이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.

방법 논문

Typha latifolia(Cattail)의 배양 및 미생물 생물증강을 위한 최적화된 방법

919 조회수

⸱

DOI:

10.3791/67729

⸱

2025년 7월 25일

 , 
1Department of Biological Sciences, University of Calgary

이 논문에서

요약

주로 뿌리줄기를 통해 무성으로 번식하는 Typha latifolia는 광범위한 뿌리 시스템으로 인해 수집 문제를 야기합니다. 이 논문은 종자에서 T. latifolia를 재배하는 방법을 제시하여 실험실 재배를 용이하게 하고 무균 식물 성장 및 조기 미생물 생물 증강의 가능성을 제공합니다.

초록

활엽수 부들 또는 일반 불러시로 더 일반적으로 알려진 Typha latifolia는 전 세계적으로 범위가 넓으며 북미 습지 생태계를 지배합니다. 북미에서는 다양한 종의 부들이 침입적인 것으로 간주되는 경우가 많지만, T. latifolia는 이 지역의 토착종으로 간주되며 대륙 전체에서 우세한 Typha 종으로 발견됩니다. 역사적으로 Typha는 식량 공급원에서 건축 자재에 이르기까지 다양한 기능을 수행해 왔습니다. 보다 최근에는 T. latifolia가 생물학적 정화 노력을 돕는 저명한 종으로 부상했습니다. 오염 물질 정화를 위한 건설 습지 처리 시스템(CWTS) 개발에 대한 관심이 높아짐에 따라 실험실 환경에서 부들을 재배하는 재현 가능한 기술이 필요합니다. 여기에 제시된 작업은 종자에서 T. latifolia의 성공적인 재배를 위한 다양한 성장 매개변수를 조사하고 테스트했습니다. Typha 종의 성공적인 발아에는 흉터화(종피 파열)가 포함되며, 이는 대규모 생산을 위한 기계적 기술을 사용하여 달성되었습니다. 초기 종자 확립은 첫 주 동안 낮은 영양 성장 조건을 선호하는 것으로 나타났고, 이식 후 생존율을 향상시키기 위해 다음 주에 비료를 도입하는 것으로 나타났습니다. 식물 시스템의 미생물 생물 증강을 위해 결과는 종자를 접종물에 담그면 뿌리 조직의 더 광범위한 집락화와 장기적인 박테리아 지속성으로 이어지는 것으로 나타났습니다. 미생물 집락화 성공률을 향상시키기 위해 표백제와 세제의 조합을 사용하여 최적화된 종자 살균 기술을 사용했습니다. 이 연구에서 설계된 무균 및 비멸균 성장 혈관은 다양한 조건에서 T. latifolia의 장기적인 성장을 지원합니다.

서론

비용 및 에너지 효율적인 기술로서 건설 습지 처리 시스템(CWTS)은 환경 오염 물질 개선을 위해 상당한 인기를 얻었습니다 1,2,3. CWTS는 물리적, 화학적, 생물학적 공정을 사용하여 오염 물질을 제거, 변형 또는 안정화합니다. 화학적 회전율과 관련된 물리적, 화학적 과정은 CWTS의 기원 이후 잘 특성화되어 왔지만 식생의 영향은 대체로 수수께끼로 남아 있습니다2. 최근 몇 년 동안 식물이 폐수에서 잠재적인 우려가 되는 유기 및 무기 오염 물질을 변환하는 메커니즘을 이해하는 데 점점 더 중점을 두었습니다 2,4,5. 그러나 이와 같은 기계론적 연구는 많은 수의 거대 식물을 재배하고 각 식물이 동일한 성장 및 발달 단계에 있는지 확인하기 위해 종자에서 성장을 선호하는 능력에 의존합니다.

