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연구 논문

웬양딩촨탕은 M2 대식세포 주도의 섬유아세포 활성화를 억제하여 천식 기도 재형성을 완화합니다

195 조회수

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DOI:

10.3791/69737

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2026년 3월 24일

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1Department of Traditional Chinese Medicine, The Third Affiliated Hospital of Qiqihar Medical University, 2Department of Respiratory, The First Affiliated Hospital of Heilongjiang University of Chinese Medicine, 3Department of Clinical Pharmacy, The Third Affiliated Hospital of Qiqihar Medical University, 4Department of Central Laboratory, The Third Affiliated Hospital of Qiqihar Medical University, 5Department of Stomatology, The Third Affiliated Hospital of Qiqihar Medical University, 6Department of Magnetic Resonance, The Third Affiliated Hospital of Qiqihar Medical University

이 논문에서

요약

이 글은 원양딩촨 데코션이 M2 대식세포 분극을 억제하여 폐섬유아세포 섬유증을 조절하는 연구를 설명합니다.

초록

천식에서 기도 재형성 및 기전에 대한 원양딩추안 탕(WYDCT)의 효과를 연구하기 위함. IL-4는 RAW264.7 대식세포의 M2 분극을 유도하는 데 사용되었고, 편극된 대식세포는 WYDCT로 처리되어 쥐 폐 섬유아세포에 미치는 영향을 조사하였습니다. 편극된 RAW264.7 세포는 다양한 처리를 받은 후 섬유아세포와 공동 배양하였습니다. M1 및 M2 마커 수준, 세포 형태, IL-6 농도를 평가하였다. STAT3 단백질 수치를 분석하였다. 섬유아세포 생존성, 증식, 콜로니 형성, PCNA 발현, 피브로넥틴, COL1A1, α-SMA의 발현은 실시간 PCR, 웨스턴 블롯, CCK-8, Edu, 면역형광, 콜로니 형성 등 다양한 검사법을 사용하여 분석하였습니다. WYDCT는 RAW264.7 세포에서 IL-4에 의해 유도된 형태학적 변화를 되돌리고, M2 마커(Arg-1, CD206)와 IL-6 수치를 감소시켰으며, RAW264.7 세포에서 STAT3 발현을 감소시켰으며, IL-6 보충은 M2 마커에 대한 WYDCT의 효과를 회복시켰다. 더 나아가, WYDCT는 섬유아세포의 생존 및 증식을 억제하고, PCNA 발현을 감소시키며, 섬유증 표지자(피브로넥틴, COL1A1, α-SMA)를 감소시켜, WYDCT가 대식세포 M2 분극을 억제함으로써 폐 섬유아세포의 생존 가능성, 증식 및 섬유화를 억제하는데, 이 과정에서 IL-6/STAT3 신호 전달 경로가 핵심 역할을 할 수 있습니다.

서론

천식은 기관지 천식이라고도 하며, 호흡 통로에 지속되는 염증성 질환입니다. 알레르기 유발 물질 노출, 추운 온도, 물리적 및 화학적 자극과 자주 연관되며, 염증 세포 침투, 기도 가역적 수축, 점액 분비, 기관지 경련2가 특징입니다. 현재 전 세계적으로 최소 3억 명의 천식 환자가 있으며,3년 차마다 유병률이 증가하고 있습니다. 2015년에는 40만 명이 천식으로 사망하여 심각한 전 세계 보건 문제로 남았습니다. 중국도 같은 문제에 직면해 있으며, 연구에 따르면 천식 유병률이 4.2%로 약 4,570만 명의 성인 환자를 차지하고 있으며, 선진국의 6.7에 비해 통제율이 낮습니다. 이 질환으로 고통받는 개인들의 복지는 크게 훼손되어 가족들에게 상당한 재정적 부담을 안겨줍니다.

