방법 논문

Chromobacterium violaceum에서 Violacein의 정량화 및 생리 활성 화합물에 의한 억제

DOI:

10.3791/68507

⸱

2025년 8월 8일

 ,  ,  , 
1Food Research Center, Department of Food and Experimental Nutrition, Faculty of Pharmaceutical Sciences, University of São Paulo (USP)

이 논문에서

요약

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 프로토콜의 목적은 생리 활성 화합물에 의한 쿼럼 감지 억제를 평가하기 위한 프록시로서 Chromobacterium violaceum ATCC 12472에 의한 비올라세인 생산을 정량화하는 것입니다.

초록

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

박테리아는 쿼럼 감지(QS)라는 시스템을 통해 통신하며, 이를 통해 세포 밀도의 변화에 반응하여 행동을 조정할 수 있습니다. 이 과정에는 일반적으로 자가유도제(AI)라고 하는 작은 세포외 신호 분자의 생산, 분비 및 검출이 포함됩니다. QS는 생물막 형성 및 확산, 군집 운동성, 독성 인자 생성, 항생제 내성, 생물 발광 등 광범위한 유전자와 기능을 조절합니다. QS 억제는 기존 항생제에 비해 낮은 선택압을 발휘하기 때문에 항생제 내성 박테리아에 대한 유망한 항독성 전략이 되었습니다. 박테리아 Chromobacterium violaceum ATCC 12472에서 Aliivibrio fisheri의 LuxI/LuxR형 QS 단백질과 상동인 QS 단백질 CviI/CviR은 보라색 색소 비올라세인 생성을 담당하는 유전자를 포함하여 많은 유전자를 제어합니다. C. violaceum 은 QS 억제 연구, 특히 비올라세인 생산 억제에서 바이오센서 균주로 널리 사용되었습니다. 많은 화합물은 LuxI 또는 LuxR 상동체인 QS 단백질에 결합하여 QS 회로를 방해함으로써 QS를 억제할 가능성이 있습니다. 이 프로토콜은 C. violaceum ATCC 12472에 의해 생산된 비올라세인을 정량화하는 방법과 박테리아 성장에 영향을 미치지 않는 농도의 생리 활성 화합물에 의한 억제를 설명합니다. 여기에 설명된 분석은 테스트된 화합물에 의한 비올라세인 생산의 상당한 감소를 보여줍니다. 이 연구는 QS 억제 연구에서 유망한 후보를 선별하기 위해 이 프로토콜을 사용할 수 있는 가능성을 강조합니다.

서론

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

박테리아는 QS라는 시스템을 통해 통신할 수 있으며, 이를 통해 세포 밀도의 변화에 반응하여 행동을 조정할 수 있습니다. 이 과정에는 자가유도제라고도 하는 작은 세포외 신호 분자의 생산, 분비 및 검출이 포함되며, 이는 서로 다른 종 간 및 동일한 종 내에서 통신을 가능하게 합니다 1,2.

이 통신은 생물막 형성 및 분산, 운동성 및 접착, 세포 증식, 외효소 및 철단의 합성, 포자 형성, 내산성, 수평 유전자 전달, 항생제 내성, 생물 발광, 외소다당류 생산 등과 같은 유전자 및 기능을 조절할 수 있습니다 3,4,5. QS 조절 표현형의 관련성을 감안할 때 이 세포 통신을 방해할 수 있는 시스템을 개발하는 데 큰 관심이 있습니다. QS 신호의 억제는 쿼럼 소멸(QQ)이라고도 합니다6. QQ는 자가유도제 합성 억제제, 이러한 신호의 효소적 불활성화, 이들 분자에 대한 길항 효과가 있는 분자 등 여러 가지 방식으로 발생할 수 있습니다 4,7.

항생제 내성의 위협이 증가함에 따라 병원균을 직접 죽이지 않고 박테리아 의사소통을 방해하는 쿼럼 감지 억제제(QSI)를 포함한 대체 요법에 대한 연구가 진행되고 있습니다. 이러한 화합물은 항생제와 결합할 때 시너지 효과를 보일 수 있으며, 박테리아 감수성을 향상시키고 항생제 용량을 줄일 수 있으며, 이는 내성 발달을 늦추는 핵심 전략입니다. 예를 들어, 레스베라트롤과 카나마이신은 함께 Aeromonas hydrophila 성장을 지연시키는 반면 8-아세틸시스테인은 토브라마이신과 시너지 효과를 발휘하여 녹농 균 생물막을 파괴합니다5.

