방법 논문

생체 내 생 체 내 자궁경부 림프관 수축성과 생쥐 림프관 수축성 및 림프 흐름 영상을 재현 가능한 장비

DOI:

10.3791/69482

⸱

2026년 4월 10일

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Biology, Saratov State University, 2Institute of Physics, Department of Optics and Biophotonics, Saratov State University, 3Department of Computer Science and Information Technology, Saratov State University, 4, Res Inst Intelligent Complex Syst, Fudan University, 5Potsdam Institute for Climate Impact Research

이 논문에서

요약

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이 논문은 경추 림프관과 림프류의 수축성을 생 체 내에서 연구하는 혁신적인 방법을 제시하며, 경추 림프관(cLV)의 다양한 생리적 기능을 시험하고, 뇌 배출 및 정리의 림프 조절 메커니즘 조절을 위한 치료 전략을 연구합니다.

초록

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cLVs의 수축성은 림프 흐름을 이끄는 원동력이자 뇌 독소 정화의 핵심 메커니즘입니다. 여기서는 cLVs의 수축성을 생 체 내 2광자 영상으로 측정하는 혁신적인 방법을 제시하고, 마우스에서 cLVs에서 림프류에 따라 적혈구가 장기간 제거되는 현상을 관찰하는 방법을 제시합니다. 구성 요소로는 쥐 목에 맞게 조정된 미니 온열 패드가 포함되어 있어 cLV 수축력과 림프 흐름을 유지하면서 영상 촬영 창을 최대 5시간까지 늘릴 수 있습니다; 습도 조절; 보호 케이스; 그리고 cLV의 안정적인 광학 시각화를 유지할 수 있는 위치 제어 시스템도 포함됩니다. 이 방법은 재현성과 다른 유형의 2광자 현미경 및 다양한 대물렌즈와의 호환성을 보장하며, 최대 500 μm 깊이의 고품질 이미지를 유지합니다. 프로토콜에는 정상적인 cLV 수축성을 제공하기 위한 생리적 환경을 유지하기 위한 수술적 준비 단계가 상세히 포함되어 있습니다.

서론

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경추 림프관(cLVs)의 수축력은 뇌 배출과 대사산물 및 독소로부터 림프관을 제거하는 데 핵심적인 역할을 합니다 1,2,3. cLVs의 주요 기능이 감소하면 알츠하이머병, 외상성 뇌손상, 뇌암 등 여러 뇌 질환이 동반되는 뇌 독소 정화 억제가 촉진됩니다(4,5,6,7,8,9). 따라서 cLV 수축력 연구는 뇌 배출과 정화의 림프 조절 메커니즘 조절을 위한 새로운 치료 전략 개발에 중요한 접근법입니다 10,11,12.

본 연구는 다양한 연령대의 쥐에서 cLV 수축력과 림프통을 실시간으로 2광자 영상으로 촬영하는 혁신적인 방법을 제시합니다. 이 장비의 중요한 구성 요소는 마이크로 가열 패드로, 동물의 목에 부착하면 집집 림프관의 수축 활동과 림프류 안정성을 유지하면서 최대 5시간의 연장 영상 촬영 시간을 제공합니다.

혈액 순환계는 특정 속도(인간의 경우 동맥에서 10mm/s, 시상동에서 13cm/s)로 다양한 혈관을 통과하는 반면, 림프관에 림프관이 림프로 채워지는 것은 빈 림프관 사이의 압력 구배가 증가하는 것과 대사 중 생성되는 간질액의 양에 따라 달라진다는 점을 주목해야 합니다. 14, 15, 16, 17, 18, 19. 동시에 림프관 내 림프류 속도는 0에서 1 mm/s 사이로 간헐적으로 변동합니다 20,21,22. 최근 인간을 대상으로 한 MRI 연구에 따르면 수막림프관(MLVs) 내 림프류 수치는 1-3 mm23입니다. 하지만 한 사람에서도 MLV의 림프류는 하루 중 시간대에 따라 달라지며 0에 이를 수 있다는 점을 유념해야 합니다. 따라서 림프관 내 림프류 흐름은 대사 과정의 속도에 따라 달라지고,이는 다시 온도에 따라 달라지기 때문에 일관성이 없습니다. 실제로 생화학적 반응의 속도는 온도에 의해 깊고 직접적으로 영향을 받으며, 따라서 림프관 자발적 수축에도 큰 영향을 미쳐 림프 배출과 수송에 영향을 미칠 수 있다 24,25,26.

