자궁 속에서 태아 양 모델: 승모판 유입 폐쇄를 저형성 좌심증후군 유사 생리학 유발

요약

이 프로토콜은 풍선 기반 좌심방 유입 제한을 이용 한 태아 양 모델을 설명하며, 지속적인 혈역학적 모니터링과 정교한 좌심방풍선 이식 기법을 결합한 승모판 유입 폐쇄 모델입니다.

초록

저형성 좌심증후군(HLHS)은 좌심실(LV), 승모판, 대동맥판막, 그리고 상행대동맥의 발달 저하를 특징으로 하는 심각한 선천성 심장 결함입니다. "유류 없으면 성장 없음" 이론에 기반한 이 프로토콜은 승모판 유입을 제한하여 자궁 내 저절 성장을 저해하는 재현 가능한 태아 양 모델을 설명합니다. 임신 약 120일에 모체 복강 절개술과 자궁 절개술이 시행되고, 이어서 태아 왼쪽 흉강 절개술이 시행됩니다. 풍선 카테터를 좌심방(LA)에 삽입하고, 수술 시 방영된 상태로 남겨둔 후 약 수술 후 3일째부터 부풀려 승모판 유입을 제한하며, 산모 회복 후 유동 탐침으로 확인된 상승 대동맥의 전행성 혈류가 현저히 감소하거나 제거될 때까지 유지됩니다. 혈액역학적 변화는 태아 경동맥압과 상행 대동맥 흐름 탐침을 통해 지속적으로 모니터링됩니다. 태아는 최대 3주간 유지되며 부검을 받습니다. 중요한 단계로는 연약한 태아에 대동맥 흐름 탐침과 LA 풍선을 무외상 상태로 삽입하고 고정하는 것, 그리고 자궁 폐쇄 전후의 양수 손실 예방이 포함됩니다. 이 모델은 HLHS 기전 조사, 영상 바이오마커 검증, 산전 또는 주산기 치료 중재 평가, 예방 전략 개발을 위한 플랫폼을 제공합니다.

서론

저형성 좌심증후군(HLHS)은 좌심 구조와 대동맥의 발달 부족을 특징으로 하는 심각한 선천성 심장병의 한 형태^입니다. 작은 좌심실(LV)은 전신 관류를 지지할 수 없기 때문에 순환이 우심실에 의존하게 되어 단일 심실 생리학이 나타납니다. 따라서 HLHS는 일반적으로 일련의 단계적 개심 수술을 요구합니다.

HLHS의 병인은 다요인으로, 유전적 요인 ^2,3과 배아 기계적 혈 류^변화 3,4,5,6,7,8이 질병 발병의 주요 원인으로 인식됩니다. 최근 LV 성장을 촉진하기 위해 혈류를 조절하는 태아 개입이 점점 더 주목받고 있으며^, 이는 기전적 이해를 개선하고 치료 전략 개발을 지원하기 위해 대형 동물 HLHS 모델의 중요성을 부각시키고 있습니다.

태아 양은 만성적인 기구 사용과 수술 절차를 견디며, 태생 시 신생아와 비슷한 체형을 가지고 있기 때문에 인간 선천성 심장병 모델링에 자주 사용됩니다¹¹. 돼지 모델은 심혈관 연구에 널리 사용되며 특정 유전적·해부학적 측면에서 인간 심장과 더 유사하지만, 체외 케이블이 필요할 때는 외부로 연결된 선을 잡아당기거나 얽힐 수 있어 관리가 어렵습니다. 따라서 만성적인 외부 전선 및/또는 압력 모니터링 카테터가 필요한 연구에서는 양이나 소가 선호되는 경우가 많습니다. 이 반추동물들은 일반적으로 돼지보다 더 차분하며, 제한된 환경에서 더 쉽게 관리할 수 있습니다.

