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방법 논문

폐색성 심근경색 모델 개발을 위한 쥐의 좌전하행 관상동맥 결찰

1K 조회수

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DOI:

10.3791/68143

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2025년 10월 3일

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1Department of Pharmacology, Khalsa College of Pharmacy, 2Khalsa College of Veterinary and Animal Sciences, 3Department of Molecular Biology and Biochemistry, Guru Nanak Dev University, 4Universal Diagnostics, 5Histopathology Department, Fortis Memorial Research Institute

이 논문에서

요약

이 프로토콜은 쥐에서 좌전하행 관상동맥을 영구적으로 결찰하여 심근경색(MI) 모델의 개발을 보여줍니다. MI 후 동물의 생존은 허혈 영역의 심근 세포를 구제하고 경색 확장을 방지하며 심근 후 염증 및 섬유증을 줄이는 데 필수적입니다.

초록

허혈성 심장 질환 및 뇌졸중을 포함한 심혈관 질환(CVD)은 전 세계적으로 사망률과 이환율의 주요 원인입니다. 심근경색은 장기간의 허혈로 인해 발생하는 허혈성 심장질환의 임상 증후군입니다. 허혈성 심근은 기능적, 대사적, 구조적 변화를 겪어 괴사로 인해 심근의 일부에 돌이킬 수 없는 손상을 초래합니다. 심근경색의 실험 모델은 MI 도중 및 후에 발생하는 급성 및 만성 세포, 분자 및 형태학적 변화를 이해하고 치료를 위한 새로운 표적 또는 전략을 개발 및 최적화하는 데 중요합니다. 좌전하행관상동맥(LAD)의 영구 폐쇄를 사용하는 작은 동물의 MI 수술 모델은 인간 MI와 거의 유사합니다. 이 연구의 목표는 쥐에서 LAD 관상 동맥을 지울 수 없이 폐쇄하는 것과 관련된 외과적 유도 MI 모델을 확립하는 것입니다. 실험 프로토콜에는 케타민 80mg/kg 및 자일라진 12mg/kg i.p.를 사용한 초기 마취 유도, 폐포의 붕괴를 방지하기 위해 외인성 호기말 양압(PEEP)을 사용하여 인공호흡기 보조 환기 하에서 기관절개술을 수행하지 않고 검이경을 사용하여 기관내 캐뉼라를 삽입하는 것이 포함됩니다. 수술 중 골격근에 발생하는 병변을 제한하는 개흉술 절차가 채택되었습니다. 이 접근법은 최소 침습적이고 반복 가능하며 수술 후 사망률을 낮춥니다. 이 모델에서 동물은 MI 후 4일 동안 생존하여 단기적인 병태생물학적 변화, 주로 MI 후 염증, 경색 치유의 자연적인 과정으로서의 혈관신생, 궁극적으로 경색된 심근의 섬유증을 이해했습니다.

서론

주로 허혈성 심장 질환(IHD)과 뇌졸중으로 구성된 심혈관 질환(CVD)은 전 세계적으로 사망률과 이환율의 주요 원인입니다. 세계심장연맹(World Heart Federation)에 따르면 2021년에는 2,050만 명이 심혈관 질환으로 사망했습니다 1,2. 심장마비라고도 알려진 심근경색(MI)은 IHD의 급성 임상 증후군입니다. MI 동안 심근 조직은 일반적으로 관상 동맥의 파열된 죽상동맥경화반 위에 형성된 폐색성 혈전으로 인해 발생하는 장기간의 허혈의 결과로 돌이킬 수 없는 손상을 입습니다3.

경피적 관상동맥 중재술(PCI) 또는 혈전용해제를 사용한 적시 재관류는 괴사로부터 허혈성 심근을 구제하기 위한 주요 요법입니다 3,4. 선진국에서는 PCI의 시행이 확대되면서 심경근에 따른 사망률이 감소했지만 남아시아와 같은 개발도상국에서는 심경근 발병률이 증가하고 있습니다5. MI 후 괴사를 겪는 심근의 일부는 가역적으로 손상된 심근 세포 영역과 허혈 영역으로 둘러싸여 있습니다. 허혈성 심근은 심실 확장 및 기능 장애로 이어질 수 있는 심근경색 후 심실 리모델링을 거쳐 궁극적으로 심부전으로 진행됩니다6.