따라서 체온 유지는 림프관의 생리적 환경을 보존하여 정상적인 수축력과 림프 흐름을 지원하는 데 중요한 조건입니다. 하지만 시중에서 구할 수 있는 가열판을 사용하는 것은 cLV가 위치한 깊고 광학 접근 가능한 목 부위의 필요한 온도를 보장하지 않습니다. 이는 특히 cLV 수축도와 림프류 2광자 영상에 중요한데, 이는 19°C의 추운 실험실에서 수행되기 때문이다. 이 광학 기법27에 필요한 온도는

이와 관련해, 대부분의 생체 내 연구에서 상업용 가열판을 사용하는 림프 수집 용관의 수축성은 3-5분으로 제한됩니다(최대 효과는 보통 몇 초 내에 관찰됩니다 3,28,29,30,31,32,33,34,35,36,37).그 이후에는 림프 충전과 수축력이 감소합니다. 이 접근법은 림프관 생리학의 관찰 시간을 크게 제한하고, 수축력과 림프 흐름에 대한 장기적 영향을 평가하는 것을 불가능하게 만들었으며, 이를 통해 우리는 쥐 목에 적합한 미니 온열 패드를 개발하여 cLV 수축성과 안정적인 림프류 보존 시 영상 촬영 시간을 최대 5시간까지 늘리는 것을 목표로 했습니다.

이 장치의 또 다른 구성 요소는 습도 조절 및 위치 제어 시스템이 있는 보호 케이스로, 물 침지 없이 cLV의 안정적인 시각화를 유지할 수 있게 하며, 0.17mm 커버 유리를 보정한 장거리 공기 침입 렌즈(예: CFI Plan Apochromat Lambda D 10x (MRD70170) 및 CFI Plan Apochromat Lambda D 20x (MRD70270) 사용될 때 고해상도 이미지를 보존할 수 있습니다.

제안된 방법은 온도/습도 조절과 렌즈로부터의 작업 거리 등 환경 특성을 고려하여 다른 유형의 2광자 현미경 및 다양한 대물렌즈 범위와의 호환성을 보장하며, 최대 500 μm의 깊이와 최대 5시간의 시간 창을 가진 고품질 이미지를 유지하여 쥐에서 cLV와 림프류 수축성을 장기간 고품질로 분석할 수 있게 합니다.

cLV가 경동맥 분기점 근처에 위치한 바로수용기가 위치한 해부학적 위치를 고려하는 것이 중요합니다. 압력수용기에 미치는 기계적 충격은 혈압과 심박수의 불안정을 초래합니다. 이로 인해 정수압에 큰 변화가 생기고, 그 결과 림프류39의 방해가 발생할 수 있습니다. 따라서 제안된 방법에는 심부 경동맥의 분기와 혈압 변화에 기계적 충격을 방지하기 위해 cLV를 부드럽게 분리하는 수술 프로토콜에 대한 상세한 설명이 포함되어 있습니다. 이는 뇌 내 림프류 장애, 결과적으로 cLV의 림프류 및 수축력 저하로 이어질 수 있습니다.

결과는 쥐에서 나이 증가에 따른 cLV 수축력 감소와 치료 광자극 효과에 대한 민감도를 보여줍니다. 더욱이, 장기 관찰(5시간 이상) 처음으로 cLV가 뇌 독소 정화에 중요한 림프 경로인 오른쪽 측심실에서 적혈구를 제거하는 터널 역할을 한다는 것을 명확히 입증했습니다(1,2,3). 전반적으로, cLV 수축성 및 림프류 생체 내 2광자 영상 촬영 방법은 뇌 배출 및 제거 조절, 대사산물 및 독소 제거, 그리고 cLV 생리학 조절을 위한 새로운 치료 기술 시험 등 cLV의 다양한 생리학적 기능에 대한 전임상 연구를 목적으로 합니다.

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프로토콜

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모든 절차는 실험동물 관리 및 사용 지침, 과학적 목적에 사용되는 동물 보호에 관한 지침 2010/63/EU, 그리고 러시아 과학고등교육부의 지침(1984년 11월 13일 제742호)에 따라 수행되었으며, 이는 사라토프 주립대학교 생명윤리 위원회(의정서 제7호)에서 승인되었습니다. 22.09.2022).