현재 HLHS 표현형을 복제하려는 대형 동물 실험은 주로 자궁 태아 양 모델에서 사용되고 있습니다. 양심장은 인간의 심장과 매우 유사하며, 4개의 방 구조, 방실판막 및 반월판 구조, 유사한 관상동맥 패턴을 가지고 있습니다. HLHS의 첫 태아 양 모델은 1970년대 Fishman 등에 의해 보고되었으며, 40여 년 후에 추가 모델이 개발되었습니다. 태아^{양 7,8, 13}에서 승모판 유입 폐쇄를 유도하고 요실 저형성을 유도하기 위해 여러 방법이 사용되었으며, 여기에는 자궁 내 유입을 포함합니다. 태아 난반공 스텐트⁷을 이용한 폐쇄, 승모판⁸ 위에 놓인 백금 코일을 이용한 LV 유입 폐쇄, 그리고 승모판 유입을 막기 위해 좌심방(LA) 내에 풍선 카테터를 삽입하고 팽창시키는 방법¹³. 그러나 명확한 수술 후 평가 기준에 따른 생존율은 상대적으로 낮아 42%^8.13에서 58^%까지 이어져 더 안전하고 덜 침습적인 접근법의 필요성을 강조합니다.

여기서 설명하는 모델은 좌심방풍선 팽창을 이용해 승모판 유입을 차단하며, HLHS 유사 생리학을 유도하고 LV 언로드를 역전시키기 위한 중재를 시험하는 유망한 실험적 접근법을 제시합니다. 그러나 다른 태아 양 모델과 마찬가지로 상대적으로 낮은 생존율은 여전히 중요한 한계로 남아 있습니다. 따라서 덜 침습적인 기법을 향한 추가 외과적 개선이 필요합니다. 이 연구는 만성 태아 양에서 LA 풍선 이식의 안전성과 실현 가능성을 향상시키기 위한 방법론을 설명합니다. 주요 초점은 수술의 실현 가능성과 안전성에 있습니다; 장기 결과 데이터는 제한적이지만, 이 모델은 저절 발달 기전 조사와 치료 전략 개발에 유용할 수 있습니다.

프로토콜

이 실험 프로토콜은 내셔널와이드 아동병원 애비게일 웩스너 연구소의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(AR24-00184)에서 승인받았습니다. 모든 절차는 국립보건원(NIH)의 실험동물 관리 및 사용 가이드에 따른 지침을 따랐습니다. 이 연구는 ARRIVE 지침(동물 연구: 생체 내 보고) 을 준수했습니다. 실험). 도싯 임신한 양(65–79kg, 임신 117–120일)은 수술 최소 1주일 전부터 병원체가 없는 특정 환경에서 음식과 물을 자유롭게 섭취할 수 있도록 방치되었습니다. 이 연구에 사용된 장비는 재료표에 나열되어 있습니다.

인도적 평가 기준:

라인 유지보수 문제.

태아에 삽입된 카테터와 플로우 프로브 케이블은 암양의 자궁과 옆구리를 통해 외부로 배출되어 몸 밖으로 고정됩니다. 이러한 외부화된 선들은 혈전증이나 휘어짐으로 인해 막힐 수 있으며, 동물의 움직임에 의해 밀려날 수 있습니다. 이로 인해 감염이나 주요 출혈 등 합병증이 발생할 수 있습니다. 합병증의 징후로는 샘플링 중 혈액 회귀 부족, 지속적인 모니터링 오류, 라인을 통한 주입 불가, 라인 이탈, 심한 출혈 등이 있습니다. 감염이나 출혈 징후가 없으면 막힌 선이 남아 있을 수 있습니다. 라인 제거 후 통제되지 않는 출혈이 발생하거나 막힌 라인과 관련된 명백한 감염 징후가 있는 경우, 암양과 태아는 안락사됩니다.

조산이야.

조산은 임신 어느 단계에서든 발생할 수 있으며, 태아 심장 개입 후에 더 자주 발생합니다. 초기 증상으로는 외음부 부종과 이완이 있습니다. 양막이 나타나면 임박한 분만이 임박했음을 나타내며, 보통 파열 후 30분 이내에 발생합니다. 조산 징후가 관찰되면, 암양과 태아는 안락사되어 실험을 종료하고 부검을 진행합니다.

태아 사망.

태아 사망은 임신 어느 단계에서든, 특히 태아 심장 개입 후에 발생할 수 있습니다. 태아 사망은 종종 조산으로 이어지지만, 암양에게 전신 감염을 초래할 수도 있습니다. 암양이 분만 진행의 명확한 징후를 보이거나 태아가 생존 불가능하다고 판단되면 말기 수술이 시행되고 암양과 태아는 안락사됩니다.

태아 사망 후 난산이 동반된 낙태.

한 태아가 사망하고 공동 쌍둥이가 생존하면, 사망한 태아를 보유하면 난산과 유무에 관계없이 낙태 위험이 증가할 수 있습니다. 이는 암양의 생체 징후 변화나 초조함으로 나타날 수 있습니다. 만약 난산이 발생하면, 암양과 태아는 안락사되어 실험을 종료하고 부검을 진행합니다.

