RA 모델 쥐에서 모시부스트가 대식세포 분극 및 이동에 미치는 조절 효과와 TIM-3의 역할

요약

본 연구는 류마티스 관절염 쥐 모델에서 대식세포 분극과 이동에 대한 규제 효과를 조사하며, T 세포 면역글로불린과 뮤신 도메인 함유 단백질 3(TIM-3)의 역할에 초점을 맞추어 이 질환에서 뜸 억제의 치료 기전을 밝히는 데 중점을 둡니다.

초록

본 연구는 류마티스 관절염 쥐 모델에서 대식세포 분극과 이동에 대한 규제 효과와, 이 과정에서 T 세포 면역글로불린 및 뮤신 함유 단백질 3(TIM-3)의 역할을 조사하는 것을 목표로 했습니다. 실험 0일째에 스프래그–도울리(SD) 쥐는 다섯 그룹으로 나뉘었습니다. 류마티스 관절염 모델을 확립하기 위해 후다리 발바닥에 완전한 프로인트 보조제(CFA)를 주입하였습니다. 추가로, 렌티바이러스 매개 Havcr2 RNA 간섭(LV-Havcr2-RNAi)을 뒷발 패드에 주입하여 TIM-3 발현을 억제하였습니다. 7일째부터 쥐들은 6일간의 치료와 1일간의 휴식으로 구성된 사이클로 뻸 치료를 받아 총 3번의 완전한 사이클을 수행했습니다. 모큐버스션 치료 완료 후, 염증 상태를 조직학적 분석과 발바닥 두께 측정을 통해 평가하였다. M1 및 M2 대식세포의 표현형 마커는 효소 결합 면역흡착 분석법(ELISA)과 면역형광법을 통해 평가하였다. TIM-3 발현은 정량적 실시간 중합효소 연쇄반응(qRT-PCR)과 웨스턴 블롯을 통해 검출되었습니다. 또한 추가 SD 쥐에서 복막 삼출 대식세포(PEMs)를 분리하였고, 트랜스웰 검사법을 사용해 대식세포 이동을 조사하였습니다. 연구 결과, CFA 주사 후 쥐는 발바닥에 현저한 발적 발적 발과 부기, 그리고 대식세포 표현형 발현의 불균형을 보였다. 또한 Transwell 이동 분석 결과, CFA 유도 모델 쥐는 대조군 표본에 비해 대식세포 이동이 증가한 것으로 나타났습니다. 하지만 모큐버스트 치료는 이러한 변화를 완화시켰습니다. 또한 모큐스처스가 TIM-3 발현을 증가시켰으며, 렌티바이러스 개입 후 TIM-3 수치가 현저히 감소하여 염증 증상과 대식세포 불균형이 악화됨을 보여주었습니다. 이 결과들은 TIM-3가 대식세포 분극과 이동의 모큐버스션 조절에서 핵심 매개체 역할을 함을 나타냅니다.

서론

류마티스 관절염(RA)은 임상적으로 대칭성 염증성 관절염을 동반하는 흔한 전신 자가면역 질환입니다. 염증은 주로 활막, 연골, 뼈를 표적으로 하여 조직 파괴를 초래하고 결국 비가역적 관절 변형으로 이어집니다¹. 현재 RA의 약리학적 치료는 주로 질병 조절 항류마티즘제(^DMARDs)에 의존하며, 이는 종종 평생 복용이 필요합니다. 하지만 이러한 치료제들은 다양한 부작용과 관련이 있습니다. 따라서 상당수의 환자들이 임상 증상을 완화하고 기존 약물 의존도를 줄이기 위해 안전하고 효과적인 보완 요법을 찾습니다. 전통 중의학의 핵심 요소로서 뜸부스트레이션은 RA에 대한 유망한 보완 치료제로 활용될 수 있습니다. 전신 항염증 및 면역조절 기전을 통해 치료 효과를 발휘합니다^. 근주는 모스트를 완화하고 관절 구조를 보호할 수 있음을^{보여줍니다.} 더욱이, DMARDs의 잠재적 간신 독성, 감염 위험, 높은 비용에 비해 모피부스유는 안전성이 뛰어나고 비용이 저렴합니다. 하지만 모듬은 만병통치약이 아니며, 류마티스 관절염 관리에 있어 DMARDs를 완전히 대체할 수는 없습니다. 뜸 부스태션은 효과를 내기 위해 반복적이고 장기 치료 세션이 필요합니다. RA의 급성 악화 시에는 빠른 증상 조절을 제공하지 못할 수 있습니다. 더불어, 낻번술의 치료 결과는 시술자의 기술과 경험에 크게 의존하여 변동성을 초래합니다. 따라서 모시버스션과 DMARDs의 통합은 시너지 효과를 내는 '독성 감소와 효능 향상' 효과를 달성하는 것을 고려하여 RA⁵의 장기 관리에 적합한 전략이 되어야 합니다.

