방법 논문

하중 지지 부위에서 뼈 대체 성능 평가를 위한 쥐의 반분절 골단골 결손 모델

DOI:

10.3791/69211

2025년 12월 30일

이 논문에서

요약

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이 연구는 내고정 또는 외부 고정 없이 하중 지지 조건에서 뼈 대체 재료의 기계적 및 골형성적 성능을 평가하기 위해 쥐 대퇴골 반분절 결손 모델을 구축하였습니다.

초록

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골 대체 재료의 정확한 전임상 평가는 조직 재생을 지원할 뿐만 아니라 생리학적 하중 부하 지탱 조건의 기계적 도전을 반영하는 모델을 요구합니다. 그러나 대부분의 기존 동물 골 결함 모델은 이 점에서 부족합니다. 예를 들어, 칼바리 결함 모델은 널리 사용되지만 하중을 지지하지 않는 영역에서 생성됩니다. 마찬가지로, 장골의 드릴 홀 또는 부분 결함은 주로 국소적 치유에 집중하며, 기계적 지지를 평가할 만큼 충분한 하중 전달이 부족합니다. 이 연구는 고정장치 없이 하중을 지탱하는 환경에서 뼈 대체 재료의 기계적 및 생물학적 성능을 평가하기 위해 쥐 대퇴골에서 표준화된 반분절 골꼰부결 부위 모델을 확립하였습니다. 고속 핸드피스와 특수 원통형 치과용 버를 사용하여, 대퇴골 외측 중간통에 길이 4mm, 반반원통형 결손이 만들어졌습니다. 두 가지 대표적인 재료인 젤라틴 메타크릴로일(GelMA) 하이드로겔과 3D 프린팅 다메틸 메타크릴레이트(3DP-PMMA)가 주입되어 모델의 기계적 특성 구분 능력을 검증했습니다. 이식 4주 후 수행된 방사선, 조직학, 면역형광 분석 결과, 기계적 지지 부족으로 인해 GelMA 이식이 섬유 조직 우세와 제한된 뼈 통합 부합을 초래함이 발견되었습니다. 반면, 3DP-PMMA는 새로운 뼈 형성, 골막 연속성, 압전형 기계감응 이온 채널 구성 요소 1-발현(Piezo1+)과 렙틴 수용체 발현(LepR+) 세포의 모집을 촉진했습니다. 이 모델은 생체재료의 하중 지지 능력, 골유도성, 골통합 잠재력을 평가할 수 있는 실용적이고 재현 가능한 플랫폼을 제공합니다. 이는 장골 재건이나 골절 수리와 같은 정형외과 응용을 위한 후보 재료를 선별하는 데 유용한 도구가 될 수 있습니다.

서론

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생리학적 조건에서 뼈는 신체의 구조적 완전성과 기계적 기능을 유지하는 데 중심적인 역할을 합니다. 체중을 지탱하고, 움직임을 가능하게 하며, 내부 장기를 보호합니다. 특히 하중을 지탱하는 부위에서 외상, 종양 절제, 감염으로 인해 뼈가 손상되면 기계적 연속성이 끊깁니다. 이러한 장애는 종종 뼈 변형, 이동성 저하, 사지 불안정, 만성 통증, 심한 골절과 출혈로 인한 생명을 위협하는 문제까지 초래합니다 1,2. 현재는 뼈 이식과 생체재료 같은 뼈 대체 요법이 심각하게 손상된 뼈 조직을 대체하거나 대규모 골 결손을 복원하는 데 임상적으로 적용되고 있습니다. 마찬가지로, 이식된 뼈 대체물의 기계적 성능 저하로 인해 임플란트 실패가 발생하여 결손 부위의 비유합 또는 심지어 치명적인 골절로 이어질 수 있습니다 3,4. 구조와 기능을 모두 회복하기 위해 뼈 대체 재료는 뼈 재생을 촉진할 뿐만 아니라 생리적 하중을 견딜 수 있는 충분한 기계적 강도를 가져야 합니다.