북미의 CWTS는 Typha, Scirpus, Juncus 및 Phragmites 종과 같은 이 지역의 자연 습지에 자생하는 식생을 사용하여 자주 설립됩니다 6,7. 식생의 선택은 또한 사용되는 건설된 습지에 따라 달라지며, 이는 깊이, 물 흐름, 기질 소싱 및 물 소싱(재순환 유무에 관계없이)이 다를 수 있습니다2. 마지막으로, 기후는 습지 식생에도 영향을 미치며, 서늘한 기후는 적응성이 증가하기 때문에 수중 식물을 선호합니다8. 티파 종은 환경을 빠르게 식민지화하고 다양한 환경 조건에 적응하는 능력으로 인해 깊은 지표 흐름 건설 습지에서 특히 관심이 있습니다 9,10.

최근 결과 검토에 따르면 Typha 종을 사용한 87개의 식물 독성 테스트 중 15개의 연구만이 종자에서 테스트 식물을 시작했으며 그 중 성숙한 식물의 성장을 조사한 연구는 단 1개뿐이었습니다11. 종자에서 부들 실험이 과소 대표되는 것은 실험실 연구를 위한 부들 재배를 설명하기 위한 프로토콜에 관한 문헌의 격차를 나타냅니다. 여기에 설명된 프로토콜은 멸균 및 비멸균 조건에서 종자에서 성숙한 식물까지 Typha latifolia 의 성장을 위한 심층적인 프로토콜을 제시함으로써 이러한 격차를 해소하는 것을 목표로 합니다. 또한, 이 논문은 조기 접종이 도입된 뿌리줄기 및 내생 미생물의 장기적인 지속성을 유지하는 데 도움이 될 수 있는 종자 단계에서 부들 종의 박테리아 생물 증강 기술에 대해 논의합니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

프로토콜

1. 종자 흉터

  1. 부들 씨앗은 2023년 가을(북위 51.11312°, 서경 114.39381°)에 캐나다 앨버타주 캘거리의 습지에서 공급되었습니다. 가을에 부들 꽃차례를 모아 사용할 때까지 어두운 곳에 종이 봉지에 보관하십시오. 아직 줄기에 있으면 봄에 꽃차례를 모으지만 종자 회복이 감소합니다.
  2. 정원 가위를 사용하여 꽃차례 바닥에서 ~2cm 떨어진 식물 줄기를 자릅니다. 꽃차례에서 씨앗을 뽑아 블렌더의 부피가 약 4분의 1이 될 때까지 실험실 블렌더에 넣습니다. 이것은 압축되지 않은 약 250mL의 종자입니다.
  3. 블렌더에 수돗물 500mL를 채웁니다. 블렌더에 10cm의 헤드스페이스를 유지하십시오. 중저속으로 20초 동안 블렌딩한 후 즉시 큰 1L 비커로 옮깁니다. 결과 용액은 점성이 있어야 합니다.
  4. 이 종자 물 슬러지 약 100mL를 블렌더로 다시 옮기고 블렌더에 400-600mL의 신선한 수돗물을 채웁니다. 중고속으로 20초 동안 블렌딩한 후 즉시 신선한 1L 비커로 옮깁니다.
  5. 비커에 수돗물을 800mL까지 채우고 최소 60초 동안 그대로 둡니다. 흉터가 있고 생존 가능한 부들 씨앗은 비커 바닥으로 가라앉고 깃털과 부리(부들 씨앗 구조에 대한 설명은 그림 1 참조)가 상단으로 떠 있습니다. 비커 상단의 슬러지를 퍼내고 하단의 씨앗을 방해하지 않고 비커에서 물을 천천히 붓습니다. 씨앗을 100mL 비커에 옮깁니다.
  6. 1.5단계부터 부들 슬러지의 나머지 부분에 대해 혼합 과정을 반복합니다.
  7. 씨앗이 들어 있는 비커를 교반판에 놓고 중간 속도로 1시간 동안 회전시킵니다. 1시간 후 비커 상단에 떠 있는 식물 재료를 퍼냅니다.
  8. 씨앗을 진공 상태에 부착한 여과지가 있는 Büchner 깔때기에 부어 밤새 씨앗을 건조시킵니다. 건조 종자는 15mL 원추형 폴리프로필렌 튜브에 -20°C에서 보관할 수 있습니다.

