방법 논문

Ex Vivo 및 In Vivo 이미징을 위한 흡수 분자를 사용한 일시적인 광학 투명화

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DOI:

10.3791/68629

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2025년 7월 11일

 ,  ,  , 
1Department of Physics, The University of Texas at Dallas, 2Department of Electrical and Computer Engineering, The University of Texas at Dallas

이 논문에서

요약

흡수 분자 용액과 같은 광학 투명화 기술은 광 산란을 일시적으로 줄여 생물학적 이미징을 향상시키고 깊이 박힌 장기에 대한 생체 적합성, 가역적 생체 내 이미징 전략을 제공합니다. 이 프로토콜은 살아있는 동물의 실시간 역학을 위한 고품질의 동적 이미징을 달성하기 위해 상세한 실험 절차와 고급 이미지 처리를 제공합니다.

초록

다이나믹 이미징은 생물학 및 의학의 기본 도구이지만, 굴절률 불일치로 인한 살아있는 조직의 광 산란으로 인해 제한되어 생물학적 조직의 침투 깊이와 해상도를 감소시킵니다. 이전 연구에서는 흡수율이 높은 분자를 활용하여 살아있는 동물의 광학적 투명도를 달성하는 새로운 접근 방식을 도입했습니다. 식품에 일반적으로 사용되는 FDA 승인 염료인 Tartrazine과 같은 이러한 흡수 분자가 물에 용해되면 Kramers-Kronig 관계를 통해 수성 매질의 굴절률을 수정합니다. 이 조절을 통해 뚜렷한 굴절률을 가진 조직의 개별 구성 요소 간의 굴절률 불일치를 줄여 산란을 완화할 수 있습니다. 이 기사는 생체 외 및 생체 내 샘플 모두에 적용되는 Tartrazine 기반 수용액을 사용하는 조직 투명화 기술의 자세한 방법론을 보고합니다. 이 접근 방식은 가시 스펙트럼에서 살아있는 쥐 몸체를 가역적으로 투명하게 만들어 내부 프로세스와 구조를 보다 선명하고 심층적인 이미징으로 만듭니다. 그런 다음 고급 이미지 처리 알고리즘을 사용하여 관심 기관의 대비와 세분화를 개선했습니다. 또한, Tartrazine 기반 용액으로 처리된 닭 가슴살과 같은 생체 외 샘플에서 높은 투명도가 표시됩니다. 이 방법은 다양한 양식에서 이미징 기능을 향상시킬 수 있는 다재다능하고 접근 가능한 접근 방식을 제공하고 복잡한 생물학적 시스템에 대한 이해를 높일 수 있는 길을 열어줍니다.

