In vivo 컨포칼 현미경은 고해상도의 유망한 이미징 기술입니다. 임상의가 생체 내에서 눈꺼풀 가장자리에서 Demodex를 감지하기 위해 다음 절차를 제시합니다.
방법 논문
In vivo 컨포칼 현미경은 고해상도의 유망한 이미징 기술입니다. 임상의가 생체 내에서 눈꺼풀 가장자리에서 Demodex를 감지하기 위해 다음 절차를 제시합니다.
Demodex 진드기 감염은 눈꺼풀 가장자리에 염증을 유발할 수 있으며, Demodex 안검염은 임상 사례에서 일련의 안구 질환을 유발할 수 있습니다. 많은 의사들이 속눈썹 제모술과 체외 광학 현미경으로 속눈썹 관찰을 통해 Demodex 진드기의 안구 감염을 진단합니다. 그러나 속눈썹 제거 후 잔류 진드기의 존재와 절차와 관련된 통증은 표준 임상 치료의 한계입니다.
생체 내 컨포칼 현미경(IVCM)은 임상의가 제모 없이 눈꺼풀 가장자리에서 Demodex 진드기를 자세히 관찰할 수 있는 비침습적 이미징 기술입니다. 이 기술을 사용하면 <30분 이내에 완료할 수 있는 간편한 분석이 가능합니다. 이 검사에 대한 관심이 높아지고 있음에도 불구하고 광범위한 경험이 없는 많은 안과 의사는 접근하기 어려울 수 있습니다. 이 논문은 임상 작업에서 이 방법의 채택 증가를 촉진하기 위해 IVCM을 사용하여 눈꺼풀 가장자리에서 Demodex 진드기를 시각화하기 위한 표준 운영 절차를 제시합니다.
안검염은 임상 실습에서 가장 흔하게 접하는 안과 진단 중 하나입니다. 증거는 Demodex 진드기의 존재와 안검염 사이에 상당한 연관성이 있음을 시사합니다1. 진드기의 감염은 Demodex2로 인한 직접적인 손상과 그 분비물에 의해 유발되는 면역 반응을 모두 포함하며, 이는 박테리아의 매개체로 작용하여 잠재적으로 안검염3의 발병에 기여할 수 있습니다. 모낭낭염(Demodex blepharitis, DB)은 각막과 안구 표면의 손상1을 포함하여 환자의 삶의 질에 부정적인 영향을 미치는 다양한 불만족스러운 사건을 유발한다 4,5.
Demodex는 모낭과 피지선, 그리고 그 주변 부위에 서식하는 기생 진드기입니다6. 속눈썹 여포 내부 또는 주변에서 Demodex를 감지하면 DB7 진단에 도움이 될 수 있습니다. DB의 임상 진단에는 속눈썹 제모와 광학 현미경 검사로 Demodex를 관찰하는 것이 포함됩니다. 그러나, 속눈썹 제거 후 난포 깊숙한 곳에 서식하는 많은 진드기가 구멍에 남아 있을 수 있으며, 8,9,10 이는 잠재적으로 진드기 수를 과소평가하게 만들 수 있는 것으로 인식되고 있다. 안과의 비침습적 이미징 도구인 IVCM(In vivo Confocal Microscopy)은 in vivo 11에서 속눈썹 여포 내부 또는 주변의 Demodex를 시각화하기 위한 대체 접근 방식을 제공합니다. 이 기술은 조직학적인 해상도11로 안구 표면과 눈꺼풀의 미세 구조에 대한 통찰력을 제공합니다. 진드기는 특징적인 형태와 운동성을 기반으로 육안으로 식별할 수 있습니다. 그러나 IVCM은 이 이미징 양식에 대한 광범위한 경험이 부족한 안과 의사에게 기술적 문제를 제시할 수 있습니다12.
건강한 눈꺼풀과 DB의 감별 진단 및 후속 조치를 포함한 일상적인 임상 적용에서 IVCM의 채택을 촉진하기 위해 눈꺼풀 가장자리에서 Demodex 진드기를 관찰하기 위한 표준 운영 절차(SOP)를 제안합니다. 이 프로토콜은 임상의에게 in vivo 진드기 검출을 위한 체계적인 접근 방식을 제공합니다.
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이 프로토콜은 IVCM을 사용하여 눈꺼풀 가장자리에서 Demodex를 관찰하는 데 사용되는 SOP에 중점을 둡니다(그림 1). 본 연구는 원저우 의과대학 안과병원 기관검토위원회(IRB)의 승인을 받았으며(IRB 승인 번호 H2023-022-K-20), 후향적 성격으로 인해 본 후향적 분석에 대한 개인 동의 요건은 면제되었다. 여기에 설명된 절차는 이전에 보고된 설명을 참조합니다 11,13,14,15,16.

