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연구 논문

설산 진로한 코팅제의 진통 및 항염 효과와 그 경피 기전

238 조회수

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DOI:

10.3791/70480

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2026년 4월 30일

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1Qingdao Academy of Chinese Medicinal Sciences, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, 2State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 3Tibet Rhodiola Pharmaceutical Holding Co. Ltd, 4State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 5Laboratory of Epigenetics and Immunology, West China Institute of Women and Children's Health, NHC Key Laboratory of Chronobiology, Department of Obstetric and Pediatric, Key Laboratory of Birth Defects and Related Diseases of Women and Children of MOE, State Key Laboratory of Biotherapy, West China Second University Hospital, Sichuan University

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

본 연구는 설산 진로한 진통제 진통제의 진통제 및 항염증 효과를 통합적으로 평가하는 접근법을 제시합니다. 효과는 면적과 시간에 따라 달라졌으며, 경피 분석 결과 벤조일라코닌이 확산 조절 방출을 가진 주요 투과 성분임이 확인되었습니다.

초록

국소 전통 중의학(TCM) 제제는 국소 치료 효과를 제공하고 전신 부작용을 줄일 수 있어 염증성 및 통증 관련 질환 관리에 널리 사용됩니다. 그러나 임상적으로 적용되는 많은 제형의 약리학적 특성과 경피 메커니즘은 아직 충분히 규명되지 않았습니다. 티베트 의학 제형인 쉬에산 진루오한 진통제 진통제(XJCA)는 염증성 통증에 흔히 처방되지만, 적용 범위, 작용 지속 시간, 국소 및 전신 효과의 상대적 기여도에 대해서는 체계적으로 평가되지 않았습니다. 본 연구는 이러한 매개변수를 조사하기 위한 통합 생체 내 시험관 내 방법론적 틀을 확립합니다. 여러 상완동물 모델을 사용하여 중추 및 말초 진통 활동과 급성 염증 반응을 평가하였으며, 이를 통해 지역적, 시간적, 국소 대 전신 의존적 효과를 평가할 수 있었습니다. 동행으로, 프란츠 확산 셀 시스템과 초고성능 액체 크로마토그래피-텐덤 질량분석법(UPLC-MS/MS)을 결합하여 두 가지 주요 알칼로이드인 벤조일라코닌과 아코니틴의 경피적 흡수 동역학을 특성화하였습니다. XJCA는 부적·시간 의존적인 진통 및 항염증 효과가 유의미했으며, 적용 범위가 클수록 진통 효과에 대한 전신적 기여도가 더 높았다. 경피 동역학 분석 결과, 벤조일라코닌은 상당히 높은 정상 상태 플럭스를 보였고 확산 조절 방출을 따르는 히구치 모델과 일치하는 반면, 아코니틴은 투과성이 낮고 더 복잡한 방출 프로필을 보였다. 이 발견들은 경피 전달 행동과 관찰된 약리역학적 결과를 연계시키며, 국소 TCM 제형을 평가하고 최적화하는 구조화된 틀을 제공합니다.

서론

염증과 통증은 신체가 부상과 감염에 대해 방어하는 데 중요한 역할을 하는 상호 연관된 생리적·병리학적 반응입니다. 그러나 골관절염, 류마티스 관절염, 외상 후 통증과 같은 지속적이거나 과도한 염증과 통증은 조직 손상을 초래하여 환자의 신체 기능과 정신 건강에 심각한 지장을 줄 수 있습니다 2,3. 현재 염증과 통증에 대한 임상 치료는 주로 비스테로이드성 소염제(NSAIDs)(예: 디클로페낙, 이부프로펜)와 오피오이드에 의존하고 있습니다. NSAIDs는 항염증 및 진통 효과로 널리 사용되지만, 경구 투여는 종종 위장 자극, 신장 손상, 심혈관 위험을 유발합니다. 오피오이드는 강력한 진통제이지만, 중독, 호흡 억제 및 기타 심각한 부작용과 연관되어 있습니다 5,6. 따라서 더 안전한 대체 대안에 대한 임상적 필요성이 커지고 있습니다. 작용 부위에 직접 약물을 전달하는 국소 제제는 이러한 전신적 부작용을 완화하는 전략적 해결책을 제공합니다 7. 그러나 효능은 약물이 피부 장벽을 극복하는 능력에 크게 의존하며, 이는 특히 큰 분자나 지친성이 낮은 환자에서 전임상 소견의 번역 가능성을 제한할 수 있습니다 8,9. 따라서 안전하고 효과적인 대체 요법, 특히 국소 작용과 최소한의 전신 노출을 가진 국소 제제 개발은 약리학 연구 중점이 되었습니다.