2. 비멸균 기술을 이용한 발아

  1. 1% phytoagar12로 절반 강도의 Murashige 및 Skoog(MS) 배지 플레이트를 준비합니다.
  2. 약 1mL의 마른 씨앗을 15mL 원뿔형 폴리프로필렌 튜브에 넣고 10mL의 수돗물을 채웁니다. 궤도 쉐이커에서 저속으로 24시간 동안 회전하여 발아를 유도합니다.
  3. 15mL 원추형 폴리프로필렌 튜브에 3mL가 남도록 과도한 물을 제거합니다.
  4. 1000μL 플라스틱 피펫 팁의 끝을 잘라 보어 크기를 늘리고 종자 용액을 세게 피펫팅하여 피펫 팁 내에 종자를 현탁시킵니다.
  5. 절반 강도의 MS 한천 플레이트에 씨앗과 물을 놓습니다. 접시를 휘젓어 씨앗을 고르게 분포시킵니다.
  6. 플레이트를 실험실 밀봉 필름으로 싸고 23°C 및 70% 습도에서 16시간/8시간 명암 주기로 성장 챔버에 넣습니다. 종자 발아를 유도하기 위해 플레이트를 1주일(최대 2주) 동안 배양합니다.

3. 멸균 기술을 이용한 발아

참고: 다양한 종자 멸균 프로토콜을 테스트하고 비교했습니다. 완전히 멸균된 종자를 생산하는 동안 가장 높은 발아율을 생성하는 기술은 이전 프로토콜(13 )에서 수정되었으며 여기에 설명되어 있습니다.

  1. 1% phytoagar12로 반강도 MS 배지 플레이트를 준비합니다.
  2. 약 1mL의 종자를 15mL 원뿔형 폴리프로필렌 튜브에 넣고 10mL의 멸균 ddH2O로 채웁니다. 10분 동안 중고속으로 궤도 셰이커에 놓습니다.
  3. 물을 제거하고 5mL의 0.1% 폴리소르베이트 20 용액(멸균 ddH2O에서 제조)을 15mL 원뿔형 폴리프로필렌 튜브에 추가합니다. 10분 동안 중-고속으로 궤도 셰이커에 올려 놓습니다.
  4. 용액을 제거하고 5mL의 30% 상업용 표백제 및 0.025% 폴리소르베이트 20 용액(멸균 ddH2O에서 제조)을 15mL 원추형 폴리프로필렌 튜브에 첨가합니다. 중고속으로 30분 동안 흔듭니다.
  5. 용액을 제거하고 멸균 ddH2O로 교체합니다. 중고속으로 5분 동안 흔듭니다. 총 3회 물 헹굼을 반복합니다.
  6. 15mL 원뿔형 폴리프로필렌 튜브에 멸균 ddH2O를 채우고 24시간 동안 저속으로 회전시켜 발아를 유도합니다. 24시간 후 플라스틱 튜브에 3mL가 남도록 여분의 물을 제거합니다.
  7. 1000μL 플라스틱 피펫 팁의 끝을 무균 상태로 자르고 세게 피펫을 사용하여 팁 내에 종자를 현탁시킵니다.
  8. 절반 강도 MS 한천 플레이트에 종자와 액체를 플레이트합니다. 접시를 휘젓어 씨앗을 고르게 분포시킵니다.
  9. 플레이트를 실험실 밀봉 필름으로 감싸고 23°C 및 70% 습도에서 16시간/8시간 명암 주기의 성장 챔버에 넣습니다. 발아가 일어날 수 있도록 플레이트를 1주일(최대 2주) 동안 그대로 두십시오.