임상 번역 전에 중요한 단계는 생 내에서 이식된 생체재료가 하중을 지탱하는 골 부위의 구조적 지지에 필요한 기계적 요구를 충족할 수 있는지에 대한 현실적인 평가입니다. 많은 생체재료가 시험관 내외 또는 소형 비하중을 지탱하는 모델에서 가능성을 보였지만, 임상 실무로의 전환은 생 내 기계적 상태를 시뮬레이션하는 신뢰할 만한 전임상 모델의 부재로 인해 종종 방해받고 있습니다. 현재 골 결손 연구에 사용되는 동물 모델로는 하악 결손6, 수추 결손7, 장골의 드릴 홀 결손8, 발치 후 소켓9 등이 있습니다. 이 모델들은 주로 재료의 골형성 능력을 평가하며, 조직학적 또는 방사선 재생 종점에 중점을 둡니다10,11. 그러나 이러한 부위들이 하중을 지탱하지 않거나 기계적으로 보호되어 있기 때문에, 장골에서 겪는 동적 응력 조건을 재현하지 못한다. 압축 또는 인장 강도 분석과 같은 시험관 내 기계적 특성을 시험하더라도, 이는 생체 내 환경에 내재된 동적 부하와 숙주 조직 상호작용을 재현하지 못합니다13.

전임상 연구의 주요 공백은 하중을 지탱하는 조건에서 뼈 대체물의 생체 내 기계적 평가를 가능하게 하는 표준화되고 재현 가능한 동물 모델의 부재입니다. 이를 해결하기 위해 본 연구는 쥐에서 반분절 관절단 결손 모델을 확립하였습니다. 이 모델은 하중 지지 영역에 안정적이고 재현 가능한 결함 부위를 제공하여 생리학적 하중 하에서 골 대체 재료의 기계적 지지 능력을 직접 평가할 수 있게 하고, 동시에 골 생성 결과도 평가할 수 있게 합니다. 더불어, 이 모델은 특정 동물에 따라 결함 크기와 위치를 조정하여 다양한 동물 종에 적용할 수 있습니다. 그럼에도 불구하고, 인간 뼈의 복잡한 생체역학적 환경을 완전히 재현하지는 못하며, 비하중을 지탱하는 결손, 두개골 치유, 또는 매우 큰 구조적 임플란트에만 초점을 맞춘 연구라면 대체 모델이 더 적합할 수 있습니다.

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프로토콜

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본 연구에서 시행된 모든 동물 시술은 쓰촨대학교 화서광학 우수과학대학 윤리위원회(WCHSIRB-AT-2025-342)의 승인을 받았습니다. 수컷 스프래그-도울리 쥐(각각 180g)는 상업적 공급처에서 얻어 이식된 재료에 따라 무작위로 두 그룹(n=6마리)에 배정했습니다. 시약과 사용된 장비는 재료표에 나열되어 있습니다.

1. 수술 전 준비

  1. 수술 관련 항목
    1. 그림 1A를 참조한 수술 기구를 다음 순서로 준비하세요. 그림 번호가 표시된 라벨에 해당합니다: 곡선 겸자, 일회용 멸균 메스, 직선 가위, 골막 엘리베이터, 세척 바늘, 특정 치과용 다이아몬드 버(그림 1B의 확대 보기 참조), 고속 핸드피스, 버니어 캘리퍼, 수술용 모터, 단섬유 봉합사(4-0), 바늘 홀더.
    2. 관개용으로 0.9% 멸균 식염수를 준비하세요.
  2. 멸균 및 소독
    1. 곡선 겸자, 가위, 골막 엘리베이터, 치과용 다이아몬드 버, 고속 핸드피스, 바늘 홀더 등 오토클레이빙을 견딜 수 있는 수술 기구를 멸균하세요.
      참고: 기기는 의료용 부직포 천으로 감싸고 오토클레이브 테이프로 밀봉하여 121-134°C에서 20-25분간 증기 멸균을 해야 합니다.
    2. 버니어 캘리퍼스나 수술용 모터와 같은 열에 민감한 기기의 경우, 소독을 위해 최소 30분 이상 자외선에 노출시키세요. 일회용 멸균 메스, 관개 바늘, 봉합사와 같은 일회용 물품은 사용 전까지 원래 멸균 포장 상태로 밀봉된 상태로 있어야 합니다.
    3. 수술 환경이 무균이고 온도가 잘 조절되도록 하세요. 수술대와 주변 표면을 75% 에탄올로 닦으세요. 수술대를 덮을 때는 멸균된 의료용 부직포 천을 사용하세요.
      주의: 에탄올은 가연성입니다; 점화원에서 떨어진 곳에서 다루고 닫힌 용기에 보관하세요. 에탄올 폐기물을 지정된 화학 폐기물 용기에 수집하여 적절히 처리하세요. 장갑, 실험복, 안전 고글 등 적절한 개인 보호 장비를 착용하세요.
  3. 마취
    1. 쥐의 무게를 재고 마취제 복용량(케타민 100mg/kg, 자일라진 10mg/kg, 복강 내 투여)을 계산하세요.
    2. 수술 20분 전(기관에서 승인한 프로토콜에 따라) 마취를 유도하고, 발가락 압박에 대한 반응 부재와 교정 반사 상실을 확인하여 마취 깊이를 확인하세요.
    3. 시술 중 각막 건조를 방지하기 위해 양쪽 눈에 안과 연고를 바르세요.