항생제 남용과 약물 개발 정체로 인해 QS 억제와 같은 항독성 접근법은 패러다임 전환을 제공합니다9. 생존력을 표적으로 삼는 대신 독성 인자를 표적으로 삼아 박테리아를 덜 해롭게 만들고 숙주 면역이나 항생제에 더 취약하게 만듭니다5. 이 전략은 기존 항생제에 비해 더 약한 선택 압력을 가하여 내성을 최소화하고 유익한 미생물군을 보존합니다10,11. 유망한 실험실 결과에도 불구하고 임상 시험을 통한 실제 검증은 아직 연구되지 않은 상태로 남아 있습니다12. QS 억제는 항생제에 대한 유망한 보완제이지만 실제 적용을 위해서는 복잡한 생물학적 환경에서 효능과 안전성에 대한 추가 증거가 필요합니다.

C. violaceum은 매끄럽고 반짝이는 표면을 가진 보라색 콜로니를 형성하는 베타 프로테오박테리움입니다. 그들은 통성 혐기성 간균이며 포자를 형성하지 않습니다13. C. violaceum의 QS 메커니즘은 단백질 CviI(LuxI와 상동) 및 CviR(LuxR과 상 동; 그림 1). 비올라세인은 곰팡이, 박테리아, 선충류, 바이러스 등 다양한 유기체에 대해 살생물 활성을 나타내며, 특히 인구 밀도가 극도로 높고 영양분이 거의 고갈되는 미생물 고정 성장 단계에서 더욱 그렇습니다. 결과적으로, 비올라세인 생산은 미생물 콜로니의 생존을 연장하기 위한 경쟁 전략으로 간주될 수 있습니다14.

식물은 2차 대사에서 유래한 화합물을 생산하며, 이는 불리한 환경에 적응하는 능력을 높이는 데 중요한 역할을 합니다. 알칼로이드, 페놀, 플라보노이드, 퀴논, 탄닌, 테르펜 및 렉틴과 같은 이러한 대사산물은 초식 동물 및 미생물에 대한 방어 메커니즘으로 널리 인식되고 있습니다15. QSI로서 식물 유래 화합물의 잠재력은 식물과 미생물 간의 역동적인 상호 작용으로 인해 특별한 주목을 받고 있습니다. 뿌리권의 식물-병원체 상호 작용에 대한 연구는 식물이 병원체에 대한 억제제 역할을 할 수 있는 생리 활성 화합물을 분비함으로써 박테리아 자가유도제에 반응할 수 있음을 입증했습니다16.

이 연구에서는 C. violaceum에 의한 비올라세인 생산을 정량화하기 위한 실용적인 방법을 설명하며, 생리 활성 화합물에 의한 비올라세움의 억제에 초점을 맞춥니다. 이 방법은 잠재적인 QSI 활성을 가진 화합물을 선택하기 위한 초기 스크리닝 도구 역할을 합니다. 이는 그람 음성 병원성 박테리아에 대한 향후 치료법 개발을 위한 신속하고 실용적인 접근 방식을 제공합니다. 이 표준화된 프로토콜은 이전 연구에서 수행되지 않은 자세한 설명을 제공하고 향후17,18,19에서 서로 다른 연구 간의 비교를 용이하게 하기 때문에 유용할 것입니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

프로토콜

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. 배양 준비(그림 2)

  1. Luria Bertani 국물(LB: 트립톤 10g/L, 효모 추출물 5g/L, 5g/L NaCl)에서 Luria Bertani 국물(LB: 트립톤 10g/L, 효모 추출물 5g/L, 5g/L NaCl)에서 5mL 배양액을 시험관에서 24시간 동안 성장시킵니다.
  2. 배양액을 약 1 x 108 CFU/mL에 해당하는 0.1 in LB 국물의 OD595로 조정합니다.