수많은 연구가 RA ^6,7,8에서 빻번요법의 치료 효능을 확인했으나, 정확한 작용 기전은 여전히 명확하지 않습니다. 본 연구는 T 세포 면역글로불린과 뮤신 도메인 포함 단백질 3(TIM-3)을 기전적 진입점으로 사용하여 RA에서 대식세포 분극과 이동에 미치는 근적요법의 영향을 조사합니다. 이 접근법은 모닉이 항관절염 효과를 발휘할 수 있는 잠재적 면역조절 경로를 밝히기 위해 설계되었습니다.

주요 면역 세포로서 대식세포는 RA ^9,10의 병인과 진행에 중심적인 역할을 합니다. 염증이 시작되면 조직 내 대식세포는 다양한 사이토카인과 화학계 물질을 방출합니다. 이 신호 분자들은 혈관 내피세포에 작용하여 순환 중인 단핵구가 대식세포로 분화하고 이후 염증 조직으로 유동되도록 촉진합니다^11,12. 이러한 침투하는 대식세포는 추가 매개체를 생성하여 염증 반응을 증폭시키고, 매개체들은 더 많은 대식세포를 모집하여 조직 침윤을 악화시켜 염증과 조직 침윤의 악순환을 형성합니다.

환경 자극에 따라 대식세포는 주로 M1(고전적으로 활성화됨)과 M2(대안적으로 활성화된) 상태인 명확한 기능적 표현형으로 분극함으로써 상당한 가소성을 보인다¹³. 생리학적 조건에서 대식세포 분극은 M1과 M2 표현형 간의 동적 균형을 유지합니다. 그러나 류마티스코에서는 이 평형이 깨지며, 인터페론(IFN)-γ 및 유도성 일산화질소 합성효소(iNOS) 등 염증성 매개체 분비가 증가하여 M1 분극이 증가하여 염증 반응을 악화시킵니다. 동시에 M2 분극이 약해지고, 인터루킨(IL)-4와 CD206을 포함한 항염증 인자의 방출이 감소하여 T세포 활성화 및 증식을 억제하는 능력을 저해하여 질병 진행을 악화시킵니다^. 여러 연구에서 M1/M2 대식세포 균형을 조절하는 것이 RA 진행을 완화할 수 있음이 밝혀졌습니다^15,16.

TIM-3는 T 세포 표면 당단백질로 확인되며, T 세포, 대식세포, 자연 살해 세포 등 다양한 면역 세포에서 널리 발현되며, 특정 리간드에 결합해 면역조절 기능을 발휘합니다¹⁷. TIM-3 신호전달은 대식세포 염증성 사이토카인 발현과 분극에 결정적인 영향을 미칩니다. 특히 TIM-3는 M2 대식세포에서 매우 많이 발현되어 M2 표현형을 촉진하고 M1 표현형을 억제합니다. 반대로, 연구에 따르면 TIM-3 억제는 반대 효과를 내어 M1 편극을 유도하고 M2 편극을 약화시키는 것으로 나타났습니다 18,19,20. 또한, TIM-3는 대식세포 이동 행동의 핵심 조절자임을 근거로 강조합니다^21,22. 따라서 TIM-3를 표적으로 삼아 대식세포 분극과 이동 역학을 조절하는 치료적 개입은 RA 치료 전략으로서 상당한 가능성을 보입니다.

앞서 언급한 근거에 근거하여, 본 연구는 낻번이 류마티스에서 치료 효과를 발휘하는 메커니즘에 대한 지식 확장에 기여하기 위해 수행되었습니다.