기도 재형성은 조절하기 어려운 천식 치료에서 매우 중요한 요소로 여겨집니다. 따라서 만성 지속성 천식 치료가 핵심 과제가 됩니다. 임상 실무에서는 흡입 코르티코스테로이드와 기관지 확장제를 병용하여 환자의 증상을 효과적으로 완화할 수 있습니다. 하지만 이러한 치료법들은 부작용이 일부 있으며, 일부 환자에게는 증상 개선에 덜 효과적일 수 있습니다. 또한, 천식은 약물 중단 후에도 재발하는 경향이 있습니다. 연구에 따르면 폐섬유아세포의 활성화는 천식 진행 중 기도 재형성과 관련이있습니다. 활성화 시 폐 섬유아세포는 표현형 변형을 거치고 기도 재형성의 핵심 병리학적 특징인 세포외 기질(ECM) 침착을 촉진하는 주요 단백질을 분비합니다. 구체적으로, 피브로넥틴은 ECM 조립의 초기 기초 역할을 하여 다른 매트릭스 구성 요소의 동원 및 접착을 촉진합니다; COL1A1(제1형 콜라겐 α1 사슬)은 ECM의 주요 구조 단백질이며, 과도한 축적은 기도벽 두꺼움과 강성을 유발합니다; α-SMA(α-평활근 액틴)는 섬유아세포가 강한 수축 및 분비 능력을 가진 근섬유아세포로 전환되는 과정을 나타내며, ECM 침착과 기도 섬유화를 더욱 가속화합니다.

IL-6는 STAT3 경로 활성화에 가장 중요한 세포질 신호 인자입니다. IL-6 수치가 상승하면 STAT3 경로가 활성화됩니다. 천식 마우스 폐 조직에서는 STAT3와 인산화된 mRNA 및 단백질 발현이 유의미하게 증가합니다. IL-6/STAT3 신호 전달 경로는 천식 치료의 표적 중 하나입니다. 연구에 따르면 IL-6/STAT3 신호전달 경로의 활성화가 천식에서 기도 염증과 관련이 있으며, 이 경로를 억제하면 기도 염증이 줄어들 수 있음이 확인되었습니다12,13. IL-6/STAT3는 대식세포의 M2 분극과도 관련이 있습니다. 해외 연구들은 IL-6 발현이 STAT3 활성화를 유의미하게 감소시키며, 이는 종양 표면 수치 감소, 증식 감소, 간 내 M2 대식세포 수치 감소와 상관관계가 있음을 보여주었다14.

대식세포로 알려진 면역 세포는 고전적 활성화(M1)와 대체 활성화(M2)라는 뚜렷한 표현형으로 분류할 수 있으며, 각각 고유한 역할을 수행합니다15. M1 대식세포는 염증 반응과 조직 손상을 유도할 수 있으며, M2 대식세포는 세포 증식을 촉진하고 상처 치유와 조직 복구를 촉진합니다. 연구에 따르면 천식에서 기도 재형성은 M2 대식세포와 관련이 있습니다. 시험관 내 실험에서 IL-4로 대식세포의 M2 분극을 유도하면 α-SMA 양성 세포의 증식 능력이 유의미하게 향상됨이 입증되었습니다17. M2 대식세포 분극 억제는 천식에서 기도 재형성 치료에 효과적인 접근법입니다.