2. 화합물 준비

  1. 바닥이 평평한 96웰 플레이트에 아래 설명에 따라 연속 희석 계산에 따라 LB 국물과 생리 활성 화합물을 추가합니다. 용해도에 따라 생리 활성 화합물은 일반적으로 순수 DMSO 또는 DMSO: 물(1:1) 용액에서 희석됩니다.
    참고: QSI를 평가하는 방법론에서는 사용된 농도가 박테리아 성장에 영향을 미치지 않는 최소 억제 농도(sub-MIC) 미만인지 확인하는 것이 중요합니다. 따라서 화합물이 미생물 생존율보다는 세포 간 통신을 특이적으로 억제하는지 확인하기 위해 다양한 농도에서 성장 곡선 분석을 수행하는 것이 좋습니다. 이 프로토콜에 사용된 테스트된 생리 활성 화합물의 성장 곡선 분석에 대해서는 보충 그림 1 을 참조하십시오.
  2. 웰 내 생리 활성 화합물 농도를 계산하려면 20 mg/mL의 파르네솔 및 리나롤 원액과 웰 내 목표 농도 200 μg/mL, 스베라트롤 2.5 mg/mL 및 웰 내 25 μg/mL를 고려하여 다음과 같이 계산을 수행합니다.
    씨1V1 = 씨2V2
    20,000 μg/mL x V1 = 200 μg/mL x 200 μL
    V1 = 40,000/20,000 μL
    V1 = 2 μL
    여기서 C1 = 원액 농도(20mg/mL, 20,000μg/mL에 해당); V1 = 첨가할 원액의 부피; C2 = 원하는 최종 농도(200μg/mL); V2 = 웰의 최종 부피(200μL).

3. 연속 희석20 및 플레이트 준비(그림 3)

참고: 연속 희석은 테스트된 화합물의 농도 범위를 신속하게 평가하는 데 사용됩니다. 이 과정에서 화합물은 일정한 비율(이 경우 1:2)으로 연속적으로 희석됩니다. 각 희석은 이전 농도에 비해 화합물의 농도를 절반으로 감소시켜 농도 범위가 감소합니다20.

  1. 연속 희석의 첫 번째 열에 196μL의 LB 국물(이 예에서는 3, 5 및 7열)을 추가합니다. 연속 희석의 다음 웰에 100μL의 LB 국물(이 경우 열 4, 6 및 8)을 추가합니다.
  2. 그런 다음 이전 단계(2.2)에서 계산된 생리활성 화합물의 2배를 첨가하여 연속 희석을 수행합니다. 계산 결과 첫 번째 웰에서 최종 농도를 달성하기 위해 각 테스트 화합물 2μL가 생성되었으므로 화합물 4μL를 추가합니다(열 3, 5 및 7).
  3. 웰 총 부피의 절반(100μL)을 다음 컬럼(이 경우 컬럼 4, 6 및 8)으로 옮기는 식으로 마지막 원하는 농도가 될 때까지 연속 희석을 수행합니다. 옮기기 전에 내용물을 철저히 혼합하는 것을 잊지 마십시오.
    참고: 이 실험 설정에서는 단순화를 위해 두 가지 농도만 사용했으며 모든 화합물은 하나의 플레이트에만 맞습니다.
  4. 각 화합물의 농도당 적어도 세 번 실험을 수행합니다. 세 번의 생물학적 복제도 권장됩니다. 팁을 교체하고 마지막으로 원하는 농도가 될 때까지 절차를 반복합니다. 마지막 열(이 경우 4, 6 및 8)에서 100μL를 가져와 버립니다.
  5. 모든 웰에 80μL의 LB 국물을 추가하여 총 180μL(행 B에서 D까지)를 추가합니다. 그런 다음 1.2단계에서 표준화된 C. violaceum 배양액 20μL를 추가하여 웰당 최종 부피 200μL를 보장합니다(행 B에서 D까지). 웰 사이에 더 높은 농도가 이월되거나 오염되지 않도록 웰을 교체할 때마다 피펫 팁을 교체하십시오.
  6. 화합물이 어떤 종류의 용매에 용해되어 있는 경우 해당 용매로 대조군을 준비해야 합니다. 우리는 DMSO를 사용했습니다. 이 경우 처리되지 않은 대조군이 될 용매 대조군인 UC(생리 활성 화합물 없음, 열 9)를 준비합니다. 대조군 웰당 2 μL의 DMSO를 추가합니다. 이것은 테스트에서 1% DMSO의 최대 농도를 제공합니다.
    참고: 1%의 DMSO는 박테리아 성장에 영향을 미치지 않습니다21,22.
  7. 블랭크를 준비하거나 박테리아 없이 착색 화합물을 사용하는 경우 색상 조절을 준비합니다. 모든 웰에 80μL의 LB 국물을 추가한 후, 총 180μL(앞서 설명한 대로 B에서 D까지의 행)를 추가한 후, 20μL의 LB 국물을 해당 블랭크 웰에 추가하여 총 200μL(행 E에서 G까지)를 추가합니다. 이것은 이 프로토콜의 5단계에서 설명할 것처럼 OD 판독값에서 빼야 하는 크리스탈 바이올렛의 일부 배경 염색이 있기 때문에 수행됩니다.
  8. 열이 비어 있는 경우 200μL의 LB 국물 또는 멸균 증류수로 채웁니다(열 1, 2, 10, 11 및 12). 이 단계는 인큐베이터에서 배지가 과도하게 건조되는 것을 방지하는 데 중요합니다.