엄청난 산모 출혈이야.

임신한 암양은 자궁 또는 복부 절개 부위의 합병증으로 출혈을 경험할 수 있습니다. 증상으로는 질 출혈, 무기력, 지속적인 활력 징후 이상이 있습니다. 심한 출혈은 혈종 형성이나 쇼크로 이어질 수 있습니다. 출혈로 인해 생리적 평균 동맥압 유지가 어렵거나, 개입에도 빈맥이 지속되고 심혈관 붕괴가 임박한 징후가 관찰되면 안락사가 시행됩니다.

풍선 손상이나 이동.

풍선 손상이나 변위는 LV 유입의 비효과적인 폐쇄를 초래할 수 있습니다. 태아 혈역학이 안정적이라면 단순한 풍선 손상은 임상적 징후를 보이지 않을 수 있습니다. 내부 LA 구성에서 탈구가 발생하면 흉부 내 출혈과 태아 사망이 발생할 수 있습니다. 심한 출혈로 인해 태아가 죽는 경우, 암양과 태아는 안락사됩니다.

수술 부위 열공 및/또는 상처 감염.

수술 부위 열열은 보통 수술 후 5일에서 8일 사이에 발생하며, 감염, 조직 괴사, 내부 장기 탈출증 등의 증상으로 나타날 수 있습니다. 상처 감염은 수술 후 몇 주 이내에 발생할 수 있습니다. 개입이 가능하다면 치료가 제공됩니다; 만약 상태가 생명을 위협하는 상태가 될 경우, 안락사가 고려될 것입니다.

1. 동물 준비

1. 암양의 경정맥에서 혈액을 채취하여 도착 시 Q열의 음성 반응을 확인하세요.
2. 양을 수술 후 지속 모니터링을 위해 스탠션에 적응시키세요.
3. 수술 1주 전에 수의팀이 양을 평가하세요. 마취 전 하룻밤 동안 건강한 동물을 단식시키세요.
4. 진정을 위해 내경정맥을 통해 디아제팜(0.5 mg/kg)과 케타민(4 mg/kg)을 투여합니다.
5. 8–9mm 단일 내강 기관내관으로 삽관하고, 이소플루란(1%–5%)으로 마취를 시작하세요. 산소 내 이소플루란(1%–5%)이나 연속 프로포폴 주입(30 mg/kg/h 시작; 범위: 20–45 mg/kg/h)으로 마취를 유지하세요.
6. 위와 반추위를 감압하기 위해 구강위관을 삽입하세요.
7. 단일 내강 정맥 카테터(16–18G)를 두정맥 또는 경정맥에 삽입하여 수액 투여, 프로포폴 주입, 필요 시 약물 전달을 수행합니다.
8. 심이도, 대퇴 또는 요골 동맥에 동맥 라인(22–24G)을 삽입하여 지속적인 혈압 모니터링과 혈액 샘플링을 수행합니다.
9. 복부 전체를 면도하여 등과 서혜부 부위까지 확장합니다. 수술 부위는 클로르헥시딘, 포비돈-요오딘 또는 알코올을 사용해 준비하세요.
10. 양을 수술실로 옮겨. 암양을 수술대 위에 눕히고, 저체온증을 예방하기 위해 암양 아래에 온열 장치를 놓으세요. 모든 팔다리를 고정하세요.
11. 오른쪽 앞다리에 혈압 커프, 귀나 혀에 맥박 산소 측정기, 심전도(심전도) 등 비침습적 모니터를 사용하여 산모의 혈압, 산소포화도, 심박수를 모니터링하세요.
12. 절개 전에 항생제 예방을 위해 세파졸린(50 mg/kg)을 투여하세요. 필요에 따라 시술 중 4시간마다 반복하세요.