4. 선택된 박테리아를 종자 접종

  1. 부들 종자를 접종하려면 먼저 위의 멸균 종자 발아 프로토콜에 따라 3.6단계까지 멸균 종자를 생산합니다. 위의 3.6단계에서 설명한 대로 15mL 원뿔형 폴리프로필렌 튜브에서 최종 물 헹굼을 제거합니다.
  2. 단일 분리주 또는 군집에서 접종된 하룻밤 성장 미생물 배양물을 사용하여 OD600을 측정하고 배양 배지에서 희석하여 1.0 흡광도 값으로 정규화합니다. OD600 1.0이 달성되지 않으면 더 오랜 기간 동안 배양균을 배양합니다.
    참고: 여기에서는 앨버타 북부의 식물 뿌리에서 분리된 Luteimonas sp.에서 배양물을 확립하고 현미경 시각화를 위해 DsRed 형광 단백질을 발현하도록 접합했습니다.
  3. 배양액 1mL를 9300 x g 에서 2분 동안 회전시킵니다. 상청액을 제거하고 펠릿을 1mL의 1x 인산염 완충 식염수에 재현탁합니다. 9300 x g 에서 2분 동안 회전시킵니다.
  4. 상청액을 제거하고 박테리아 펠릿을 멸균 ddH2O 1mL에 재현탁합니다.
  5. 15mL 원뿔형 폴리프로필렌 튜브에서, 0.025% 유기실리콘 계면활성제로 제조된 접종물의 1:10 희석액 10mL에서 약 1mL의 종자를 24시간 동안 저속으로 흔든다.
  6. 3.8단계부터 시작하는 멸균 종자 발아 프로토콜의 나머지 부분을 따릅니다.

5. 토양에서 비멸균 부들 성장

  1. 화분 상단에서 1cm의 공간을 남겨두고 원하는 유기물 함량이 낮은 토양으로 화분을 채웁니다. 수돗물로 토양을 미리 적시고 토양에 1cm 구멍을 뚫습니다.
  2. 핀셋을 사용하여 위의 3단계에서 설명한 대로 성장한 MS 한천 플레이트에서 뿌리가 손상되지 않도록 주의하면서 1주일 동안 발아한 묘목을 부드럽게 제거합니다. 토양의 각 구멍에 묘목을 부드럽게 넣고 흙으로 덮습니다.
  3. 화분을 쟁반에 넣고 수돗물을 토양 높이까지 채웁니다. 화분 10개마다 0.5% 20/20/20 NPK 비료 100mL를 추가합니다.
  4. 10개의 화분으로 구성된 각 세트에 다음과 같이 비료를 추가합니다: 2주차 - 0.5% 비료 100mL, 3주차 - 1.0% 비료 100mL, 4주차 - 1.0% 비료 100mL.
  5. 4주 후에는 매주 시비를 중단하고 1.0% 비료 용액 100mL로 한 달에 한 번만 비료를 줍니다. 4주가 되면 필요한 경우 더 큰 화분에 이식합니다. 이 시점에서 식물은 토양 유형에 덜 민감하므로 혼합물을 사용하십시오.
  6. 용기를 초과하면 부들을 계속 이식하십시오. 가위로 죽은 잎을 제거하십시오. 한 달에 한 번 부들을 비료로 주세요.
  7. 실험을 위해 묘목을 빈 피펫 팁 상자의 바닥에 넣으면 상자 측면에 고정되는 작은 화분에 이식합니다. 이를 통해 토양이 적절하게 범람하여 습지 조건을 모방할 수 있습니다. 오래된 부들에 대한 실험을 수행하는 경우 화분이 거의 물에 거의 완전히 잠길 수 있도록 유사하게 수정하십시오.