천식은 전통 중의학에서 '샤오빙(Xiao Bing)' 범주에 속합니다. 샤오빙의 병리학적 요인은 주로 가래와 관련되어 있습니다. 가래 생성은 내장에서 음양의 불균형과 외부 병원체, 식습관, 병후 상태 등 외부 요인이 체액 이동에 영향을 미치며 정체와 축적을 초래합니다. 천식 치료에서 전통 중의학의 기전을 계속 탐구함에 따라, 전통 중의학이 기도 염증 완화, 과도한 점액 분비 감소, 기도 재형성 억제에 유의미한 효과를 낸다는 연구가 점점 더 많이 입증되고 있습니다18,19. 샤오빙에서는 주로 폐가 영향을 받고, 그 다음으로 비장과 신장이 영향을 받습니다. 샤오빙 환자는 폐기가 부족하고 외부 병원체에 대한 방어력이 약해 폐기 전파가 상실되고 장기적이고 반복적으로 양기가 손상되어 폐양결핍이 발생합니다. 양 결핍은 체액의 비정상적인 순환을 일으켜 가래로 응결합니다. 장기 발작 시 냉가래는 비장과 신장의 양에 영향을 미쳐 폐-비장-신장 양 결핍, 음양 불균형, 체질 과도한 우세 또는 결핍, 체액 순환 이상 패턴을 초래합니다. 폐는 체액을 분산시킬 수 없고, 비장은 물과 정수를 변환할 수 없으며, 신장은 체액을 기화시키고 변환하지 못해 가래가 응축되고 정체가 형성되어 천식으로 나타납니다. 따라서 양 부족이 샤오빙의 근본 원인이며, 가래 정체가 특징입니다. 문양정추탕은 에피미디엄(15g), 에페드라(가공됨)(10g), 인삼(15g), 황기(15g), 은행잎(15g), 플로스 파르파라에(15g), 쓴 살구 알갱이(15g), Pinellia ternata(가공됨)(10g), Schisandra chinensis(10g), 지렁이(10g), 페르시카(10g), 감초(가공됨)(10g) 등 12가지 중국 약초로 이루어져 있습니다. 이 한방은 『사성중묘방』에 나오는 딩천탕의 수정된 공식에서 유래했으며, 양을 따뜻하게 하고, 기를 강화하며, 가래를 해소하고, 혈액순환을 촉진하며, 기침과 천식 완화 효과를 가지고 있습니다. 이 치료의 임상적 효능이 입증되었으며, 이는 천식에서 기도 재형성 문제를 해결하기 위한 현재의 실험적 연구를 촉진하고 있습니다.

흡입형 코르티코스테로이드, β2 작용제, IgE 또는 IL-5를 표적으로 하는 단클론 항체 기반 생물학적 제제와 같은 현재 천식 약물 치료와 비교할 때, 원양정추당(WYDCT)은 다표적적이고 더 안전한 치료 전략을 제시합니다. 기존 코르티코스테로이드는 기도 염증을 효과적으로 완화하지만, 면역 억제, 호르몬 불균형, 금단 시 재발과 같은 부작용과 연관되어 있습니다. 생물학적 제제는 더 특이적이긴 하지만, 비용이 많이 들고 특정 천식 표현형에 한정됩니다. 반면, 전통 중국 의학의 '양 따뜻하게 하고 가래를 해소한다'는 이론에서 유래한 WYDCT는 임상 및실험 연구에서 입증된 바와 같이 면역 균형 조절, 기도 염증 감소, 기도 재형성 억제에 포괄적인 효과를 발휘합니다. 다성분 조성은 대식세포 분극, 섬유아세포 활성화, 사이토카인 방출을 동시에 조절하여 천식 병리에 더 넓고 잠재적으로 지속 가능한 개선을 제공할 수 있습니다.

본 연구에서는 12가지 허브를 고정된 전통 비율로 추출한 원양정천탕(WYDCT)을 최종 1g/mL(원약 환산액)로 농축한 후 세포 배양용으로 여과하였습니다. 추출물은 50, 100, 200 μg/mL의 농도로 적용되었으며, 이는 세포 독성 없이도 약리학적 활성을 유지하기 위해 예비 세포 생존성 검사를 기반으로 선정되었습니다. 시험 관 내 모델은 IL-4에 의해 유도된 M2 분극과 마우스 폐 섬유아세포(L929 세포)와의 공동 배양을 포함하여, 대식세포가 섬유아세포 활성화와 섬유증 관련 반응에 미치는 영향을 평가할 수 있게 했습니다. 이러한 세부 사항은 기도 재형성에서 WYDCT의 선량-반응 특성과 기전적 경로를 조사하는 향후 연구를 위한 재현 가능한 틀을 제공합니다.

위 결과를 바탕으로 우리는 문양정추탕이 대식세포의 M2 분극을 억제하고 섬유아세포의 활성화를 억제함으로써 천식에서 기도 재형성 효과를 발휘한다고 추측합니다.

