자외선 경화 수지를 이용한 합성 생체적합성 임플란트의 냉동절부 면역형광 분석을 위한

Summary

이 연구는 자외선 경화 가능한 수지 안정화를 사용하여 임플란트-조직 인터페이스의 무결성을 유지하면서 항원 접근성을 유지하는 냉동절부 프로토콜을 제시하여, 합성 폴리머 임플란트의 신뢰할 수 있고 고해상도 면역형광 분석을 가능하게 합니다.

Abstract

합성 생체 적합성 임플란트의 조직학적 평가는 기존 조직 처리 방법과 이들 재료의 물리화학적 특성 간의 부적합성 때문에 상당한 기술적 도전을 제기합니다. 현재 완전한 수지 임베딩을 사용하는 접근법은 구조적 보존을 충분히 제공하지만, 에피토프 접근성을 심각하게 저해하여 숙주 면역 반응 특성화에 필수적인 면역조직화학적 응용을 제한합니다. 반면, 기존 파라핀 임베딩은 합성 기판에 대한 접착력이 떨어져 포괄적인 면역학적 프로파일링을 위한 항체 선택을 제한합니다. 표준 냉동절개 프로토콜은 항원 보존을 개선하여 면역조직화학적 적합성을 향상시키며; 그러나 이러한 방법들은 임플란트 내 표본의 구조적 완전성이 부족해 형태학적 평가와 절절 품질을 저해하는 경우가 많습니다. 이러한 한계를 해결하기 위해, 냉동절부 전에 임플란트 조직 구조물을 선택적으로 안정화하기 위해 UV 경화 가능 수지를 포함하는 새로운 처리 프로토콜이 개발되었습니다. 이 방법론은 광중합 가능 수지를 사용하여 기계적 지지를 제공하면서도 에피토프 접근성과 항원 결정인을 보존하는데, 이는 일반적으로 완전한 수지 중합으로 인해 손상되는 부분입니다. 이 프로토콜은 면역형광 평가를 위한 최적의 두께의 고품질 절편을 재현 가능하게 하며, 기존 수지 내장된 시료에서 항체 침투를 제한하는 광범위한 가교 결합 없이 표준 냉동 절편보다 우수한 구조적 보존성을 달성합니다. 이 접근법은 합성 임플란트의 조직학적 처리에 있어 실용적이고 비용 효율적인 해결책으로, 생체적합성 평가를 위한 분석 능력을 향상시키고 임플란트-조직 접면에서 국소 면역 반응의 상세한 특성화를 가능하게 합니다.

Introduction

면역형광 현미경은 재생의학 연구에서 필수적인 분석 기법으로, 형광포체 결합 항체를 이용해 조직 구조와 세포 구성을 시각화할 수 있게 합니다. 이 방법론은 면역화학 인식의 분자 특이성과 형광 검출의 민감도와 다재다능함을 통합하여, 조직 미세환경 내 세포 표적 분포를 상세히 관찰할 수 있게 합니다. 면역형광 접근법은 직접 표지와 간접 표지 전략을 모두 포함하며, 간접 면역형광 프로토콜은 가시광선 및 근적외선 스펙트럼에 걸쳐 다양한 형광체에 결합된 2차 항체 시스템을 통해 신호 증폭을 강화합니다^. 이 방법론은 스펙트럼 분리를 통한 동시에 다중 표적 검출이 가능한 내재적 능력은 복잡한 조직 미세환경 내에서 이질적인 세포 집단과 그 공간적 관계의 포괄적인 표현형 특성화를 용이하게 합니다².

면역형광 현미경의 기술적 역량은 기존의 단백질 위치 측정을 넘어 형광 강도 측정, 공위치 분석, 세포 기능과^{조직 조직 이해}에 필수적인 공간 분포 평가 등 정량적 분석 응용 분야까지 포함합니다. 임플란트 생체적합성 연구 맥락에서 면역형광 분석은 이물질 반응, 염증 연쇄 반응, 조직 통합 과정 등 숙주 면역 반응에 대한 중요한 통찰을 제공하며, 이는 이식의 수용 또는 거부 반응을 세포 및 분자 수준에서 결정합니다^.

