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방법 논문

화학요법 유발 말초 신경병증의 쥐 모델에서 칸나비디올에 의한 이질통 및 통각 과민 예방

865 조회수

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DOI:

10.3791/68079

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2025년 6월 20일

 ,  ,  ,  , 
1Center for Substance Abuse Research, Department of Neural Sciences, Temple University, 2Department of Psychology, Program in Neuroscience Temple University

이 논문에서

요약

CBD와 파클리탁셀의 공동 투여는 쥐에서 화학 요법으로 인한 말초 신경 병증의 발병을 예방합니다. 이 프로토콜은 카나비노이드 취급, 화학 요법 투여 를 통해 쥐에서 동종자 표현형 유도, 기계적 및 열적 동질통을 평가하고, 동질통과 통각과민을 구별하기 위해 고속 비디오 촬영을 사용하는 방법을 설명합니다.

초록

이 연구는 생체 내에서 이 증후군의 발달을 조절하는 비향정신성 칸나비노이드 칸나비디올(CBD)의 능력을 평가하기 위해 화학요법 유발 말초신경병증(CIPN)의 쥐 모델의 유용성을 보여줍니다. 이 방법은 화학 요법제인 파클리탁셀(paclitaxel)을 사용하여 동물에서 동질성 표현형을 생성합니다. 이 연구는 CBD를 취급 및 용해시키는 방법, 화학 요법제를 투여하는 방법, 기계적 및 추위 민감도를 평가하고, 동물의 야경 행동을 측정하기 위해 고속 비디오 촬영을 적용하는 방법을 설명합니다. 설명 된 절차를 사용하여 데이터는 CBD가 처리 된 동물에서 동종 표현형이 발생하는 것을 방지한다는 것을 뒷받침합니다. CBD 처리 동물에서는 0일(파클리탁셀 이전 기준선)부터 7일(감작 후)까지 기계적 또는 열적 민감도에서 차이가 관찰되지 않은 반면, 차량 처리 동물은 훨씬 더 민감해졌습니다. 치료에 대한 이러한 반응은 데이터가 수집된 최신 시점(7주)까지 지속됩니다. 고속 비디오 촬영을 추가하면 이러한 행동 표현형을 보다 세분화되고 편견 없이 평가할 수 있습니다(예: 진통 및 항이질통의 분류). 이것은 카나비노이드 약물 특성화에 대한이 모델의 유용성과 신경 병성 통증을 완화하는 데 CBD의 잠재적 인 역할을 모두 보여줍니다.

서론

화학요법 유발 말초신경병증(CIPN)은 감각신경병증의 일종입니다. 이는 화학요법 치료의 흔한 부작용이며, 특히 탁산(taxane)과 백금(platinum) 기반 약물에서 흔히 볼 수 있다 1,2. CIPN의 일부 증상으로는 만성 통증, 무감각, 따끔거림, 촉각 및 온도에 대한 극도의 민감성등이 있습니다 1,2. 이러한 고통스러운 증상은 환자의 일상 생활뿐만 아니라 암 치료에도 지장을 줍니다. 일부 암 환자는 이 증후군과 관련된 삶의 질 저하를 관리하기 위해 복용량을 줄이거나 화학요법을 완전히 중단하기를 원한다3. 현재 임상적으로 일반적으로 사용되는 CIPN 치료법은 증상 완화에 불완전한 효과를 보이고 있으며, 오피오이드(opioid)는 심각한 남용 가능성을 내포하고 있다4. 현재까지 CIPN에 대한 치료법은 없으므로 안전하고 효과적인 대안을 찾는 것이 필수적입니다 5,6.

칸 나비 디올 (CBD)은 이전에 마우스 7,8에서 모델링 된 바와 같이 CIPN의 발병을 예방하는 효능이 있는 것으로 나타났습니다. 이는 모호한 효과를 보이는 약물이나 잠재적으로 해로운 오피오이드를 통해 완화할 필요가 없는 환자가 CIPN의 잠재적으로 장기적인 동종형성 증상을 피할 수 있는 유망한 경로를 보여줍니다. 특히 발작 관리와 같은 치료 목적으로 CBD를 사용하는 대다수의 사람들은 경미한 부작용을 경험하며 약물은 일반적으로 잘 견디어냅니다9. 대부분의 부작용은 용량에 따라 다르며 신체가 적응함에 따라 개선되는 경우가 많습니다.