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프로토콜

이 연구는 인도적 동물 처우에 관한 국제적, 국가적, 기관적 지침을 준수하고 관련 법률을 준수하여 수행되었습니다. 구체적으로, 쥐를 이용한 모든 시술은 치치하르 의과대학 제3부속병원 동물윤리관리 위원회(AECC-2022-009)의 승인을 받았습니다. 쥐들은 표준 실험실 환경에서 사육되었으며, 음식과 물을 자유롭게 제공받았으며, 고통을 최소화하기 위한 모든 노력이 기울어졌다. 인도적 평가 지표가 연구 전반에 걸쳐 설정되고 모니터링되었습니다.

1. WYDCT 추출물 제제

문양정추탕의 12가지 허브는 전통적인 비율에 따라 무게를 재졌습니다: 에피미디엄(15g), 가공된 에페드라(10g), 인삼(15g), 황기(15g), 은행잎(15g), 플로스 파르파라에(15g), 쓴 살구 알갱이(15g), 가공된 피넬리아 테르나타 (10g), 시산드라 치넨시스 (10g), 지렁이(10g), 페르시카(10g), 그리고 가공된 감초(10g)를 사용했습니다.

증류수의 10배를 넣고 혼합물을 30분간 끓였습니다. 추출은 두 번 반복되었고, 여과액들이 혼합되었다. 결합된 추출물은 감압 하에서 조약제 상당량 농도인 1 g/mL로 농축되었습니다. 추출물을 0.22 μm 막을 통과시켜 견적을 내어 −20 °C에서 보관했습니다. 작업 농도(50, 100, 200 μg/mL)는 사용 직전 희석하여 준비되었습니다.

2. 세포 배양과 M2 분극

RAW264.7 세포(ATCC, 미국)는 10cm 접시당 1× 10⁶ 세포 밀도로 해동되어 10 mL DMEM에 10% 태아 소 혈청, 100 U/mL 페니실린, 100 μg/mL 스트렙토마이신을 보충하여 시딩하였습니다. 세포들은 37°C에서 5% CO₂가 포함된 습기 환경에서 24시간 배양되어 80%-90% 수합에 도달했습니다.

배양지는 20 ng/mL IL-4가 포함된 신선한 DMEM으로 교체되었고, 세포를 추가로 24시간 배큐하여 M2 분극을 유도했습니다. 인큐베이션 후, 세포는 PBS로 두 번 세척한 후, WYDCT 추출물(최종 농도에 희석된 10 mg/mL 스톡 용액)으로 24시간 처리했습니다. IL-6 보충 실험에서는 WYDCT 치료 중에 50 ng/mL IL-6를 추가하였습니다.

0.1% DMSO로 처리된 세포가 음성 대조군으로 작용했습니다. 세포 형태를 거꾸로 현미경으로 관찰하고 대표적인 이미지를 촬영했습니다.

3. 마우스 폐 섬유아세포의 분리 및 배양

쥐들은 승인된 윤리 프로토콜에 따라 안락사되었습니다. 폐엽을 채취해 행크스의 차가운 균형 잡힌 소금 용액에 넣었다. 눈에 보이는 혈관과 결합 조직이 제거되었고, 폐 조직은 작은 조각(~1 mm3)으로 잘게 썰렸습니다.

조직 조각들은 37°C에서 0.25% 트립신에 40분간 부드럽게 교반하며 소화한 후, 0.25% 트립신에서 30분간 두 번째 소화를 했습니다. 세포 현탁액은 300× g 에서 5분간 원심분리한 후 상청액을 버린 후 10% 태아 소 혈청을 보충한 DMEM에 재현탁했습니다.

현탁액은 섬유아세포가 부착할 수 있도록 100분간 배양한 후, 정제를 강화하기 위해 300 × g에서 다시 원심분리하여 5분간 진행했습니다. 정제된 섬유아세포를 적절한 배양판에 씨앗 이식하여 5% CO₂가 포함된 가습 대기 중 37°C에서 약 80% 융합에 도달할 때까지 배양했습니다.