국소 한의학 제제는 염증과 통증 치료에 오랜 기간 적용되어 왔습니다. 이들의 장점으로는 병변 부위에 직접 작용, 전신 부작용 감소, 약물 방출 기간의 장기 시간이 있습니다10,11. XJCA는 여러 한방 성분으로 구성된 임상에서 사용되는 중의학 필름 형성 젤입니다. 중국에서 골관절염, 연부 조직 손상, 신경통으로 인한 통증과 염증 완화에 널리 사용되고 있습니다 12,13,14. 그러나 효능에 대한 과학적 증거는 제한적이며, 적용 지역과 효능 간의 관계, 작용 시간 경과, 국소 효과와 전신 효과의 차이 등 주요 약리역학적 특성도 명확하지 않습니다. 이러한 격차는 XJCA의 합리적인 임상 적용을 방해합니다.

경피 흡수는 국소 제제의 치료 효과에 영향을 미치는 주요 요인입니다. 주요 장벽으로서 피부는 약물이 전신 순환계나 국소 조직으로 침투하는 것을 제한합니다15,16. XJCA의 경우, 활성 성분의 경피 흡수 특성을 이해하는 것이 약리역학적 효과를 명확히 하고 제형을 최적화하는 데 매우 중요합니다. 이전 TCM 제제 연구들은 알칼로이드(예: 아코니틴 유도체)가 항염증 및 진통 효과를 가진 중요한 활성 성분임을 보여주었다17,18. 벤조일라코닌과 아코니틴은 XJCA19,20의 주요 알칼로이드이며, 이들의 함량과 경피 내 거동이 XJCA의 효능에 직접적인 영향을 미칠 수 있습니다. 그러나 XJCA에서 이 두 성분의 경피 흡수나 그 동역학적 특성 및 방출 기전에 대한 보고는 없습니다.

이 연구 공백을 메우기 위해 본 연구는 XJCA를 사례 연구로 활용하여 국소 TCM 제형을 평가하는 체계적인 방법론적 틀을 개발하고 검증하는 것을 목표로 합니다. 목표는 다음을 포함하는 통합 평가 접근법을 입증하는 것이었습니다: (1) 적용 부위, 치료 기간, 국소 및 전신적 약물 전달이 효능에 미치는 영향을 분석하기 위해 설계된 생체 내 약리역학 모델; 그리고 (2) 프란츠 확산 세포와 UPLC-MS/MS를 이용한 시험 관 내 경피 반응학 평가를 통해 주요 활성 알칼로이드의 경피적 흡수 및 방출을 측정하였습니다. 우리는 XJCA의 생체 내 효능, 특히 면적과 시간 의존성이 주요 구성 요소의 경피 동역학에 의해 주로 결정된다고 가설을 세웠습니다. 생체 내 효능 매개변수를 해당 시험관 내 동역학 데이터와 연결함으로써, 이 접근법은 경피 전달이 국소 TCM 제제의 약리역학에 어떻게 영향을 미치는지에 대한 메커니즘적 이해를 제공합니다.

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프로토콜

이 연구는 실험동물 복지 윤리 검토 지침(GB/T 35892-2018)과 실험동물 인도적 처우에 관한 지침에 따라 수행되었습니다. 모든 동물 시술은 청두 중의학대학교 실험동물윤리위원회(승인 번호)의 승인을 받았습니다. TCM-09-315).

