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방법 논문

RNA 증폭 측면 유동 분석에 의한 Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis 및 Ureaplasma urealyticum 의 신속한 식별

698 조회수

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DOI:

10.3791/68413

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2025년 6월 20일

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1The First People's Hospital of Foshan

이 논문에서

요약

여기에서는 RNA 증폭 측방 유동 분석을 입증하는 프로토콜을 제시하고 Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis 및 Ureaplasmaurealyticum을 신속하게 검출하기 위한 효능을 평가합니다.

초록

임 질(NG), 클라미디아 트라코마티스(CT ) 및 우레아플라스마 우레알리티쿰(UU )은 성병(STD)과 관련된 흔한 병원체입니다. NG는 임질의 원인 물질로, 부고환염, 전립선염, 자궁경부염, 불임 등 다양한 비뇨생식기 질환을 유발할 수 있습니다. CT는 비임균성 요도염과 골반 염증성 질환을 일으키는 미생물입니다. 유유 대학은 비임균성 요도염, 자궁경부염, 전립선염 및 불임과 관련이 있습니다. NG, CT 및 UU 분석을 위한 현재의 분자 기술은 종종 복잡하고 시간이 많이 걸립니다. 이러한 병원체에 대한 신속한 분자 검사는 성병의 조기 진단을 용이하게 할 수 있습니다. RNA 증폭 측방 유동 분석법(RGT)은 핵산 추출이 필요하지 않은 방법입니다. 이 과정에서 샘플을 용해하여 핵산 단편을 방출한 다음 역전사 및 전사를 통해 증폭합니다. 증폭된 RNA 생성물은 특정 프로브에 의해 인식되고 캡처되어 RNA 검출 프로브-금 프로브 복합체를 형성하여 측면 흐름을 통해 니트로셀룰로오스 멤브레인에 고정되어 가시적인 띠를 생성할 수 있습니다. 전체 절차는 1시간 미만이 소요됩니다. 본 연구의 목적은 NG, CT 및 UU의 신속한 검출을 위한 망진 신경절 세포의 효능을 평가하는 것이었다. 총 1,416개의 샘플이 포함되었습니다. 중합효소연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR) 형광 프로빙 방법과 비교하여 RGT로 분석했을 때 NG, CT, UU의 일관성은 각각 99.03%(307/310), 99.38%(159/160), 99.02%(303/306)였다. RGT로 분석했을 때 NG, CT, UU의 일관성은 유전자 염기서열분석과 비교했을 때 각각 99.17%(238/240), 98.95%(188/190), 98.30%(173/176)였다. 병원체 분리 배양법과 비교했을 때 NG, CT, UU 분석의 검출률은 100.00%(9/9, 17/17, 8/8)였습니다. 높은 감도와 특이성, 사용 편의성 및 시간 요구 사항 감소로 인해 이 분석은 NG, CT 및 UU의 빠르고 정확한 검출에 이상적입니다.

서론

성매개 감염(STI)은 전 세계적으로 심각한 공중 보건 문제를 나타내며 심각한 생식기 및 생식 이환율과 사망률을 초래합니다1. 임 질(NG)은 임질의 원인 병원체로, 전 세계적으로 매년 약 8,700만 건의 새로운 사례가 보고되고 있습니다2. 이 병원체는 주로 비뇨생식관의 원주형 상피를 침범하여 염증을 유발합니다3. 또 다른 미생물인 클라미디아 트라코마티스(Chlamydia trachomatis , CT)는 비임균성 요도염 및 골반 감염의 원인이 되며, 매년 약 1억 3천만 건의 새로운 감염 사례가 발생합니다4. 가장 단순하고 가장 작은 자가 복제 세포인 우레아플라스마 우레알리티쿰(Ureaplasma urealyticum , UU)은 손상된 자궁경부 조직에 쉽게 침입하며 비임균성 요도염, 자궁경부염, 전립선염 및 불임과 관련이 있다5. 이러한 모든 감염은 여성과 남성 환자 모두에서 증상이 없는 경우가 많지만 즉시 치료하지 않으면 심각한 합병증을 유발할 수 있습니다. 산모 감염은 사산, 유산, 조산, 직접적인 태아 감염 등 심각한 임신 부작용을 초래할 수 있다6. 따라서 병원체 검출을 위한 빠르고 민감하며 특이적이고 사용자 친화적인 방법을 개발하는 것이 가장 중요합니다.

