뉴런에 미치는 영향 외에도 미세아교세포 기능을 조절하고 신경염증을 억제하며 중추신경계 미세환경을 개선하는 것으로 나타났습니다19. 이전 연구에서 우리는 손상 부위의 반복적인 자기 자극이 미엘린 파편을 삼키는 미세아교세포의 능력을 크게 향상시키고, 미엘린 파편의 제거를 가속화하며, SCI 쥐의 척수 미세환경을 개선한다는 것을 관찰했다16. 이 현상을 추가로 조사하기 위해 세포 수준에서 미세아교세포작용에 대한 반복적인 자기 자극의 효과를 ...

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공개 사항

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감사의 글

이 연구는 중국 국립자연과학재단(82302877, 82172541), 후난성 자연과학재단(2023JJ30549)의 보조금으로 지원되었다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
DAPIBeyotime, 중국P0131
BCA 키트ThermoFisher Scientific, 미국23227
Bv-2 세포ATCCCBP60922
세포 배양 12웰 플레이트Biofil, 중국
세포 배양 24웰 플레이트Biofil, 중국
공초점 레이저 스캐닝 현미경Zeiss, 독일800
항온 인큐베이터ThermoFisher Scientific, 미국
CFSEMedChemExpress, 미국HY-158820
DMEM-배양 배지KeyGen, 중국KGL1202-500
FBSGibco, 미국16250078
Iba1Abcam, 미국ab48004
자기 자극 장치Yiruide, 중국CCY-IA
자기 자극 코일Yiruide, 중국
파라포름알데히드BioSharp, 중국
PBSKeyGen, 중국KGL2210-500
페니실린-스트렙토마이신Gibco, 미국15140-122
자당MedChemExpress, 미국HY-B1779
트립신KeyGen, 중국KGL2107-100
초원심분리기Beckman, 미국L-100XP

참고문헌

  1. Osso, L. A., Hughes, E. G. Dynamics of mature myelin. Nat Neurosci. 27 (8), 1449-1461 (2024).
  2. Gao, R., et al. Myelin debris phagocytosis in demyelinating disease. Glia. 72 (11), 1934-1954 (2024).
  3. Kopper, T. J., Gensel, J. C. Myelin as an inflammatory mediator: Myelin interactions with complement, macrophages, and microglia in spinal cord injury. J Neurosci Res. 96 (6), 969-977 (2018).
  4. Yu, F., et al. Phagocytic microglia and macrophages in brain injury and repair. CNS Neurosci Ther. 28 (9), 1279-1293 (2022).
  5. Filbin, M. T. Myelin-associated inhibitors of axonal regeneration in the adult mammalian CNS. Nat Rev Neurosci. 4 (9), 703-713 (2003).
  6. Sen, M. K., Mahns, D. A., Coorssen, J. R., Shortland, P. J. The roles of microglia and astrocytes in phagocytosis and myelination: Insights from the cuprizone model of multiple sclerosis. Glia. 70 (7), 1215-1250 (2022).
  7. Jia, J., et al. The role of microglial phagocytosis in ischemic stroke. Front Immunol. 12, 790201(2021).
  8. Kettenmann, H., Hanisch, U. K., Noda, M., Verkhratsky, A. Physiology of microglia. Physiol Rev. 91 (2), 461-553 (2011).
  9. Shen, S., et al. Neutrophil nanovesicle protects against experimental autoimmune encephalomyelitis through enhancing myelin clearance by microglia. ACS. 16 (11), 18886-18897 (2022).
  10. Cignarella, F., et al. TREM2 activation on microglia promotes myelin debris clearance and remyelination in a model of multiple sclerosis. Acta Neuropathol. 140 (4), 513-534 (2020).
  11. Dufor, T., Lohof, A. M., Sherrard, R. M. Magnetic stimulation as a therapeutic approach for brain modulation and repair: Underlying molecular and cellular mechanisms. Int J Mol Sci. 24 (22), 16456(2023).
  12. Martin, D. M., McClintock, S. M., Forster, J. J., Lo, T. Y., Loo, C. K. Cognitive enhancing effects of rTMS administered to the prefrontal cortex in patients with depression: A systematic review and meta-analysis of individual task effects. Depress Anxiety. 34 (11), 1029-1039 (2017).
  13. Kamo, T., et al. Repetitive peripheral magnetic stimulation for impairment and disability in people after stroke. Cochrane Database Syst Rev. 9 (9), CD011968(2022).
  14. Wang, Y., Wang, L., Ni, X., Jiang, M., Zhao, L. Efficacy of repetitive transcranial magnetic stimulation with different application parameters for post-stroke cognitive impairment: A systematic review. Fron Neurosci. 18, 1309736(2024).
  15. Chu, F., et al. Transcranial magneto-acoustic stimulation attenuates synaptic plasticity impairment through the activation of Piezo1 in alzheimer's disease mouse model. Research. 6, 0130(2023).
  16. Zhai, C., et al. Repeated trans-spinal magnetic stimulation promotes microglial phagocytosis of myelin debris after spinal cord injury through LRP-1. Exp Neurol. 379, 114844(2024).
  17. Qin, T., et al. Repetitive transcranial magnetic stimulation ameliorates cognitive deficits in mice with radiation-induced brain injury by attenuating microglial pyroptosis and promoting neurogenesis via BDNF pathway. Cell Comm Signal. 22 (1), 216(2024).
  18. Qian, F., et al. Microglia and astrocytes responses contribute to alleviating inflammatory damage by repetitive transcranial magnetic stimulation in rats with traumatic brain injury. Neurochem Res. 49 (9), 2636-2651 (2024).
  19. Luo, J., et al. Repetitive transcranial magnetic stimulation improves neurological function and promotes the anti-inflammatory polarization of microglia in ischemic rats. Front Cell Neurosci. 16, 878345(2022).
  20. Jannati, A., Oberman, L. M., Rotenberg, A., Pascual-Leone, A. Assessing the mechanisms of brain plasticity by transcranial magnetic stimulation. Neuropsychopharmacol. 48 (1), 191-208 (2023).
  21. Luo, L., et al. Intermittent theta-burst stimulation improves motor function by inhibiting neuronal pyroptosis and regulating microglial polarization via TLR4/NFκB/NLRP3 signaling pathway in cerebral ischemic mice. J Neuroinflammat. 19 (1), 141(2022).
  22. Eichler, A., et al. Microglial cytokines mediate plasticity induced by 10 Hz repetitive magnetic stimulation. J Neurosci. 43 (17), 3042-3060 (2023).
  23. Kent, S. A., Miron, V. E. Microglia regulation of central nervous system myelin health and regeneration. Nat Rev Immunol. 24 (1), 49-63 (2024).
  24. Yong, V. W. Microglia in multiple sclerosis: Protectors turn destroyers. Neuron. 110 (21), 3534-3548 (2022).
  25. Sarlus, H., Heneka, M. T. Microglia in Alzheimer's disease. J Clin Invest. 127 (9), 3240-3249 (2017).
  26. Cantuti-Castelvetri, L., et al. Defective cholesterol clearance limits remyelination in the aged central nervous system. Science. 359 (6376), 684-688 (2018).
  27. Norton, W. T., Poduslo, S. E. Myelination in rat brain: Method of myelin isolation. J Neurochem. 21 (4), 749-757 (1973).
  28. Gordon, S. Phagocytosis: An immunobiologic process. Immunity. 44 (3), 463-475 (2016).

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