면역형광 프로토콜의 성공적인 구현은 형광 신호를 유지하고 배경 자가형광을 최소화하면서 형태학적 완전성을 유지하는 조직 처리 방법론을 신중히 고려해야 합니다. 전통적인 임베딩 배지 선택은 조직 유형, 후속 분석 요구사항, 그리고 관심 있는 특정 항원에 따라 달라집니다. 합성 재료 및 임플란트의 경우, 현재 문헌은 절개 절차 중 구조적 안정성을 유지하기 위해 완전한 수지 삽입을 주로 권장^합니다. 그러나 이 접근법은 중합된 수지 블록을 절단하는 데 특수 울트라미세토미와 블레이드가 필요하다는 점에서 상당한 한계를 가지고 있으며, 이는 상당한 장비 투자와 기술 전문성을 요구합니다. 파라핀 임베딩은 절절에 적절한 구조적 지지를 제공하면서도, 광범위한 탈수, 화학적 경화, 유기 용매 침투를 통해 고정 및 가공 과정에서 항원 결정인체의 구조 변화를 초래하여 단백질을 변성시키고 에피토프를 가릴 수 있습니다. 파라핀 처리는 또한 신호 검출과 정량적 분석을 저해하는 고유한 자가형광 간섭을 발생시킵니다. 이러한 변화는 항체 접근성을 회복하기 위해 일반적으로 열 유발 에피토프 추출(HIER) 또는 단백질분해 유도 에피토프 추출(PIER) 등의 항원 회수 절차를 필요로^합니다. 이러한 개입에도 불구하고, 시판적으로 시행되는 많은 항체는 파라핀 함침 표본과 호환되지 않으며, 가혹한 채취 조건은 형광 신호 품질을 더욱 저하시키고 광표백 인공물을 유발할 수 있습니다.

냉동절부는 면역형광 응용을 위한 대체 처리 방법론을 제공합니다. 조직 준비에는 두 가지 냉동 보존 방법이 사용될 수 있습니다. 첫 번째 방법은 액체 질소로 미리 냉각된 이소펜탄 욕조에 신선한 조직 표본을 직접 담가 -20 °C 이하의 온도를 달성하는 신속 냉동 보존을 한 후, 온도 조절 절단실이 장착된 냉동 절단기를 이용해 절편 절단하는 것입니다. 두 번째 프로토콜은 파라포름알데히드(PFA) 또는 포르말린에 짧은 고정 기간을 거친 후, 점진적으로 자당 침투를 통한 냉동 보호를 거쳐 냉동합니다. 냉동 보존 과정은 조직의 완전성을 유지하면서 항체 인식에 필수적인 천연 단백질 구조를 보존하는 견고한 매트릭스를 만듭니다. 냉동 절절은 최소한의 화학적 변형으로 조직을 거의 원래 상태로 유지하여 엄격한 항원 회취 절차의 필요성을 줄이고, 에피토프 마스킹이나 변성으로 인해 파라핀 침입 조직과 호환되지 않는 1차 항체를 포함한 더 넓은 범위의 1차 항체를 사용할 수 있게^합니다.

냉동절부 공정은 일반적으로 최적 절단 온도(OCT) 화합물을 사용하며, 이는 폴리비닐 알코올과 폴리에틸렌 글리콜로 구성된 수용성 임베딩 매체로, 절개 시 구조적 지지를 제공하면서도 투명성을 유지하고 형광 검출 시스템과 호환됩니다. OCT 임베딩은 특정 분석 요구사항과^{조직 특성에} 따라 두께 5–15 μm 사이의 얇고 균일한 절편 생성을 용이하게 합니다. 동결 절편에서 천연 단백질 구조를 보존하는 것은 정량적 면역형광 분석에 필수적인 최적의 신호-잡음비를 유지하면서도, 파라핀 임베드 조직과 호환되지 않는 다양한 1차 항체를 사용할 수 있도록 에피토프를 온전하게 유지합니다⁸.