병원체의 신속하고 정확한 검출은 효과적인 질병 진단 및 관리에 매우 중요합니다. 병원체의 분리, 배양 및 식별이 필요한 전통적인 배양 방법은 시간이 많이 걸리고 민감도가 낮다는 등 상당한 단점이 있습니다. 유전자 염기서열분석은 높은 정확도를 자랑하지만 복잡한 환경과 장비가 필요하여 비용과 시간이 많이 소요됩니다. NG, CT 및 UU 분석을 위한 기존 분자 기술은 널리 받아들여져 왔습니다. 그러나 이러한 방법은 종종 복잡하고 시간이 많이 소요되며 정교한 기기, 숙련된 기술자 및 연장된 처리 시간이 필요합니다. 따라서 기존 접근 방식의 한계를 해결하기 위해 간단하고 신뢰할 수 있는 분자 진단 방법이 시급히 필요합니다. RNA 증폭 측방 유동 분석법(RGT)은 복잡한 절차를 필요로 하지 않고 빠르고 민감하며 특이적인 대안을 제공합니다 7,8. 이 방법에서는 핵산 추출 없이 핵산 단편을 방출하기 위해 샘플을 직접 용해하고, 이러한 단편은 역전사 및 전사를 통해 증폭됩니다. 그런 다음 증폭된 RNA 생성물은 특정 프로브에 의해 인식되고 포착되어 RNA 검출 프로브-금 프로브 복합체를 형성하며, 이는 측면 흐름을 통해 니트로셀룰로오스 멤브레인에 고정되어 가시적인 띠를 생성할 수 있습니다9. 전체 프로세스는 1시간 미만이 소요되므로 응급 실험실 테스트에 매우 적합합니다.

본 연구에서는 NG, CT 및 UU 검출을 위한 RGT의 사용을 평가하기 위해 1,416개의 샘플을 모집했습니다. 샘플은 RGT, PCR 형광 프로빙, 유전자 염기서열분석 및 병원체 분리 배양 방법을 사용하여 분석되었습니다. 그 결과, RGT 방법이 정확하고 기존 진단 방법과 일치함을 보여주었습니다. 결론적으로, 이 분석법은 높은 감도와 특이성, 사용 편의성 및 시간 요구 사항 감소로 인해 NG, CT 및 UU의 빠르고 정확한 검출에 이상적이며 성병의 예비 의료 진단에 유망한 응용 분야를 시사합니다.

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프로토콜

본 연구는 중국 광둥성 포산시 제1인민병원 기관검토위원회(Institutional Review Board of the First People's Hospital of Foshan, Guangdong Province, China Ethical Review Document No. LR (2025) 136). 총 1,416개의 생식기 면봉 검체(여성 환자 716명, 남성 환자 700명)를 이전 14일 이내에 항생제 치료를 받지 않은 임상적으로 성병이 의심되는 개인으로부터 전향적으로 수집되었습니다(보충 표 1). 각 참가자에 대해 쌍을 이루는 면봉을 동시에 얻어 병렬로 분석했습니다: 하나는 테스트 방법(RGT)으로, 다른 하나는 참조 방법(각각 PCR 형광 프로빙, 유전자 염기서열 분석 및 병원체 분리 배양)으로 분석했습니다. 방법 간 일치는 Cohen의 카파 계수(κ)를 사용하여 정량화되었으며, 해석은 Landis와 Koch의 기준에 따라 이루어졌습니다.

참고: CT 및 UU에 대한 분석 프로토콜은 NG에 대해 설명된 것과 동일한 절차 단계를 따르며 변형은 병원체 특이적 시약으로 제한됩니다. 자세한 시약 제형은 단계 2.1(보충 표 2, 보충 표 3 및 보충 표 4)에 제공됩니다.