2. 암양의 개강 및 자궁 절개술, 태아의 흉부 절개술

1. 자궁을 노출시키기 위해 정중 복강 절개술을 하세요. 자궁을 촉진하고 태아 수를 세어보세요.
2. 자궁을 부드럽게 외부 노출하세요. 태아 크기에 따라 약 10–15cm 크기의 자궁절개 부위를 선택하세요.
3. 자궁절개술 전에 양수 누출을 조절하기 위해 가방끈 봉합사(흡수성 땋은 봉합사 1개)를 삽입하세요. 전기적 소작술로 자궁벽을 층층이 열어보세요.
4. 자궁 절개 부위에 네 개의 바브콕 클램프를 놓아 모든 층을 고정하고 양수 손실을 방지하세요. 양막(가장 안쪽 층)이 포함되는지 확인하세요.
5. 절개 가장자리를 따라 2-0 실크를 사용해 양막이 자궁벽에 부착된 상태를 유지하도록 반복적으로 봉합합니다.
6. 태아 머리를 부드럽게 외부로 내밀고 자궁 주머니끈 봉합선을 지혈기로 고정하세요(그림 1A). 태아 얼굴을 맞춤형 플라스틱 커버로 덮고, 심장 내 심초음파(ICE) 프로브를 위한 구멍을 만들어 수분을 유지하세요.
7. 거즈를 사용해 태아 머리를 안정시켜 등을 대고 있는 자세를 유지하세요.
8. 입을 통해 태아 식도에 ICE 탐침을 삽입하고 경식도 심초음파(TEE)를 시행합니다(그림 1A).
9. 기초 심초음파 측정값을 취득하세요.
   참고: 기초 초음파 평가에는 심장 해부학과 심실 수축력의 질적 평가뿐만 아니라, 영상 품질이 충분할 경우 심실 챔버 크기 및 수축기 기능의 정량적 측정이 포함됩니다.
10. 수술 중 움직임을 줄이기 위해 진통제, 항콜린제, 신경근차단제(펜타닐 20 μg/kg, 아트로핀 20 μg/kg, 베쿠로늄 20 μg/kg)를 포함한 근육 내 약물 조합을 태아 허벅지에 투여합니다.
11. 목을 절개하고 경정맥과 경동맥을 노출하세요.
12. 동맥 압력 모니터링을 위해 경동맥에 액체가 채워진 카테터를, 중심정맥 압력 모니터링을 위해 경정맥에 또 다른 카테터를 삽입합니다(그림 1B).
    참고: 말단 혈관 끝을 연결하고 2-0 실크 봉합사로 카테터를 고정합니다.
13. 카테터를 외부로 빼는 동안 2-0 실크 봉합사로 목 절개를 봉합하세요.
14. 두 압력 라인을 추가로 양수 압력 라인과 정렬시키고, 3-0 실크 봉합사로 태아 목을 따라 고정하세요.
15. 자궁 가방끈 봉합선을 풀어 상부 태아를 노출시킨다. 고정 봉합사는 주상골과 등쪽에 위치해 위치를 확보합니다.
16. 태아의 머리와 앞다리를 거즈로 고정하여 태아를 오른쪽 외측 직장 위치로 고정합니다.
17. 네 번째 늑간에서 태아 흉강 절개술을 시행하고 갈비뼈 확장기를 사용해 갈비뼈를 열어주세요.
18. 심막을 열고 4-0 실크 스테이 봉합사로 고정하여 좌심방(LA)과 폐동맥(PA)을 노출시킵니다.
19. 폐동맥과 상행 대동맥을 절단하고 각각 혈관 루프로 둘러싸세요.
20. 6mm 플로우 프로브의 케이블을 두 번째 늑간극 공간을 통과시켜 상승 대동맥 주위에 위치시킵니다.
21. 프로브를 유량 측정 장치에 연결하여 적절한 신호 품질을 확인하세요.

3. 풍선 이식법 1: 좌심방(LA) 내부(GA110보다 나이 많은 태아)