널리 사용되는 이 CIPN10 모델에서, 쥐는 신경병증을 유도하기 위해 파클리탁셀(paclitaxel)을 투여하는데, 이는 이전에 보고된 바와 같이 화학요법 중재 후 일부 환자에서 관찰된 이질체(allodynic phenotype)를 요약한 것이다11. 이 유도의 목표는 이러한 유형의 감각 신경병증을 in vivo에서 평가하기 위한 번역 관련 플랫폼을 보유하는 것이며, 이는 이 증후군에 대한 메커니즘 또는 중재를 조사하는 연구자에게 적합합니다. 기계적 민감도는 폰 프레이 테스트를 사용하여 측정하고 저온 챌린지는 열 민감도를 측정하는 데 사용됩니다10,11. 이를 통해 환자에게 임상적으로 가장 중요한 두 가지 삶의 질 종점에서 CIPN을 완화하는 데 있어 CBD의 예방 가능성을 정량화할 수 있습니다. 추가 평가에는 야간 행동에 대한 고속 비디오 촬영 보조 분석이 포함됨12,13. 무해하고 유해한 자극에 대한 행동 반응의 확장 된 분석은 화학 요법 투여의 동종 및 통각 과잉 효과를 구별 할 수있을뿐만 아니라 이러한 효과를 조절하는 CBD의 능력을 허용합니다.

이 프로토콜은 CIPN 표현형을 유도하고, 쥐의 기계적 및 열적 과민성을 평가 및 정량화하고, 이질통 및 통각 과민에 대한 편견 없고 보다 세분화된 평가를 위해 비디오 촬영을 적용하는 방법을 설명합니다.

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프로토콜

이 프로토콜은 승인되었으며 동물 연구를 위해 승인된 프로토콜에 따라 Temple University의 동물 관리 및 사용 위원회의 지침을 따릅니다. 이 연구에는 성인 수컷 Sprague-Dawley 쥐(250-300g)가 사용되었습니다. 사용된 시약 및 장비에 대한 자세한 내용은 재료 표에 나열되어 있습니다.

1. CIPN의 유도를위한 칸 나비 노이드 및 화학 요법 제제 준비

참고 : 그림 1 은 칸 나비 디올의 가용화 과정을 보여줍니다.

  1. CBD의 가용화 및 파클리탁셀의 희석을 위해 다음 재료를 조립합니다.
    1. 100% 에탄올(EtOH), 크레모포(에톡실화 피마자유), 생리식염수, 호박색 유리 바이알(x2), 50ml 원뿔형 튜브(x2), CBD 분말 스톡, 파클리탁셀 임상 스톡(6mg/mL).
  2. 1:1:18 EtOH: 에톡실화 피마자유: 일반 식염수의 최종 용매 준비를 위해 각 50mL 코니컬 튜브에 적절한 양의 EtOH를 추가합니다.
  3. 테스트 할 동물의 수에 대해 5 mg / kg 농도를 생성하기 위해 적절한 양의 CBD를 질량으로 추출하십시오.
  4. 두 개의 준비된 50mL 원뿔형 튜브 중 하나에 CBD를 EtOH에 용해시킵니다.
  5. 와류 CBD가 완전히 용해 될 때까지 고속으로 CBD-EtOH 혼합물.
  6. 각 50mL 원뿔형 튜브에 동일한 부피의 에톡실화 피마자유(ethoxylated castor oil)를 첨가합니다.
  7. 에톡실화 피마자유가 EtOH와 용액에 들어갈 때까지 각 튜브를 고속으로 소용돌이치십시오.
  8. 각 50mL 원뿔형 튜브에 적절한 양의 생리식염수를 1:1:18의 최종 비율로 추가합니다.
  9. 식염수가 용액에 들어갈 때까지 소용돌이.
  10. 차량 제어 솔루션과 CBD 솔루션을 호박색 유리 바이알에 옮깁니다.
  11. 원액 파클리탁셀 용액을 생리식염수에 1:6으로 희석하여 테스트할 동물 수에 적합한 부피의 호박색 바이알에서 최종 농도를 1mg/mL로 만듭니다.
  12. 호박색 바이알을 알루미늄 칼라 고무 바이알 캡으로 밀봉합니다.
    참고: 실험을 시작하기 전에 준비한 경우 차량, 차량 + CBD 및 파클리탁셀의 바이알을 4-8°C에서 최대 7일 동안 보관할 수 있습니다. 주입하기 전에 냉장 바이알이 실온과 평형을 이루도록 합니다. 또한, 준비된 카나비노이드 시약을 즉시 사용하지 않는 경우 유리에 보관하여 용기에 접착하거나 용액에서 침전되는 것을 방지하는 것이 매우 중요합니다.