1. 샘플 수집

  1. 적용 가능한 표본 유형: 생식기 면봉(여성 자궁 경부 면봉, 남성 요도 면봉)을 수집합니다.
  2. 표본 수집
    1. 생식기 면봉을 남성 요도 구멍에 2-3cm 또는 여성 경추 구멍에 약 1-2cm 동안 삽입합니다.
    2. 한 번 회전하고 10초 동안 유지합니다.
    3. 면봉을 제거하고 생리식염수 1mL가 들어 있는 채취 튜브에 삽입합니다.
    4. 면봉의 꼬리를 떼어 버린 다음 튜브 캡을 조입니다.
    5. 수집 시간을 기록하고 즉시 테스트를 수행합니다.
  3. 표본 보관 및 운송
    1. 시료를 실온(RT)에서 4시간 이내 또는 2-8°C에서 얼음찜질을 하고 24시간 이내에 운반합니다.
    2. 처리된 검체의 나머지 세포 펠릿을 -20°C에서 3개월 동안 보관하거나 -80°C에서 적시에 테스트를 수행할 수 없는 경우 최대 6개월 동안 보관하십시오.

2. 준비 사항

  1. 시약
    1. NG 핵산 분석 시약은 보충 표 2를 참조하십시오.
    2. CT 핵산 분석 시약은 보충 표 3을 참조하십시오.
    3. UU 핵산 분석 시약은 보충 표 4를 참조하십시오.
    4. 저장: 모든 시약은 -40 °C에서 -15 °C 범위의 온도에서 보관하고 검출 카드는 2 °C에서 30 °C 사이의 온도에서 보관하십시오.
      알림: 증폭 버퍼와 검출 용액은 일일 검출 요구 사항에 따라 사용하기 전에 RT와 평형을 이루어야 합니다. RT에 도달한 후에는 4°C에서 보관해야 하며 다음 감지에 사용할 수 있습니다. 얼고 해동을 반복하지 마십시오. 증폭 효소는 실험 과정을 제외하고 -20 °C에서 보관해야 합니다. 보관 온도가 상승하면 효소 활성이 감소하거나 손실될 수 있습니다.
  2. 실험 환경 요구 사항
    1. 물리적으로 분리된 4개의 구역에서 실험을 수행합니다.
      1. 시약 준비 영역: 양의 공기 압력(고효율 미립자 공기(HEPA) 필터링 공기 흐름 속도 ≥ 0.3m/s)으로 22 ± 1°C로 유지합니다. 사전 분주된 시약은 UV 멸균 캐비닛에 보관하십시오.
      2. 시료 전처리 영역: 70% 에탄올로 전처리된 Class II 생물 안전 캐비닛에서 모든 시료 취급을 수행합니다.
      3. 증폭 영역: 진동 방지 테이블에서 열 순환기를 작동합니다.
      4. 제품 분석 영역: UV 멸균 벤치를 사용하십시오(사용 전/후 30분 노출).
    2. 다음과 같이 교차 오염을 방지하기 위해 각 섹션의 인력과 공기 흐름을 조절합니다.
      1. 시약 준비에서 제품 분석 영역까지 단방향 공기 흐름을 유지합니다.
      2. 샘플 준비 영역에서 음압을 확인합니다(인접 구역에 대해 -5 Pa).
      3. 인원 이동을 제한합니다. 구역 전환 전에 장갑의 오염을 75% 에탄올로 제거하십시오.
      4. 인터록 시스템이 있는 에어록 도어를 설치합니다(개구부 간 최소 30초 지연).
    3. 구역별 소모품(예: 원심분리기 튜브, 피펫 팁 등)을 사용하고 한 번 사용한 후에는 소모품을 폐기하십시오.
    4. 청결 및 품질 관리 유지:
      1. 매일 10% 차아염소산나트륨과 75% 에탄올 또는 증류수로 벤치를 청소하십시오.
      2. 내독소 검사(Limulus amebocyte lysate assay, <0.25 EU/mL)를 통해 소모품 무균 상태를 검증합니다.
      3. 침전 플레이트(TSA(Tryptic soy agar) 한천, 4시간 노출 후 ≤5 집락 형성 단위(CFU)/플레이트)를 사용하여 매주 공기 질을 모니터링합니다.
  3. 인사 자격 요건
    1. 본 실험의 정확성과 신뢰성을 보장하기 위해 PCR 기술과 관련된 인증서 또는 자격을 보유하고 있습니다.

3. 세포를 용해하여 RNA를 추출합니다.