참고: 이 프로토콜에서 사용되는 모든 재료에 대한 자세한 내용은 재료표 를 참조하십시오.

1. 마우스 고정 기술 장치

  1. 강철 광학 레일(SOR, 길이 270 mm, 너비 43 mm; 그림 1A) 설치물의 기반으로.
  2. SOR 위에 두 개의 기둥 홀더(3PH-25)를 서로 175mm 간격으로 설치합니다(그림 1B). 장착 포스트(3MP, 직경 12mm)를 3PH-25 안에 넣고 M6 나사로 단단히 고정하세요(그림 1C).
  3. 포스트 칼라(3PC)를 두 마운팅 포스트(3MP)에 부착하세요 (3MP; 그림 1D). 경추림프관의 광학 모니터링 시 지속적으로 식염수 용액을 공급하여 카테터 고정을 위해 포스트 칼라가 필요합니다.
    참고: 이는 수술 후 광학 모니터링을 복잡하게 만들 수 있는 혈액을 주기적으로 세척하기 위해 필요합니다.
  4. 직각 고정 포스트 클램프(3RPC-12)를 3MP 장착 포스트 중 하나에 부착하고 M6 나사로 단단히 고정하세요(그림 1H).
    1. 장착 포스트(직경 12mm)를 3RPC-12의 측면 구멍에 삽입하세요(그림 2B).
      참고: 장착 포스트는 비수중 침수 2광자 렌즈의 보호 커버를 고정하기 위해 필요합니다.
    2. 3D 프린터로 출력한 홀더를 측면 마운팅 포스트에 부착하고, M3 나사 두 쌍으로 단단히 고정하세요(그림 2C).
    3. UV 경화 접착제를 사용해 직경 12mm의 커버 유리를 3D 프린터로 인쇄한 보호 케이스 하단에 부착합니다(그림 2D, F). 그 후 M4 나사 너트 쌍을 사용해 보호 커버를 홀더에 부착합니다(그림 2).
  5. 수직 이동용 정밀 팬터그래프 테이블 02TV004(그림 1E)를 두 개의 테이블 클립(3TC5)과 나사, 너트, 와셔 세트 M6(그림 1F)를 사용해 SOR 베이스에 설치합니다.
  6. 3D 프린팅 케이스(길이 155mm, 너비 110mm)를 테이블 위에 놓고, 식염수 용액 축적을 위한 저장소로 사용됩니다(그림 1G).

2. 가열 요소

  1. 주변 장치 조립.
    1. 가열 요소 1과 연결된 전선의 연결 지점을 얇은 실리콘 층으로 덮으세요(그림 3). 온도 센서 1을 매트에 고정하고 실리콘으로 밀봉하세요(그림 3B).
    2. 가열 요소와 온도 센서의 전선을 다선 케이블에 납땜하고, 연결 지점을 실리콘으로 채운 뒤 수축 랩으로 닫습니다(그림 3).
    3. 가열 요소 2와 온도 센서 2를 폼 롤러에 넣으세요(그림 4).
  2. 제어 장치 조립
    참고: 통제 https://disk.yandex.ru/d/06BURfMlQpl0Jg 케이스 인쇄용 다운로드 파일 링크.
    1. 제어 장치의 케이스를 3D 프린터로 출력합니다(그림 5B).
    2. 전원 케이블과 전원 버튼 연결 커넥터를 케이스 벽에 고정하세요(그림 5C,D에 나와 있습니다).
  3. 인클로저 내부에 24V DC 전원 공급 장치, DC 스텝다운 컨버터, 그리고 2개의 MOSFET 모듈을 설치하세요(그림 5A, G, H, I).
  4. 회로를 조립하려면 다음 단계를 따르세요(그림 6).
    1. 스텝다운 컨버터를 소스에 연결하고 전압을 9V로 설정하세요(그림 6).
    2. Arduino UNO의 VIN 핀을 컨버터의 OUT+ 커넥터에, GND를 OUT 커넥터에 각각 연결합니다(그림 6).
    3. 전원 공급 장치의 V+ 핀을 MOSFET 모듈의 VIN+ 핀에, V 핀을 VIN 핀에 각각 연결합니다(그림 6).
    4. 히팅 요소 1의 V 핀+를 모듈 MOSFET 1의 VOUT+, V-를 VOUT에 각각 연결합니다(그림 6).
    5. 가열 요소 2와 MOSFET 2에 대해서도 단계를 반복합니다(그림 6).
    6. MOSFET 1과 2 모듈의 GND 핀을 Arduino UNO의 GND에, PWM MOSFET 1을 Arduino UNO의 D11 커넥터에, PWM MOSFET 2를 D10 커넥터에 각각 연결합니다(그림 6).
    7. 온도 센서 1의 VIN 핀을 Arduino UNO의 GND 커넥터에, VIN+를 Arduino UNO의 5V 커넥터에, SIG를 D3에 연결하세요(그림 6).
    8. 온도 센서 2의 SIG 접점을 Arduino UNO의 A1에 연결하고, GND 센서를 Arduino UNO의 GND에 연결하며, 100 kΩ 풀업 저항기도 연결하세요(그림 6).
  5. Arduino UNO와 뚜껑 하우징 안의 키보드 화면을 고치세요(그림 7I).