2. 수술 절차

  1. 부지 준비
    1. 쥐를 멸균된 수술대에 옆으로 누운 자세로 눕히세요. 대퇴골 돌출부에 해당하는 허벅지 측면을 면도하고 2% 요오드 팅크로 피부를 소독한 뒤 75% 에탄올을 사용한다(그림 2Ba).
      주의: 요오드 팅크는 가연성이 있고 자극적입니다. 장갑, 실험복, 안전 고글을 착용한 채 환기가 잘 되는 곳에서 다루세요. 사용 후 물티슈와 용액은 기관 안전 규정에 따라 지정된 화학 폐기물 용기에 폐기하세요.
    2. 무균을 유지하기 위해 수술 부위에 멸균된 창문이 있는 시트를 덮어주세요.
  2. 수술 부위 개방
    1. 수술 중 조직을 안정시키고 근육을 고정하며 대퇴골을 부드럽게 고정하는 데 도움을 주기 위해 곡선 겸자를 사용하세요(그림 2Bb-h).
    2. 허벅지 측면 측면에 2-3cm 세로 피부 절개를 직선 가위로 하여 아래 근육을 노출시킵니다(그림 2Bb).
    3. 대퇴직근과 외측광근을 식별하고, 가위(그림 2Bc)로 보이는 흰색 근막(그림 2Bb의 노란 화살표로 표시됨)을 따라 조심스럽게 분리하세요.
    4. 대퇴골 측면의 근육 부착부를 찾아 노출하세요(그림 2Bd).
    5. 일회용 멸균 메스로 근육 부착부를 따라 세로 절개하여 대퇴골 표면에 접근합니다(그림 2Be).
      참고: 연조직 분리를 위해 가위나 메스를 사용해 날카로운 해부를 할 때는 기저의 혈관과 신경을 손상시키지 않도록 주의하세요. 해부학적 구조에 익숙하지 않은 경우, 끝이 가는 겸자와 골막 엘리베이터를 사용해 둔한 해부를 수행하세요.
    6. 골막 엘리베이터를 이용한 둔탁 박리를 수행하여 근육 부착물을 분리하고 대퇴골 중간 간단 부분을 완전히 노출시킵니다(그림 2Bf).
    7. 대퇴골을 주변 근육과 분리하여 곡선 겸자를 사용해 대퇴골 중앙 간부를 고정합니다(그림 2Bg).
  3. 반분절 극단결부 뼈결손 모델 구축
    1. 수술용 모터로 구동되는 고속 핸드피스에 평평한 원통형 특정 치과 다이아몬드(그림 1B)를 부착합니다. 수술용 모터를 35,000 rpm으로 설정하세요.
    2. 직접 시각화 하에서, 대퇴골 중앙축의 가장 높은 지점을 결손 형성의 해부학적 중심으로 식별하세요. 이 지점에서 버를 사용해 수직으로 아래로 드릴을 진행하다가 갑작스러운 저항 감소가 관찰되고, 결손 부위에 혈액 삼출이 나타나는 것은 피질 관통과 연수강 접근을 나타냅니다(그림 2Bh).
      참고: 피질 두께의 동물 간 변동성을 고려할 때, 운영자는 대퇴부 해부학에 익숙해지고 이 단계를 표준화하기 위한 사전 실험 훈련을 수행할 것을 권장합니다.
    3. 초기 관통점을 중심으로 제어된 수평 밀-풀 동작을 적용하여 결함을 확대합니다. 결손을 종방향(대퇴골 축을 따라)과 측면(대퇴골 직경을 따라 )으로 확장하여 길이 4mm, 반반변 반변경 1.5mm의 표준화된 반원통형 결손을 점차 형성합니다(그림 2Bi, 결손의 형태와 위치는 그림 2A 참조).
      참고: 중심점이 확립되면 버니어 캘리퍼를 사용해 결함을 단계적으로 확대하여 모든 시편의 치수를 균일하게 유지하세요. 특수 치과용 버의 평평한 끝 원통형 설계는 반원통형 결함과 일치하여 효율적이고 재현 가능한 준비를 가능하게 합니다.
    4. 뼈 절개 시 열괴사를 예방하기 위해 세척 바늘을 사용해 무균 식염수로 수술 부위를 지속적으로 세척하세요.
  4. 뼈 대체 이식
    1. 뼈 이물질을 부드럽게 제거하고 잔여 입자를 제거하기 위해 부위를 관개하세요.
    2. 기계적 성능 시험을 위해 하중을 지지하지 않는 젤라틴 메타크릴로일(GelMA) 하이드로겔(재료 참조) 또는 기계적 성능 시험을 위한 하중 지지 3D 프린팅 폴리메틸 메타크릴레이트(3DP-PMMA)를 결함 부위에 이식하여 밀착 상태를 보장합니다(그림 2Bj).
      참고: 여기서 사용된 두 생체재료는 기계적 특성과 생물학적 특성을 대조적으로 나타내도록 의도적으로 선택되었습니다: GelMA 하이드로겔은 부드럽고 비하중을 지탱하는 재료로 제한된 골형성 잠재력을 가진 반면, 3DP-PMMA는 효과적인 응력 전달과 뼈 형성을 지지할 수 있는 단단하고 하중을 지탱하는 비계 역할을 합니다14 (그림 2A)). 이러한 대조는 모델이 광범위한 기계적 강도와 생물학적 성능을 가진 임플란트를 평가할 수 있음을 강조하며, 실제로는 결함 모델을 기계적 특성을 가진 다른 후보 재료 시험에도 적용할 수 있습니다.
  5. 수술 부위 폐쇄
    1. 4-0 모노필라멘트 봉합사와 바늘 홀더를 사용해 근육층을 봉합하며, 과도한 긴장을 피하도록 주의하세요(그림 2Bk).
    2. 봉합을 중단하여 피부 봉합을 시행하고, 수술 부위를 2% 요오도포르 용액으로 소독합니다(그림 2Bl).