2. 쥐에서 동질성 표현형 유도

  1. 아래와 같이 파클리탁셀 주입에 필요한 재료를 조립합니다.
    1. 1mg/mL 파클리탁셀 원액, 1mL 일회용 주사기(xn 랫드), 25G 주사기 바늘(x n 랫드), 화학요법용 폐기물 샤프 용기 및 동물의 체중을 수집하기 위한 스케일을 준비했습니다.
  2. 고유 식별자로 쥐에 번호를 매기거나 태그를 지정합니다.
    참고: 동물들은 실험이 시작되기 최소 1주일 전에 그들의 집에 적응했어야 한다.
  3. 각 동물의 무게를 모으십시오.
  4. 적절한 양의 파클리탁셀(모든 동물)과 비히클 또는 CBD(치료 그룹별)로 주사기를 준비합니다. 이 경우 주입량은 동물의 1μL/g 무게에 해당합니다.
  5. 파클리탁셀과 비히클 또는 파클리탁셀과 CBD를 복강간에 주입합니다.
    1. 쥐가 주사를 맞도록 제지하려면 검지가 엄지손가락과 목덜미를 만나고 중지손가락이 엄지손가락과 어깨 아래의 엄지손가락을 만나도록 뒤에서 비지배적인 쥐를 잡고 약지와 새끼손가락으로 몸을 잡습니다.
    2. 쥐의 뒷다리를 몸에 고정시킵니다.
    3. 부상을 방지하기 위해 동물에게 불편한 수준의 압력을 가하지 않도록 주의하십시오.
      알림: 쥐를 다룰 때 물리거나 긁힐 위험이 항상 있습니다. 이 위험을 완화하기 위해 실험자는 물림 방지 장갑 형태의 추가 PPE를 착용할 수 있습니다.
    4. 수동으로 제지하고 안정시키는 동안 주사기에 복부가 쉽게 접근할 수 있도록 동물을 기울입니다.
    5. 동물의 오른쪽 하단 사분면에 1mg/mL 파클리탁셀을 주입하고 주사기를 화학요법 폐기물 날카로움 용기에 버립니다.
    6. 동물의 왼쪽 하단 사분면에 1 μL / g 무게의 차량 또는 CBD를 주입하고 주사기를 일반 날카로운 물건 용기에 처분하십시오.
      참고: 주사 부위를 번갈아 가며 주사 부위의 동물의 고통과 잠재적인 자극을 완화합니다.
    7. 이것은 실험 1일차를 표시합니다. 2-4일에 이 과정을 반복하여 동질성 표현형을 유도합니다. 이 기간 동안 화학 요법으로 오염된 케이지에 대한 기관 취급 프로토콜을 따르십시오.
    8. 3단계에서 설명한 대로 0일에 기준선 기계적 및 열적 이질통 측정을 수행합니다. 4단계에서 설명한 대로 기준선 생성에 추가 자극을 포함합니다. 통증 점수를 생성하려면 이러한 자극에 대한 0일차 값 분석이 필요합니다.
    9. 동물이 불충분한 취급으로 인한 반응의 이질성을 피하기 위해 안정적이고 반복 가능한 기준선을 보여줄 때까지 2.5.8단계를 반복합니다.
      참고: 동질성 표현형을 유도하는 과정을 중단하지 마십시오. 실험자가 4일 연속으로 주사를 수행할 수 없는 경우, 대체 투여 일정을 통해 유사한 표현형 유도를 달성할 수 있습니다. CBD의 최종 농도 5 mg/mL 및 파클리탁셀의 1 mg/mL 농도를 유지하면서 이러한 혼합물에서 파클리탁셀의 희석을 수용하기 위해 초기 차량 또는 CBD 용액의 부피를 적절하게 조정하여 파클리탁셀과 비히클 또는 CBD의 주사를 2가 아닌 1회 주사로 결합하는 것도 가능하고 아마도 권장됩니다. 화학요법 날카로운 약물을 취급하는 동안 실험자에게 우발적으로 노출되지 않도록 적절한 주의를 기울이십시오.