현재 줄기세포 치료7 를 통해 손상된 심근세포의 재생을 촉진하고, 허혈부8 내에서 혈관신생을 자극하여 심근 복구를 촉진하기 위한 광범위한 연구가 진행되고 있다. 그러나 두 접근법의 임상적 성공을 위해서는 전략의 상당한 개선이 필요합니다. 따라서 심근경색 또는 허혈을 모방한 실험 모델은 MI 도중 및 후에 발생하는 병리학적, 세포적, 분자적, 형태학적 변화를 이해하여 새로운 치료 표적 또는 치료 전략을 식별하고 임상 번역을 최적화할 수 있도록 하는 데 중요합니다. 본 연구에서는 쥐에서 좌전하행(LAD) 관상동맥을 비가역적으로 폐쇄하여 MI의 실험 모델을 개발하였다. 첫째, 무기폐(폐의 기낭 수축/붕괴)를 예방하기 위해 인공호흡기 보조 환기 하에서 기관절개술을 하지 않고 마취된 동물에서 기관내 삽관을 시행하였다. 흉강을 열기 위해 최소 침습 시술을 채택하여 수술 중 골격근 손상을 방지했습니다. 결찰의 위치는 LAD의 첫 번째 대각선 가지의 기원을 포함하며, 이는 충분한 경색을 일으키고 폐쇄성 심근경색증(OMI)의 임상 상태를 모방합니다. 결찰 위치가 중간 LAD 부위이기 때문에 수술 후 사망률과 수술 후 합병증이 더 낮습니다9. 이 모델에서 동물은 MI 후 심근 조직에서 발생하는 단기 변형을 이해하고 MI를 치료하기 위한 새로운 표적 및 전략을 식별하기 위해 MI 후 4일 동안 생존했습니다.

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프로토콜

실험 절차는 기관 동물 윤리 위원회(IAEC)의 승인 후 프로토콜에 따라 수행되었습니다. (IAEC/KCP/2023/009)]. 통제 및 감독 목적 위원회(CCSEA)와 인도 정부 환경산림기후변화부의 지침에 따라 실험동물을 취급하고 돌볼 수 있었습니다.

1. 기관내 캐뉼라의 마취 및 삽관 (소요 시간: 10-15분)

  1. 체중이 200 - 240g이고 생후 6개월 이상인 남녀 Wistar 쥐를 사용하십시오. 쥐의 무게를 기록하십시오. 복강내 경로를 통해 체중에 따라 케타민(80mg/kg)과 자일라진(12mg/kg)을 투여하여 쥐를 마취시킨다.
    참고: 해리성 마취제인 케타민은 빠른 마취를 일으키지만 부분적인 근육 고정을 생성합니다10. 따라서, 자일라진과 병용하여 근육 이완을 일으키고 외과적 마취 상태를 달성한다11.
  2. 마취 정도를 보장하기 위해 꼬리를 꼬집습니다. 쥐가 반사를 보이면 케타민용량의 1 /3을 투여합니다. 가열 패드를 인공호흡기에 연결하여 수술대 위에 놓아 항온을 제공합니다.
  3. 쥐를 가열 패드의 등쪽 욕창 위치에 놓습니다(그림 1A). 접착 테이프를 붙여 쥐를 이 자세로 유지하고 수술대를 기울어진 위치에 놓습니다.
  4. 일회 호흡량을 8mL/kg(2-3mL/min), 호흡수를 분당 77회(bpm), 최대 압력(최대 흡기압)을 15cm H2O로 인공호흡기 호흡 매개변수를 조정합니다. 폐의 허탈을 방지하려면 호기말 양압(PEEP)을 2cm H2O로 조정하십시오.
  5. 기관내 삽관을 시행하려면 혀를 잡고 뭉툭한 핀셋으로 들어 올리십시오. 검이경(그림 1B)을 입에 삽입하여 성대를 보고 성대를 통해 기관내 캐뉼라(그림 1B 및 그림 2A)를 삽입합니다. 후두개를 명확하게 보려면 위에서 목구멍 주위에 손전등을 비춥니다.
  6. 기관내 캐뉼라를 인공호흡기 튜브와 연결하고(그림 1A 및 그림 2B) 흉부 움직임을 모니터링하여 올바른 삽관을 확인합니다. 복부가 부어오르면 식도 삽관이 의심되는 경우 1.8단계에 따라 삽관을 반복합니다.
  7. 모든 설정이 완료된 후 LAD 결찰을 위해 수술용 실체현미경을 사용하고(그림 1A), 수술 중 가열 램프를 사용하여 쥐 체온을 37°C로 유지합니다.
  8. 쥐의 목과 흉부 부위에 제모 크림을 바르고 10 - 20분 동안 그대로 둡니다. 쥐의 털을 목에서 흉부 부위까지 부드럽게 제거하십시오.