4. 섬유아세포와 조건 배지 공동 배양

상청액은 처리된 RAW264.7 세포에서 채취되어 3000 × g 에서 4 °C에서 10분간 원심분리했습니다. 섬유아세포 배양 배지는 수집된 대식세포 조절 배지로 대체되었습니다. 섬유아세포는 기능적 분석이 이루어지기 전에 37°C의 가습 대기와 5% CO₂ 함유 환경에서 24시간 배양되었습니다. 배양 후에는 섬유아세포를 채취하여 RNA와 단백질 추출을 위해 qRT-PCR 및 웨스턴 블롯 분석을 수행했습니다.

5. 세포 생존성 (CCK-8 분석)

섬유아세포는 100 μL 배양지를 포함한 96웰 플레이트에 5× 10³³ 세포 밀도로 시딩되었습니다. 세포들은 24시간 동안 지정된 처리를 받았다. 이후 각 웰에 10 μL CCK-8 시약을 첨가하고, 판을 37 °C에서 2시간 배양했습니다. 광학 밀도(OD)는 마이크로플레이트 리더기를 사용해 450 nm에서 측정되었습니다. 세포 생존율은 (OD_treated / OD_control) × 100%로 계산되었습니다. 모든 실험은 세 개의 생물학적 복제체로 수행되었습니다.

6. 군체 형성 분석

셀은 6웰 플레이트에 1× 10³ 셀 밀도로 시딩되었으며, 각 조건마다 3개의 복제 웰이 설치되었습니다. 판들은 10-14일간 부양되어 눈에 띄는 군집이 형성되었습니다. 군체들은 0.1% 결정 보라색으로 실온에서 10분간 염색되었습니다. 염색 후 군체를 세척하고 사진을 찍었습니다. 결합된 염료는 30% 아세트산에 15분간 용해되었고, 광학 밀도는 590 nm에서 측정되었습니다. 세 가지 독립적인 실험이 수행되었습니다.

7. EdU 확산 분석법

세포는 24시간 동안 권장 시점에 대해 처리되었습니다. 이후 각 웰에 50 μM EdU 100 μL을 첨가하고, 세포를 37 °C에서 2시간 배양했습니다. 세포는 4% 파라포름알데히드에 30분간 고정시키고, 2 mg/mL 글리신으로 5분간 소환했습니다. 세포는 PBS에서 0.5% Triton X-100으로 투과되고, 세척된 후 아폴로 염색액으로 30분간 배양했습니다. 핵은 Hoechst 33342(1×)로 30분간 카운터스테인을 했습니다. 형광현미경으로 EdU 양성 세포를 관찰하고 영상화하였습니다.

8. IL-6용 ELISA

RAW264.7 셀 상청액은 3000 × g 에서 4 °C에서 15분간 원심분리되었습니다. IL-6 수치는 제조사 지침에 따라 Beyotime ELISA 키트를 사용해 측정되었습니다. 흡입도는 마이크로플레이트 리더기를 사용해 측정되었고, IL-6 농도는 표준 곡선을 기반으로 계산되었습니다.

9. 면역형광

섬유아세포는 미리 냉각된 아세톤에 10분간 고정한 후 PBS로 세 번 세척했습니다. 세포는 0.1% Triton X-100으로 10분간 투과시키고, PBS에서 1% BSA로 30분간 차단하였습니다. 그 후 세포는 PCNA에 대한 1차 항체(1:100)와 함께 4°C에서 하룻밤 배양하였습니다. PBS로 세 번 세척한 후, FITC가 결합된 2차 항체(1:200)와 실온에서 1시간 동안 배양했습니다. 핵은 DAPI로 카운터 스테인팅을 하고, 세척한 후 형광 현미경으로 영상을 촬영했습니다.