3. 민감화 후 기계적 및 열적 민감도 평가

참고: 그림 2 는 이 연구에 사용된 개략도를 보여줍니다.

  1. 기계적 및 저온 감도 분석을 위해 다음 재료를 조립하십시오.
    1. 폰 프레이 필라멘트(4-100g), 드라이아이스, 15mL 원추형 튜브, 격리 챔버, 와이어 플로어 그리드, 1/4인치 유리 패널 및 스톱워치.
  2. 실험 7일차(예: 최종 화학요법/치료 조건 주입 후 3일)에 평가를 시작합니다.
  3. 폰 프레이(von Frey) 및 단열 챔버를 조립합니다.
    1. 기계적 감도를 위한 격리 챔버(플라스틱 파티션으로 분리된 6개의 챔버)를 벤치탑 위 20cm의 와이어 바닥 그리드에 배치합니다.
    2. 열 감도 테스트를 위한 격리 챔버(단일 챔버)를 벤치탑 위 20cm의 1/4인치 유리 표면에 놓습니다.
  4. 기계적 이질통을 위해 동물을 격리 챔버에 개별적으로 배치합니다.
  5. 실험 시작 전 15분 동안 격리실에 적응할 수 있도록 합니다.
  6. 기계적 민감도에 대한 수동 폰 프레이 테스트를 수행합니다. 이 방법은 수동 폰 프레이 테스트를 설명하지만, 수동 테스트(14)를 전자 폰 프레이 테스트로 대체할 수 있다.
    1. 가장 낮은 힘(예: 4g)에 해당하는 필라멘트부터 시작하여 필라멘트가 6초 동안 C자 모양으로 유지되도록 오른쪽 뒷발의 중간 발바닥 표면에 압력을 가합니다.
      참고: 연구자들은 오른쪽 뒷발과 왼쪽 뒷발 사이에 약간의 차이가 있다고 보고하지만, 실험자들은 동물들 간에 일관성이 있어야 합니다). 자극당 5번의 시도를 반복합니다.
    2. 테스트할 각 동물에 대해 반복합니다.
    3. 필라멘트 크기를 순차적으로 늘리고 5건의 임상시험 중 최소 2건에서 통증 반응(예: 발 철수)이 관찰될 때까지 3.5.1-3.5.2 단계를 반복합니다.
    4. 관찰된 발 반응을 유발하는 힘의 필라멘트 그램을 기록합니다.
    5. 다음 아래쪽 필라멘트를 다시 테스트하여 발 철수가 관찰되는지 확인합니다. 응답이 관찰되지 않으면 기록된 힘의 그램이 최종적입니다.
    6. 이 단계에서 동물이 반응하면 새로운 필라멘트 그램의 힘을 기록하고 다음 아래쪽 필라멘트를 다시 테스트합니다. 아래쪽 필라멘트가 더 이상 반응을 이끌어내지 않을 때까지 반복합니다. 대표적인 데이터는 그림 3A,C에 나와 있습니다.
  7. 추위 민감도 테스트를 수행합니다.
    1. 기계적 감도 격리 챔버에서 동물을 제거하고 열 감도 격리 챔버에 넣습니다.
    2. 15mL 원뿔형 튜브에 드라이아이스를 넣어 최종 펠릿이 튜브 상단에서 확장되도록 합니다.
    3. 동물의 오른쪽 뒷발 근위부에 가까운 유리잔에 드라이아이스를 놓습니다.
    4. 스톱워치로 동물이 온도에 반응하여 발 철회를 보일 때까지의 시간을 기록합니다. 대표적인 데이터가 그림 3B에 나와 있습니다.
    5. 쥐를 집 우리에 다시 수용하십시오.
    6. 모든 동물이 테스트를 마치고 집 케이지로 돌아갈 때까지 3.7의 모든 단계를 반복합니다.
      참고: 이 단계에서 고통의 징후가 있는지 동물의 행동과 체중을 모니터링해야 한다는 점에 유의하는 것도 중요합니다. 동물이 기본적인 통증 행동을 보이거나 장시간 경과하는 동안 체중이 감소하는 경우, 연구를 종료하고 동물을 적절한 동물 취급 기술에 따라 안락사시켜야 합니다. 실험이 진행되는 동안 동물들이 고통을 보이지 않는다면, 동물들은 마지막 실험일 이후에 안락사시켜야 한다.