2. 심근경색의 외과적 유도 (소요시간: 20 - 25분)

  1. 핀셋을 사용하여 검상돌기의 피부를 뽑고 가위를 사용하여 약간의 절개(약 1cm)를 한 다음 검상돌기에서 시작하여 흉쇄유돌근을 향해 세로로 절단합니다.
    1. 심한 출혈을 방지하기 위해 근막에 해를 끼치지 마십시오. 출혈이 있는 경우 포장된 물티슈를 사용하여 출혈 부위를 부드럽게 누르십시오.
  2. 흉쇄유돌근의 기저부에서5-6번째 갈비뼈까지 흉골 왼쪽을 따라 근막과 가슴 근육을 절단합니다.
  3. 겸자를 사용하여 흉골 왼쪽을 향한 3번째 와 4번째 늑간 공간에 구멍을 뚫습니다. 구멍(약 6-8mm)을 만드는 동안 심장이나 폐를 손상시키지 마십시오. 이 단계에서 엿보기를 적용하십시오.
  4. 갈비뼈 절단 니퍼를 사용하여 늑간근과 함께 4번째, 5번째, 6번째 갈비뼈를 자르고 나머지 늑간근을 겸자로 분리합니다(그림 2C).
  5. 갈비뼈 견인기를 부드럽게 삽입하여 갈비뼈를 분리하고 심장을 노출시킵니다(그림 2D). 좌심방을 명확하게 보려면 핀셋과 곡선 가위를 사용하여 심장 앞쪽에서 심낭과 흉선을 분리하십시오.
  6. 봉합사에 의한 결찰을 위한 좌전하행(LAD) 관상동맥의 위치를 식별합니다.
    1. 심낭을 조심스럽게 제거한 후 LAD를 심실 홈을 따라 심장 기저부에서 정점까지 대각선으로 이어지는 눈에 띄는 표재성 동맥으로 식별합니다. LAD는 두 세트의 가지로 나뉩니다: 첫째, 심실 중격을 천공하는 중격 가지(S1 및 S2). 대각선 가지(D1 및 D2)라고 하는 두 번째 가지 세트는 좌심실 전방에 구멍을 뚫습니다.
    2. LAD의 세 영역, 즉 근위부, 중간 및 원위 영역을 식별합니다. 근위 LAD : 기원에서 첫 번째 가지까지의 LAD 영역으로, 중격 또는 대각선이 될 수 있습니다. Mid LAD: 첫 번째 가지와 두 번째 대각선 가지 사이의 영역; 원위 LAD: 두 번째 대각선 가지를 넘어서는 영역을 원위 LAD라고 합니다(그림 2E).
    3. LAD는 벽이 두꺼운 박동성 붉은 동맥으로 나타납니다. 위치를 확인하려면 마이크로 집게로 부드럽게 누르면 맥동이 느껴집니다.
  7. 8-0을 통과하여 LAD의 영구 폐쇄를 수행합니다. 바늘 홀더를 사용하여 첫 번째 대각선 가지 D1의 기점 근처의 중간 LAD 영역에 실크 봉합사를 사용하고 봉합사를 부드럽게 잡아당겨 심장에 해를 끼치지 않도록 합니다(그림 2E).
  8. 집게를 사용하여 동일한 방향으로 두 개의 합자 매듭(외과 의사의 매듭)을 만듭니다. 겸자를 사용하여 양면 방향으로 여러 개의 매듭을 만들어 합자를 고정합니다.

