CBD와 파클리탁셀의 공동 투여는 쥐에서 화학 요법으로 인한 말초 신경 병증의 발병을 예방합니다. 이 프로토콜은 카나비노이드 취급, 화학 요법 투여 를 통해 쥐에서 동종자 표현형 유도, 기계적 및 열적 동질통을 평가하고, 동질통과 통각과민을 구별하기 위해 고속 비디오 촬영을 사용하는 방법을 설명합니다.
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CBD와 파클리탁셀의 공동 투여는 쥐에서 화학 요법으로 인한 말초 신경 병증의 발병을 예방합니다. 이 프로토콜은 카나비노이드 취급, 화학 요법 투여 를 통해 쥐에서 동종자 표현형 유도, 기계적 및 열적 동질통을 평가하고, 동질통과 통각과민을 구별하기 위해 고속 비디오 촬영을 사용하는 방법을 설명합니다.
이 연구는 생체 내에서 이 증후군의 발달을 조절하는 비향정신성 칸나비노이드 칸나비디올(CBD)의 능력을 평가하기 위해 화학요법 유발 말초신경병증(CIPN)의 쥐 모델의 유용성을 보여줍니다. 이 방법은 화학 요법제인 파클리탁셀(paclitaxel)을 사용하여 동물에서 동질성 표현형을 생성합니다. 이 연구는 CBD를 취급 및 용해시키는 방법, 화학 요법제를 투여하는 방법, 기계적 및 추위 민감도를 평가하고, 동물의 야경 행동을 측정하기 위해 고속 비디오 촬영을 적용하는 방법을 설명합니다. 설명 된 절차를 사용하여 데이터는 CBD가 처리 된 동물에서 동종 표현형이 발생하는 것을 방지한다는 것을 뒷받침합니다. CBD 처리 동물에서는 0일(파클리탁셀 이전 기준선)부터 7일(감작 후)까지 기계적 또는 열적 민감도에서 차이가 관찰되지 않은 반면, 차량 처리 동물은 훨씬 더 민감해졌습니다. 치료에 대한 이러한 반응은 데이터가 수집된 최신 시점(7주)까지 지속됩니다. 고속 비디오 촬영을 추가하면 이러한 행동 표현형을 보다 세분화되고 편견 없이 평가할 수 있습니다(예: 진통 및 항이질통의 분류). 이것은 카나비노이드 약물 특성화에 대한이 모델의 유용성과 신경 병성 통증을 완화하는 데 CBD의 잠재적 인 역할을 모두 보여줍니다.
화학요법 유발 말초신경병증(CIPN)은 감각신경병증의 일종입니다. 이는 화학요법 치료의 흔한 부작용이며, 특히 탁산(taxane)과 백금(platinum) 기반 약물에서 흔히 볼 수 있다 1,2. CIPN의 일부 증상으로는 만성 통증, 무감각, 따끔거림, 촉각 및 온도에 대한 극도의 민감성등이 있습니다 1,2. 이러한 고통스러운 증상은 환자의 일상 생활뿐만 아니라 암 치료에도 지장을 줍니다. 일부 암 환자는 이 증후군과 관련된 삶의 질 저하를 관리하기 위해 복용량을 줄이거나 화학요법을 완전히 중단하기를 원한다3. 현재 임상적으로 일반적으로 사용되는 CIPN 치료법은 증상 완화에 불완전한 효과를 보이고 있으며, 오피오이드(opioid)는 심각한 남용 가능성을 내포하고 있다4. 현재까지 CIPN에 대한 치료법은 없으므로 안전하고 효과적인 대안을 찾는 것이 필수적입니다 5,6
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이 프로토콜은 승인되었으며 동물 연구를 위해 승인된 프로토콜에 따라 Temple University의 동물 관리 및 사용 위원회의 지침을 따릅니다. 이 연구에는 성인 수컷 Sprague-Dawley 쥐(250-300g)가 사용되었습니다. 사용된 시약 및 장비에 대한 자세한 내용은 재료 표에 나열되어 있습니다.
1. CIPN의 유도를위한 칸 나비 노이드 및 화학 요법 제제 준비
참고 : 그림 1 은 칸 나비 디올의 가용화 과정을 보여줍니다.
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쥐에서 이 CIPN 모델에 의해 도출된 행동 결과는 재현성이 높고 일관성이 있습니다. 그림 3A 는 대조군 및 CBD 처리 동물에서 기준선 및 파클리탁셀 감작 후 기계적 민감도를 보여줍니다. 기준선에서 Sprague-Dawley 쥐는 일반적으로 von Frey 필라멘트에 의해 가해지는 26-60g의 힘에서 발 철수를 보이기 시작합니다. 이는 0일차에 두 치료 그룹 모두에서 관찰할 수 있습니다. 파클리탁셀이 투여된 후, 차량 처리된 동물은 적용된 가장 낮은 그램의 힘 필라멘트(예: 4-6g)에 민감해집니다. 이는 이전에 발표된 연구와 함께 본 연구에서도 관찰되었다11. 이 연구는 CBD가 파클리탁셀과 함께 투여되는 경우 이러한 감작을 완화하는 데 매우 효과적임을 보여줍니다. CBD 처리된 동물은 기준선을 유지하며 7일째와 0일 사이에 통계적으로 유의미한 차이를 보이지 않습니다. 또한 이 효과는 내구성이 있습니다.
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화학요법 유발 말초신경병증에 대한 쥐 모델은 기계적 및 열적 민감성으로 특정 유형의 화학요법을 받는 환자에서 가장 많이 보고된 삶의 질 문제 중 두 가지를 요약합니다. 이 모델을 사용하면 상대적으로 저렴하고 효율적인 방법으로 폰 프레이 필라멘트 테스트를 통해 이러한 민감도를 정량화하고 드라이아이스 노출을 통해 열 민감도를 정량화할 수 있습니다. 이 방법은 또한 고속 비디오 촬영을 통해 보다 전문화된 테스트를 위한 추가 방법을 제공하며, 이는 위에서 설명한 보다 쉽게 적용할 수 있는 방법보다 더 상세하고 편향되지 않은 분석에 사용할 수 있습니다. 이 모델은 새로운 치료 옵션이 시급히 필요한 증후군인 CIPN에 대한 실험적 치료법을 조사하는 데 중요한 도구입니다.
여기에 제시된 연구는 비 향정신성 칸 나비 노이드 CBD에 초점을 맞추고 있습니다. 이 방법은 CBD를 효과적으로 취급하고 저장하.......
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저자는 공개할 내용이 없습니다.
저자는 이 프로젝트에 도움을 준 Ward와 Wimmer 연구소에 감사의 뜻을 전합니다. 이 연구는 미국 국립보건원(National Institutes of Health), 국립 신경 장애 및 뇌졸중 연구소(National Institute of Neurological Disorders and Stroke)의 지원을 받았습니다[Grant R42 NS120548-02].
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Cannabidiol | Caymen Chemical | 90080 | Ann Arbor, MI |
| Chremophor | Millipore-Sigma | 238470 | St. Lous, MO |
| Ethanol | Millipore-Sigma | E7023 | St. Lous, MO |
| FastCAM 분석 소프트웨어 | Photon | https://photron.com, 오픈 소스 | |
| 고속 카메라 | Photron | 도끼 50 | |
| 적외선 | CM바이전 | IP65 | |
| Normal Saline | Millipore-Sigma | S0817 | St. Lous, MO |
| Paclitaxel | Temple University Hospital Pharmacy | N/A | Philadelphia, PA |
| Sprague-Dawley 쥐 (250– 300g) | Taconic Laboratories, 크랜베리, 뉴저지 |
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