10. qRT-PCR

총 RNA는 제조사 프로토콜에 따라 트리졸 시약(중국산 비요타임)을 사용해 추출되었습니다. 역전사는 2 μg의 RNA와 무작위 프라이머를 사용하여 cDNA 합성 키트를 사용해 수행되었습니다. PCR 반응은 20 μL 용량에서 10 μL SYBR 그린 마스터 믹스, 각 유전자 특이 프라이머 0.5 μL(최종 농도 0.5 μM), 1 μL cDNA 주형을 포함한 용량에서 준비되었습니다. 사용된 프라이머에는 CD16, iNOS, Arg-1, CD206, 피브로넥틴, COL1A1, α-SMA, GAPDH가 포함되었습니다(서열 제공).

열 사이클링 조건은 95°C에서 5분간 초기 변성, 95°C에서 30초, 60°C에서 30초, 72°C에서 30초간 40회 사이클을 거치는 것이었습니다. 증폭의 특이성을 검증하기 위해 60 °C에서 95 °C까지 0.5 °C 단위로 녹는 곡선 분석이 수행되었습니다.

데이터 분석: 상대 발현은 2^−ΔΔCT 방법으로 계산하여 GAPDH로 정규화하였다. 프라이머는 다음과 같았습니다: CD16 (마우스): 5′- AGGAGCTGAGGAGGAGG-3′ 및 5′- TGAGGAGGAGGAGGAGGAGC-3′, iNOS (마우스): 5′-TGCTCCCCAGGAGGATGTGT-3′ 및 5′-TGGTCTGTAGGGTACGG-3′, Arg-1 (마우스): 5′- GCTGCTGCTGCTGCTG-3′ 및 5′- GGTGGTTGTGTGTGT-3′, CD206 (mo) 사용: 5′- GGCTTCTATGAGCTGGGTGA-3′ 및 5′- CTGGGCTTCTGGATGTGTT-3′, 피브로넥틴(마우스): 5'-CGTGTGAAGGTGTTTCTGC-3' 및 5'-GAGGTCAGTGTGTGTGTGT-3', COL1A1(마우스): 5'-CCCTGGACACCTGGTTTT-3' 및 5'-GCGGGTCCCTTCTCTTC-3', α-SMA(마우스): 5'-CTGGAACAGCACACCTCTC-3' 및 5'-GGGACATAGCACAGCTTCTC-3', GAPDH(쥐): 5′- TGTGTCCGTCGTGGATTCTGA -3′ 및 5′- CCTGCTTCACCACCTTCTCTGAT-3′.

11. 서부 얼룩

세포는 프로테아제 억제제가 포함된 RIPA 버퍼를 사용해 용해하였습니다. 단백질 농도는 BCA 분석법을 사용하여 측정하였습니다. SDS-PAGE에서는 10% 폴리아크릴아마이드 겔의 각 레인에 단백질 60 μg를 적재하고 120 V에서 1.5-2시간 분리했습니다. 단백질들은 100V의 습식 전달 방식으로 1시간 동안 PVDF 막에 전달되었습니다. 5% 무지방 우유로 TBS-T에 1시간 동안 차단한 후, 막을 1차 항체(1:1000 희석)와 함께 4°C에서 하룻밤 배양했습니다. TBS-T로 세척한 후, 막은 HRP 결합된 2차 항체(1:5000 희석)와 실온에서 1시간 동안 배양하였습니다. 추가 세척 후, ECL 화학발광 시약을 사용해 단백질 밴드를 검출하고 화학발광 이미징 시스템으로 영상화하였습니다. 밴드 강도는 ImageJ 소프트웨어를 사용해 정량화되었고, 단백질 수치는 내부 대조군인 GAPDH로 정규화되었습니다.

12. 통계 분석

데이터는 SPSS 17.0을 사용하여 분석되었습니다. 연속 변수는 평균 ± 표준편차(SD)로 표현되었습니다. 두 그룹 간 비교는 비쌍 t-검정을 사용했고, 다군 간 비교는 일원 ANOVA 및 LSD 사후 검정을 사용하였습니다. p-값이 0.05 미만이면 통계적으로 유의한 것으로 간주되었습니다.