4. 고속 비디오 촬영 을 통한 기계적 감도 평가

  1. 기계적 감도 분석 및 비디오 촬영을 위해 아래에 언급된 대로 다음 재료를 조립하십시오.
    1. 격리 챔버, 와이어 바닥 그리드, 면봉, 메이크업 브러시, 핀, 고속 카메라, 적외선 조명, 호환 가능한 분석 소프트웨어가 있는 노트북.
  2. 앞서 설명한 기계적 감도 테스트11와 함께 평가하거나 아래에 설명된 대로 독립형 분석법으로 평가합니다.
  3. 기계적 감도를 위한 격리 챔버(단일 챔버)를 벤치탑 위 20cm의 와이어 바닥 그리드에 배치하여 조립합니다.
  4. 격리 챔버에서 45피트에서 1피트 사이의 약 2도 각도로 카메라를 삼각대에 놓습니다.
  5. 삼각대에 적외선 조명을 배치하여 실험 및 후속 채점을 위해 챔버를 비춥니다.
  6. 기계적 자극 평가를 위해 동물을 격리 챔버에 개별적으로 배치합니다.
  7. 실험 시작 전 15m 동안 격리실에 적응할 수 있도록 합니다.
  8. 다양한 자극으로 기계적 민감도에 대한 체성 감각 검사를 수행합니다(그림 4).
    1. Photron FastCAM 분석 소프트웨어가 설치된 노트북을 사용하여 각 자극에 대해 2000 frames/s로 격리 챔버를 기록합니다(녹음을 시작하려면 해당 버튼을 누름).
    2. 녹음하는 동안 면봉을 사용하여 면봉과 쥐의 뒷발을 부드럽게 접촉하고 녹음을 완료한 후 중지합니다.
    3. 메이크업 브러시를 사용하여 뒷발을 뒤에서 앞으로 닦고 완료 후 멈춥니다.
    4. 핀을 사용하여 쥐의 뒷발에 저압 및 고압 핀 찌르기를 수행합니다. 저압 찌르기의 경우 핀을 뒷발에 부드럽게 터치하고 녹음 중 접촉 후 철회하고 완료 후 중지하십시오.
    5. 고압의 핀 찌르기의 경우 핀을 뒷발에 세게 누르고 녹음 중 접촉 후 빼고 완료 후 중지합니다.
    6. 동물을 가정용 케이지로 되돌려 놓습니다.
    7. 테스트할 각 동물에 대해 반복합니다.
  9. 기록된 통근 행동을 수동으로 평가 via FastCAM 소프트웨어로 처리된 비디오를 사용한 고속 비디오 촬영15에서 설명한 것처럼 그림 5A,B.
    1. 메쉬 바닥에서 발 자극 후 가장 높은 지점까지 발 높이(cm)를 측정합니다. 소프트웨어에서 이 작업을 수행하려면 Dimensions > Measurements 로 이동하여 Two points를 선택합니다.
      1. 전체 발 움직임을 통해 비디오를 재생하여 초기 상향 동작 중에 발이 최고점에 도달하는 순간을 확인합니다. 발바닥에서 명확하게 식별할 수 있는 영역(예: 발바닥 표면의 중심, 발바닥, 발뒤꿈치와 숫자의 교차점 등)을 선택하고 초기점으로 설정합니다.
      2. 비디오를 되감아 자극이 발생하기 전의 해당 영역의 위치를 찾고 y축을 따라 해당 위치의 두 번째 점을 표시합니다. 측정 선이 y축과 평행하게 유지되고 각이 꺾이지 않았는지 확인합니다. 높이는 화면의 왼쪽 상단 모서리에 표시됩니다15.