서론

생물학적 이미징은 관심 구조1을 모호하게 하는 빛의 산란으로 인해 오랫동안 어려움을 겪어 왔습니다. 광학 클리어링 기술은 빛의 산란을 줄이고 시각적 선명도를 향상시켜 이전에 숨겨진 구조를 시각화할 수 있도록 하는 것을 목표로 합니다2. 이러한 기술의 개발은 샘플의 물리적 해부 없이 생체 외 생물학적 조직, 심지어 전체 동물의 광학 이미징을 개선하기 위해 고안된 다양한 방법으로 이어졌습니다3. 그러나 생체 내 응용 프로그램을 위한 유사한 기술의 개발은 쉽지 않았습니다. CLARITY Clear Lipid-exchanged Acrylamide-hybridized Rigid Imaging / Immunostaining / in situ-hybridization-compatible Tissueh Ydrogel)과 같은 기술은 고해상도 이미징을 제공하지만 가역성이 부족하여 살아있는 동물 연구에 적합하지 않습니다4. Constantini 등은 in vivo 이미징의 선명도에 비해 in vivo 이미징의 진행 속도가 느린 것으로 나타났는데, 이는 조직 투명도에 필요한 독성 수준의 제제를 피하면서 조직 생존력을 유지하는 것이 복잡하기 때문입니다5. Genina는 광학 조직 투명화의 미래가 비침습적 및 가역적 방법6에 의존한다고 강조합니다. 최근 연구에서는 in vivo 광학 투명화를 위한 수용성 흡수 염료의 효과를 입증했습니다. 예를 들어, Miller 등은 Tartrazine을 국소적으로 적용하면 산란을 줄이고 간질 조직 구성 요소의 굴절률을 증가시켜 살아있는 쥐 피부의 OCT 및 광음향 현미경(PAM) 모두에서 이미징 깊이를 크게 향상시킨다는 것을 보여주었습니다7. Jia 등은 15% w/w Tartrazine 용액을 사용하여 쥐 귀 및 복부 조직의 생체 내 PAM 이미징을 향상시켜 그렇지 않으면 가려졌던 세포 내 해상도를 가진 미세한 미세혈관 구조를 드러냈습니다8. Zuo 등은 0.6M Tartrazine을 사용하여 살아있는 쥐의 온전한 두피와 두개골을 통한 뇌 이미징을 추가로 입증하여 처리되지 않은 조직에 비해 4배 더 높은 신호 강도와 3.5배 향상된 해상도를 달성했습니다9. 또 다른 응용 사례에서 Narawane 등은 Tartrazine을 적용하여 돼지 눈에서 깊은 경공막 OCT 이미징을 가능하게 하여 이전에는 강한 공막 산란으로 인해 접근할 수 없었던 상부 공간을 명확하게 시각화할 수 있었습니다10. CLARITY 및 iDISCO(용매 세척 장기의 면역 라벨링 가능 3차원 이미징)와 같은 생체 외 조직 투명화 방법은 지질 제거 또는 용매 기반 투명화를 통해 높은 광학 투명도와 세포 내 해상도를 달성하지만 살아있는 동물을 사용한 생체 내 이미징에는 적합하지 않은 경우가 많습니다 4,11,12. 이러한 제한은 질병 발병 및 치료와 같은 살아있는 동물 내부의 동적 과정에 대한 생체 의학 이미징에 중요한 동적 이미징에 영향을 미칩니다.

식품 등급 염료인 타르트라진(Tartrazine)과 같이 높은 수성 용해도와 뚜렷한 흡수 띠 모양을 가진 흡수 분자는 살아있는 동물에서 광학적 투명도를 달성하는 데 유망한 이점을 제공합니다13. Tartrazine을 특이적으로 도입함으로써 이 조직은 염료의 고유한 스펙트럼 특성으로 인해 자외선 및 청색 파장을 선택적으로 흡수하여 더 긴 파장에서 산란을 줄이는 수정된 굴절률 프로파일을 생성합니다. 이 반직관적인 광학 조직 투명화 기술은 생체 내 이미징에 최적화되어 있으며, Kramers-Kronig 관계는 Tartrazine14,15와 같은 흡수율이 높은 분자를 사용할 때 관찰된 투명도에 대한 과학적 기반을 제공합니다. 생체 내 이미징을 위해 타르트라진은 가열된 아가로스 입자 및 물과 결합하여 피부에 더 잘 부착되는 응집력 있는 솔루션을 만듭니다. Tartrazine의 수용성 특성은 또한 살아있는 동물에서 염료 기반 용액을 쉽게 제거할 수 있도록 하여 염료 용액에 대한 장기간 노출의 잠재적 영향을 줄입니다. 또한 이 방법은 광간섭 단층촬영(Optical Coherence Tomography) 7,16 및 광음향 이미징(photoacoustic imaging) 7,9을 포함하여 이미징 깊이, 해상도 및 감도를 개선하기 위해 다양한 생물의학 응용 분야에 적용되어 광범위한 생물의학 이미징 커뮤니티에 대한 잠재력을 보여주었습니다.