실험 동물과 주거
특정 병원체가 없는 쿤밍 마우스(20~25g, 수컷/암컷 = 1:1)와 SPF Sprague-Dawley(SD) 쥐(180~200g)를 사용하였습니다. 동물들은 통제된 조건 하에 사육되었는데, 12시간의 빛과 어둠 주기, 23± 2°C의 온도, 60%± 5%의 습도, 그리고 자유롭게 먹이와 물을 이용할 수 있었습니다. XJCA의 진통 및 항염증 프로필을 포괄적으로 평가하기 위해 생체 내 마우스 모델 세트를 사용하였습니다. 핫플레이트 검사는 중추 매개 통증 역치를 평가했으며; 포르말린 검사는 신경성 통증(1상)과 염증성 통증(2상)을 구분했으며; 자일렌 유도 귀 부종 검사는 급성 항염증 효과를 평가했으며; 그리고 아세트산에 의한 꿈틀거림 검사는 내장 염증 통증을 모델링했다. XJCA는 즉시 사용할 수 있는 필름 형성 젤임을 유의하세요. 신청 전에 별도의 준비는 필요하지 않습니다.

적용 면적이 진통 및 항염증 효과에 미치는 영향
SPF 쿤밍 마우스는 무작위로 4개 그룹(수컷/암컷 = 1:1)으로 나뉘었습니다: 정상 대조군(NC), XJCA 소면적(1×1cm,1cm 2) 그룹(XJCASAAG), XJCA 중면적군(1×2cm, 2cm2) 그룹(XJCAMAAG), 그리고 XJCA 대면적군(1.5×2cm, 3cm2) 그룹(XJCALAAG). XJCA는 0.015 g/cm2 (쥐당 0.15 mL)로 7일 연속 적용되었습니다. NC 그룹도 같은 방식으로 생리식염수를 투여했습니다. 마지막 투여 후 120분 후, 핫플레이트 및 포르말린 검사를 사용해 진통 효과를 평가하였다.

핫플레이트 테스트에서는 쥐를 55± 0.5 °C로 유지된 일정 온도의 핫플레이트 위에 올려 사전 선별했습니다. 발 철수 잠복 기간(PWL)을 기록했으며, 기저 PWL 간격이 5초에서 30초 사이의 쥐만 선정되었다(n = 40, 수컷/암컷 = 1:1). 7일 치료 후 PWL은 30분 간격으로 3회 측정되었고, 평균 값이 기록되었습니다. 조직 손상을 방지하기 위해 60초의 차단 시간이 적용되었다.

포르말린 검사(n = 40, 남성/여성 = 1:1)에서는 7일 치료 후 1% 포르말린(1 mL/kg)을 오른쪽 뒷발에 피하 주입하에 투여했습니다. 주사 직후에는 쥐들을 개별 관찰실에 배치했습니다. 통증 관련 행동(핥기, 들어 올리기, 도망치기)은 1단계(0–10분, 신경성 통증)와 2단계(15–30분, 염증성 통증) 동안 기록되었습니다. 발바닥의 눈에 띄는 부기로 성공적인 주사가 확인되었습니다.

시간 의존적 진통 및 항염증 효능 평가
120마리의 SPF 쿤밍 마우스를 무작위로 세 그룹(n = 10, 수컷/암컷 = 1:1)으로 나누었습니다: 모델 대조군(MC), XJCALAAG(1.5×2 cm, 3 cm2) 그룹, 그리고 디클로페낙 디틸아민 에뮬젤(DDE) 양성 대조군입니다. XJCA(0.015 g/cm2, 0.15 mL/마우스)와 DDE(0.016 g/cm2, 0.15 mL/마우스)는 7일 연속 적용되었으며, MC 그룹은 정상 식염수를 투여하였다. 마지막 투여 후 2, 4, 6, 8시간마다 자일렌 유도 귀부종 검사와 아세트산에 의한 꿈틀거림 검사가 모두 실시되었습니다.