3. 수술 후 관리

  1. 쥐를 소독된 일정 온도의 온열 패드(37 °C)로 옮겨 수술 후 회복을 돕습니다.
  2. 적절한 수술 후 진통제(예: 부프레노르핀 0.03 mg/kg 피하 투여)를 12시간마다 48-72시간 동안 투여합니다.
  3. 쥐들이 의식을 되찾으면 부드러운 깔개와 쉽게 먹이와 물을 얻을 수 있는 깨끗한 우리에 넣으세요.
  4. 감염, 열개, 비정상적인 부종 징후를 매일 관찰하세요. 수술 후 최소 7일간 쥐의 행동, 체중, 이동성을 관찰하여 회복을 확인하고 복지를 평가하세요.

4. 샘플 채취 및 데이터 수집

  1. 샘플 채취
    1. 이산화탄소 흡입으로 쥐를 안락사시키고, 이후 기관에서 승인한 프로토콜에 따라 2차 확인을 시행합니다.
    2. 이식 후 4주에 대퇴골 표본을 수확하여 처음에는 두 개의 재료 그룹(n=6개)으로 무작위로 배정하여 재료의 기계적 성능을 평가합니다.
      참고: GelMA 그룹에서는 수술 직후 세 마리의 동물이 완전 골절을 일으켰고 제외되었고, 이후 분석을 위해 세 마리의 표본만 남겨두었습니다.
    3. 대퇴골 표본을 4% 파라포름알데히드에 48시간 동안 4°C에서 고정하세요.
      주의: 파라포름알데히드는 독성이 있으므로 인증된 훈제구에서 다뤄야 합니다. 장갑, 실험복, 안전 고글 또는 페이스 쉴드를 착용하세요. 폐기물 용액은 라벨이 붙은 유해 화학 폐기물 용기에 수집하여 폐기하세요.
  2. 마이크로 컴퓨터 단층촬영(μCT) 평가
    1. 이식 후 4주 이내에 채취한 대퇴골 표본에 대해 다음과 같은 스캔 매개변수를 가진 μCT 스캔을 수행하세요: X선 튜브 전위, 70 kVp; 엑스선 강도 0.2 mA; 필터, AL 0.5 mm; 적분 시간, 1 x 300 ms; 그리고 복셀 크기는 17 μm입니다.
    2. μCT 기계 소프트웨어에 제공된 사전 정의된 스크립트를 사용하여 3D 재구성을 수행합니다. 전용 이미지 처리 소프트웨어의 재슬라이스 기능을 사용하여 결함 부위의 단면 이미지를 생성합니다. 해당 소프트웨어 매뉴얼에 설명된 표준 워크플로우를 따르세요.
  3. 조직학적 염색
    1. 샘플을 4°C에서 12% 에틸렌디아미네테트라아세트산(EDTA, pH 7.2)을 셰이커에서 6주간 탈석화합니다.
      참고: EDTA 용액은 2일마다 교체하세요. 탈석화 진행 상황을 정기적으로 확인하세요. 석회화는 시료가 압력 하에서 유연하거나 바늘을 통과할 때 완료됩니다.
      주의: 수용성 화학 폐기물에 대한 기관 지침에 따라 EDTA 용액을 폐기하십시오. 오염된 생물학적 물질은 생물학적 위험 폐기물로 처리되어야 합니다.
    2. 샘플을 단계별 에탄올 희석 연속으로 탈수한 후 파라핀에 박힙니다.
    3. 파라핀 내재 샘플을 6μm 두께의 시상상(sgittal) 조각으로 자릅니다.