생물 의학 이미징에서 흡수 분자의 응용에 대한 관심이 높아짐에 따라17,18, 이 프로토콜은 이미지 처리 및 가역적 생체 내 이미징과 함께 생체 외 및 생체 내 응용 분야에 식품 염료를 활용하는 자세한 절차를 제시합니다. 이 프로토콜은 닭 가슴살 조직에 적용되어 생체 외 투명성을 입증한 다음 마우스의 생체 내 머리 및 복부 이미징을 위해 수정되어 가역성을 보여줍니다. in vivo 마우스 피부에 적용된 용액은 피부나 조직의 무결성을 손상시키지 않고 일시적이고 가역적인 투명도를 생성합니다. 이 기술은 노이즈 제거를 포함한 이미지 처리 파이프라인과 통합되어 내부 장기의 생체 내 광학 이미징을 위한 최적화된 이미징 프로토콜을 만들 수 있습니다. 이러한 기술을 결합하면 생물학적 과정을 실시간으로 관찰할 수 있는 더 나은 비침습적 종단 이미징이 가능합니다. 가역성을 입증하는 보다 안전한 제제의 사용은 이전의 한계를 극복하고 동적 생물학적 이미징에 더 적합한 방법을 제공합니다.

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프로토콜

수행된 모든 동물 실험은 NIH Guide for the Care and Use of Laboratory Animals에 따라 University of Texas at Dallas의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(IACUC)의 승인을 받았습니다. 사용된 시약과 장비는 재료 표에 나열되어 있습니다. 이미지 처리 코드는 Github에서 사용할 수 있습니다. https://github.com/ou-group-utd/JoVE-2025-Image-Processing

1. Tartrazine 용액 준비

  1. ex vivo 샘플의 경우
    1. 염료 용액을 준비하려면 필요한 염료 분말 (Tartrazine)의 질량을 계산하여 원하는 부피의 용액을 준비하십시오. 다음 공식을 사용합니다.
      질량(g) = 몰농도(M) × 분자량(g/mol) × 부피(L)
      참고: 실제 몰 농도를 보정하려면 UV-VIS 분광계를 사용하여 준비된 용액의 흡광도를 측정하고 Beer-Lambert 법칙19를 적용합니다.
      주의: 분석 저울을 사용하여 분말의 정확한 양을 계량하십시오. 염료 분말로 작업할 때는 실험복, 장갑, 보안경을 포함한 적절한 PPE(개인 보호 장비)를 착용하십시오. 흡입이나 피부 접촉을 피하십시오.
    2. 염료 분말을 깨끗한 유리 바이알에 옮기고 부피 측정 피펫을 사용하여 필요한 양의 탈이온수(DI)를 추가하여 부피 측정 정밀도를 보장합니다.
    3. 분말이 실온에서 완전히 용해되지 않으면 유리 바이알을 40°C로 예열된 실험실 오븐이나 용광로에 넣고 10분 동안 또는 분말이 완전히 용해될 때까지 가열합니다(그림 1A).
      알림: 저몰 농도 용액은 실온에서 완전히 용해되고 액체 형태로 유지되는 반면 고농도(>0.37M) 용액은 가열이 필요합니다.
      주의 : 과도한 가열은 물을 증발시키고 용액의 실제 농도를 변경합니다.
    4. 완전한 용해를 보장하기 위해 와류 믹서에서 30초에서 1분 동안 저어줍니다.
    5. 0.65M 용액을 준비하려면 427.5mg의 Tartrazine 분말을 DI water 1mL에 용해시킵니다19. 다른 농도에 대해서는 표 1을 참조하십시오.
      알림: 사용하지 않은 염료 용액과 오염된 물질은 표준 화학 폐기물 처리 절차에 따라 폐기하십시오.
  2. in vivo 샘플용
    1. 0.4%(4mg/mL) 아가로스 하이드로겔 용액으로 0.65M 농도를 준비하기 위해 저용융 온도 아가로스 미립자와 타르트라진의 필요한 질량을 계산합니다.
      알림: 모든 시약을 취급할 때는 1.1.1단계에 설명된 표준 안전 예방 조치를 따르십시오.
    2. 가중 분말을 깨끗한 유리 바이알에 옮깁니다. 부피 측정 피펫을 사용하여 DI water를 추가합니다.
    3. 약 10-15분 동안 또는 아가로스 입자가 완전히 용해될 때까지 75°C로 예열된 실험실 오븐 또는 용광로에 바이알을 놓습니다.
    4. 균일한 용해를 위해 가열 과정에서 와류 믹서를 사용하여 때때로 혼합합니다.
    5. 사용하기 전에 용액을 실온으로 식히십시오. 젤 형태로 응고되면 와류 믹서를 30초 동안 사용하여 다시 액화하십시오.
    6. 0.65M 하이드로겔 용액을 준비하려면 427.5mg의 타트라진 분말과 4mg의 아가로스를 DI 물 1mL에 용해시킵니다. 다른 농도의 용액을 준비하려면 아가로스 농도를 0.4%(4mg/mL)로 유지하고 해당 Tartrazine 질량17에 대해서는 표 1을 참조하십시오.