자일렌 유도 귀부종 검사에서는 오른쪽 귀 양쪽에 30 μL의 자일렌을 투여했으며(MC 그룹은 정상 식염수 투여), 60분 후 쥐들에게 펜토바르비탈 나트륨(30 mg/kg, 이종)으로 마취하고 희생시켰다; 이어 직경 8mm의 귀 디스크를 천공하고 무게를 재았습니다. 귀 부종 정도는 오른쪽 귀 디스크 무게에서 왼쪽 귀 디스크 무게를 뺀 값으로 계산되었으며, 부종 억제율은 [(MC 그룹 부종 정도 – 치료군 부종 정도) / MC 그룹 부종 정도] × 100%로 결정되었습니다. 동형 귀 펀치(직경 8mm)를 좌우 귀 양쪽 같은 위치에서 측정하고, 전자 저울로 귀 조직을 무게로 측정했습니다.

아세트산 유도 몸부림 검사에서는 0.6% 아세트산 용액(0.1 mL /10 g)을 복강 내 주입하였고, 몸부림 반응 시간(뒷다리 확장, 복부 수축, 몸통 비틀림)이 20분 이내에 기록되었습니다. 아세트산 주입 직후, 쥐들은 개별 관찰 우리에 넣었습니다. 몸부림 억제율은 다음 공식에 따라 계산되었습니다: [(MC 그룹의 몸 비틀거리는 시간 – 치료군의 몸 비틀거리는 시간)/MC 그룹의 몸 비틀거리는 시간]×100%.

국소 진통과 전신 진통 효과 비교
국소 제한 진통과 경피 흡수 및 전신 분포에서 발생하는 효과와 분리하기 위해, 우리는 명확한 운영 정의를 가진 두 가지 투여 요법을 구상하였다. 국소 효과란, 약물이 적용 부위 바로 아래 또는 인접한 조직에 국한되어 작용하며, 순환하는 약물의 기여는 거의 없다는 것을 의미합니다. 반면, 전신 효과는 혈액에 침투한 약물이 작용하여 적용 부위에서 멀리 떨어진 중심 또는 말초 부위에 작용하는 진통을 의미합니다. 우리는 적용 부위를 넓힐수록 약물의 전신 흡수가 증가하여 국소 작용만으로 인한 진통 효과보다 더 큰 진통 효과를 발생시킨다는 가설을 직접 검증했습니다. 이는 단위 면적당 용량을 일정하게 유지하면서 총 처리 면적을 변화시키는 방식입니다. 이 설계는 노출의 공간적 규모가 전신 생체이용률과 그로 인한 전신 매개 효과의 기여도를 어떻게 결정하는지 정량화할 수 있게 합니다.

30마리의 SPF 쿤밍 마우스(핫플레이트 테스트에서 PWL 5~30초)는 무작위로 3그룹(n=10개, 수컷/암컷=1:1)으로 나누었다: NC 그룹, 국소 약물 그룹(TMG), 전신 약물 그룹(SMG). XJCA는 0.015 g/cm 2의 고정 용량, 0.15 mL의 부피로 7일 연속 투여되었습니다.

TMG의 경우, 이 제형은 하지의 국소적인 피부 부위에 적용되었습니다. SMG의 경우, 전신 흡수 증가를 시뮬레이션하기 위해 후다리와 등 피부를 포함한 복합 부위에 적용되었으며, 단위 면적당 0.015 g/cm2의 용량을 동일하게 유지했습니다. 이 설계는 SMG 그룹에 적용된 XJCA의 총 양이 TMG 그룹보다 비례적으로 더 많아, 전신 순환계로의 경피 흡수 가능성을 높였습니다. 마지막 투여 후 120분에 핫플레이트 검사(30분 간격으로 3회, 평균 값 기록)로 PWL을 측정했습니다. TMG(국소 효과 우세)와 SMG(국소 + 전신 효과)를 비교함으로써 전신 약물 분포가 전체 진통에 미치는 기여도를 분석할 수 있었습니다.