    2. 초기 리프트에서 가장 높은 지점까지의 거리(cm)를 이 두 지점 사이의 시간(초)으로 나눈 값을 계산하여 발 속도를 결정합니다. 이 측정은 Dimensions > Measurements를 선택하고 Two points를 선택하여 소프트웨어에서 수행할 수 있습니다.
    3. 전체 발 움직임을 통해 비디오를 재생하여 발이 첫 번째 상향 움직임을 시작하는 프레임을 식별합니다. 이 움직임 내에서 서로 다른 프레임에 있는 두 지점을 선택하고 거리를 프레임 수로 나눈 값 또는 시작 프레임과 끝 프레임 사이에 경과된 시간을 계산하여 발 속도를 측정합니다15.
    4. 안와 조임, 발 흔들기, 발 보호대 및 점프 동작에 대한 비디오를 평가합니다. 예를 들어, 동물이 자극을 가하는 동안 이러한 행동 중 하나를 보인다면 야경 행동 점수는 1이 될 것입니다.
      참고: 안와 조임은 자극 적용 중 눈이 완전히 열린 상태에서 부분적으로 또는 완전히 닫힌 상태로 전환될 때 점수가 매겨졌습니다. 발 흔들림은 자극 적용 중에 고주파 발 움찔거림이 관찰될 때 점수가 매겨졌습니다. 점프는 자극 적용 중에 3개 이상의 발이 와이어 그리드 바닥에서 떨어졌을 때 점수가 매겨졌습니다.
    5. 자극의 기준선 데이터를 사용하여 앞서 설명한 대로 이 동물 코호트에 대한 분포 및 오차 추정치를 생성합니다15. 간단히 말해서, 전처리 기준선에서 정적 접촉, 동적 접촉, 가벼운 바늘 찌르기 및 무거운 바늘 찌르기에 대한 반응으로 연구에 사용되는 각 동물의 비디오를 녹화하여 가능한 모든 행동 특징을 포착합니다.
      1. 모든 자극(정적 접촉, 면봉, 가벼운 핀프릭, 무거운 핀핀)에 걸쳐 그룹에 대한 각 행동 특징(속도, 높이, 통증 점수)의 평균 및 표준 편차를 계산합니다.
    6. 4.9.4단계에서 생성된 변수와 앞서 설명한 절차16을 사용하여 각 비디오에서 관찰된 원시 데이터에서 z-점수를 생성합니다.
    7. 통계 분석 소프트웨어를 사용한 주성분 분석을 사용하여 모든 z-점수를 1차원 고유값으로 결합합니다17. 이를 통해 3차원 데이터셋에서 변환된 z-점수의 조합을 단일 가중 합계 값16으로 계산할 수 있습니다.
    8. 통계 분석 소프트웨어를 사용하여 유해 및 무해한 자극과 관련된 행동을 구분하기 위해 이러한 여러 행동 차원을 포함하는 PCA 생성 통증 점수를 플롯합니다(그림 5C).
      참고: 비디오 촬영 지원 기계 테스트는 증가된 차원을 통합하여 폰 프레이 테스트를 반복합니다. CIPN의 맥락에서, 항이질통(antiallodynia)과 진통제(analgesia)에 대한 설명과 구별을 허용합니다. 비디오 채점은 감각 테스트를 수행한 실험자와 독립적인 당사자가 수행할 수도 있습니다. 이것은 실험자 편향을 줄이고 수집된 정보의 깊이를 높일 수 있는 강력한 도구입니다. 이 방법은 특수 하드웨어, 소프트웨어 및 통계 기술에 의존한다는 점에 유의하는 것이 중요합니다. 이전 섹션에서 설명한 보다 접근하기 쉬운 방법을 보완하는 역할을 합니다. 또한 카메라에서 생성되는 파일의 크기로 인해 데이터 수집에 시간이 많이 걸리고 파일 저장 공간이 제한 요소가 될 수 있다는 점에 유의해야 합니다. 이러한 요인은 실험 초기에 고려해야 합니다.