프로토콜

윤리적 진술 및 안전 수칙
모든 동물 실험은 청두 중의학대학교(2024029) 윤리위원회의 승인을 받았습니다. CFA와 렌티바이러스 투여를 포함한 모든 주사 절차 동안, 운영자는 일회용 장갑, 고글, 실험실 코트로 구성된 개인 보호 장비(PPE)를 착용해야 합니다. 이 절차들은 반드시 생물안전 캐비닛 안이나 환기가 잘 되는 환경에서 수행되어야 합니다. 시약과 접촉한 모든 샤프는 즉시 지정된 샤프 용기에 버려야 합니다. 모유 부속 치료 내내 운영자는 동물의 반응을 면밀히 관찰했습니다. 피부에 대한 열 손상을 방지하기 위해 목 콘은 즉시 교체되었습니다. 또한, 화재 위험을 없애기 위해 인화성 물질은 연소 중인 목구멍에서 멀리 떨어져 있어야 합니다.

1. RA 모델 설립

6주 된 수컷 SD 쥐 30마리(체중: 200 ± 20g), 등록번호: SCXK 2020-030)는 무작위로 다섯 그룹(n = 6)으로 나뉘었습니다: 대조군, RA 모델 그룹(RA 그룹), RA + 목욕 치료 그룹(Mox 그룹), RA + TIM-3 렌티바이러스 간섭 그룹(RA + TIM-3– 그룹), RA + TIM-3 렌티바이러스 간섭 + 목시버션 치료 그룹(RA + TIM-3– + Mox 그룹). 실험 전, 쥐들은 22–24°C의 온도, 20% 습도, 자연스러운 빛과 어둠의 주기가 있는 통제된 환경에서 7일간 고등에 적응했으며, 음식과 물을 자유롭게 섭취할 수 있었습니다. 실험 23일째에는 같은 회사에서 추가로 3주 된 수컷 SD 쥐 5마리를 구입했습니다. 이 쥐들은 동일한 사육 환경에서 5일간 적응시킨 후 PEM 추출에 사용되었습니다. 실험 절차를 요약한 회로도와 대표적인 절차 사진은 그림 1에 나와 있습니다.

실험 0일째에 대조군을 제외한 모든 쥐의 뒷발바닥에 0.5 mL/kg의 CFA를 주입하여 RA를 유도하였습니다. 대조군 쥐에서도 같은 부위에서 동일한 양의 생리식염수를 투여했습니다. RA 모델²³의 성공적인 확립 평가 기준으로 발 두께가 사용되었습니다.

2. 렌티바이러스 주사

RA + TIM-3^- 및 RA + TIM-3^- + Mox 그룹의 쥐들은 실험 첫날에 뒷발바닥에 LV-Havcr2-RNAi(94435-1)를 주입했습니다(3.5 ×^{10 7} TU/mL; 10 μL 한 발). 다른 모든 쥐는 동일한 해부학적 부위에 동일한 생리식염수 주사를 받았다²⁴.

3. 뜸 부활

실험 7일째에 Mox 및 RA + TIM-3^- + Mox 그룹의 쥐들에게 뜸 치료를 받았습니다. 시술을 원활하게 하기 위해 BL23과 ST36 경혈점 주변 약 1× 1cm 범위 내의 털을 면도했으며(이 시술은 나머지 그룹의 쥐에게도 시행됨). 낸 부술 중에는 각 쥐를 몸 크기보다 약간 큰 나무 블록에 두 개의 탄력 밴드로 부드럽게 고정하여 치료 부위를 완전히 노출시켰습니다(다른 그룹의 쥐도 마찬가지로 제압되었습니다). 이후 두 경혈 모두에 곡물 모양의 뺥원추를 적용하였습니다. 개인 간 열 자극의 일관성을 보장하기 위해, 각 목사 콘(직경: 2 mm; 높이: 5 mm; 목사 양모 함량: 60%)은 표준화된 5mg 목사 양모 분량에서 준비되었습니다. 매일 한쪽 경보에 다섯 개의 원추세포를 적용하고, 다음 날에는 반대쪽 경보에 번갈아 치료를 시행했다. 이 교대 치료 프로토콜은 3주간 유지되었으며, 7일마다 하루 휴식 기간이 있었습니다.

3주기의 뜸 치료 후, 쥐들은 이소플루란(유도 4%, 유지 흡입 2%)으로 마취를 받고 복대동맥에서 5mL의 동맥혈을 채취하였다. 원심분리(2,000 × g, 15분, 4 °C) 후, 상청혈청은 마이크로 원심분리관으로 옮겨져 −20 °C에서 저장되었습니다. 혈액 채취 후, 쥐들은 자궁경부 탈구로 안락사되었습니다. 발목 관절은 조심스럽게 해부되어 4% 파라포름알데히드에 고정되었습니다. 활막 조직과 비장은 액체 질소를 이용해 빠르게 냉동하여 −80 °C에서 보관했습니다.