6. 무균 묘목 성장

  1. 묘목 성장 챔버 설계
    참고: 각 묘목 성장 챔버 장치를 조립하려면 2개의 배양 상자, 루어 잠금 팁이 있는 주사기 1개, 일회용 0.2μm 멸균 필터 및 내열성 실리콘이 필요합니다. 챔버 설정의 시각적 표현은 그림 2 를 참조하십시오.
    1. 배양 상자에서 뚜껑을 제거하고 휴대용 드릴을 사용하여 뚜껑 중앙에 직경 3.5cm의 구멍을 만듭니다. 내열성 실리콘을 사용하여 두 뚜껑의 윗부분을 함께 붙입니다.
    2. 배양 상자 중 하나의 하단 모서리에 주사기 팁 크기(직경 ~ 1cm) 크기의 구멍을 뚫습니다. 주사기의 끝을 자르고 주사기 본체를 버립니다.
    3. 내열성 실리콘을 사용하여 상자 외부에 루어 잠금 나사산이 있는 주사기 끝을 배양 상자에 고정합니다.
    4. 사용하기 전에 실리콘이 경화되도록 최소 24시간 동안 기다리십시오.
  2. 토양의 무균 성장
    1. 3단계에서 설명한 멸균 종자 발아 프로토콜에 따라 멸균 종자를 얻습니다.
    2. 멸균 성장실 장치를 수돗물에 적신 선택한 토양으로 채웁니다.
    3. 액체에서 20분 주기 동안 오토클레이브하고 미끼 잠금 팁을 알루미늄 호일로 덮습니다. 24시간 후, 액체 20분 주기로 시스템을 다시 오토클레이브합니다. 층류 후드에서 모든 후속 단계를 수행합니다.
    4. 0.2μm 필터 장치를 성장 챔버의 루어 잠금 장치에 부착합니다(그림 2). 성장 챔버를 열고 필터 멸균된 1% 20/20/20 비료 500μL를 토양에 추가합니다. 멸균 주걱으로 토양을 섞습니다. 토양을 혼합하는 동안 멸균 ddH2O를 첨가하여 과포화 없이 적절하게 수화되도록 합니다.
    5. 멸균 면도날을 사용하여 1주일 된 묘목이 들어 있는 접시에서 MS 한천을 4등분합니다. 멸균 주걱을 사용하여 한천 조각을 토양 위에 놓습니다.
    6. 성장 챔버 장치를 23°C 및 70% 습도에서 16시간/8시간 낮-밤 주기로 식물 성장 인큐베이터에 넣습니다.
  3. 수경 재배 용액의 멸균 성장
    1. 3단계에서 설명한 멸균 발아 프로토콜에 따라 멸균 종자를 얻습니다.
    2. 피펫 팁 상자와 절반 강도 MS 한천을 액체 20분 주기에 오토클레이브합니다. 층류 후드에서 팁 인서트의 바닥을 멸균 실험실 밀봉 필름으로 감쌉니다. 각 피펫 팁 입구를 거의 상단까지 한천으로 채웁니다.
    3. 팁 인서트를 팁 박스에 다시 추가하여 상자 바닥을 절반 강도의 Hoagland's 수경 재배 용액(0.5 mM NH4H2PO4, 3 mM KNO3, 2 mM Ca(NO3)2, 1 mM MgSO4, 0.023 mM H3BO3, 0.005 mM MnCl2·4H2O, 0.0004 mM ZnSO4·7H2O, 0.0002 mM CuSO4·5H2O, 0.00007 mM H2MoO4·1H2O 및 0.045 mM FeSO4·7H2O, pH 7.0으로 조정됨).
    4. MS 한천 플레이트에서 묘목을 조심스럽게 제거하고 팁 박스 인서트의 피펫 구멍에 있는 한천 위에 있는 MS 한천에 놓습니다.
    5. 팁 상자 뚜껑을 닫고 23°C 및 70% 습도에서 16시간/8시간 낮-밤 주기로 성장 챔버에 넣습니다.
    6. 식물이 팁 박스에 비해 너무 크면 5.1단계에서 설명한 배양 성장 챔버에 이식합니다. 옮기려면 식물과 함께 한천 플러그 전체를 제거하고 방사형 절단이 있는 폼 마개로 옮깁니다. 폼 마개는 두 개의 배양 상자 사이에 놓을 수 있으며 하단 배양 상자는 절반 강도의 Hoagland's로 채울 수 있습니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