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결과

쥐에서 이 CIPN 모델에 의해 도출된 행동 결과는 재현성이 높고 일관성이 있습니다. 그림 3A 는 대조군 및 CBD 처리 동물에서 기준선 및 파클리탁셀 감작 후 기계적 민감도를 보여줍니다. 기준선에서 Sprague-Dawley 쥐는 일반적으로 von Frey 필라멘트에 의해 가해지는 26-60g의 힘에서 발 철수를 보이기 시작합니다. 이는 0일차에 두 치료 그룹 모두에서 관찰할 수 있습니다. 파클리탁셀이 투여된 후, 차량 처리된 동물은 적용된 가장 낮은 그램의 힘 필라멘트(예: 4-6g)에 민감해집니다. 이는 이전에 발표된 연구와 함께 본 연구에서도 관찰되었다11. 이 연구는 CBD가 파클리탁셀과 함께 투여되는 경우 이러한 감작을 완화하는 데 매우 효과적임을 보여줍니다. CBD 처리된 동물은 기준선을 유지하며 7일째와 0일 사이에 통계적으로 유의미한 차이를 보이지 않습니다. 또한 이 효과는 내구성이 있습니다.

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토론

화학요법 유발 말초신경병증에 대한 쥐 모델은 기계적 및 열적 민감성으로 특정 유형의 화학요법을 받는 환자에서 가장 많이 보고된 삶의 질 문제 중 두 가지를 요약합니다. 이 모델을 사용하면 상대적으로 저렴하고 효율적인 방법으로 폰 프레이 필라멘트 테스트를 통해 이러한 민감도를 정량화하고 드라이아이스 노출을 통해 열 민감도를 정량화할 수 있습니다. 이 방법은 또한 고속 비디오 촬영을 통해 보다 전문화된 테스트를 위한 추가 방법을 제공하며, 이는 위에서 설명한 보다 쉽게 적용할 수 있는 방법보다 더 상세하고 편향되지 않은 분석에 사용할 수 있습니다. 이 모델은 새로운 치료 옵션이 시급히 필요한 증후군인 CIPN에 대한 실험적 치료법을 조사하는 데 중요한 도구입니다.

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공개 사항

저자는 공개할 내용이 없습니다.

감사의 글

저자는 이 프로젝트에 도움을 준 Ward와 Wimmer 연구소에 감사의 뜻을 전합니다. 이 연구는 미국 국립보건원(National Institutes of Health), 국립 신경 장애 및 뇌졸중 연구소(National Institute of Neurological Disorders and Stroke)의 지원을 받았습니다[Grant R42 NS120548-02].

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
CannabidiolCaymen Chemical90080Ann Arbor, MI
ChremophorMillipore-Sigma238470St. Lous, MO
EthanolMillipore-SigmaE7023St. Lous, MO
FastCAM 분석 소프트웨어 Photonhttps://photron.com, 오픈 소스
고속 카메라Photron 도끼 50 
적외선 CM바이전 IP65 
Normal SalineMillipore-SigmaS0817St. Lous, MO
PaclitaxelTemple University Hospital PharmacyN/APhiladelphia, PA
Sprague-Dawley 쥐 (250– 300g) Taconic Laboratories, 크랜베리, 뉴저지

참고문헌

  1. Zhang, X., Chen, W. W., Huang, W. J. Chemotherapy-induced peripheral neuropathy. Biomed Rep. 6 (3), 267-271 (2017).
  2. Sałat, K. Chemotherapy-induced peripheral neuropathy: part 1-current state of knowledge and perspectives for pharmacotherapy. Pharmacol Rep. 72 (3), 486-507 (2020).
  3. Velasco, R., Bruna, J. Chemotherapy-induced peripheral neuropathy: An unresolved issue. Neurología (English Edition). 25 (2), 116-131 (2010).
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