4. 비올라세인의 배양 및 추출

  1. 사용된 분광 광도계에 따라 증발을 방지하기 위해 뚜껑이나 밀봉 필름( 재료 표에 명시된 대로)으로 플레이트를 덮습니다.
  2. 플레이트를 30°C에서 130rpm으로 교반하면서 24시간 동안 배양합니다. 그런 다음 인큐베이터에서 플레이트를 제거하고 60°C의 건조 인큐베이터에 넣고 뚜껑을 제거하고 플레이트를 완전히 건조시킵니다(약 8시간).
  3. 플레이트가 건조된 후 인큐베이터에서 꺼내 각 웰에 200μL의 순수 DMSO를 첨가한 다음 덮습니다. 플레이트를 25°C의 인큐베이터에 넣고 130rpm에서 30분 동안 흔들어 비올라세인 색소를 녹입니다.
  4. 이 시간이 지나면 인큐베이터에서 플레이트를 제거하고 팁과 웰 벽 사이의 접촉을 피하면서 100μL를 다른 마이크로플레이트로 옮깁니다.

5. 비올라세인 생산의 정량화

  1. 적절한 플레이트 분광 광도계를 사용하여 595nm에서 흡광도를 측정하여 비올라세인 생산량을 정량화합니다(재료 표). 비올라세인 색소의 억제는 낮은 흡광도 판독값에 비례합니다.
  2. 100% 비올라세인 생산에 대한 기준으로 음성 대조군(처리되지 않은 대조군)을 사용하여 비올라세인 생산을 정량화합니다(표 1). 먼저, 각 처리 반복에서 블랭크의 흡광도 값을 빼서 비올라세인 안료에만 해당하는 흡광도를 얻습니다(국물 또는 복합 색상의 간섭 제외). 그런 다음 다음 방정식을 사용하여 각 처리에 대한 비올라세인 생산 비율을 계산합니다.
    %비올라세인 생산량 = (생리 활성 화합물의 OD / 처리되지 않은 대조군의 OD) x 100
  3. 3회 반복실험으로 통계 분석을 계산합니다. 결과는 ANOVA에 제출한 다음 GraphPad Prism 8.0 소프트웨어를 사용하여 Tukey의 테스트를 수행할 수 있습니다. p <0.05의 값은 통계적으로 유의한 것으로 간주되었습니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

여기에 표시된 결과를 위해 연구 그룹8에서 이전에 연구한 세 가지 생리 활성 화합물인 레스베라트롤, 파르네솔 및 리나룰이 사용되었습니다. 각 화합물은 vioABCDE 오페론23에 대해 QS 시스템에 의해 조절되는 표현형인 C. violaceum ATCC 12472에서 비올라세인 생산을 억제하는 능력에 대해 테스트되었습니다.