3. 가짜 수술

  1. 2.1-2.6단계를 수행합니다. 좌추 개흉술을 시행한 후 심장을 노출시키고 실크 봉합사를 통과시킨 후 결찰하지 않고 좌측 주관상동맥(LAD) 아래를 당깁니다.

4. 치료제 투여(소요시간: 2-5분)

  1. LAD 결찰 후 즉시 치료군에서 꼬리 정맥을 통해 독사조신 0.06 mg/kg을 정맥 주사합니다(그림 3)

5. 수술 후 흉강 폐쇄 (소요시간 : 5분)

  1. 갈비뼈와 늑간근이 원래 위치로 돌아가도록 견인기를 제거합니다. 6-0 실크 봉합사를 사용하여 좌우 늑간근을 봉합하여 흉강을 닫습니다. 4-0 Prolene 봉합사로 바늘을 꿰매어 피부를 봉합합니다(그림 2F).

6. 수술 후 관리 및 모니터링(소요시간: 40분 - 60분)

  1. 마취에서 회복하기 위해 수술한 쥐를 40분 이상 추적합니다. 꼬리를 들어 올리거나 꼬집어 완전한 회복을 보장합니다.
  2. 인공호흡기에서 연결부를 일시적으로 제거하고 흉부 부위의 정상적인 움직임을 검사하여 쥐의 자가 조절 호흡을 보장합니다.
  3. 인공호흡기를 끄고 기관내 캐뉼라를 제거합니다. 팔다리에 고정된 접착 테이프를 분리합니다.
  4. 수술 후 통증을 완화하기 위해 복강내 경로를 통해 트라마돌(12.5mg/kg)을 주사합니다.
  5. 쥐를 가열 패드 위에 올려 최소 30분 동안 체온을 37°C로 유지합니다. 불규칙한 호흡이나 어려움과 같은 병적 상태 또는 경색의 위험한 징후가 있는지 쥐를 지속적으로 모니터링하십시오.
  6. 쥐가 자유롭게 움직일 수 있을 때, 마취에서 완전히 회복된 상태라고 생각하십시오. 쥐가 자발적으로 움직일 수 없더라도 인공호흡기에서 제거한 후 45분 이내에 우리에 보관하십시오.
  7. 처음 4일 동안 매일 쥐를 관찰하십시오. 4일째에는 CO2 안락사 챔버를 사용하여 쥐를 희생합니다.