3. 온도 제어 소프트웨어 가이드

  1. Arduino 스케치(.ino 파일)를 다운로드하여 Arduino 개발 환경(IDE 버전: 2.3.5-nightly-20241212)에서 열어보세요.
  2. 올바른 COM 포트를 선택하고 펌웨어를 다운로드하세요. 인터페이스에는 두 개의 버튼이 있습니다. 이동하려면 좌우 버튼을 사용하세요(그림 7B, D). 선택 표시기는 열의 왼쪽에 위치해 있습니다(그림 7F).
  3. 온도 선택 필드는 화면 왼쪽 열에 위치해 있습니다(그림 7H). 위와 아래 버튼을 사용해 조정하세요(그림 7C).
  4. START/종료 필드는 화면 오른쪽 열에 위치해 있습니다(그림 7G). 이 열을 선택하려면 키보드의 오른쪽 버튼을 누르고 선택(Select)을 누르세요(그림 7A). 프로세스가 실행 중일 때 활동 표시기가 깜빡이고, RUN 버튼의 라벨이 OFF로 바뀝니다.

4. 동물을 기술 장치에 고정하기

참고: 실험은 수컷 BALB/c 마우스(25-28g, 2, 18, 24개월)를 대상으로 수행되었으며; 각 그룹에는 7마리의 동물이 있었습니다.

  1. 케타민과 자일라진(각각 100 mg/kg; 10-156 mg/kg) 혼합물을 준비하여 쥐의 무게에 따라 복강내 주사로 주입합니다.
  2. 수술 중 눈알이 건조해지는 것을 막기 위해 눈꺼풀에 연고를 바르세요. 필요하다면 이 과정을 반복하세요.
  3. 뒷다리를 빼고 꼬리를 접는 반사가 멈추면, 쥐를 등 뒤의 가열 요소 위에 올려 복부 부위에 접근할 수 있게 합니다.
  4. 제어 장치를 콘센트에 연결하세요(입력 전압 범위 175-240 V AC, 주파수 범위 50-60 Hz, AC 전류 1.8A/230 V AC). 장치의 작동 온도를 37-38 °C로 설정하세요.
  5. 의료용 테이프를 사용해 동물을 테이블 표면과 평행하게 고정하고, 머리를 시상축에 대해 각도를 맞춰 목의 오른쪽 또는 왼쪽이 롤러 위에 놓이도록 합니다(그림 8A).
    참고: 쥐 머리의 고정은 실험 조건에 따라 목의 오른쪽 또는 왼쪽을 현미경 렌즈 쪽으로 약 5mm 높이로 올려야 합니다. 따라서 dcLN과 cLV의 면적은 기관과 거의 같은 수준에 위치하게 됩니다.
  6. 결찰을 윗 앞니에 감아 장치 뒤쪽에 부착하여 의료용 테이프를 사용해 동물의 체온을 유지하세요.
  7. 면도기를 사용해 목 부위의 헤어라인 부위를 면도하세요. 면도 후 남은 털을 제거한 후, 멸균 구역을 보호하기 위해 동물을 덮으세요. 수술 및 이후 광학 검사를 위해 절개 부위에 0.5 - 1 mL의 리도카인/부피바카인(각각 1 mg/mL 및 0.25 mg/mL)을 피하 주입합니다.
    1. 1차 소독 시에는 알코올 면봉으로 피부를 탈지하고 부분적으로 소독한 후, 소독 치료를 위해 클로르헥시딘 0.5% 또는 요오드 2% 용액을 피부에 바릅니다. 모든 멸균 과정을 두 번 더 반복하세요.
  8. 직선 해리 가위를 사용해 하악에서 쇄골 부위까지 약 2cm 길이의 종방향 절개를 하여 목 피부 피부 절개술을 시행합니다(그림 8B).
  9. 곡선 핀셋을 사용해 미세수술용 곡선가위를 이용한 근막절개술을 시행하여 침샘과 목의 표재 근육을 밀어 벌려 흉쇄유돌근을 노출시킵니다. 출혈을 막기 위해 눈에 보이는 혈관을 손상시키지 마세요. 수술 부위를 식염수로 지속적으로 적셔 과도한 조직 손상을 예방하세요.
  10. 미세수술 가위를 사용하여 흉쇄유돌근의 근절개술을 시행하여 기관과 경동맥 사이의 부위에 접근할 수 있도록 합니다.
  11. 근육과 근막을 계속 확장하고 근막 절개술을 시행하여, 5-7mm 깊이에서 심부 경추 림프절과 구심성 및 원심성 림프관을 위치시킵니다(그림 8C).