  1. 시편 가공
    1. 검체 채취 튜브를 10초 동안 2,600회/분으로 소용돌이쳐 면봉 헤드의 세포를 용액으로 제거합니다.
    2. 1000 μL로 설정된 보정된 피펫을 사용하여 1 mL의 용액을 1.5 mL 마이크로 원심분리 튜브로 옮깁니다.
    3. 12,000 × g 에서 25 °C에서 2분 동안 원심분리기.
    4. 펠릿을 방해하지 않고 상등액 950μL를 흡입합니다. 50 μL로 설정된 200 μL 보정 피펫을 사용하여 10회 위아래로 피펫팅하여 펠릿을 25 μL의 잔류 용액에 재현탁시킵니다.
  2. 시편 및 품질 관리 재료의 용해
    1. 사전 평형 세포 용해 완충액 및 25°C에서 15분 동안 음성 대조군.
    2. 모든 분말이 튜브 바닥에 침전되도록 25°C에서 10초 동안 1000× g 에서 품질 관리 재료를 원심분리합니다.
    3. 품질 관리 재료에 30μL의 용해 완충액을 추가하고 검체에 20μL를 추가합니다.
    4. 25 °C에서 10분 동안 배양합니다.
      참고: 세포 용해 완충액을 사용할 때는 철저히 혼합하는 것이 중요합니다. 15회(200μL 팁) 피펫팅으로 혼합하고 입자와 액체를 모두 침전물에 첨가합니다. UV 처리된 Class II 생물 안전 캐비닛에서 양성 대조군을 처리한 후 10% 차아염소산나트륨 오염 제거를 수행합니다.

4. RNA 등온 증폭

  1. 증폭 완충액의 사전 평형
    1. 증폭 버퍼를 해동하고 25°C ± 1°C에서 15분 동안 평형을 이룹니다.
  2. 제어 설정
    1. 각 실험 실행에 positive control과 negative control을 모두 포함합니다.
  3. 튜브 라벨링
    1. 표본의 수에 따라 증폭 튜브에 라벨을 부착하십시오.
  4. 반응 어셈블리
    1. 보정된 20 μL 피펫을 사용하여 각 튜브에 17 μL의 증폭 버퍼를 피펫팅합니다. 2 μL의 검체 또는 대조군 용해물을 완충액에 직접 첨가합니다.
      알림: 용해물이 튜브 벽과 접촉하지 않고 버퍼에 들어가는지 확인합니다(필요한 경우 500× g 에서 5초 동안 잠시 원심분리). 에어로졸 오염을 방지하기 위해 튜브를 즉시 캡으로 덮으십시오.
  5. 열 활성화
    1. 다음 프로그램에서 예열된 열 순환기에서 튜브를 배양합니다.
      1단계: 95°C에서 2분(변성)
      2 단계 : 2 분 동안 42 °C (프라이머 어닐링).
  6. 효소 증폭
    1. 각 튜브에 1μL의 증폭 효소를 추가하고 튜브를 5회 튕겨 혼합한 다음 간단한 원심분리(5초 동안 500× g )를 수행합니다. 튜브를 42°C에서 45분 동안 예열된 두 번째 열 순환기로 즉시 옮깁니다.
      알림: 온도 변동을 피하기 위해 별도의 인큐베이터를 사용하여 하나는 95°C로, 다른 하나는 42°C로 설정합니다. 다중 시료 실행의 경우 나머지 증폭 튜브를 42°C로 유지하면서 마지막 증폭 튜브에 증폭 효소를 추가합니다.

5. 측면 흐름 분석

  1. 검출 용액 pre-equilibration
    1. 검출 용액을 42°C의 인큐베이터로 10분 동안 옮깁니다.
  2. 균질
    1. 색상이 균일해질 때까지 15초 동안 2,600회/분으로 감지 용액을 소용돌이치십시오.
  3. 온도 유지
    1. 사용하기 전에 검출 용액을 25°C ± 2°C에서 ≤30분 동안 유지하십시오.
  4. 반응 개시
    1. 보정된 20-200 μL 피펫을 사용하여 각 증폭 튜브에 30 μL의 검출 용액을 추가합니다.
      알림: 피펫 팁은 기포 형성을 방지하기 위해 디스펜싱 중에 45° 각도로 튜브 벽과 접촉해야 합니다.
  5. 교 잡
    1. 위아래로 5회 피펫팅하여 용액을 혼합하고 53°C로 예열된 인큐베이터에서 10분 동안 배양합니다.
  6. 분석 장치 준비
    1. 호일 파우치에서 감지 카드를 제거합니다.
      참고: 샘플 응용 프로그램 영역을 만지지 마십시오.
  7. 샘플 응용 프로그램
    1. 20-200 μL 피펫을 사용하여 전체 혼합물을 검출 카드의 검체 포트로 옮깁니다.
    2. 즉시 검출 카드를 42°C 인큐베이터에 15분 동안 넣습니다.