7. 심근경색의 생화학적 마커 분석

  1. 동물의 혈액 샘플에서 수술 후 6시간 및 4일에 심근경색의 바이오마커로서 트로포닌 수치를 평가합니다.
    1. 샘플 수집 및 준비: 경색 6시간 후 EDTA 코팅 또는 헤파린 코팅 튜브에 및 MI 4일 후 안와후 천자(1mL)로 측근에서 혈액 샘플(200μL)을 수집합니다.
      참고: 트로포닌 T 검사에는 항응고제 전혈 샘플이 선호됩니다.
    2. 키트에 제공된 심장 피펫과 일회용 투여 주사기를 사용하여 150μL의 샘플을 테스트 스트립에 적용합니다.
    3. 실온에서 15-20분 동안 배양한 다음 15-20분 이내에 검출 영역에 신호선(붉은색을 띤 선)의 모양을 기반으로 결과를 해석합니다. 다음 매개변수 사용: 감지선 없음, 제어선만 = 음성; 가시광선 및 제어선 = 양성(그림 6B).
  2. 표준 F 분석기를 사용하여 혈청 샘플에서 트로포닌 I을 검출합니다.
    1. 샘플 수집 및 준비: 경색 6시간 후 EDTA 코팅 또는 헤파린 코팅 튜브에서 꼬리 정맥에서 혈액 샘플(200μL)을 수집하고 MI 4일 후 안와후 천자(1mL)를 통해 수집합니다.
    2. 키트와 혈액 샘플을 실온에 두십시오. 호일 파우치 뒷면의 유통기한을 확인하세요. 호일 파우치를 열고 테스트 장치를 확인합니다(그림 4).
    3. 테스트 장치를 분석기의 테스트 슬롯에 삽입합니다. 분석기는 바코드 데이터를 읽고 테스트 장치가 유효한지 확인합니다(그림 4).
    4. 고정 부피 점적기(100μL)로 100μL의 샘플을 수집합니다. 수집된 샘플을 추출 완충 튜브에 분배합니다. 그런 다음 사용한 고정 부피 점적기(100μL)를 폐기합니다.
    5. 샘플과 버퍼를 일회용 점적기(100μL)로 2x-3x로 혼합합니다. 그런 다음 100μL의 샘플 혼합물을 수집합니다.
    6. 샘플을 테스트 장치의 샘플 웰에 적용한 후 즉시 분석기의 TEST START 버튼을 누릅니다. 분석기는 10분 이내에 테스트 결과를 자동으로 표시합니다.
      참고: 트로포닌 I(TnI)이 존재하면 유로퓸 미립자에 결합합니다. 이 복합체는 테스트 라인의 포획 항체에 의해 포획되고 형광의 강도는 분석기에 의해 검출됩니다.

8. 경색 부위 분석

  1. 위반 후 4일 후에 쥐를 희생시킨 후, 2,3,5-트리페닐테트라졸륨 클로라이드(TTC) 염료의 거시적 방법을 사용하여 경색 부위를 결정합니다.
    1. 동물의 몸에서 심장을 제거하고 4°C에서 하룻밤 보관합니다. 귓바퀴, 대동맥 뿌리, 우심실을 모두 절제합니다. 수술용 칼날을 사용하여 얼어붙은 좌심실을 2-4mm 두께의 조각으로 자릅니다. 심실 절편을 37°C에서 1% TTC 용액(pH 7.8로 유지된 0.1M Tris 완충액을 사용하여 준비)에서 20분 동안 배양합니다.
    2. 탈수소효소와 보인자 NADH를 함유한 생존 가능한 심근은 포르마잔 형성으로 인해 TTC로 벽돌색으로 염색되는 반면, 경색을 겪는 심근 부위는 염색되지 않은 상태로 남아 있기 때문에 염색 패턴을 분석합니다.
  2. 부피법으로 경색 부위를 결정합니다.
    1. 두 개의 유리 슬라이드 사이에 심실 조각을 놓고 그 위에 1cm에 100개의 정사각형이 있는 투명한 플라스틱 격자를 놓습니다.
    2. 양쪽의 정사각형 수를 세어 각 심실 절편의 평균 면적을 계산합니다. 마찬가지로 양쪽의 얼룩진 부분과 얼룩지지 않은 부분에 떨어지는 사각형의 수를 계산합니다. 염색되지 않은 칙칙한 노란색 영역은 경색된 부분을 나타내고 빨간색 영역은 생존 가능한 부분을 나타냅니다.
    3. 경색 크기를 총 좌심실 용적(%LVV)의 백분율로 표현합니다.