2. 체외 조직의 광학적 투명화

  1. 시료 전처리
    1. 체외 조직을 준비하려면 닭 가슴살 조직을 콜라겐 섬유와 평행한 원하는 두께로 자릅니다.
    2. 얇게 썬 티슈를 물로 부드럽게 청소하십시오.
    3. 두 개의 깨끗한 현미경 슬라이드 사이에 조직을 배치하여 두께를 측정합니다. 슬라이드를 함께 부드럽게 누르고 버니어 캘리퍼를 사용하여 조직 중앙에 있는 슬라이드 사이의 거리를 측정합니다.
    4. 염료 용액에 조직을 담그십시오.
      주의: 용액의 부피가 s보다 큽니다.amp르 부피와 조직이 완전히 잠겨 있습니다.
    5. 용기를 오비탈 셰이커에 놓고 10분 동안 분당 100회전으로 흔듭니다.
    6. 조직을 용액에 60분 동안 그대로 두십시오., 실온에서 낮은 농도 ≤ 0.4m, 높은 농도 >0.4m의 경우 40°C에서 .
  2. 이미징
    1. 깨끗한 집게를 사용하여 염료 용액에서 조직을 제거합니다.
    2. 두 개의 투명 유리 슬라이드 사이에 샘플을 놓고 적절한 해상도와 배율 설정의 디지털 또는 과학용 카메라를 사용하여 이미지를 캡처합니다.
    3. 외부 조명 간섭을 최소화하기 위해 통제된 조명 환경에서 이미징 프로세스를 수행합니다.
    4. 두께와 염료 용액 농도가 다른 조직 샘플에 대해 이미징 프로세스를 반복합니다(그림 2B).
      알림: 백라이트에는 LED 광원을 사용하십시오. 그러나 상단 조명 광원에 대해서도 정확히 동일한 방식으로 작동합니다.
  3. 광 전송 측정
    1. 광학 투과율을 측정하려면 두 개의 투명 유리 슬라이드 사이에 닭 조직을 끼우고 UV-Visible-NIR 분광계를 사용하여 투과율을 측정합니다(그림 2C).
    2. 시스템이 적절하게 기준선을 설정하고 광선이 일관성을 유지하기 위해 염료 용액으로 처리하기 전과 후에 조직의 동일한 영역을 통과하는지 확인합니다.
      참고: 중간 스캔 속도와 1.0nm의 데이터 간격을 사용하여 400nm에서 2000nm 파장 범위에서 투과 스펙트럼을 기록합니다. 전체 스펙트럼 스캔에는 샘플당 약 5분이 소요됩니다.

