여기서는 제브라피시 사육 재순환을 위한 새롭고 건설이 쉬우며 저비용의 프로토콜을 소개합니다.
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방법 논문
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여기서는 제브라피시 사육 재순환을 위한 새롭고 건설이 쉬우며 저비용의 프로토콜을 소개합니다.
제브라피시는 생 체 내 연구 수행에 인기 있는 모델 생물로, 부분적으로는 사육 및 유지가 비용이 저렴하다고 여겨졌습니다. 하지만 상업용 주택 시스템은 소규모 연구 그룹에게는 비용이 부담스럽습니다. 여러 맞춤형 제브라피시 사육 시스템이 존재하지만, 불규칙한 수질 상태, 낮은 물 순환률, 그리고 취약한 수조 문제를 안고 있습니다. 이러한 설계 문제들은 장기 연구 프로그램의 생존 가능성을 저해합니다. 이 글에서는 새롭고 저렴하며 제작이 쉬운 맞춤형 순환식 제브라피시 사육 선반을 소개합니다. 이 시스템은 이전에 발표한 수조 설계와 결합되면, 발달 단계의 어느 단계에서도 제브라피시를 사육할 수 있습니다. 여러 단계의 여과 및 멸균이 있어 안정적인 수질 상태를 조성하여 제브라피시를 연구 및 교육에 장기간 사용할 수 있게 합니다. 아래에 설명된 시스템은 우리 연구실에서 9년간 제브라피시를 사육하는 데 사용되어 왔으며, 여러 세대에 걸친 사육 물고기와 수백 건의 실험을 의미합니다.
제브라피시는 생물학 연구에 흔히 사용되는 모델 생물입니다. 많은 환경 조건에 견디며, 많은 자손을 낳아 쉽게 번식합니다. 이들은 인간 건강, 염증, 유전학, 독성학등 다양한 생물학 연구의 훌륭한 모델이 됩니다. 1,2,3,4,5,6,7. 또한 비교적 낮은 유지보수 비용으로 비용 효율적인 옵션을 제공합니다. 하지만 제브라피시 사육 시스템을 만드는 것은 특히 경험이 적은 사람들에게는 부담스러울 수 있습니다. 재순환률, 수질, 그리고 발달 여러 단계에서 제브라피시를 키우는 데 따른 어려움 등 여러 요소를 고려해야 합니다.
상업용 제브라피시 사육 시스템은 종종 비용이 많이 들며, 이는 소규모 연구소나 자금이 제한된 연구소에 큰 장애물이 될 수 있습니다. 이러한 시스템들은 자동 급식기나 자동 청소 같은 추가 기능을 포함해 수만 달러에 이를 수 있지만, 예산에 민감한 실험실이나 교실 환경에서 제브라피시를 활용하려는 사람들에게는 불필요합니다. 이런 유형의 시설에서는 제브라피시 사육 시스템을 건설하는 것이 훨씬 합리적입니다. 맞춤형 건설 도면에 관한 다른 기사들도 출판되었지만, 각각의 단점이 있습니다. Kim 등은 쉽게 구축할 수 있는 80탱크 시스템을 만드는 방법을 시연했습니다. 출판 당시 건설 비용은 약 500달러였으나, 현재로서는 훨씬 더 비싸질 것입니다. Paige 등은 앞서 언급한 방법을 개선하기 위한 계획을 만들었으나, 건설 비용은 $1500이었습니다. 또한, 150마리의 어류 개체군 유지 비용은3개월마다 1,000달러로 추정됩니다.
이 글에서는 이전에 발표된 하우징 탱크 설계10과 결합하여 상업적으로 이용 가능한 시스템보다 훨씬 저렴하게 저렴한 순환식 제브라피시 사육 및 여과 시스템을 구축하는 방법을 확립했습니다. 또한, 몇 가지 일반적인 도구로 쉽게 만들 수 있습니다. 30개의 개별 탱크(~70% 용량)를 사용할 때도 비교적 조용하여 약 60 dBA의 소리를 발생시키는데, 이는 일반 대화나 텔레비전11과 동등한 수준입니다. 몇 가지 간단한 수정이나 탱크 수를 줄여 운영하면, 이 시스템은 학생들에게 방해가 되지 않고 교실 환경에서 직접 사용할 수 있다고 믿습니다. 순환 시스템의 전체 설계는 다음과 같습니다: 가열되고 조절된 물이 배수 분지에서 주 급수관을 통해 펌프로 공급되며, 이 관로는 하우징 랙 중앙을 통해 위로 올라갑니다. 주 공급 라인의 볼 밸브는 배플에 물을 공급하며, 이 배플은 각 레벨의 개별 탱크에 조절 가능한 유량으로 물을 공급합니다. 주 공급 라인 내 과도한 압력 축적을 방지하기 위해, 시스템은 조절 가능한 볼 밸브가 있는 압력 해제 라인을 사용하여 과도한 물을 다시 섬프로 되돌립니다. 배플에서 탱크로 들어오는 물은 탱크 내에서 재순환하며, 각 층의 하우징 선반 중앙을 관통하는 약간 경사진 수로가 '넘침'을 수용합니다. 트로프에서 나온 물은 수직 회수관으로 흘러가 배수 분지로 되돌아가고, 다단계 캔스터 필터로 세척하고 자외선으로 멸균됩니다.