시험관 내 경피 흡수 연구
이 연구는 유효 확산 면적이 1.76625 cm²인 프란츠 확산 셀을 사용했습니다. 프란츠 확산 셀은 경피적 흡수 평가의 금본위입니다. 이 시스템은 검사 제형을 포함하는 기증자 구획, 생리학적 완충제로 채워진 수용체 구획, 그리고 그 사이에 부착된 절제 피부로 구성되어 있습니다. 약물 분자는 피부를 통해 수용체 용액으로 확산되며, 시간이 지남에 따라 샘플을 수집하여 투과 속도론을 정량화합니다. 펜토바르비탈 나트륨(30 mg/kg, ip.)으로 마취한 SD 쥐의 복부 피부는 피하지방을 제거하고 정상 식염수로 세척한 후 정상 식염수에 24시간 담가두어 신중하게 준비하였습니다. 각질층의 완전성을 보호하는 것이 매우 중요합니다. 표피 표면을 늘리거나 접거나 만지지 마세요. 피부의 투과성은 수분 상태에 크게 좌우됩니다. 수화 시간은 재현 가능한 결과를 제공합니다.

준비된 피부는 기증자와 수용체 구획 사이에 부착되었으며, 각질층은 기증자 구획을 향하게 했습니다. 기증 쪽에는 200 μL XJCA(조약 0.06 g에 해당)가 투여되었고, 수용체 구획에는 15mL의 수용액(30% 에탄올:70% PBS, 15분간 초음파 제거로 탈기)이 32 ± 0.5 °C에서 350 r·min⁻1의 자기 교반 하에 유지되었다. 사용 전 수신액은 기포 형성을 방지하기 위해 15분간 초음파 제거로 기가스를 제거해야 합니다.

수용체 구획에서 2, 4, 6, 8, 10, 12, 20, 24시간에 1mL 샘플을 채취했으며, 매번 같은 부피의 미리 데워진 32°C 신선한 수용액으로 보충하였습니다.

참고: 확산 속도에 영향을 줄 수 있는 온도 변동을 피하기 위해 교체 용액은 동일한 온도여야 합니다. 수집된 샘플은 0.22 μm 미세다공성 막을 통해 여과된 후 24시간 이내에 UPLC-MS/MS로 분석되었습니다. 아코니틴의 불안정성으로 인해 샘플은 채취 후 24시간 이내에 분석하거나 안정제를 첨가해야 합니다. 즉각적인 분석이 불가능하다면 샘플을 분리하여 -80 °C에 보관하되, 진행 전에 이 조건에서의 안정성을 검증하세요.

UPLC-MS/MS 조건
크로마토그래피 분석은 40 °C에서 유지된 Agilent ZORBAX SB-C18 컬럼(2.1 × 100 mm, 1.8 μm)을 사용하여 0.3 mL/min, 2 μL의 주입 부피로 수행되었습니다. 이동상은 아세토니트릴(A)과 0.5 mL/L 빙하 아세트산(B)을 포함한 0.1 mol/L 아모늄 용액으로 구성되었으며, 다음과 같은 구배 프로그램을 사용했습니다: 0–5분 (26%–45% A), 5–7분 (45%–74% A), 7–10.1분 (74%–90% A), 10.1–12분 (90% A), 12–12.1분 (90%–26% A), 그리고 12.1–15분 (26% A).

질량분석은 전기분무 이온화(ESI) 원천을 양이온 모드로 사용하여 다음 설정에서 수행되었습니다: 건조 가스 온도 500 °C, 건조 가스 흐름 5 L/min, 네뷸라이저 압력 50 psi, 피복 가스 온도 500 °C, 외피 가스 흐름 11 L/min, 모세관 전압 5500 V, 그리고 다중 반응 모니터링(MRM) 모드에서의 데이터 수집. MRM 전이 및 매개변수는 다음과 같이 설정되었습니다: 아코니틴(m/z 646.6→586.4, 체류 시간 100 ms, DP 102.930 V, CE 49.810 V)와 벤조일라코닌(m/z 604.4→105.1, 체류 시간 100 ms, DP 105.120 V, CE 74.270 V).