그러나 냉동 조직 절절은 특히 천연 생물 조직과 다른 물리화학적 특성을 가진 합성 임플란트 재료를 처리할 때 독특한 기술적 도전을 제기합니다. 동결 중 합성 고분자와 생물학적 조직 경계면 간의 차등 열팽창은 국소적인 기계적 응력을 초래하여 구조적 완전성을 저해하고 단면 가공 인공물을 만들 수 있습니다¹⁰. 더불어, 많은 합성 재료가 냉동 생물 조직에 비해 본질적으로 강성하기 때문에 단면 절단 시 칼날 편향이 발생해 단면 두께가 고르지 않게 되고 시료와 절단 장비 모두에 손상이 발생할 수 있습니다. 이러한 기술적 한계는 임플란트 포함 표본의 고유한 요구를 충족하면서도 면역형광 응용을 위한 냉동 절편의 장점을 유지할 수 있는 전문 처리 프로토콜을 필요로 합니다.

이러한 한계를 해결하기 위해 본 연구는 선택적 UV 경화 가능 수지 안정화와 제어된 냉동체의 절편 파라미터를 결합하여 고해상도 다중 매개변수 면역형광 분석을 가능하게 하는 냉동절부 프로토콜을 개발했습니다.

Protocol

이 연구는 메이요 클리닉 기관 동물 관리 및 이용 위원회(IACUC)의 승인 번호 A00003765-18-24에 따라 수행되었습니다. 합성 생체 적합성 임플란트를 포함한 모든 시술은 적절한 생물안전 프로토콜에 따라 멸균 조건에서 진행되었습니다.

1. 시료 처리 및 냉동 보호

참고: 포르말린은 화학 훈기 후드에서만 다루고 적절한 개인 보호 장비(PPE)를 착용하세요. 포름말린에는 강력한 자극제, 감작제, 발암물질인 포름알데히드가 포함되어 있습니다.

1. 조직 통합 생체 적합성 합성 임플란트 표본을 10% 중성 완충 포르말린 안에서 4°C에서 하룻밤 고정하며, 조직 부피에 비해 최소 10용량의 고정액을 사용해 완전한 침투와 적절한 침투를 보장합니다. 이 제한된 고정 기간의 목적은 조직 형태를 보존하면서 최소한의 가교 결합을 달성하는 것입니다. (프로토콜에 사용되는 재료는 재료 표를 참조하세요.)
2. 표본을 인산염 완충 생리식염수(PBS)에 조제한 15% 자당 용액으로 옮겨 4°C에서 하룻밤 배양하며 부드럽게 교반합니다. 조직 침입으로 입증되는 완전한 자당 침윤을 보장합니다.
3. 시료를 PBS에서 30% 자당 용액으로 옮겨 4°C에서 두 번째 하룻밤 배양합니다. 조직이 용기 바닥으로 가라앉아 완전한 평형을 확인하여 충분한 자당 침투와 수분 이동을 나타냅니다.
4. 30% 자당 용액과 OCT 화합물의 1:1 부피 비율을 준비합니다. 이 전이 매체에서 4°C에서 2시간 동안 인큐베이팅한 후, 1시간 동안 100% OCT로 옮겨 완전한 평형을 이루는데, 이는 조직의 균일하게 불투명한 모습을 나타냅니다.
5. 시료를 신속히 신속히 배치하여 신선한 OCT 화합물로 채워진 표준 크라이오몰드에 위치하여 절면 평면의 최적의 방향을 보장합니다. 이후 시술을 위해 임플란트-조직 인터페이스가 접근 가능한 상태로 자세를 잡으세요. 미리 냉각된 겸자를 사용해 기포를 제거하세요.
6. 드라이아이스 플랫폼 위에 바로 가득 찬 크라이오몰드를 놓아 아래에서 위로 빠르게 얼음 결정 형성을 촉진하는 온도 구배를 만든다. 완전히 굳어질 때까지 10–15분간 모니터링하며, 동결된 OCT 화합물의 특징적인 불투명한 흰색 모습으로 확인됩니다. 냉동 블록은 –80°C 저장 또는 즉시 절면 절단을 위해 바로 냉동조절기 챔버로 옮겨 보관합니다.