6. 결과 분석

  1. 판독을 위한 통제된 환경
    1. 시각적 해석 중에 53°C로 예열된 인큐베이터에서 검출 카드를 유지하여 신호 강도를 안정화합니다.
  2. 시각적 통역 프로토콜
    1. 10-20 분 이내에 감지 카드의 밴드를 육안으로 검사하여 테스트 결과를 직접 읽으십시오.
      참고: 결과는 20분 후에 유효하지 않게 됩니다.
  3. RGT 결과 해석을 위한 해석 매트릭스는 보충 표 5를 참조하십시오.
    참고: 결과의 시각적 해석은 그림 1에 나와 있습니다.

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결과

RGT 및 PCR 형광 프로빙 방법의 일관성
NG에 대해 총 310개의 샘플을 분석했으며, 암컷 161명과 수컷 149명으로 구성되었습니다. 양의 일치율은 98.78%(95% CI: 93.39%-99.97%)였고, 음의 일치율은 99.12%(95% CI: 96.87%-99.89%)였다. 전체 일치율은 99.03%(95% CI: 97.20%-99.80%)였다. 카파 일관성 값은 0.975(95% CI: 0.947-1.003, Z =17.171, P < 0.05)였다(표 1). 일관성 없는 결과를 보인 샘플은 3개였습니다: 1개의 샘플은 PCR 형광 프로빙 방법을 사용하여 양성 반응을 보였으나 RGT에서는 음성이었으며, 유전자 염기서열 분석 검토에서 음성 결과를 확인했습니다. RGT 양성이지만 PCR 음성을 테스트한 두 샘플 중 유전자 염기서열 분석을 통해...

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토론

본 연구에서는 NG, CT, UU를 포함한 STI 병원체를 검출하기 위해 RGT를 사용하였다. RGT 분석은 엄격한 운영 프로토콜에 따라 수행되었을 때 PCR 형광 프로빙, 유전자 염기서열 분석 및 병원체 분리 배양 기술과 같은 확립된 진단 방법과 매우 일치하는 것으로 나타났습니다. RGT 분석법의 민감도와 특이도는 확립된 벤치마크10,11과의 비교 분석에 의해 입증된 바와 같이 이전에 보고된 방법론과 유사하거나 초과했습니다.

RGT 방법론의 신뢰성은 몇 가지 중요한 프로토콜 단계에 달려 있습니다. 검체 균질화는 면봉에서 세포가 완전히 분리될 수 있도록 10초 동안 2,600회/분으로 수행해야 합니다. 부드러운 교반 후 신속한 원심분리를 통한 증폭 완충액 및 검출 용액의 적절한 균질화는 균질성을 달성하고 증폭 효율 ...

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공개 사항

저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.