방법 검증 및 데이터 분석
방법 검증은 특이성, 선형성, 정밀도, 안정성, 반복성을 평가하여 수행되었습니다. 특이성은 빈 수용액, 표준 용액, 샘플 용액을 분석하여 내인성 물질의 간섭이 없음을 확인하였습니다. 선형성을 위해 최소제곱회귀법을 사용해 농도의 피크 면적을 그래프로 표시하여 표준 곡선을 구성했습니다. 정확도는 50 ng/mL 표준 용액을 사용하여 일중 6회 및 하루 간(3일 동안 2회 복제) 검사를 통해 평가되었으며, 이는 피크 영역의 상대 표준편차(RSD)로 표현되었습니다. 안정성은 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 18, 24시간에서 샘플 솔루션의 최고 면적 RSD를 산출하여 평가하였다. 6개의 평행 시료 준비에서 피크 면적 RSD를 측정하여 반복 가능성을 확인했습니다. 표준 스톡 용액은 벤조일라코닌과 아코니틴 각각 2.5mg씩을 정확히 계량한 후, 이소프로판올-디클로로메탄(1:1) 혼합물에 용해하여 최종 농도는 25 μg/mL로 만들어졌습니다. 시험 용액을 위해 적절한 양의 샘플을 원심분리관에 옮기고 12,000 x g 의 고속 원심분리 5분간 가한 후 상원액을 수집하여 분석했습니다.

각 시점에서의 누적 투과량(Qn, ng/cm2)은 다음 공식으로 계산되었습니다:

Qn = [(Cn × V + ΣCi × Vi) / A]

여기:
Qn: n번째 샘플링 시점의 누적 투과량(ng/cm2).
Cn: n번째 샘플링 시점에서 수용액 내 약물 농도(ng/mL).
Ci: i 번째 샘플링 시점에서 수용액 내 약물의 농도(ng/mL).
V: 수용액의 부피(15 mL)입니다.
Vi: 각 시점에서의 샘플 부피(1 mL).
A: 프란츠 확산 셀의 유효 확산 면적(1.76625 cm2).

누적 투과 양-시간(Q-t) 곡선은 Qn 을 좌표, 시간 (t, h)를 추첨으로 그렸다. Q-t 곡선의 선형 부분은 선형 회귀를 적용하였고, 회귀 방정식의 기울기는 정상 상태 경피 플럭스(Js, ng/cm2/h)로 취했다.

Q-t 곡선은 0차 모형(Q = kt + b), 1차 모형(ln(Qmax - Q) = -kt + lnQmax), 히구치 모형(Q = kt1/2 + b)에 적합되었으며, 여기서 Qmax는 최대 누적 투과량, k는 속도 상수, b는 절편이다. 적합도는 상관계수 (R2)를 사용하여 평가되었으며, R2가 높을수록 더 나은 적합을 나타냈다.

통계 분석
모든 생체 내 행동 검사에 대한 개체-동물 원시 데이터와 시험관 내 투과 연구를 위한 원시 UPLC-MS/MS 크로마토그래피 데이터는 각각 보조 파일 1과 2로 제공됩니다. 모든 실험 데이터는 평균 ± 표준편차(x̄ ± SD)로 제시되었습니다. 통계 분석은 GraphPad Prism 9.0을 사용하여 수행되었습니다. 분산 일방향 분석(ANOVA)과 더넷의 다중 비교 검정을 사용하여 그룹 차이를 비교하였습니다. p < 0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주되었습니다.

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결과

진통제 및 항염 효능의 적용 부위에 따른 의존성
XJCA는 마우스 모델에서 0.03 g/cm2의 고정 용량으로 7일 연속 투여 후 적용 면적과 진통/항염증 효능 사이에 양의 상관관계를 보였습니다. 핫플레이트 테스트에서 NC 그룹은 가장 짧은 평균 PWL을 보였으며, 이는 가장 강한 통증 반응을 나타냈다. 반면, XJCA 처리군은 PWL의 부위 의존적 연장을 보였으며, XJCASAAG, XJCAMAAG, XJCALAAG 그룹은 모두 NC 그룹과 유의한 차이를 보였으며(그림 1A), 넓은 적용 부위가 진통 효과를 증진한다는 것을 확인했다.