그림 1은 부리가 제거된 불완전하게 흉터가 생긴 종자 및 흉터가 없는 종자와 함께 흉터 과정을 거친 Typha 종자의 표현을 보여줍니다. 혼합 시간이 주로 완전히 흉터가 있는 종자를 생산하기에 충분한지 확인하십시오.

종자를 흉터화하고 건조시킨 후 비멸균 발아 기술을 사용하여 종자의 생존력을 테스트해야 합니다. 7일이 지나면 씨앗의 최소 20%에 새싹 조직이 있는 새로운 라디칼이 있어야 합니다. 발아율이 낮으면 종자 생존력이 좋지 않거나 성장 조건이 부적절하다는 것을 나타낼 수 있습니다. 종자 살균은 더 높은 발아율을 생성하는 경향이 있습니다(그림 3). 살균은 종자를 화학적으로 더욱 흉터화하고 발아를 향상시키는 역할을 한다고 제안됩니다.

판에서 토양으로 이동할 때 묘목의 약 10%-40%가 생존해야 합니다. ...

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

토론

여기에 제시된 프로토콜은 실험실 응용 분야를 위해 종자에서 부들 종의 성장에 대한 자세한 가이드를 제공합니다. 부기는 뿌리줄기 절단에서 쉽게 번식할 수 있지만, 종자에서 식물을 시작하면 샘플 세트 내에서 유전적 변이가 가능하고 식물이 동일한 성장 단계에 있는지 확인하며 미생물 생물 증강 실험을 위한 조기 집락화의 기회를 제공합니다. 보다 침입적인 부들 종의 번식은 토착종의 이동을 촉진할 수 있으므로 수집되는 종을 정확하게 식별하는 것이 중요합니다14. 또한, 침입성 잡종은 종종 번식력이 감소하며, 증가된 뿌리줄기 활력은 교배 감소로 인해 유전적 다양성이 감소한 습지를 지배할 수 있게 할 수 있습니다15. 부들 씨앗은 온라인 소매점에서 구할 수 있지만 국제자연보전연맹(IUCN) 최적한 우려종으로 등재되어 있기 때문에 허가 없이 공공 토지에서 수확할 수도 있습니다

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

저자는 공개할 것이 없습니다.

감사의 글

AZ는 캐나다 자연과학 및 공학 연구 위원회(NSERC) CGS-M 대학원 상의 지원을 받았습니다. 뮌헨치 연구실의 CWTS 연구는 Genome Alberta 및 Genome Quebec과 협력하여 대규모 응용 연구 프로젝트(LSARP) 보조금(#18207)을 통해 Genome Canada의 지원을 받습니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
0.2 & 마이크로; 멸균 필터VWR514-4126
3′,5′-디메톡시-4′-하이드록시아세토페논파이토테크 연구소S7777
뚜껑이 있는 배양 상자 (77 mm & times; 77 mm & times; 97 mm)밀리포어 시그마와 nbsp;V8505
내열 실리콘 실란트 고온임페리얼 제조 그룹KK0205
실험실 밀봉 필름밀리포어 시그마와 nbsp;P7793
무라시게와 스쿠그 미디어 파이토테크 연구소M401
오르가노실리콘 계면활성제파이토테크 연구소S7777
식물성 식물과 nbsp;골드바이오테크놀로지P1003 
폴리소르베이트 20로슈11332465001