감사의 글

이 연구를 위해 제공된 시약과 기술 지침에 대해 Wuhan Zhongzhi Bio-technologies Inc.에 감사드립니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
10%(w/v)  차아염소산나트륨실험실에서 준비.실험실에서의 준비.장비 또는 표면의 병원균 오염 제거 및 비활성화를 위한 희석된 표백제 용액.
75% (v/v) 에탄올Ante Food Co., Ltd (Anhui, China)http://www.antegroup.com/product_detail_cn/id/81.html표면 소독에 사용되는 수성 에탄올 용액
조절 가능한 부피의 피펫 (0.5– 10 &뮤; L)DLAB Scientific Co., Ltd. (주)디랩사이언티픽7010101004마이크로리터 단위의 정확한 처리를 위한 단일 채널 마이크로피펫.
조절 가능한 부피 피펫 (100– 1000 &뮤; L)DLAB Scientific Co., Ltd. (주)디랩사이언티픽7010101014대용량 액체 취급을 위해 보정된 단일 채널 피펫.
조절 가능한 부피 피펫 (10– 100 &뮤; L)DLAB Scientific Co., Ltd. (주)디랩사이언티픽7010101008분자생물학 프로토콜에 일반적으로 사용되는 중간 부피에 최적화된 단일 채널 피펫.
조절 가능한 부피 피펫 (20– 200 &뮤; L)DLAB Scientific Co., Ltd. (주)디랩사이언티픽7010101009중간 용량 이송을 위한 단일 채널 피펫으로, 시약의 정확한 분취에 적합합니다.
생물 안전 캐비닛 (HF Safe-1200)HealForce Bio-Meditech Holdings Limited (홍콩, 중국)HF Safe-1200A Class II 생물 안전 캐비닛은 병원성 미생물 또는 세포 배양을 취급하는 동안 인력, 샘플 및 환경 보호를 보장합니다.
원심분리기 튜브Haozhi Medical Devices Co., Ltd.(중국 광저우)Guangzhou Yuexiu Medical Device Filing No. 20210414핵산 추출, 세포 펠릿화 및 기타 실험실 절차용.
Chamydia trachomatis (CT) 핵산 분석 (RNA 증폭 - 측면 흐름 분석)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC. (Wuhan, China)A.10.309-STD-RG-002생식기 및 요로 면봉 샘플에서 Chamydia trachomatis 핵산 RNA의 정성적 검출.
CO2 인큐베이터Thermo Fisher Scientific(Asheville, USA) LLCSN:세포 배양에 사용되며 온도 조절(37°C; C), 습도 및 CO2 농도(일반적으로 5%)를 고려하여 최적의 세포 성장을 보장합니다.
배양 플레이트 Corning Incorporated (Corning, USA)50 mm ´ 9 mm부착성 세포 배양 및 증식용.
Chamydia trachomatis(CT)에 대한 핵산 검출 키트(PCR-형광 프로빙)Fosun Diagnostics (Shanghai, China) Co., Ltd중국 의료기기 등록 증명서 번호 20143402234생식기 및 요로 면봉 샘플에서 Chamydia trachomatis의 핵산을 정성적으로 검출합니다.
Neisseria gonorrhoeae (NG)(PCR-Fluorescence Probing)에 대한 핵산 검출 키트FosunDiagnostics (Shanghai, China) Co., Ltd중국 의료기기 등록 증명서 번호 20173401080생식기 및 요로 면봉 샘플에서 Neisseria gonorrhoeae의 핵산의 정성적 검출용.
Ureaplasma Urealyticum (UU) (PCR-Fluorescence Probing)에 대한 핵산 검출 키트Fosun Diagnostics (Shanghai, China) Co., Ltd중국 의료 기기 등록 인증서 번호 20173400536생식기 및 요로 면봉 샘플에서 Ureaplasma Urealyticum의 핵산을 정성적으로 검출합니다.
DMEM 배지Thermo Fisher Scientific Inc.(Waltham, USA)11965092클라미디아 트라코마티스 배양용.
필터 피펫 팁(10 μ L)Guangzhou Surbiopure Biotechnology Co., Ltd (광저우, 중국)TF-10-BXL실험에서 정확한 피펫팅을 위해.
필터 피펫 팁(200 μ L)Guangzhou Surbiopure Biotechnology Co., Ltd (광저우, 중국)TF-200-BXL실험에서 정확한 피펫팅을 위해.
생식기 면봉Haozhi Medical Devices Co., Ltd.(중국 광저우)Hz112생식기 점막 표면에서 임상 표본을 수집하기 위한 멸균 면봉
Gibco Fetal Bovine Serum (FBS)Thermo Fisher Scientific Inc. (Waltham, USA)10270106클라미디아 트라코마티스 배양용.
유리 슬라이드Haozhi Medical Devices Co., Ltd. (광저우, 중국)Guangzhou Yuexiu Medical Device Filing No. 20210414그램 염색 프로토콜과 호환되는 세포 도말 또는 조직 절편 준비를 위한 퇴색 방지 처리가 된 표준 유리 슬라이드.
Goldenstar RT6 cDNA 합성 키트 Ver2Beijing Tsingke Biotech Co., Ltd(중국 베이징)TSK302S2단계 RT-PCR의 첫 번째 단계에서 cDNA의 첫 번째 가닥 합성을 위해. 여기에는 RNA에서 cDNA를 합성하는 데 필요한 모든 시약이 포함되어 있습니다.