신경성 통증(1상, 0~10분)과 염증성 통증(2상 15~30분)을 구분하는 포르말린 검사에서 일관된 소견이 관찰되었습니다 (

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토론

염증과 통증은 여러 신호 경로를 포함하는 복잡한 병리학적 과정입니다. 국소 제제는 병변에 정확히 작용하고 전신 부작용을 최소화할 수 있어 점점 더 선호되고 있습니다21,22. 이 연구는 XJCA를 시범으로 사용하여 국소 TCM 제형을 평가하는 체계적인 방법론적 틀을 성공적으로 확립하고 검증하였습니다. 전략적으로 설계된 생체 내 동물 모델과 정량적인 시험관 경피 분석을 결합한 통합 접근법은 생체 내 효능이 주요 성분의 경피 동역학에 의해 주로 결정된다는 가설을 검증하는 데 효과적임이 입증되었습니다.

방법론적 틀은 신뢰성과 재현성을 위해 특별한 주의를 기울여야 할 절차적 단계에 의존합니다. 우선, 프란츠 세포 연구를 위해 피부를 준비할 때 각질층의 완전성을 유지하는 것이 매우 중요합니다; 이 장벽층에 손상이 가해지면 투...

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공개 사항

저자들은 이해 상충을 선언할 필요가 없습니다.

감사의 글

이 연구는 산둥성 태산 학자 프로그램(tsqn20250730), 쓰촨 대학교-기업(티베트 로디올라 제약 지주공사)의 지원을 받았습니다. 협력 프로젝트(24H0764, 24H1043)와 산둥 중의학대학교 변취 학자 프로그램.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
0.22 & mu; 미세다공성 막 여과기밀리포어시그마, 매사추세츠주 벌링턴, 미국GSWP04700
아세트산CNW 테크놀로지컬스 GmbHN3800060크로마토그래피 등급
아세토니트릴머크 KGaAI1241129242질량분석등급
아코니틴청두 레메이톈 제약기술유한회사.DSTDW00060220mg, 그리고 ge; 순도 98%
애질런트 조르박스 SB-C18 컬럼애질런트2.1 & 시간; 100 mm, 1.8 & mu; m
아세트산 암모늄일반 시약P1492146분석 등급
벤조일라코닌청두 레메이톈 제약기술유한회사.DSTDB00550220mg, 그리고 ge; 순도 98%
디클로로메탄CINC 케미컬 주식회사P3048495분석 등급
디클로페낙 디틸아민 에뮬젤 (DDE)노바티스 파마 베이징 유한회사.H20020176
포르말린 용액시노팜 화학 시약 주식회사10010061
프란츠 확산 셀선전 루이툰 분석 기기 유한회사.RT806
그래프패드 프리sm 9.0 소프트웨어그래프패드 소프트웨어 주식회사버전 9.0
이소프로판올일반 시약0530240601D크로마토그래피 등급
생리식염수시노팜 화학 시약 주식회사SY15931
펜토바르비탈 나트륨시그마-올드리치, 세인트루이스, 미주리, 미국P3761
정수수광저우 왓슨 식음료 유한회사.배치 번호 20240717C
SPF 쿤밍 마우스청두 엔스웰 생명공학 유한회사.면허: SYXK (쓰촨) 2019-049
SPF 스프래그-도울리 쥐베이징 스페이푸 생명공학 유한회사.면허: SYXK (베이징) 2024-0010
UPLC-MS/MS 시스템애질런트 테크놀로지스, 캘리포니아주 산타클라라애질런트 1260 인피니티
쉬에산 진루오한 진통 완화 코팅제 (XJCA)티베트 제약 주식회사Z20010095
자일렌시노팜 화학 시약 주식회사10023418

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