9. 조직병리학적 분석

  1. 헤마트실린 및 에오신 염색
    1. 조직병리학적 소견의 경우, LAD 결찰 후 4일 후에 동물을 희생하고, 심장을 제거하고, 인산염 완충액(PBS, pH 7.4)으로 세척하고, 즉시 포르말린 용액(10%)에 보존합니다.
    2. 일련의 증가하는 알코올 농도(70%, 80%, 95%, 95% 및 무수 알코올)에서 조직을 1시간 동안 탈수하여 조직 처리를 수행하여 조직에서 수분이 제거되고 알코올이 조직 내부로 들어갑니다. 자일렌에 담가 조직에서 알코올을 제거합니다.
    3. 제거 후 집게를 사용하여 조직을 스테인리스 스틸 몰드에서 용융된 파라핀 왁스로 옮깁니다. 투명제가 확산되고 녹은 왁스가 조직으로 침투합니다. 냉각판에서 금형을 식혀 파라핀을 응고시킵니다. 왁스가 완전히 냉각되고 경화되면(30분) 파라핀 블록을 금형에서 쉽게 제거합니다.
    4. 마이크로톰을 사용하여 포매된 조직을 포함하는 파라핀 블록을 4μm 두께의 섹션으로 자릅니다. 파라핀 절편의 리본을 40-45°C의 수조에 넣습니다. 슬라이드에 섹션을 장착하고 슬라이드를 자연 건조하거나 부드럽게 데우십시오. 그런 다음 절편을 자일렌으로 세척하고 무수 알코올과 물로 재수화하여 탈파라핀화합니다.
    5. 헤마트실린으로 15분 동안 염색합니다. 얼룩진 부분을 물로 씻고 1% 산성 알코올 혼합물로 20초 동안 처리합니다.
    6. 물로 세척한 후 대대염색(1% 에오신 수용액)으로 절편을 2분 동안 염색합니다. 현미경으로 슬라이드를 관찰하여 10배 및 40배 배율로 조직병리학적 변화를 시각화합니다.
  2. Masson 삼색 염색
    1. 다음 시약을 준비합니다.
      1. Bouin's Solution: 포화 피크르산 75mL, 40% 포름알데히드 25mL, 빙초산 5mL를 첨가합니다. Weigert의 철 헤마목실린 용액: 95% 알코올 100mL에 헤마톡실린 1g을 함유한 원액 A를 준비합니다. 물 4mL, 진한 염산 1mL, 증류수 95mL에 염화제이철 29%를 함유한 원액 B를 준비합니다. 사용을 위해 원액 A와 B를 같은 비율로 첨가하십시오. 혼합물은 3개월 이내 동안만 안정적입니다.
      2. Biebrich Scarlet-Acid Fuschin 용액: 1% Biebrich Scarlet 수성 90mL, 1% Acid Fuschin 수성 10mL, 빙초산 1mL를 첨가합니다. 인화-인화성 용액: 5% 인화화산 25mL와 5% 인화화산 25mL를 첨가합니다. 아닐린 블루 용액: 증류수 100mL에 아닐린 블루 2.5g과 빙초산 2mL를 첨가합니다. 1% 빙초 산 용액.
    2. 자일렌을 사용하여 파라핀 포매 심장 절편을 탈파라핀화한 다음 다양한 농도의 알코올로 재수화합니다.
    3. 심장 절편을 Bouin's 용액과 함께 56°C에서 30분 동안 배양하여 최종 색상 강도를 증가시킵니다. 노란색이 제거될 때까지 흐르는 수돗물로 섹션을 헹굽니다.
    4. 헤마톡실린으로 조직을 1분 동안 염색한 다음 흐르는 수돗물로 2-3분 동안 세척합니다. Biebrich 주홍산 푹신 용액으로 절편을 15분 동안 염색합니다.
    5. 5% 포스포몰리브드산-인산으로 5 - 8분 동안 구별합니다. 절편을 6-8분 동안 아닐린 블루 용액에 직접 옮깁니다(헹구지 않고).
    6. 증류수로 씻으십시오. 그런 다음 1% 아세트산 용액으로 구별합니다. 95% 에탄올로 탈수하고 자일렌으로 투명하게 한 다음 슬라이드에 장착하고 현미경으로 검사합니다12.

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결과

기관내 삽관은 쥐의 개흉 흉부 시술을 포함하는 LAD 결찰 시술 중 환기를 돕기 위해 필요합니다. 성공적인 삽관은 수술 전 기저 호흡 매개변수와 수술 중 안정적인 호흡량, 일회 호흡량 및 분당 용적의 유지에 의해 확인됩니다(그림 5).