4. 쥐 발 두께 측정

쥐 뒷발 중간 지점에는 방수 마커가 표시되어 일관된 측정 위치를 보장했습니다. 발바닥 두께는 모델링 전, 성공적인 모델링 후, 그리고 각 치료 과정 사이(실험 0일, 7일, 14일, 21일, 28일차)에 베르니어 캘리퍼스를 사용해 측정하였습니다.

5. 조직학적 분석

4% 파라포름알데히드에 고정한 후, 쥐 발목 관절을 충분한 양의 탈석화 용액(10% 개미산)이 담긴 원심분리관에 넣었습니다. 튜브들은 셰이커에 장착되어 상온에서 30시간 동안 부드럽게 교반했습니다. 이 기간 동안 탈석화 용액은 정기적으로 교체되었고, 과도한 탈석을 방지하기 위해 조직 상태를 모니터링했습니다. 이후 조직을 5% 티오설페이트 나트륨 용액에 옮겨 6시간 동안 중화시키고, 이어서 수^돗물에서 4시간 동안 꼼꼼히 세척하였다. 조직은 탈수되어 파라핀 블록에 박혔습니다. 단면은 두께 5μm로 횡방향으로 절단되었습니다. 탈파라핀 및 수분 공급 후, 절편을 헤마톡실린으로 3분간 염색한 뒤 물로 헹군 후 잠시 5초간 분화한 후 다시 세척하고 5초간 청색 처리를 한 뒤, 흐르는 수돗물로 철저히 헹군 후 그 후 절편을 95% 에탄올에 1분간 탈수시키고 에오신으로 15초간 교환했습니다. 마지막으로 절편을 탈수하고 정리한 뒤, 광학 현미경으로 관찰할 수 있도록 커버슬립에 부착했습니다. 이 염색으로 핵은 파란색으로 나타났고, 세포질, 콜라겐 섬유, 적혈구는 다양한 분홍색으로 나타났습니다; 각화층은 보통 선명한 빨간색으로 염색됩니다.

6. 엘리사

제조사 프로토콜에 따라 각 혈청 샘플(미리 희석된 1:2)의 100 μL 알리코트가 지정된 웰에 첨가되었습니다. 빈 유정과 표준 유정이 병행하여 포함되었습니다. 밀봉 후 플레이트는 37°C에서 90분간 배양되었습니다. 세척 단계 후, 검출 항체를 추가하여 37°C에서 60분간 인큐베이션했습니다. 또 한 번 세척한 후 스트렙타비딘-HRP 결합체가 추가되었다. 철저한 세척 후 색 현상을 위해 기질 용액을 첨가했으나, 정지 용액을 첨가하여 색 현상을 멈추게 했습니다. 흡광도는 450 nm(OD₄₅₀)에서 측정되었습니다. IL-4와 IFN-γ의 시료 농도는 표준 곡선에서 보간하여 결정되었으며, 최종 농도는 해당 희석 계수를 곱하여 계산하였습니다.

7. qRT-PCR

총 RNA는 수정된 프로토콜에 따라 TRIzol 시약을 사용해 혈청 샘플에서 추출되었습니다. 간단히 100 μL의 혈청을 1mL의 TRIzol 시약과 격렬한 피펫팅으로 균질화하였습니다. 이후 100μL의 클로로포름이 첨가되었고, 혼합물을 15초간 격렬하게 흔들었으며, 실온에서 3분간 배화했다. 샘플은 12,000 × g 에서 4 °C에서 15분간 원심분리하여 상 분리를 달성했습니다. 상부 수용상은 조심스럽게 새로운 튜브로 옮겨 0.5mL 이소프로판올과 혼합한 후 실온에서 10분간 배큐했다. 이후 총 RNA는 12,000 × g 원심분리로 4°C에서 10분간 펠릿으로 투여되었습니다. 생성된 RNA 펠릿은 75% 에탄올 1mL로 한 번 세척(4 °C에서 8,000 × g 에서 5분간 원심분리) 공기 건조 후 최종 용해되었습니다. 얻은 RNA는 cDNA 합성 키트를 이용해 역전사를 거쳤습니다. 유전자 발현 분석은 qRT-PCR을 통해 실시간 정량 PCR 시스템 소프트웨어를 사용해 수행되었습니다. β-액틴은 정상화를 위한 하우스키핑 유전자로 사용되었습니다. TIM-3 mRNA의 상대 발현은 2^−ΔΔCt 방법을 사용하여 계산하였습니다. 프라이머의 세부 사항은 표 1에 추가되어 있습니다.