3. 살아있는 동물의 광학적 투명도

  1. 동물 준비
    1. 실험하기 전에 동물의 체중을 측정하고 일반적인 활동 수준을 기록하여 생리학적 기준선을 설정합니다.
    2. 실험하는 동안 동물의 체온을 유지하기 위해 온도를 37°C로 설정한 가열 패드를 사용하십시오.
      주의 : 과열을 방지하기 위해 동물을 지속적으로 모니터링하십시오.
    3. 이미징 사이트를 기반으로 살아있는 동물의 광학 이미징을 위해 마취(기관에서 승인한 프로토콜에 따름)를 시행합니다. 복부 영상의 경우 빠른 회복을 위해 흡입 마취제를 사용하고 뇌 영상을 위해 주사 마취제를 사용하십시오.
    4. 흡입 마취의 경우 이미징 실험 전 약 5분 동안 1.5%-3%의 이소플루란과 0.8L/분의 유속으로 유도하고 실험 내내 1%-2%로 유지합니다.
      주의 : 동물의 호흡 패턴과 깊이를 지속적으로 모니터링하십시오. 사람에 대한 마취제 노출을 최소화하기 위해 환기가 잘 되는 장소를 사용하십시오.
    5. 주사 마취를 위해 케타민 HCL(16mg/mL)과 덱스메데토미딘 HCL 0.2mg/mL가 함유된 칵테일을 준비합니다. 동물의 체중 및 승인된 기관 프로토콜에 따라 복용량.
    6. 원하는 이미징 영역에서 작은 동물 클리퍼를 사용하여 털을 다듬습니다.
    7. 트리밍된 피부 부위에 제모 크림을 60초 미만으로 바르면 잔여 모발을 제거할 수 있습니다. 즉시 크림을 제거하고 알코올 물티슈를 사용하여 피부를 청소하여 피부 자극을 피하십시오.
    8. 실험 후 주사 가능한 마취를 위한 반전 약물로 Atipamezole을 사용합니다. 회복하는 동안 동물을 모니터링하고 집 우리로 돌아가기 전에 정상적인 호흡과 이동성으로 돌아오는지 확인하십시오.
  2. 조직을 투명하게 만드는 절차
    1. 저체온증을 방지하기 위해 동물 아래에 37°C로 설정된 발열 패드를 배치하여 이미징 설정을 준비합니다. 광원과 카메라를 정렬하여 이미지를 캡처합니다.
    2. 적용을 위해 0.3%-0.4% 아가로스 겔과 혼합된 0.65M 타트라진 하이드로겔 용액을 사용합니다(1.2단계).
    3. 스포이드를 사용하여 용액을 피부(실험의 성격에 따라 배 또는 머리)에 바르고 흡수를 시작할 때까지 몇 초 동안 그대로 둡니다(그림 3A).
    4. 염료 용액이 고르게 분포되고 피부 흡수를 촉진하기 위해 면봉을 사용하여 해당 부위를 부드럽게 문지릅니다.
    5. 깨끗한 면봉으로 해당 부위를 부드럽게 마사지하고 피부가 투명해지기 시작하고 내부 장기가 보일 때까지 용액을 더 바르십시오. 흡수하는 동안 피부는 먼저 주황색-빨간색 점의 모양을 보이며 점차 균일한 색상으로 병합됩니다. 이 색상 변화는 적절한 염료 침투와 광학 투명화의 시작을 나타내는 중요한 시각적 지표입니다.
      주의: 용액이 적용 영역에서 결정화되지 않도록 하십시오 - 결정화는 피부 통로를 막아 염료 분자가 피부에서 흡수되는 것을 방해할 수 있으며, 이는 투명성을 달성하는 데 매우 중요합니다. 염료 분자를 충분히 흡수하면 피부색이 주황색-빨간색으로 바뀝니다.
    6. 피부가 투명해지기 시작하고 내부 장기가 보일 때까지 해당 부위를 부드럽게 마사지하십시오. 이 과정은 일반적으로 작은 부위를 마사지하는 데 약 3-5분이 소요되지만 지속 시간은 동물의 크기와 피부 두께에 따라 다를 수 있습니다.
    7. 정렬된 카메라를 사용하여 이미지를 캡처합니다. 초점, 노출 및 화이트 밸런스를 조정하여 이미지 품질을 최적화합니다.
    8. 유리 슬라이드나 커버 슬립을 피부에 부드럽게 올려 번들거림을 최소화하고 반사를 줄여 더 나은 품질의 이미지를 얻을 수 있습니다.
      주의 : 모든 화학 용액은 적절한 개인 보호 장비(실험실 가운, 장갑 및 보안경)로 취급하고 사용한 재료는 기관의 화학 폐기물 처리 프로토콜에 따라 폐기하십시오.