LAD 결찰 절차의 성공은 심근 손상의 생화학적 마커로서 심장 트로포닌 T와 트로포닌 I을 평가하고13 경색 크기를 측정하고, 조직병리학적 변화를 관찰함으로써 확인되었습니다. 심장 트로포닌(cTn) 단백질은 액틴 필라멘트와 상호 작용하여 심장 근육의 수축 및 이완을 조절합니다. 심장에 존재하는 트로포닌의 두 가지 이소형, 즉 트로포닌 I(cTnI)과 트로포닌 T(cTnT)는 심근 세포가 손상된 후 혈액에서 방출됩니다13. 트로포닌 T(cTnT) 수치는 TropT 정성 키트를 사용하여 검출됩니다. 테스트 스트립에...

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토론

우리의 본 연구는 쥐에서 좌전하행 관상동맥(LAD)의 영구 폐쇄를 통한 심근경색의 유도를 나타냅니다. 이 수술 프로토콜에서 복강내 경로로 투여된 마취제 케타민 80mg/kg은 자일라진 12mg/kg의 복강내 투여와 함께 빠른 마취를 유도하여 충분한 근육 이완을 일으켜 전체 수술 절차를 효과적으로 촉진할 뿐만 아니라 부작용을 최소화하면서 단기간에 수술 후 원활한 회복을 촉진했습니다. 케타민 80mg/kg 및 자일라진 10mg/kg의 투여와 같은 다양한 용량의 케타민 및 자일라진에 대한 유사한 마취 프로토콜이 이전 연구에서 확립되었으며, 이는 MI 유도를 위한 수술을 수행하기에 바람직한 충분한 마취를 생성했으며 쥐에서 MI 후 높은 생존율을 생성했습니다15,16. 기관내 캐뉼라의 삽관은 손전등 아래에서 검이경을 사용하여 성대를 시각화하여 경사진 수술대에서 앙누운 자세로...

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공개 사항

모든 저자는 모든 이해 상충을 공개했습니다.

감사의 글

암리차르 칼사 약학대학 교장인 Ravi Kumar Dhawan 박사는 모든 수술 장비 구매에 대한 지침과 지원을 제공했습니다. 자금 제공을 위한 Khalsa College Governing Council 관리; 케타민과 자일라진의 선물 샘플을 제공한 암리차르 칼사 수의학 및 동물 과학 대학 교장인 Harish Kumar Verma 박사; Rekha Singh 박사, 조직병리학 시설 및 등급을 위한 구루그람 Fortis Memorial Research Institute의 조직병리학과; Mr. Hemaant Arora, M.D., 트로포닌 I 평가를 위한 시설을 제공하는 Universal Diagnostics; Rachna Hora 박사, 블로팅 기술을 위한 분자 생물학 및 생화학과 부교수.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
18게이지 정맥 캐뉼라Kent scientific, 미국
20게이지 정맥 캐뉼라Kent scientific, 미국
4-0 폴리프로필렌 봉합사칸나 외과
6-0 실크 봉합사나낙 외과
8-0 실크 봉합사나낙 외과
애드슨 집게(Adson 겸자)나낙 외과
마취 장치오키드 사이언티픽
마취유도실오키드 사이언티픽
곡선 가위나낙 외과
기관내 삽관 튜브켄트 사이언티픽, 미국
제모 크림나낙 외과
가열 패드Kent scientific, 미국
후크 집게나낙 외과
케타민암리차르 KVAS의 선물 샘플
마이크로 바늘 홀더나낙 외과
니트릴 장갑 나낙 외과
수술대
검이경나낙 외과
완두콩 집게(Pean Thanps)나낙 외과
리브 견인기나낙 외과
스트레이트 핀셋나낙 외과
해협 니퍼나낙 외과
수술용 헤어 캡나낙 외과
수술용 마스크나낙 외과
수술용 입체현미경올림푸스 매그너스24B1187암 붐 스탠드가 있는 스테레오 줌 MSZ-TR 현미경, 줌 비율: 1:7 대물렌즈 줌: 0.65 - 4.5x 접안렌즈 10x/22mm 배율: 6.5 - 45x, 10x 접안렌즈 LED 링 조명
이빨이 없는 집게나낙 외과
트라마돌ASR Amandeep 병원의 선물 샘플
핀셋나낙 외과
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참고문헌

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