2. 냉동 저장기 설치 및 초기 절면 절단

1. 냉동조절기 온도 제어 챔버를 –15°C로 유지하세요. 통합 디지털 모니터링을 통해 온도를 확인하고, 시료 투입 전 밤새 평형을 유지하세요.
2. 새 일회용 칼날을 설치하세요. 합성-생물학적 재료 단면을 위한 블레이드 각도를 제조사 사양에 맞게 설정하세요.
3. 원하는 단면 두께(50–100 μm)는 제어판에서 두께 설정을 선택하고 화살 표 키로 조정한 후 Set 키를 눌러 매개변수를 확인함으로써 크라이오스탯에 프로그래밍됩니다.
4. 임베스트 샘플을 통과해 임플란트-조직 인터페이스에 해당하는 미리 정해진 깊이에 도달합니다. 조직 불투명도와 초기 임플란트-말초 노출의 미묘한 변화가 특징인 UV-수지 적용 최적 평면을 모니터링하며, 이러한 특징이 연속적으로 절단된 절면에서 일관되게 보이면 깊이가 확인됩니다.
   참고: 중요한 인터페이스에 도달하자마자 섹션 작업을 즉시 중단하여 목표 영역을 넘어서는 것을 방지하세요.

3. UV 경화 수지 적용

참고: 자외선 경화 수지는 적절한 개인 보호 장비를 착용한 채 환기가 잘 되는 곳에서 다루고, LED-UV 경화광으로부터 눈과 피부를 보호하세요. 이 수지들은 피부와 눈 반응을 일으킬 수 있는 자극제를 포함하고 있으며, LED-UV 노출은 자외선에 의한 눈 손상을 초래할 수 있습니다.

1. 가위를 사용해 파라필름을 임플란트 둘레보다 2–3mm 크기로 절단합니다. 멸균된 겸자로 보호 종이 뒷면과 조심스럽게 분리하세요.
2. 노출된 파라필름 표면에 5–10 μL UV 경화 가능 수지를 분포합니다(그림 1A). 수지 부피는 점진적으로 분사하는 예비 시험 적용을 통해 최적화되며, 결과물의 퍼지는 시료 표면에 균일한 범위가 유지되도록 하여 과도한 수지 축적이 절면 절단에 방해가 되지 않도록 보장합니다.
3. 보호용 종이 뒷면은 즉시 수지가 첨가된 파라필름 위에 교체하세요. 폴리우레탄 이음 롤러(2인치)를 일정한 압력으로 겹치고 평행한 패스를 한 뒤 수직으로 가해 얇고 균일한 수지 층을 만듭니다(그림 1B).
4. 보호 종이층을 조심스럽게 제거하면 고르게 분포된 수지 필름이 드러납니다. 노출된 임플란트 표면 위에 레진-파라필름을 직접 위치시켜 임플란트-조직 접면과 정밀하게 정렬되도록 합니다(그림 1C).
5. 임플란트 중심부에서 바깥쪽으로 폴리우레탄 이음 롤러를 발라하여 공기 방울을 제거하고 수지와 합성 및 생물학적 표면 간의 밀접한 접촉을 보장합니다(그림 1D).
6. 405nm 파장 UV LED 광원을 임플란트 표면에 2–3cm 거리로 직접 위치시킵니다. 완전한 중합을 보장하기 위해 90초간 노출하며, 수지 경도와 비끈적임 특성을 촉각 평가로 검증합니다(그림 1E). 수지 경화 과정에서 작업자를 유해 자외선 노출로부터 보호하기 위해 자외선 광중합 전에 극저온 챔버 창문 위에 자외선 차단 덮개를 덮어주세요.