5. 현미경으로 쥐를 고정하기

  1. 고정된 동물이 있는 장치를 현미경의 이동식 테이블 위에 올려놓고 M6 나사로 단단히 연결하세요. 이는 이동식 테이블에 영구적인 설치 위치를 보장하기 위해 필요합니다.
  2. 제어 장치를 콘센트에 연결하세요(입력 전압 범위 175-240 V AC, 주파수 범위 50-60 Hz, AC 전류 1.8A/230 V AC). 장치의 작동 온도를 36-37°C로 설정하세요.
  3. 생리식염수가 채워진 카테터를 의료용 테이프로 마운팅 포스트에 부착하세요.
  4. 동물 머리 옆면의 가열 요소 아래에 직경 1cm 롤러를 넣어 이동식 현미경 테이블에 대해 45° 기울어짐을 보장합니다. 이는 경추 림프관을 수평 위치로 놓고 기관에 가해지는 압력을 줄이기 위해 필요합니다.
  5. 수술 후 고정 카테터를 목 부위에 열어 놓아 동물의 쇄골 옆에 위치시킵니다.
    1. 식염수 공급을 켜고, 열린 목 부위가 완전히 식염수로 채워질 때까지 기다립니다.
    2. 목 부위에 생리식염수 용액을 채운 보호 케이스를 내리면 림프관 부위가 중심에 위치하도록 하고, 동물의 기관이 압박되지 않도록 합니다(그림 9A).
    3. 보호 케이스를 설치할 때는 쌍안경을 두 광자 현미경에 연결하는 것이 권장됩니다. 기관에 보호 케이스를 씌워서 기관이 눌리지 않도록 하세요. 보호 케이스를 내릴 때 공기 방울이 쌓이지 않도록 주의하세요. 보호판이 목 윗 근육에 위치해 cLV를 누르지 않도록 하여 가열된 식염수가 혈관으로 흐르도록 하여 cLV의 기계적 변형을 방지해야 합니다.
  6. 비물 잠수형 2광자 렌즈를 보호 케이스 안으로 이 렌즈의 작동 거리와 일치하는 깊이로 내린 후, 경추 림프관의 2광자 시각화를 수행합니다(그림 9B).
    참고: 첫 번째 스캔을 실시할 때는 림프관이 전체 길이에 걸쳐 완전한 구조를 갖추고 쥐가 호흡할 때 유동적인지 반드시 확인해야 합니다. 이는 보호막에 의해 변형되거나 눌리지 않았다는 의미입니다.