Gram Stain KitBaso Diagnostics, Inc. (Zhuhai, China)BA4012Neisseria Gonorrhoeae를 구별하기 위한 크리스탈 바이올렛, 요오드, 탈색제 및 사프라닌을 함유한 염색 키트입니다.
IBM SPSS Statistics (V25.0)International Business Machines Corporation (New York, USA)버전 25.0데이터 분석용.
적외선 살균기Huaxixinrui (Qingdao) Analytical Instruments Co., Ltd.MJ-200W접종 루프 또는 겸자의 즉각적인 오염 제거를 위해 생물 안전 캐비닛의 교차 오염을 최소화합니다.
접종 루프BKMAM Biotechnology Co., Ltd.(중국 후난성)110306002미생물 샘플 이식, 줄무늬 또는 접종용.
Inverted Microscope (IX-51)Olympus Corporation (Tokyo, Japan)Asset Code of Labortory:  71807101배양 접시에서 부착 세포 또는 살아있는 세포 역학을 관찰하는 데 사용됩니다.
MALDI Biotyper 자동 미생물 질량 분석 시스템Bruker Daltonics GmbH & Co. KG (독일 브레멘)국가 의료기기 수입 등록 번호 20182222017단백질 프로파일링을 통한 신속한 미생물 식별을 위한 MALDI-TOF 질량 분석 기반 시스템으로, 임상 미생물학 실험실에서 박테리아 및 곰팡이의 종 식별을 가능하게 합니다.
McCoy 세포주는실험실에 보존되어 있습니다.실험실에 보존되어 있습니다.클라미디아 트라코마티스 배양.
마이크로플레이트 온도 조절 인큐베이터 Leopard70-4 (4플레이트 용량)Leaptec Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.Leopard70-4실온에서 70°C까지의 온도 범위에서 최대 4개의 표준 마이크로플레이트를 수용할 수 있는 마이크로플레이트 인큐베이터; 씨,  배양 단계에 사용됩니다.
현미경(OLYMPUS CX43)Olympus Corporation(일본 도쿄)https://lifescience.evidentscientific.com.cn/zh/microscopes/upright/cx43-33/임상 샘플 관찰(예: 세포 형태, 염색된 표본)용.
미니 금속 목욕 MiniG-R100Leaptec Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.MiniG-R100소량 샘플에서 반응 가열, 배양 또는 종료와 같은 실험 중 신속한 온도 조절을 위해.
Neisseria gonorrhoeae (NG) 핵산 분석 (RNA 증폭-측면 흐름 분석)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC.(Wuhan, China)A.10.309-STD-RG-001생식기 및 요로 면봉 샘플에서 Neisseria gonorrhoeae 핵산 RNA의 정성적 검출용.
핵산 추출 시약Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC.(Wuhan, China)A.10.105-SC-001핵산의 추출, 농축 및 정제용.
표본 수송 매체QIAGEN N.V. (Venlo, Netherlands)5128-1220이 매체는 임상 표본의 수집, 보존, 운송을 위해 특별히 공식화되었으며, Chlamydia trachomatis의 생존력을 보장합니다. 과  임질  후속 진단 테스트를 위해.
온도 조절 원심분리기Beckman Coulter, Inc. (Brea, USA)SN: MRZ21L037세포, 미생물 또는 핵산 펠릿화용.
TM 매체Shanghai Yihua Medical Science & Technology Co., Ltd (Shanghai, China)Shanghai Pu Medical Device Filing No. 20140081TM medium은 임질 진단을 돕기 위해 임상 샘플에서 임질의 분리, 배양 및 식별에 사용할 수 있습니다.
트립신-EDTA (0.25%)Thermo Fisher Scientific Inc.(Waltham, USA)25200072외배양 또는 실험 절차 중 부착 세포의 부드러운 해리.
Ureaplasma urealyticum (UU) 핵산 분석 (RNA 증폭-측면 흐름 분석)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC.(Wuhan, China)A.10.309-STD-RG-003생식기 및 요로 면봉 샘플에서 Ureaplasma Urealyticum 핵산 RNA의 정성적 검출용.
Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis Selective Isolation Culture, Identification and Drug Sensitivity KitHebei Zhongaisheng Biotechnology Co., Ltd.(Hebei, China)Hebei Medical Device Registration No. 20152400168Ureaplasma urealyticum 및 Mycoplasma hominis의 선택적 분리, 배양, 식별 및 약물 감수성 측정을 위해.
와류 믹서Xinkang Medical Instrument Co., Ltd(Jiangsu, China)XK80-A빠른 교반으로 액체 샘플을 균질화하는 실험실 장치.
300504406 .

참고문헌

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