4. 단면 회수 및 슬라이드 준비

1. 수지-조직 경계면의 기계적 손상을 방지하기 위해 파라필름을 단일 연속 동작으로 제거하세요. 완전한 수지 부착 여부는 극저온 조명 하에서 노출된 표면을 검사하여 균일한 수지 커버, 조직 가장자리의 들각성 없음, 눈에 띄는 파라필름 잔여물 부재를 통해 확인합니다.
2. 보정된 미세토움 전진 메커니즘을 사용하여 미리 정해진 8 μm 두께로 표본을 절획합니다. 각 단면의 두께가 일정하고 압축, 찢어짐, 불완전한 단면이 있는지 모니터링하세요. 안티롤 플레이트를 최적의 위치로 하여 컬링을 방지하세요(그림 1F).
   참고: 친수성 양전하 접합 유리 슬라이드는 도전적인 시편의 우수한 고정력을 제공하여 절편 이송 및 이후 처리 시 접착력을 향상시키기 때문에 사용됩니다. 섹션 전송 전에 슬라이드를 개별적으로 라벨링하세요.
3. 슬라이드 접착제 표면을 위치시키고, 섹션 가장자리에서 초기 접촉을 한 후 전체 영역에 걸쳐 점진적으로 접촉하도록 하세요. UV 경화된 수지 표면이 슬라이드에 잘 붙도록 하되, 조직 표면은 위로 유지하여 면역형광을 수행하도록 하세요(그림 1G).
4. 기포를 제거하기 위해 섹션-슬라이드 어셈블리를 부드럽게 눌러주세요. 냉동체기 조명 아래에서 올바른 방향을 확인해 임플란트-조직 인터페이스가 온전한지 확인하세요.

5. 보관 및 보존

1. 완성된 슬라이드는 사전 라벨이 붙은 보관 상자에 -20°C에 보관하며, 72시간 이내에 처리가 필요한 경우를 위해서입니다.
2. 보존 기간이 1주일 이상 될 경우 80°C 조건을 활용하세요.

6. 면역형광 염색 프로토콜

참고: 펩신은 피부와 호흡기 자극물질이므로 적절한 개인 보호 장비(PPE)를 착용하여 다루시기 바랍니다.

1. 저장 후 슬라이드를 꺼내 15분에서 20분 동안 습도 챔버로 옮겨 실온 평형을 맞추세요.
2. 3회 연속으로 2분씩 PBS 세척 사이클을 수행하세요.
3. 항원 채취:
   1. 열 유발 에피토프 회수법(HIER) 방법: 1배의 표적 회수 용액과 함께 마이크로파 안전 용기 내에서 수평으로 위치 슬라이드를 사용합니다. 전자레인지(1000와트 출력)를 고출력으로 15분 동안 돌린 후 실온으로 냉각합니다.
   2. 단백질분해 유도 에피토프 추출법(PIER) 방법: 절면당 100–150 μL 즉시 사용 가능한 펩신 용액을 적용합니다. 임시 플라스틱 커버슬립으로 덮고 37°C에서 10분간 가습 챔버에서 부양하세요.
4. 세 번의 순차적인 PBS 세척 사이클(각각 2분)을 수행하세요.
5. PBS에 0.1% 사포닌과 2.5% 일반 염소 혈청이 포함된 1mL 차단액을 발포합니다. 가습실에서 실온에서 30분간 배양하세요.
6. 세 번의 순차적인 PBS 세척 사이클(각각 2분)을 수행하세요.
7. 최적화된 농도로 100 μL 1차 항체 용액을 적용하세요:
   1. 1:100 희석 기준으로 IV형 토끼 폴리클론 항제.
   2. 1:500 희석 상태의 안티-라미닌 토끼 폴리클론.
   3. 1:500 희석 비율의 Anti-F4/80 토끼 단클론 항체.
8. 임시 플라스틱 커버 슬립으로 덮고 4°C에서 가습 챔버에서 하룻밤 동안 부양하세요.
9. PBS 세척 사이클을 세 번(각각 2분씩) 수행하세요.
10. 10 μg/mL 농도로 2차 항체를 도포합니다.
    1. 당나귀 안티 래빗 IgG 알렉사 플루어 플러스 555
    2. 염소 항토끼 IgG 알렉사 플루어 488
11. 어두운 환경에서 실온에서 60분간 배양하세요.
12. 선택적 밀 배아 응집체(WGA) 염색:
    1. WGA-Alexa Fluor 647을 5 μg/mL 용량의 PBS와 2.5% 일반 염소 혈청에 적용하세요.
    2. 덮개를 덮고 37°C에서 30분간 배양하세요. 3회 연속으로 2분 PBS 세척 사이클을 수행하세요.
13. 각 단면마다 핵 카운터 스테인이 포함된 80 μL 하드 세팅 마운팅 매체를 적용하세요.
14. 커버슬립을 커버 유리로 덮어 기포를 제거하세요.
15. 슬라이드를 실온에서 어둠 속에서 2시간 동안 수평으로 경화시키세요.
16. 최적의 영상 품질을 위해 최대 일주일 동안 4°C에서 보관하세요.