그림 1: 단층 촬영 장치. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
1. 장치 및 프로그램 준비

그림 2: PMMA 캡 및 젤 도포의 올바른 피팅. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
2. 환자 준비
참고: 각막 무결성이 의심되는 경우 이 검사를 수행하지 마십시오.
3. 검사 수행

그림 3: 환자 자세. (A,B) 환자가 위치에 있습니다. (C) 눈꺼풀에 닿도록 캡을 조정하고 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
4. 진찰 후

그림 4: 속눈썹 여포 내부의 Demodex . (이미지: 400μm x 400μm). (가)3개의 Demodex 진드기가 난포 내에서 관찰되고(노란색 화살표), 단일 속눈썹이 표시됩니다(흰색 화살표). (B) 5개의 Demodex 진드기가 난포 내에서 관찰되며(노란색 화살표), 단일 속눈썹이 표시됩니다(흰색 화살표). 진드기는 서로 다른 깊이를 통해 이동할 수 있으므로 단일 초점면에서의 이미징은 개별 진드기의 단편화된 부분을 캡처할 수 있으며, 이로 인해 불완전한 형태학적 표현이 발생할 수 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
5. 매일 퇴근 후 장치를 끄십시오.
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위에서 설명한 SOP에 따라 2024년에 Demodex 감염이 의심되는 환자를 검사했습니다. 또한 이 SOP가 적용되지 않은 2023년의 데이터를 비교했습니다. 그림 5에서 볼 수 있듯이 2024년 Demodex 감지를 위해 IVCM을 받은 환자의 수는 전년도보다 훨씬 많습니다. 이 SOP를 통해 4세에서 92세까지 다양한 연령의 환자를 검사할 수 있습니다.

그림 5: 2023년과 2024년에 Demodex 관찰을 위해 생체 내 컨포칼 현미경을 받는 피험자의 수와 연령 그...
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외부 기생충인 Demodex는 인간에게 가장 흔한 기생충 중 하나입니다. 이 진드기는 속눈썹 여포, 마이봄샘(MG), 피지선에 서식하며 투명하고 길쭉한 모양이며 길이가 0.15-0.4mm입니다17. 이 장치를 사용하여 수행된 IVCM은 1μm/픽셀의 측면 해상도와 800배 배율의 400μm x 400μm 실시간 이미지를 제공합니다. IVCM을 통해 속눈썹 여포의 Demodex에 대한 자세한 이미지를 얻을 수 있습니다. 눈꺼풀 가장자리 치료에 대한 환자의 반응 변화도 모니터링할 수 있다11,13. 비침습적 기술인 IVCM은 눈꺼풀 가장자리에 있는 진드기의 빠른 시각화를 위한 안과의 이미징 도구로 제시되었습니다18. 속눈썹 제모 및 광학 현미경 검사로 ...
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저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.
이 연구는 중국 전통 의학 과학 기술부 국가관리국-저장성 중국 전통 의학 공동 건설 과학 기술 계획(GZY-ZJ-KJ-23086)의 보조금으로 지원되었습니다. 생체 내 컨포칼 현미경 검사는 Rostock 각막 모듈을 추가하여 Heidelberg Retina Tomograph III를 사용하여 수행되었습니다. 저자는 Heidelberg Engineering GmbH, 모든 참가자 및 이 표준 운영 절차에 대해 작업하는 사람들에게 감사를 표하고 싶습니다.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 카보머 기반 안과용 젤, Vidisic | Bausch and Lomb, 베를린, 독일 | 8187195 | |
| Heidelberg Eye Explorer 소프트웨어 | Heidelberg Engineering GmbH, 하이델베르크, 독일 | 버전 1.3.3.0 | |
| 하이델베르그 망막 단층 촬영 III | Heidelberg Engineering GmbH, 하이델베르크, 독일 | HRT3-08398 | |
| 프로파라카인 염산염 | Alcon Laboratories, 미국 텍사스주 포트워스 | 8387271 | |
| 토모캡 | Heidelberg Engineering GmbH, 하이델베르크, 독일 | 18829 | PMMA 캡 |
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