6. cLV 수축력의 2광자 생체 내 모니터링

참고: 2광자 이미지는 다광자 현미경(펄스 레이저, 여기 파장 970 nm)을 사용해 얻었습니다. 이 이미지는 20배(f/0.75)의 해상도로 얻어졌습니다. 각 이미지는 1개의 시야각 확대 x 3.0(212.13 × 212.13 μm)으로 구성되었으며, 512 x 512 점으로 구성되어 있습니다. cLV의 이미지는 초당 30프레임, 1분 분량의 영상을 촬영하여 얻었습니다. 2광자 이미지는 한 채널에서 488nm 파장의 형광 LYVE-1 in cLVs, 525nm 파장에서 방출된 방식으로 얻어졌습니다.

  1. cLV 직경 분석 및 자동 수축성 평가
    1. 관심 영역(ROI)에서 30분 영화, 30프레임/초, 3배 배율로 cLV의 직경을 측정하세요. 맞춤형 Python 코드를 사용해 림프류 계산에 사용되는 동일한 구간에 대한 cLV 직경의 시간 프로파일을 측정합니다.
    2. сLV의 반대편 벽에 해당하는 두 점을 수동으로 선택하세요. Lucas-Kanade 광유동 알고리즘(OpenCV의 calcOpticalFlowPyrLK 함수)을 사용하여 후속 프레임에서 위치를 결정하며, 이 알고리즘은 측정에 대해 서브픽셀 정확도를 제공합니다. 직경을 추적된 점들 사이의 거리를 픽셀에서 마이크로미터로 변환한 값으로 계산합니다. 슬라이딩 윈도우 중앙 분리대 필터를 사용해 움직임 아티팩트를 제거하세요. 한 ROI에는 최소 20개의 직경 측정이 있어야 합니다.
    3. 맥동의 내부 주파수를 구하기 위해 직경의 평활화된 시계열을 사용한다. SciPy 라이브러리의 find_peaks 함수를 사용하여 신호의 최대 값과 최소값을 자동으로 감지할 수 있으며, 이 함수는 진폭 임계값과 피크 간 최소 거리를 기반으로 신호의 국소 극단을 식별합니다.
    4. 분석에서 평균 직경의 3% 미만 진폭과 2초 미만의 간격을 가진 cLV 수축은 제외합니다. 30분 간격 동안의 평균 빈도를 분당 수축 빈도로 계산하세요.

7. cLVs의 림프류 2광자 분석

참고: 림프류 분석은 만성 카테터를 통해 자가혈혈이 우측 외측심실로 유입된 후 5시간 동안 cLV에서 적혈구의 이동을 통해 평가되었습니다.

  1. 1% 이소플루란으로 마우스를 마취하세요(40에 발표된 프로토콜 참조). 40에 설명된 프로토콜에 따라 카테터를 오른쪽 외측 심실에 삽입하세요.
  2. 7.1, 7.3-7.5 단계에 따라 cLV의 2광자 in vivo 영상 촬영을 위해 마우스를 준비합니다.
  3. 혈액 채취 및 주입 시 응고를 방지하기 위해 헤파린으로 미리 플러시된 멸균 마이크로 원심분리기 튜브에 10 μL 바늘로 혈액을 찔러 꼬리정맥에서 혈액을 채취합니다.
  4. 오른쪽 측심실에 혈액을 주입합니다(AP = −0.5 mm; ML= −1.06 mm; 마이크로인젝션 펌프를 사용하여 분당 0.1 μL의 속도로 DV = 2.5 mm를 사용합니다.
  5. cLVs에서 적혈구 이동에 대한 2광자 분석을 수행하세요. 41,22에 발표된 프로토콜을 사용하여 림프유량을 계산하세요.

8. cLV 수축력의 광생체조절

  1. cLV의 PBM은 이전에 발표된40의 기술과 프로토콜을 사용하세요.

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결과

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보호 케이싱의 사용은 수술 부위를 외부 환경으로부터 격리하여 림프관과 주변 조직을 생체 내 장기 모니터링에 가장 중요한 장점으로 제공합니다. 이는 카테터를 통해 생리식염수 용액을 지속적으로 공급하면서 림프관과 주변 조직의 생리식염수 용액 공급 상태를 유지할 수 있습니다. 또한, 현미경 슬라이드에 부착되고 림프관 주변 조직과 밀접하게 기계적 접촉을 유지하기 때문에, 보호 덮개는 동물의 자연 호흡과 심장 활동 중 관찰 영역의 기계적 안정성을 보장하며, 관찰 대상 혈관의 총 움직임을 5시간 동안 몇 분의 1마이크로미터 이하로 제한합니다.