4. 이미지 처리를 통한 장기 가시성 향상

  1. 이미지 처리 단계
    1. OpenCV가 있는 Python은 이미지 처리에 사용됩니다. OpenCV, numpy, matplotlib 및 PyWavelets를 가져옵니다.
    2. 원본 이미지를 로드하고 정규화 합니다. 원본 하이 비트 뎁스 .tif 이미지를 불러옵니다. 픽셀 값이 255를 초과하는 경우 모든 픽셀을 [0, 255] 범위로 정규화합니다.
    3. 관심 영역(ROI)을 자릅니다. OpenCV의 ROI 선택기를 호출하여 오르간 영역 주위에 경계 상자를 그립니다. 모든 후속 단계에서 자른 버전만 사용하여 계속 진행합니다.
      참고: 경계 상자가 관련 구조를 자르지 않고 대상 영역을 단단히 둘러싸고 있는지 확인합니다.
    4. LAB 채널로 분할합니다. 자른 컬러 이미지를 LAB 색 공간으로 변환하고 L(밝기), A 및 B 채널로 분할합니다.
      참고: 이미지는 컬러로 처리되므로 실험실 색 공간은 픽셀 강도가 있는 L 채널에만 적용되는 이미지 처리 기술과 함께 사용되었습니다.
    5. 픽셀 강도 분포를 분석합니다. L 채널의 히스토그램을 플로팅하여 대비와 강도 산포를 평가합니다.
      참고: 히스토그램을 사용하여 대비 향상이 필요한지 여부를 확인하고 대비 향상을 위한 매개변수 선택을 안내합니다. 히스토그램이 [0, 255]에 분산되기를 원합니다.
    6. 로컬 대비 향상을 위해 CLAHE (Contrast Limited Adaptive Histogram Equalization)를 적용합니다. clipLimit = 5.0 및 tileGridSize = (16,16)인 CLAHE 객체를 만듭니다. L 채널에서 CLAHE 를 실행하고 CLAHE로 향상된 L 채널을 원래 A 및 B 채널과 병합합니다. 필요한 경우 시각화를 위해 CLAHE 를 LAB 에서 RGB 로 변환합니다.
      참고: 히스토그램에 과증폭 노이즈(스파이크)가 표시되면 'clipLimit' 또는 'tileGridSize'를 조정하고 다시 적용하여 균형 잡힌 로컬 대비를 얻으십시오.
    7. 대비가 향상된 이미지의 노이즈를 제거합니다. 소프트 임계값 0.1로 정규화된 CLAHE L 채널(스케일링됨 [0, 1])에서 2단계 이산 웨이블릿 분해를 수행합니다. 잡음이 제거된 L 채널을 재구성하고, [0, 255]로 다시 스케일링한 다음, 잡음이 제거된 L 채널을 원래 A 및 B 채널과 병합합니다. 원본의 잘린 컬러 영상과 웨이블릿 잡음이 제거된 결과를 표시합니다.
      참고: 웨이블릿 잡음 제거는 균일한 영역에서 전경으로 잘못 해석될 수 있는 작은 변동을 줄입니다.
    8. Otsu의 Adaptive Thresholding을 통해 관심 기관을 세분화합니다. 잡음이 제거된 L 채널에서 Otsu의 임계값을 계산합니다. 임계값에서 바이어스 15를 빼서 저강도 장기 영역을 포함합니다.
      1. bias 값과 함께 이진 임계값을 적용하여 기관 픽셀의 마스크를 얻습니다. 마스크를 원본 A 및 B 채널과 병합하고 보기 위해 RGB로 변환합니다.
        참고: 바이어스 조정은 혈관 아래에 장기 영역을 포함하도록 강제합니다. 다른 데이터 세트에 필요한 경우 바이어스를 다시 조정합니다.
    9. 원하는 대로 해석을 진행합니다.