7. 형광 현미경 및 영상 획득

1. 제조업체에서 제공하는 필터 세트를 사용한 역형 형광 현미경을 사용하여 영상 촬영을 수행합니다: 360/460 nm 여기/방출, 470/525 nm 여기/방출, 545/605 nm 여기/방출, 620/700 nm 여기/방출.
2. 이미지는 현미경 소프트웨어의 필터 메뉴에서 각 형광 채널을 선택하여 캡처합니다. 노출 최적화 전에 각 채널에 대한 정확한 기준선 보정을 위해 ' 블랙 밸런스 조정' 을 선택하여 블랙 밸런스 절차를 수행합니다. 그 후 이미지 캡처 창을 열고 라이브 모드를 활성화한 후 노출 과 빛 세기 조절을 통해 픽셀 포화 없이 높은 신호 대 잡음비를 달성할 때까지 노출 파라미터를 최적화합니다. 채도는 소프트웨어의 히스토그램 디스플레이와 채도 픽셀 강조 도구를 사용해 모니터링됩니다. 각 채널은 이미지 획득 전에 독립적으로 조정됩니다.
3. 제조업체의 인접 필드 간 10% 중복 타일을 자동으로 획득합니다. 획득 과정 전반에 걸쳐 자동 초점 조정을 유지하세요.

Results

섹션 품질 평가 및 최적화
UV-수지 안정화 및 8 μm 두께의 절단 작업 후, 접착 슬라이드에 절단을 수집하고 품질 관리를 평가합니다. 고품질 절편은 뚜렷한 균열이나 균열 인위물 없이 형태가 온전하며, 조직 구조가 연속적이고 임플란트-조직 경계가 보존되어 있습니다(그림 2A). 수지 안정화 임플란트 표면에서 균열이나 조직 분리 등 상당한 구조적 손상이 있는 절편은 추가 분석에서 제외됩니다(그림 2B). 특히, UV 경화 수지 도포는 OCT 블록에 영향을 주지 않았으며, 블록 전체 깊이 전반에 걸쳐 균일한 두께의 연속 단면이 신뢰성 있게 확보되어 수지 침투와 자외선 경화가 절단 품질에 부정적인 영향을 미치지 않았음을 나타냅니다. 이후 면역형광 염색 프로토콜을 위한 품질 기준을 충족하는 절절을 유지합니다.

Discussion

이 UV 경화 가능한 수지 안정화 방법은 표준 냉동 절편 기술로는 처리하기 어려운 합성 물질을 포함한 OCT 내장된 조직 시료를 냉동절부하는 대안적 접근법을 제공합니다. 전하 슬라이드, 조직 접착 테이프, 기타 부착식 지지재 등 다양한 접착 옵션이 있어 조직 절편이나 연약한 샘플이 취급 중 떨어지는 것을 방지할 수 있지만, 이들 제품은 슬라이드 접착을 제공하며 절단 시 임플란트-조직 접점에서 필요한 기계적 보강을 제공하지 않습니다. 더욱이, 현재 생물 시료에 얇고 균일하게 적용하여 냉동 절제 중 구조적 안정성을 높이기 위해 설계된 스프레딩 가능한 자외선 경화 수지는 존재하지 않습니다. 이 맥락에서 여기서 제시된 UV 경화 가능 수지 프로토콜은 동결 처리가 필요한 항체의 에피토프 접근성을 유지하면서 표적 기계적 지지를 제공함으로써 방법론적 공백을 메워 합성 고분자 성분이 포함된 시료의 신뢰성 있는 절획을 가능하게 합니다¹¹.