      참고: 삽입된 물질과 숙주 조직 사이의 경계면을 반드시 섹션에 포함하세요.
    4. 시중에서 구할 수 있는 키트를 사용하여 헤마톡실린-에오신(H&E)과 마손의 삼색 염색을 수행하세요(재료 참조). 모든 절차를 제조사의 표준 프로토콜에 따라 어떠한 차이도 없이 엄격히 수행하세요. 조직병리학을 통해 결손 부위 치유를 관찰하세요.
      주의: 착색 용액과 오염된 소비품은 기관의 생명안전 및 유해 폐기물 처리 프로토콜에 따라 폐기해야 합니다.
  4. 면역형광(IF) 염색
    1. 일련의 자일렌과 등급 에탄올 용액을 사용해 두께 6μm 파라핀 절면을 탈핵 및 재수화합니다.
      주의: 자일렌은 가연성이며 독성이 있습니다. 장갑, 실험복, 안전 고글을 착용한 채 연기 후드에서 자일렌을 다루세요. 폐기물 용매는 화학 폐기물 용기에 별도로 수집하여 적절한 폐기용을 처리하세요.
    2. 항원 회취 시 슬라이드를 시트레이트 버퍼(pH 6.0)에서 95-100 °C에서 15-20분간 배양합니다. 슬라이드를 자연스럽게 식혀 실온까지 두세요.
    3. 인산염 완충 식염수(PBS)로 절편을 5분간 세척하고, 항체 침투를 촉진하기 위해 0.1% Triton X-100 PBS로 20분간 처리합니다. 그 후 5% 소 혈청 알부민(BSA)으로 상온에서 1시간 동안 PBS에서 비특이적 결합 부위를 차단합니다.
      주의: Triton X-100은 불편한 기기입니다; 장갑, 실험복, 안전 고글을 착용한 채 통풍 구역에서 만져보세요. Triton X-100 용액은 지정된 용기에 화학 폐기물로 폐기하세요. 모든 절차에서 BSA와 PBS와 같은 조직 절편과 접촉한 용액은 생물학적 폐기물로 간주되어야 하며, 기관의 생물안전 프로토콜에 따라 수집 및 폐기되어야 합니다.
    4. 1차 항체(항압전형 기계민감 이온 채널 성분 1(Piezo1), 희석 1:200; 항렙틴 수용체(LepR, 희석 1:50))와 함께 항체 희석 버퍼 안에서 인큐베이션합니다. 각 절면에 희석된 항체 용액 50 μL을 바르고, 4°C 어두운 가습 챔버에서 12-18시간 배큐합니다.
    5. 슬라이드를 PBS로 세척한 후 3× 5분 동안 세척한 후, 형광포체 결합 2차 항체(희석된 1:200)로 배양합니다. 각 절면에 희석된 항체 용액 50 μL을 발라하고, 가습 챔버에서 실온의 어두운 환경에서 2시간 배큐합니다.
    6. 슬라이드를 다시 PBS에 세척한 후(3분 × 5분), 4'6-디아미디노-2-페닐린돌(DAPI)(희석한 1:50)으로 핵을 5분간 교환염색합니다.
    7. 부분을 안티페이드 마운팅 매체로 장착하고 커버슬립으로 덮으세요.
    8. 적절한 필터 설정을 적용한 레이저 주사 공초점 현미경을 사용해 이미지를 시각화하고 포착하세요.