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결과

WYDCT가 RAW264.7 세포 M2 대식세포 분극에 미치는 영향

우리는 광학 현미경을 사용해 RAW264.7 세포 형태를 관찰했습니다. 그림 1A에서 볼 수 있듯이, IL-4 자극은 세포를 길게 하여 처리하지 않은 세포에 비해 더 길고 방추 모양의 형태를 만들었습니다. 또한, IL-4 자극 세포는 세포질 입자가 증가하고 배양 기질에 대한 부착력이 향상되었습니다. 이러한 형태학적 변화는 IL-4 자극이 RAW264.7 세포의 세포 구조와 표현형에 상당한 영향을 미친다는 것을 시사합니다.

WYDCT 투여 후 RAW264.7 세포의 세포 형태가 역전되었습니다. 이후 qRT-PCR 및 웨스턴 블롯 분석을 통해 M1 마커(CD16, iNOS)와 M2 마커(Arg-1, CD206)의 발현을 조사하였습니다. 특히 CD16과 iNOS의 mRNA 및 단백질 농...

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토론

이 연구의 목적은 WYDCT가 천식에서 섬유아세포 활동과 기도 재형성에 미치는 영향과 그 기저 메커니즘을 탐구하는 것이었습니다. 현재 연구 결과는 WYDCT가 RAW264.7 대식세포의 M2 분극을 억제할 수 있음을 보여주며, 이는 이후 쥐 폐 섬유아세포의 생존력, 증식 및 섬유화에 영향을 미친다. 더불어, IL-6/STAT3 신호전달 경로는 이러한 효과를 매개하는 데 핵심적인 역할을 했습니다.

대식세포 분극은 천식과 섬유증의 발병 기전에서 중요한 과정입니다21. Arg-1과 CD206 수치로 특징지어지는 M2 대식세포는 조직 재형성과 섬유증에 기여합니다. 본 연구에서 IL-4 자극은 RAW264.7 세포에서 형태학적 변화를 유도하여 신장, 세포질 입자 증가, 배양 기질에 대한 부착력 향상을 초래했습니다. 이러한 변화는 M2 편광

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감사의 글

이 연구 프로젝트에 기여해 주신 모든 파트너분들께 진심으로 감사드립니다. 이 연구는 2022년 헤이룽강성 대학 기초 과학연구운영비(번호 2022-KYYWF-0827)의 지원을 받아 감사드립니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
아폴로 643 하이브리다이제이션 시약광저우 리보바이오 유한회사.C10371-2
아르기나아제-1 (E4U1I) 마우스 mAb 셀 시그널링 테크놀로지 주식회사43933T
BCA 단백질 농도 측정 키트비요타임 바이오테크놀로지 주식회사P0012
BeyoBlot HRP 접합 마우스 항토끼 네이티브 IgG (H+L)비요타임 바이오테크놀로지 주식회사A0210
이산화탄소 인큐베이터상하이 리셴 과학 장비 유한회사.HF240
CD206/MRC1 (E6T5J) XP® 토끼 mAb셀 시그널링 테크놀로지 주식회사24595T
세포 계수 키트-8비요타임 바이오테크놀로지 주식회사C0037
COL1A1 (E8F4L) XP 래빗 mAb 셀 시그널링 테크놀로지 주식회사72026T
디메틸 설산화비요타임 바이오테크놀로지 주식회사ST038-100ml
DMEM 고당 미디엄그랜드 아일랜드 바이오컬러 컴퍼니11965092
EDU비요타임 바이오테크놀로지 주식회사ST067-250mg
Fcγ RIII/CD16 (F6K6G) 토끼 mAb 셀 시그널링 테크놀로지 주식회사71345T
태아 송아지 혈청그랜드 아일랜드 바이오컬러 컴퍼니A5256701
피브로넥틴/FN1 항체  셀 시그널링 테크놀로지 주식회사63779S
FITC-결합 염소 항생쥐 IgG (H+L)비요타임 바이오테크놀로지 주식회사A0568
형광 정량 PCR 기기야루이 바이오테크놀로지 주식회사MA-6000
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