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
5W 구스넥 자외선 라이트 395– 수지 경화를 위한 405 nm	아마존	UPC & lrm; 603335835561
항체 - 항-F4/80 (단클로날)	앱캠	AB300421	1:500
항체 - 콜라겐 IV (다클론)	앱캠	AB6586	1:100
항체 - 당나귀 항-토끼 IgG 알렉사플루오 플러스 555	인비트로젠	A32794	10 μg/mL
항체 - 염소 항토끼 IgG 알렉사플루오 488	인비트로젠	A-11008	10 μg/mL
항체 - 라미닌(폴리클론)	인비트로젠	PA1-16730	1:500
바이오메드 청원	폼랩스	FLBMCL01	생체 적합성 재료 #1
바이오메드 내구성	폼랩스	FLBMDU01	생체 적합성 재료 #2
완충 10% 포르말린	카디널 헬스	C4320-101
BZ-X 필터 Cy5	키엔스	OP-87766	필터 세트
BZ-X 필터 DAPI	키엔스	OP-87762	필터 세트
BZ-X 필터 GFP	키엔스	OP-87763	필터 세트
BZ-X 필터 TRITC	키엔스	OP-87764	필터 세트
BZ-X800 분석기 소프트웨어	키엔스	BZ-X800	통합 소프트웨어
피셔브랜드 프리미엄 커버글라스  50 x 24 mm	피셔 사이언티브	12-544-14
Form4B 3D 프린터	폼랩스	F4B-프린터
Form4 레진 탱크	폼랩스	RT-F4-01
염소 혈청	깁코	16210064
HM525 NX 크라이오스탯	에프레디아	956641EC
가정용 전자레인지	파나소닉	NN-S766BA	1000와트 출력
IHC-Tek 플라스틱 커버슬립 24mm x 60mm	IHC 월드	IW-2601	임시 커버슬립
JDiction 저점도 UV 수지	아마존	6974143904430	높은 자가형광
키엔스 BZ-X800	키엔스	BZ-X800
렛츠 UV 레진 클리어 하드 타입	아마존	ALR00038	높은 자가형광
레진 클리어 UV 레진 고점도 타입	아마존	ALR00048
마쓰나미 MAS 마이크로 슬라이드 유리 슬라이드	신입 공급	SUMAS1190	접착 슬라이드
메드포르 외과적 임플란트	스트라이커	8662	생체 적합성 재료 #3
미스터 레진 UV 레진 크리스탈 클리어	아마존	B08FRF9QTB	높은 자가형광
MX35 울트라 미세토름 블레이드	에프레디아	3053835
파라필름 M 실험실 필름	파라필름	P7543-1EA
펩신	시그마	R2283-15ML
인산염 완충 식염수 pH 7.4	시그마	P3813
플랜 아포 & 람다; 40배	키엔스	BZ-PA40	대물렌즈
플랜 아포 & 람다; 4X	키엔스	BZ-PA04	대물렌즈
폴리우레탄 이음 롤러	아마존	682698799567
NucBlue 스테인이 있는 ProLong 유리 안티페이드 마운턴트	인비트로젠	P36985	호에슈스트 33342 카운터 스테인
사포닌	밀리포어	558255-100GM
스테인트레이	수입	M920-2
멸균 실리콘 시트	벤텍	PR72034-51N
표적 회수 솔루션, 시트레이트 pH6	애질런트	S236984-2
티슈텍 O.C.T 화합물	사쿠라	4583
밀 세균 응집체 알렉사플루오르 647	인비트로젠	W32466	5 ug/mL