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결과

ex vivo 닭 가슴살 조직에서의 광학적 투명성 입증
체외 조직을 통한 빛의 전파를 조사하기 위해 두께가 1.5mm, 2.5mm, 3.5mm인 뼈 없는 닭 가슴살의 얇게 썬 조각을 사용했습니다(그림 2B). 조직은 콜라겐 섬유와 평행하게 절단되어 일관된 근육 섬유 방향을 보장했습니다. 이미지는 메쉬 그리드 패턴과 조직 아래의 "UT Dallas" 로고를 모두 사용하여 서로 다른 용액 농도로 처리하기 전과 후에 촬영되었습니다(그림 2B). 이미지를 캡처하기 위해 3.5mm 초점 거리와 f/1.4 조리개를 특징으로 하는 렌즈와 페어링된 CMOS 카메라가 사용되었으며 샘플의 후면 조명을 위해 LED 광원이 사용되었습니다. 그런 다음 UV-V...

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토론

이 연구는 흡수 분자, 특히 FDA 승인 식품 염료 Tartrazine(의료 분야가 아닌 식품에 사용하도록 승인됨)을 활용하여 생체 조직에서 광학적 투명성을 달성하기 위한 포괄적이고 재현 가능한 프로토콜 방법을 제시합니다. 이 방법은 조직의 미세환경 내에서 굴절률을 변경하여 광학적 투명도를 향상시켜 조직의 고유 산란을 효과적으로 최소화합니다. 이 연구는 생체 외 이미징과 생체 내 이미징을 통해 이 방법의 효과를 입증했습니다. 생체 외 이미징의 경우, 닭 가슴살 조직에 대한 다양한 농도의 Tartrazine의 영향을 다양한 두께의 생물학적 샘플로 조사했습니다. 결과는 Tartrazine의 최적 농도가 닭 가슴살 조직을 육안으로 투명하게 만들 수 있음을 나타냅니다. 투과율의 분광 측정은 입사광이 550nm 미만에서 거의 완전히 흡수되지만 가시 스펙트럼의 더 긴 파장과 근적외선 영역으로의 투과가 크게 증가한다는 것을 추가로 보...

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공개 사항

모든 저자는 이해 상충이 없음을 선언합니다.

감사의 글

ZO는 댈러스에 있는 텍사스 대학교의 지원에 감사를 표합니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
분석 저울HZKFA220S
동물 마취 기계RWD 생명 과학 주식회사타이지 IE흡입 마취제
아티파메졸 HCL 주사 5 mg/mL코버투스82124주사 마취
CMOS 카메라토르 연구소CS165CU/M, Zelux
덱스메데토미딘 HCL 주사 5mg/10mL코버투스72960주사 마취
파이버 라이트 일루미네이터RWD 생명 과학 주식회사76301상단 조명용 광원
유리 슬라이드크래비티사이코0303-2122슈퍼 그레이드 현미경 슬라이드
Homethermic 담요RWD 생명 과학 주식회사69027동물 온도 조절기
이미지 처리오픈CV파이썬소프트웨어
인슐린 주사기 0.5mL 29g컴포트 포인트26028주사 마취
이소플루란코버투스SKU 029405흡입 마취제
케트민 HCL 주사 100 mg/mL데크라20042240주사 마취
LED 광원GGE 주식회사TLB-01상단 조명용 광원
렌즈토르 연구소MVL4WA3.5mm 초점 거리 및 f/1.4 조리개
나이르교회 & 드와이트엘 1224제모 크림
PBS pH 7.4(1x)깁코2902869주사 마취
면봉청교도 의료 제품 회사806-WC 병원
SeaPlaque 아가로스론자50101화학
타르트라진밀리포어시그마CAS 번호: 1934-21-0화학
이송 피펫피셔브랜드13-711-9오전
UV-VIS-NIR 분광 광도계시마즈솔리드 스펙-3700i악기
튜브코르팍242633
체적 피펫Eppendorf 리서치 플러스3123000063100-1000&마이크로; L
정수 시스템아비디티 과학솔로 S악기

참고문헌

  1. Yun, S. H., Kwok, S. J. J. Light in diagnosis, therapy and surgery. Nat Biomed Eng. 1 (1), 0008(2017).
  2. Tuchin, V. V. Optical clearing of tissues and blood. , SPIE Publications. (2005).
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