결과는 C. violaceum ATCC 12472에서 비올라세인 생산 및 생리 활성 화합물에 의한 억제를 정량화하는 프로토콜의 효능을 검증합니다. 박테리아 성장에 영향을 주지 않고 파르네솔, 리나룰 및 레스베라트롤에 의한 비올라세인 수치의 유의한 감소는 QSI를 항균 효과와 구별하는 방법의 능력을 확인시켜 줍니다24. 이전 방법(25,24,26...

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

토론

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

C. violaceum에서 비올라세인을 추출하고 특성화하는 최초의 방법은 1990년대에 등장했으며, 안료 합성에 적합한 탄소원을 식별하는 데 중점을 두었습니다. 이 과정에서 비올라세인은 세포 및 배양 배지와 함께 건조되고 에탄올에 재현탁된 다음 상청액 추출에 의해 분리되었습니다. 이제 에탄올에 용해된 비올라세인은 이후 다시 건조되어 순수하고 건조한 형태의 안료를 산출했습니다27. 1998년에 프로토콜이 수정되었습니다28. 에탄올은 여전히 비올라세인을 용해하는 데 사용되었지만 업데이트된 방법은 여과, Soxhlet 추출 및 결정화 단계를 도입했습니다. 수년에 걸쳐 비올라세인 추출 / 정량 화는 세포를 용해하고 부탄올25로 비올라세인을 추출, 초음파 처리 및 DMSO29에서 희석하고 플레...

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

저자는 경쟁하는 금전적 이해관계가 없음을 선언합니다.

감사의 글

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

보조금 #403661/2023-4 및 #444794/2024-7 및 장학금 #306685/2022-1을 통해 국립과학개발위원회(CNPQ)와 보조금 #2024/05158-6 및 2023/17090-4, 식품연구센터(FoRC) #2013/07914-8에 대한 재정 지원에 감사드립니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
DMSO 신디사이저
파르네솔시그마-알드리치에프20395%
리나룰시그마-알드리치L260297%
루리아-베르타니 미디엄디프코244620
광학 접착 필름써모 피셔4311971마이크로앰프
레스베라트롤시그마-알드리치R5010≥ 99%(HPLC)
Synergy HTX 다중 모드 리더바이오텍
조직 배양 플레이트 96 웰카스비K12-096