제안된 기술은 광생체조절(PBM)의 자극 효과에 대한 감도 차이를 조사한 연구에서 테스트되었습니다(그림 10). 이 선택은 이전에 발표된 일련의 체외 연구 결과와 관련이 있는데, 이 결과들은 연령 관련 뇌 ...

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토론

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림프관 생리학 연구는 비침습적 방법을 사용하면서도 정상적인 수축력과 안정적인 림프 흐름을 가능하게 하는 특별한 환경 조건을 유지해야 합니다. 림프관 기능을 연구하는 대부분의 방법은 수축력의 광학 모니터링과 림프류 속도 평가에 기반합니다. 3,28,29,30,31,32,33,34,35,36,37,38

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공개 사항

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저자들은 공개할 것이 없습니다.

감사의 글

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이 연구는 러시아 과학재단(번호 23-75-30001)의 보조금으로 지원받았습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
3D 프린터Bambu Lab, 중국P1S
5핀 커넥터Connfly electronic (Zhenqin), 중국DS1110-01
열수축 튜브 세트Jupiter, 중국JP7230-01
Arduino IDEArduino LLC2.3.5-nightly-20241212
BALB/c 마우스"Andreevka" 지점 FSBIS SCBT FMBA, 러시아3-15-16수컷, 6개월
ChlorhixedinBIOPHARMACEUTICAL PLANT, 러시아N/A
Dumont 포스셉스Stoelting, 미국52100-07
Evans Blue 염료Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, 미국N/A
파인 포스셉스Stoelting, 미국52102-02P
HamiltonHamilton Bonaduz AG, 스위스29 G 바늘
발열 요소중국LFH-9415sg
인슐린 바늘INSUPEN, 이탈리아31G, 0.25mm*6mm
케타민MOSCOW ENDOCRINE PLANT, FSUE, 러시아전신 마취
키패드 쉴드diymore, 중국1602 LCD 키패드 쉴드
리도카인ORGANICA, 러시아N/A진통제
잠금 스위치 버튼중국N/A
금막 저항기TZT, 중국N/A
마이크로 해부용 바나스 스프링 가위Stoelting, 미국52130-00P
MOSFET 모듈중국MOSFET 모듈 D4184
마운팅 포스트Standa, 리투아니아3MP, 직경 12 mm
마운팅 와이어AB retail, 러시아HB-1
비둘기 팁Stoelting, 미국52108-83P
3D 프린터용 플라스틱Bambu Lab, 중국A00-D0-1.75-1000-SPL.
포스트 칼라Standa, 리투아니아3PC
포스트 홀더Standa, 리투아니아3PH-25
전원 커넥터RUICHI, 중국AC-015
전원 공급SANPU, 중국PS200-H1V24
수직 이동을 위한 정밀 파노그래프 테이블"레이저 부품", 러시아02TV004
직각 고정 포스트 클램프Standa, 리투아니아3RPC-12
나사 M3Standa, 리투아니아N/A
나사 M4Standa, 리투아니아N/A
나사 M6Standa, 리투아니아N/A
면도기Braun, figure-materials-13310s 시리즈
염화나트륨Kraspharma, 러시아N/A
솔더금속 분말 생산, 러시아주석-납 솔더 61
솔더링 플럭스Solins, 러시아LTI-120 22 ml 브러시 포함
솔더링 스테이션AOYUE, 중국N/A
솔더링 스테이션AOYUE, 중국N/A
강철 광학 레일(SOR)Standa, 리투아니아N/A
스텝다운 전압 변환기RUICHI, 중국EM-825
직선 해부 가위Stoelting, 미국52132-10P
온도 센서Liludin, 중국DS1820
테트라사이클린JSC Tatkhimfarmpreparaty, 러시아안과 연고
컨트롤러Arduino, 중국UNO R3
집게Stoelting, 미국52100-03
이광 현미경Nikon, 일본A1R MP
와이어Partner-Electro, 러시아P020G-0305-C050
자일라진"Alfasan International B.V.", 네덜란드근육 이완제
카테터Scientific Commodities Inc., 미국PE-10, 0,28 mm ID × 0,61 mm OD

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