8. 서부 얼룩

추출한 비장은 미리 냉각된 인산염 완충 생리식염수(PBS)로 세 번 세척한 후 작은 조각으로 잘라낸 뒤, 조직의 10배 용량에 용해 완충제를 첨가하여 용해했다. 균질화는 균질화 튜브를 사용하여 수행되었습니다. 균질체는 용해를 위해 30분간 얼음 위에 올려두었고, 조직이 완전히 파열되도록 5에서 6차례 소용돌이를 가했다. 샘플들은 12,000 × g에서 4 °C에서 10분간 원심분리되었고, 상원액은 총 단백질 추출물로 수집되었습니다. 키트 프로토콜에 따라 비신코닉산(BCA) 분석법을 사용하여 표적 단백질 농도를 측정하였습니다.

10% 도데실 황산나트륨-폴리아크릴아마이드 겔 전기영동(SDS–PAGE)으로 분리한 후, 추출된 단백질 샘플은 폴리비닐리덴 디플루오라이드(PVDF) 막으로 옮겨졌습니다. 막은 1시간 동안 실온에서 Tris 완충 식염수 중 Tween 20(TBST)과 5% 탈지분유 보충으로 차단한 후, 4°C에서 1차 항체와 함께 하룻밤 배양하였습니다. 철저한 세척 후, 막은 고추냉이 과산화효소(HRP) 결합된 2차 항체와 함께 37°C에서 2시간 동안 배양되었습니다. 마지막으로 화학발광 영상 시스템을 사용해 이미지를 촬영하고 ChemiScope 분석 소프트웨어로 그레이스케일 강도를 분석했습니다. 1차 및 2차 항체에 대한 자세한 내용은 표 1에 나와 있습니다.

9. 면역형광 검출

추출한 滑막 조직은 4% 파라포름알데히드에 담근 후 탈수 후 파라핀에 박혀 5 μm 두께의 조각으로 절단되었습니다. 각 섹션은 자일렌 I, 자일렌 II, 자일렌 III에 순차적으로 탈왁싱(각각 10분씩), 절대 에탄올로 세 차례(각각 5분) 세척과 증류수로 마지막 세척을 했습니다.

항원 회수 후 에틸렌디아미네테트라아세트산(EDTA)에서 슬라이드를 인산염 완충 생리식염수(PBS)에 3차례(각각 5분씩) 부드러운 교반과 함께 세척하였습니다. 그 후 3% 소 혈청 알부민(BSA)으로 실온에서 30분간 인큐베이션하여 차단했습니다. 차단 후에는 항유도성 일산화질소 합성효소(iNOS)(1:500)와 항-CD206(1:400)을 포함한 1차 항체를 적용하여 4°C에서 24시간 배양했습니다.

5분간 PBS 세척 3회를 마친 후, 절편들은 37°C에서 어두운 곳에서 2차 항체(Cy3 결합 염소 항토끼 IgG, 1:300)와 함께 50분간 배양했습니다. 핵 염색은 슬라이드를 PBS로 세 차례(세척당 5분) 세척한 후, 4′6-디아미디노-2-페닐린돌(DAPI) 염색액으로 처리한 후 실온에서 어두운 환경에서 10분간 배양하는 방식으로 수행되었습니다. 이 이미지들은 형광 현미경으로 검사되었습니다.

10. PEMs 고립

자궁경부 탈구에 의한 안락사 후, 쥐들은 75% 에탄올에 10분간 소독한 후 멸균된 생물안전 캐비닛으로 옮겨졌습니다. 복부 피부는 멸균 가위로 절개한 후, 주사기를 이용해 15 mL 인산염 완충 식염수(PBS)를 복강내 주사했습니다. 복부를 부드럽게 마사지한 후 복막액을 다시 주사기로 흡입하여 원심분리관으로 옮겨 대식세포 현탁액을 얻었습니다.

세포 현탁액은 PBS로 세 번 세척한 후, 10% 태아 소 혈청(FBS)이 포함된 둘벡코의 변형 이글 배지(DMEM)에 씨앗을 넣었습니다. 세포는 37°C, 5% CO₂의 가습 대기에서 24시간 동안 배양되었습니다. 이 잠복 기간 후 얻은 부착 세포는 대식세포로 확인되었습니다.