참고문헌

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Mukherjee, S., Bassler, B. L. Bacterial quorum sensing in complex and dynamically changing environments. Nat Rev Microbiol. 17 (6), 371(2019).
  2. Lima, E. M. F., Winans, S. C., Pinto, U. M. Quorum sensing interference by phenolic compounds - A matter of bacterial misunderstanding. Heliyon. 9 (7), (2023).
  3. Papenfort, K., Bassler, B. L. Quorum sensing signal-response systems in Gram-negative bacteria. Nat Rev Microbiol. 14 (9), 576-588 (2016).
  4. Grandclément, C., Tannières, M., Moréra, S., Dessaux, Y., Faure, D. Quorum quenching: role in nature and applied developments. FEMS Microbiol Rev. 40 (1), 86-116 (2016).
  5. Lima, E. M. F., de Almeida, F. A., Sircili, M. P., Bueris, V., Pinto, U. M. N-acetylcysteine (NAC) attenuates quorum sensing regulated phenotypes in Pseudomonas aeruginosa PAO1. Heliyon. 9 (3), (2023).
  6. Allen, R. C., Popat, R., Diggle, S. P., Brown, S. P. Targeting virulence: can we make evolution-proof drugs. Nat Rev Microbiol. 12 (4), 300-308 (2014).
  7. Kalia, V. C., Patel, S. K. S., Kang, Y. C., Lee, J. K. Quorum sensing inhibitors as antipathogens: biotechnological applications. Biotechnol Adv. 37 (1), 68-90 (2019).
  8. Santos, C. A., Lima, E. M. F., Franco, B. D. G. deM., Pinto, U. M. Exploring phenolic compounds as quorum sensing inhibitors in foodborne bacteria. Front Microbiol. 12, 735931(2021).
  9. Ahmed, S. A. K. S., et al. Natural quorum sensing inhibitors effectively downregulate gene expression of Pseudomonas aeruginosa virulence factors. Appl Microbiol Biotechnol. 103 (8), 3521-3535 (2019).
  10. Yang, Q., Defoirdt, T. Weak selection for resistance to quorum sensing inhibition during multiple host infection cycles. ISME J. 18 (1), 251(2024).
  11. Defoirdt, T. Specific antivirulence activity, A new concept for reliable screening of virulence inhibitors. Trends Biotechnol. 34 (7), (2016).
  12. Defoirdt, T. Quorum-sensing systems as targets for antivirulence therapy. Trends Microbiol. 26 (4), 313-328 (2018).
  13. Mahendrarajan, V., Easwaran, N. Quorum quenching effects of linoleic and stearic acids on outer membrane vesicle-mediated virulence in Chromobacterium violaceum. Biofouling. , 1-11 (2024).
  14. Durán, N., et al. Advances in Chromobacterium violaceum and properties of violacein-Its main secondary metabolite: A review. Biotechnol Adv. 34 (5), 1030-1045 (2016).
  15. Nazir, N., et al. Characterization of phenolic compounds in two novel lines of Pisum sativum L. along with their in vitro antioxidant potential. Env Sci Pollut Res Int. 27 (7), 7639(2020).
  16. Majdura, J., Jankiewicz, U., Gałązka, A., Orzechowski, S. The role of quorum sensing molecules in bacterial-plant interactions. Metabolites. 13 (1), (2023).
  17. Çevikbaş, H., Ulusoy, S., Kaya Kinaytürk,, N, Exploring rose absolute and phenylethyl alcohol as novel quorum sensing inhibitors in Pseudomonas aeruginosa and Chromobacterium violaceum. Sci Rep. 14 (1), 15666(2024).
  18. Choi, S. Y., Lim, S., Yoon, K. H., Lee, J. I., Mitchell, R. J. Biotechnological activities and applications of bacterial pigments violacein and prodigiosin. J Biol Eng. 15 (1), (2021).
  19. Moradi, F., Hadi, N., Bazargani, A. Evaluation of quorum-sensing inhibitory effects of extracts of three traditional medicine plants with known antibacterial properties. New Microb New Infect. 38 (100769), 100769(2020).
  20. Wiegand, I., Hilpert, K., Hancock, R. E. Agar and broth dilution methods to determine the minimal inhibitory concentration (MIC) of antimicrobial substances. Nat Protoc. 3 (2), 163-175 (2008).
  21. Scardino, A., et al. Cinnamaldehyde effectively disrupts Desulfovibrio vulgaris biofilms: potential implication to mitigate microbiologically influenced corrosion. Appl Env Microbiol. 91 (5), (2025).
  22. Summer, K., Browne, J., Hollanders, M., Benkendorff, K. Out of control: The need for standardised solvent approaches and data reporting in antibiofilm assays incorporating dimethyl-sulfoxide (DMSO). Biofilm. 4, 100081(2022).
  23. Ravichandran, V., et al. Virtual screening and biomolecular interactions of CviR-based quorum sensing inhibitors against Chromobacterium violaceum. Front Cell Infect Microbiol. 8, (2018).