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결과

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본 연구에서는 대퇴골 중간 간간에 길이 4mm, 반반경 1.5mm의 결손을 평평한 원통형 특정 치아 다이아몬드 버와 함께 드릴링하여 반분절 분절 관절 결손 모델을 확립하였다(그림 2A). 재료의 기계적 및 생물학적 성능을 테스트하는 모델을 입증하기 위해, 결함을 GelMA 하이드로겔 또는 3DP-PMMA로 이식한 두 개의 비교군을 설정했습니다(그림 3, 그림 4, 그림 5). GelMA 하이드로겔은 기계적 강도가 낮고 골형성 용량이 최적이 아닌 것이 특징인 반면, 3DP-PMMA는 신뢰할 수 있는 하중 지지 능력과 효과적인 응력 전달 특성을 가진 것으로 추정됩니다15,16

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토론

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골유도성, 골통합, 생체적합성 등 널리 강조되는 특성 외에도, 뼈 대체물의 기계적 반응성과 하중 지지 능력도 특히 체중 부하 부위 뼈의 결함 수리에 매우 중요합니다22. 기존의 기계적 성능 평가는 일반적으로 범용 시험기, 압축 시험, 인장 강도 분석과 같은 시험관 내 방법에 의존합니다 23,24,25. 이러한 접근법들은 유익하지만, 생리학적 조건에서 이식 물질과 숙주 조직 간의 복잡한 기계적 상호작용을 포착하지 못합니다26. 이 간극을 메우기 위해, 하중 지지 환경 내 기계적 자극을 모방하는 생체 내 모델이 뼈 대체물의 진정한 구조적 성능을 평가...

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공개 사항

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모든 원본 데이터와 이미지가 이 논문에 포함되어 있습니다. 저자들은 이해 상충이 없음을 선언합니다.

감사의 글

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이 연구는 쓰촨성 자연과학재단(2025ZNSFSC0754)의 지원을 받았습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
2% 요오도포르 용액청두 진산 화학 시약 유한회사.전혀 없습니다
3D 프린팅 다메틸 메타크릴레이트 (3DP-PMMA)쓰촨대학교 고분자과학공학대학에서 친절히 제공하셨습니다.전혀 없습니다
4% 파라포름알데히드바이오샤프BL539A
75% 에탄올청두 진산 화학 시약 유한회사.전혀 없습니다
솜뭉치하이시 하이누오 그룹 주식회사 및 nbsp; Ltd.전혀 없습니다
면 막대기라콩 의료기기 주식회사전혀 없습니다
DAPI 염색 솔루션Beyotime Cat#C1005
일회용 멸균 메스항저우 화웨이 의료용품 유한회사.20100227
젤라틴 메타크릴로일(GelMA) 하이드로겔쓰촨대학교 고분자과학공학대학에서 친절히 제공하셨습니다.전혀 없습니다
젤마 20%셀링크IKG125000005
염소 항쥐 IgG H& L (알렉사 플루어&레귤; 594)앱캠AB150116
염소 항토끼 IgG H& L (알렉사 플루오 & 레귤러; 488)앱캠AB150077
헤마톡실린 및 에오신 스테인 키트바이오샤프C1005
고속 핸드피스포산 SCS 의료기기 주식회사9018499000
관개 바늘쓰촨 신세기 의료용 고분제품 주식회사전혀 없습니다
마손 s 트리크롬 스테인 키트솔라비오G1340
의료용 부직조허난 야두 산업 유한회사, 유한회사;전혀 없습니다
의료용 부직조허난 야두 산업 유한회사, 유한회사;전혀 없습니다
마이크로 컴퓨터 단층촬영(및 마이크로; CT) 스캔코 메디컬 AGμ CT 45
단면 이미지 미믹스 20.0 (재슬라이스 기능)마실라이즈전혀 없습니다
바늘 홀더청두 시펑 유한회사.전혀 없습니다
Ob-R/렙틴 수용체 항체 (B-3)산타크루즈SC-8391
올림푸스 리서치 등급 전체 슬라이드 스캐닝 시스템 VS200청두 지식기술유한회사VS200
골막 엘리베이터청두 시펑 유한회사.전혀 없습니다
PIEZO1 항체노부스NBP1-78446
식염수 용액쓰촨 커룬 제약유한회사.전혀 없습니다
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