11. 트랜스웰

이동 분석은 24웰 플레이트를 사용하여 수행되었습니다. 혈청 기근 24시간 후, 300 μL DMEM에 4×⁴ 개의 대식세포를 1% 태아 소 혈청(FBS)과 1% 항생제(50 U/mL 페니실린, 50 μg/mL 스트렙토마이신)를 보조하여 상부 챔버에 추가했고, 10% FBS와 1% 항생제를 포함한 700 μL DMEM을 하부 챔버에 주입하였습니다. 세포들은 서로 다른 쥐 그룹의 혈청으로 24시간 동안 전처리되었습니다. 그 후 판은 5% CO₂ 환경에서 37°C에서 24시간 배양되었습니다. 결정 바이올렛 염색 후, 상부 챔버를 면봉으로 채취하여 이동하지 않은 세포를 제거했습니다. 이동하는 세포들은 광학 현미경 아래 네 개의 무작위로 선택된 시야에서 수동 세어를 통해 정량화되었습니다.

12. 통계 분석

통계 분석은 SPSS 버전 25.0을 사용하여 수행되었습니다. 데이터셋은 먼저 분산의 정규성과 동질성을 검사했습니다. 이러한 모수적 가정이 충족되면, 그룹 간 비교는 분산 일방향 분석(ANOVA)과 최저유의차이(LSD) 사후 분석으로 수행되었습니다. 이러한 가정을 위반하는 데이터에 대해서는 비모수 Kruskal–Wallis 검정을 적용하고, 다중 비교에 대해 적절한 보정을 적용한 Mann–Whitney U 검정이 적용되었습니다. 모든 값은 표준편차± 평균 단위로 표현되었으며, P < 0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주되었습니다.

결과

데이터 이용 가능성
이번 연구에서 생성된 원시 데이터는 Figshare 저장소(https://doi.org/10.6084/m9.figshare.31550197)에서 확인할 수 있습니다.

젖 치료 후 쥐의 관절 병리와 발바닥 두께
CFA를 주사한 쥐는 뚜렷한 발바닥 부기와 발적 발적이 나타났습니다. 헤마톡실린과 에오신 염색은 대조군이 관절 구조가 온전하고 매끄럽고 잘 조직된 활막 조직을 보였으며 염증성 세포 침윤이 없음을 보여주었습니다. 반면, RA 그룹은 뚜렷한 滑막 울혈, 부종, 광범위한 염증성 세포 침윤, 혈관 확장을 보였습니다. Mox 그룹에서는 활막 울혈과 부종이 감소했으며, 염증 세포 침윤과 혈관 확장이 감소했습니다(

토론

현재 RA 관리는 주로 DMARDs에 의존하고 있습니다. 그러나 이러한 약리학적 약물들은 비용이 많이 들고, 간신 기능 장애와 중증 감염 등 무시할 수 없는 부작용과 연^{관되어 개인}과 의료 시스템에 상당한 부담을 줍니다. 반면, 외부 치료로서 뜸 치료는 전신 독성 위험이 거의 보고되지 않으면서 유리한 안전성 프로필을 보입니다. 이 방법은 비교적 간단하여 적절한 훈련 후 환자가 스스로 투여할 수 있는 가능성을 허용합니다. 이 측면은 만성 질환 관리에 매우 중요한 환자 참여도와 자기 효능감을 높일 수 있습니다. 더불어, 저렴한 비용과 최소한의 인프라 요구 덕분에 빽촌은 자원이 제한된 환경이나 장기 생물학적 사용으로 인한 경제적 어려움을 겪는 환자에게 특히 적합합니다. 더불어, 모스트버스션은 여러 연구에서 RA 증상 완화에 효과가 입증되어 유망한 보완 치료제로 자리매김하고 있습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
완전한 친구 s 보조 교사 (CFA)	시그마-올드리치	F5881	쥐에서 류마티스 관절염(RA) 모델 유도에 사용됨
렌티바이러스 (TIM-3 RNAi)	GenChem 바이오테크놀로지, 상하이	3.5번반; 107 TU/mL	TIM-3 유전자 발현을 침묵시키는 데 사용됨
목사 콘(밀 크기)	전통 중의학 공급업체	해당 없음	BL23 및 ST36 경혈 근교에 사용됨