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여기에 설명된 프로토콜은 노던 미시간 대학교와 셰넌도어 대학교의 기관 동물 관리 및 사용 위원회에서 이전에 승인된 바 있습니다.
참고: 시스템의 물 회수 부분을 위한 PVC 배관을 절단하려면 톱이 필요합니다. 이 프로토콜은 회전 공구를 사용했지만, 탱크 리턴 파이프에 필요한 절단 외에 대부분의 절단에는 다른 종류의 톱으로도 충분합니다. 상수도 공급관의 투명 비닐 튜브를 자르기 위해 유틸리티 나이프가 사용되었습니다. 호스 클램프를 조이려면 드라이버가 필요합니다. PVC 탱크 리턴을 PVC 리턴 홀더에 부착하려면 3/16인치(0.47cm) 비트가 있는 드릴이 필요합니다(약간 더 크거나 작은 비트도 가능합니다). 부상을 피하려면 전동 공구 사용 시 주의가 필요합니다. 다음 프로토콜은 이전에 발표된 탱크 설계10과 결합될 하우징 레일의 생산을 설명합니다. 대체 탱크를 사용할 경우, 탱크 사양에 맞게 탱크 수원 및 물 반환 지침을 변경해야 합니다.
1. 하우징 랙 조립 (그림 1A)
2. 탱크 반환 시스템 지지 브래킷 (그림 1A)
3. 물 회수 시스템 조립 (그림 1B-D)
참고: 물 회수관은 개별 탱크에서 물을 받아 수직 회수관으로 운반하며, 이 관관에서 물을 집수로 운반하여 필터링한 후 결국 시스템으로 재순환됩니다.
4. 섬프 분지 조립
참고: 섬프 분지는 전도도, pH, 질산염/아질산염 농도, 온도의 변동을 제한하여 물 저장 역할을 합니다(그림 1A). 섬프 분지에서는 여러 단계의 여과도 이루어집니다.
5. 주 급수관 조립 (그림 1A, F)
참고: 접착제가 부족해 주 공급관을 빠르게 건설하고 분해하여 청소할 수 있습니다. 누수를 방지하기 위해 모든 비닐 튜브에는 호스 클램프를 부착할 수 있습니다. 이 장비들은 시스템을 처음 가동하고 누수를 평가한 후에 추가할 수 있습니다.
6. 압력 해제 라인 조립 (그림 1A, 왼쪽 패널)
7. 탱크 급수관 조립 (그림 1E)
참고: 탱크 내 급수관은 주 공급관에서 각 탱크로 물을 공급합니다.
8. 시스템 작동 준비
참고: 이후 단계들은 시스템에 보관할 어류의 건강과 생존을 보장하기 위해 반드시 취해야 합니다. 이 과정은 생선을 시스템에 추가하기 최소 일주일 전에 이루어져야 합니다.
9. 정기 유지보수
10. 일반적인 문제 해결
11. 추가 고려사항
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여기서 제시된 프로토콜은 3층 순환식 제브라피시 사육 시스템을 만듭니다(그림 1). 이전에 발표된 모듈식 제브라피시 어항 설계10과 결합하면, 이 시스템은 30-36개의 개별 어항을 쉽게 수용할 수 있으며, 각 대형 어항은 1리터당 10마리 미만의 밀도로 40마리의 물고기를 수용할 수있습니다. 전체 사육 시스템은 작은 크기(~5' x 7', ~1.52 m x 2.13 m)로 1,200마리 이상의 성체 제브라피시를 수용할 수 있습니다. 여러 단계의 여과 과정과 조절 가능한 탱크 유량 덕분에, 유충은 수정 후 7일째부터 시스템에 투입되어 별도의 유충 보육장 없이도 성공적으로 성충으로 키울 수 있습니다. 이를 위해 유충을 사육하고 먹이를 줘야 하며, 이에 대해 자세히 설명되어있습니다. 시스템이 시스템을 순환시키는 과정에서 사용자는 각 탱크의 유입 및 유출...
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여기에 설명된 순환 주택 시스템은 총 1500달러 미만의 비용으로 건설할 수 있습니다. 주요 부품 교체가 필요 없다고 가정할 때 연간 비용은 약 75달러로 추정되며, 모든 부품은 지역 및 온라인 소매점에서 구할 수 있습니다. 이 프로젝트의 완성을 위해 특별한 도구나 기술이 필요하지 않아 대부분이 조립에 접근하기 쉽지만, 여기서 설명한 정확한 금속 받침대를 사용하지 않을 경우 재료 길이를 변경하는 것이 필수적입니다. 시스템 조립에는 유해한 화학물질이나 접착제가 전혀 사용되지 않아 유지보수와 제작이 간단합니다. 이 시스템은 해체, 청소, 재건이 한 시간 만에 가능합니다. 또한 분해 및 재조립이 용이하기 때문에 전체 시스템을 한 공간에서 다른 공간으로 옮길 수 있고, 실험실의 필요에 맞게 탱크 선반 수를 줄이거나 많이 수용하도록 수정할 수도 있습니다. 또한 시스템의 내구성도 매우 견고하다는 것을 확인했습니다. 이 시스템을 9년간 운영하면서 메인 펌프를 한 번, 캐니스터 필터...
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저자들은 공개할 것이 없습니다.
저자들은 지난 9년간 주거 시스템을 유지하고 변화시키는 데 도움을 준 많은 학생들에게 감사의 말씀을 전합니다.
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