  24. Lima, E. M. F., de Almeida, F. A., Pinto, U. M. Exploring the antivirulence potential of phenolic compounds to inhibit quorum sensing in Pseudomonas aeruginosa. World J Microbiol Biotechnol. 41 (2), (2025).
  25. Blosser, R. S., Gray, K. M. Extraction of violacein from Chromobacterium violaceum provides a new quantitative bioassay for N-acyl homoserine lactone autoinducers. J Microbiol Methods. 40 (1), 47-55 (2000).
  26. Zhu, H., He, C. C., Chu, Q. H. Inhibition of quorum sensing in Chromobacterium violaceum by pigments extracted from Auricularia auricular. Lett Appl Microbiol. 52 (3), 269-274 (2011).
  27. Durán, N., Antonio, R. V., Haun, M., Pilli, R. A. Biosynthesis of a trypanocide by Chromobacterium violaceum. World J Microbiol Biotechnol. 10 (6), 686(1994).
  28. Rettori, D., Production Durán, N. extraction and purification of violacein: an antibiotic pigment produced by Chromobacterium violaceum. World J Microbiol Biotechnol. 14 (5), 685(1998).
  29. Cheng, K. -C., Hsiao, H. -C., Hou, Y. -C., Hsieh, C. -W., Hsu, H. -Y., Chen, H. -Y., Lin, S. -P. Improvement in violacein production by utilizing formic acid to induce quorum sensing in Chromobacterium violaceum. Antiox. 11 (5), 849(2022).
  30. Defoirdt, T., Brackman, G., Coenye, T. Quorum sensing inhibitors: how strong is the evidence. Trends Microbiol. 21 (12), 619-624 (2013).
  31. Alyousef, A. A., et al. Myrtus communis and its bioactive phytoconstituent, linalool, interferes with Quorum sensing regulated virulence functions and biofilm of uropathogenic bacteria: In vitro and in silico insights. J King Saud Univ Sci. 33 (7), 101588(2021).
  32. Kanekar, S., Devasya, R. P. Growth-phase specific regulation of cviI/R based quorum sensing associated virulence factors in Chromobacterium violaceum by linalool, a monoterpenoid. World J Microbiol Biotechnol. 38 (2), (2022).
  33. Dias, J. P., Domingues, F. C., Ferreira, S. Linalool reduces virulence and tolerance to adverse conditions of listeria monocytogenes. Antibiotics. 13 (6), 474(2024).
  34. Rodrigues, C. F., Černáková, L. Farnesol and tyrosol: Secondary metabolites with a crucial quorum-sensing role in Candida biofilm development. Genes. 11 (4), (2020).
  35. Hacioglu, M., Yilmaz, F. N., Yetke, H. I., Haciosmanoglu-Aldogan, E. Synergistic effects of quorum-sensing molecules and antimicrobials against Candida albicans and Pseudomonas aeruginosa biofilms: in vitro and in vivo studies. J Antimicrob Chemother. 79 (11), 2828(2024).
  36. Bhattacharyya, S., Agrawal, A., Knabe, C. Sol-gel silica controlled release thin films for the inhibition of methicillin resistant Staphylococcus aureus. Biomater. 35, 509-517 (2014).
  37. Qu, Y., Zou, Y., Wang, G., Zhang, Y., Yu, Q. Disruption of communication: Recent advances in antibiofilm materials with anti-quorum sensing properties. ACS Appl Mater Interfaces. 16 (11), 13353-13383 (2024).
  38. Li, B., et al. Effects of Rhapontigenin as a Novel Quorum-Sensing Inhibitor on Exoenzymes and Biofilm Formation of Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum and Its Application in Vegetables. Molecules. 27 (24), (2022).
  39. Mattio, L. M., Catinella, G., Pinto, A., Dallavalle, S. Natural and nature-inspired stilbenoids as antiviral agents. Eur J Med Chem. 202 (112541), 112541(2020).
  40. Duarte, A., Alves, A. C., Ferreira, S., Silva, F., Domingues, F. C. Resveratrol inclusion complexes: Antibacterial and anti-biofilm activity against Campylobacter spp. and Arcobacter butzleri. Food Res Int. 77, 244-250 (2015).
  41. Martinelli, D., Grossmann, G., Séquin, U., Brandl, H., Bachofen, R. Effects of natural and chemically synthesized furanones on quorum sensing in Chromobacterium violaceum. BMC Microbiol. 4 (1), (2004).
  42. Tan, L. Y., Yin, W. F., Piper Chan, K. G. nigrum, Piper betle and Gnetum gnemon-natural food sources with anti-quorum sensing properties. Sensors. 13 (3), 3975-3985 (2013).
  43. Tan, L. Y., Yin, W. F., Chan, K. G. Silencing quorum sensing through extracts of Melicope lunu-ankenda. Sensors. 12 (4), 4339-4351 (2012).
  44. Oliveira, B. D., et al. Antioxidant, antimicrobial and anti-quorum sensing activities of Rubus rosaefolius phenolic extract. Ind Crops Prod. 84, 59-66 (2016).

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재인쇄 및 허가

이 JoVE 논문의 텍스트 또는 그림 재사용 허가 요청

허가 요청

태그

관련 논문