참고문헌

  1. Ciria, M. P., Solano, M. L., Soriano, P. Role of Macrophyte Typha latifolia in a Constructed Wetland for Wastewater Treatment and Assessment of Its Potential as a Biomass Fuel. Biosys Eng. 92 (4), 535-544 (2005).
  2. Shelef, O., Gross, A., Rachmilevitch, S. Role of Plants in a Constructed Wetland: Current and New Perspectives. Water. 5 (2), 405-419 (2013).
  3. Parde, D., et al. A review of constructed wetland on type, treatment and technology of wastewater. Environ Tech Innovation. 21, 101261(2021).
  4. Abdullah, S. R. S., et al. Plant-assisted remediation of hydrocarbons in water and soil: Application, mechanisms, challenges and opportunities. Chemosphere. 247, 125932(2020).
  5. Noor, I., et al. Heavy metal and metalloid toxicity in horticultural plants: Tolerance mechanism and remediation strategies. Chemosphere. 303, 135196(2022).
  6. Vymazal, J. Plants used in constructed wetlands with horizontal subsurface flow: A review. Hydrobiologia. 674 (1), 133-156 (2011).
  7. Sandoval, L., Zamora-Castro, S. A., Vidal-Álvarez, M., Marín-Muñiz, J. L. Role of Wetland Plants and Use of Ornamental Flowering Plants in Constructed Wetlands for Wastewater Treatment: A Review. Appl Sci. 9 (4), 685(2019).
  8. Wu, H., et al. Constructed wetlands for pollution control. Nat Rev Earth Environ. 4, 218-234 (2023).
  9. Yang, Y., Shen, Q. Phytoremediation of cadmium-contaminated wetland soil with Typha latifolia L. and the underlying mechanisms involved in the heavy-metal uptake and removal. Environ Sci Pollution Res. 27 (5), 4905-4916 (2020).
  10. Leto, C., Tuttolomondo, T., La Bella, S., Leone, R., Licata, M. Effects of plant species in a horizontal subsurface flow constructed wetland - phytoremediation of treated urban wastewater with Cyperus alternifolius L. and Typha latifolia L. in the West of Sicily (Italy). Ecol Eng. 61, 282-291 (2013).
  11. Sesin, V., Davy, C. M., Freeland, J. R. Review of Typha spp. (cattails) as toxicity test species for the risk assessment of environmental contaminants on emergent macrophytes. Environ Pollution. 284, 117105(2021).
  12. Murashige, T., Skoog, F. A Revised Medium for Rapid Growth and Bio Assays with Tobacco Tissue Cultures. Physiol Plantarum. 15 (3), 473-497 (1962).
  13. Rogers, S., Beech, J., Sarma, K. S. Shoot regeneration and plant acclimatization of the wetland monocot cattail (Typha latifolia). Plant Cell Rep. 18 (1), 71-75 (1998).
  14. Tangen, B. A., et al. Distributions of native and invasive Typha (cattail) throughout the Prairie Pothole Region of North America. Wetlands Ecol Management. 30 (1), 1-17 (2022).
  15. Pieper, S. J., Nicholls, A. A., Freeland, J. R., Dorken, M. E. Asymmetric Hybridization in Cattails (Typha spp.) and Its Implications for the Evolutionary Maintenance of Native Typha latifolia. J Heredity. 108 (5), 479-487 (2017).
  16. Lansdown, R. V. Typha latifolia. The IUCN Red List of Threatened Species 2017. , (2017).
  17. Bedish, J. W. Cattail Moisture Requirements and their Significance to Marsh Management. Am Midland Naturalist. 78 (2), 288(1967).

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재인쇄 및 허가

태그

부들 재배종자 발아종자 흉피 제거인공습지종자 멸균식물-미생물 상호작용뿌리 정착수경 재배 시스템
Typha latifolia(Cattail)의 배양 및 미생물 생물증강을 위한 최적화된 방법
문의하기
도서관에 추천하기

개인정보 처리방침

이용 약관

정책

저작권 © 2026 MyJoVE Corporation. 모든 권리 보유.