1. 작은 각도 혈관 클램프를 사용해 심방실 홈 약간 위에 있는 좌심방(LA)을 클램프로 고정합니다(그림 2A).
2. LA 부속물에 6-0 폴리프로필렌 봉합사를 부착하고 지혈대로 고정하세요.
3. 가위로 가방끈 봉합사 안쪽 LA 벽을 절개하세요. 개구부가 풍선 삽입에 충분한지 확인하세요.
4. 맞춤형 풍선 카테터를 LA에 삽입하세요. 이전에 삽입한 가방 끈 봉합선으로 카테터를 고정하고, 추가로 두 개의 4-0 실크 봉합사로 고정을 강화합니다(그림 2B).
   참고: 풍선 직경은 5 mL 시 약 1.5cm, 30% 글리세린 10 mL 시 약 2.7 cm입니다. 풍선은 최대 17 mL까지 팽창을 견딜 수 있도록 벤치 테스트되었지만, 생 체 내 실질적인 상한선은 약 10 mL로 사용되었습니다. 부풀림은 부피가 많을수록 위치 이상이나 누출을 나타낼 수 있으며 과도한 압축이나 조직 손상 위험을 높일 수 있기 때문입니다.
5. 풍선 위치 확인을 위해 경식도 심초음파(TEE)를 실시하세요. 풍선이 승모판 평면 위에 있고 부속물 안에 머무르지 않는지 확인하세요. TEE 시 승모판 유입을 줄여 기능적 폐색을 확인하고, 플로우 프로브에서 전행성 상승 대동맥 흐름을 줄이거나 사라지게 한 후 풍선을 축소시킵니다.
6. 갈비뼈를 2-0 실크 봉합사 세 개로 느슨하게 닫으세요. 풍선 카테터를 압박하지 마세요.
7. 풍선 카테터를 흉강에서 외부 피하 평면으로 플로우 프로브 케이블과 같은 곳으로 옮기고, 두 쪽 모두 등쪽 피부로 연결하세요.
8. 두 케이블을 최소 두 지점에서 2-0 실크 봉합사로 등쪽 피부에 고정하세요(피부 고정, 한 케이블 묶기, 두 번째 케이블 묶기, 피부 고정).

4. 풍선 이식법 2: 좌심방(LA) 외부(GA110보다 어린 태아)

1. LA 주변의 심막 현탁을 풀고 심막과 LA 벽 간의 관계를 평가합니다(그림 3).
2. 풍선 카테터에 6-0 폴리프로필렌 봉합사 두 개(끝과 기저부)를 삽입하세요. 이 봉합사들을 해당 위치에 심막에 고정하세요.
   참고: 심막이 닫혔을 때 풍선을 LA의 상부에 위치시킵니다.
3. 심막을 2-0 실크 봉합사로 느슨하게 봉합하세요.
4. 적절한 LA 압축을 위해 TEE 안내 하에 풍선 위치를 조정하세요. 부풀린 풍선이 뒤쪽이 아닌 후륜 측면에서 LA를 압축하는지 확인하세요. 혈역학적 효과를 확인하기 위해 풍선을 일시적으로 부풀린 다음, 풍선을 빼세요.
   참고: 적절한 압박은 인접 구조물 압박 없이 TEE에서 LA 크기와 승모판 유입이 눈에 띄게 감소하는 것으로 정성적으로 정의되며, 기능적으로는 플로우 프로브에서 전행성 상승 대동맥 유입이 감소하거나 사라지는 것으로 정의됩니다.
5. 갈비뼈를 2-0 실크 봉합사 세 개로 느슨하게 닫으세요. 풍선 카테터를 압박하지 마세요.
6. 풍선 카테터를 흉강에서 외부 피하 평면으로 플로우 프로브 케이블과 같은 곳으로 옮기고, 두 쪽 모두 등쪽 피부로 연결하세요.
7. 두 케이블을 최소 두 지점에서 2-0 실크 봉합사로 등쪽 피부에 고정하세요(피부 고정, 한 케이블 묶기, 두 번째 케이블 묶기, 피부 고정).

5. 자궁 절개 및 복강 절개술의 폐쇄, 케이블 및 카테터 외부화

1. 태아를 부드럽게 자궁으로 돌려보내세요. 양수와 태반을 최대한 많이 보존하세요.
2. 지갑 끈 봉합과 2-0 실크 반복 봉합을 제거하세요. 자궁 절개 부위의 모든 잔여 봉합사를 제거하세요.
3. 자궁을 세 가지 연속된 층(수평 매트리스, 반복 봉합, 연속 덮음 봉합)으로 자궁을 봉합합니다.
   참고: 세 개의 압력 라인, 플로우 프로브 케이블, 그리고 봉합 층 사이에 있는 풍선 카테터를 외부에 배치합니다(그림 4).
4. 자궁절개술, 태아 흉강절개술, 만성 카테터/케이블 외부 삽입 후 양수내 감염 위험을 줄이기 위해 양수낭에 항생제(암피실린 500–1000 mg, 시프로플록사신 2 mg)를 투여합니다.
5. 자궁을 복강으로 되돌려 넣으세요.
6. 복부 근막 오른쪽으로 2–3cm 떨어진 곳에 주머니끈 봉합사를 넣고 케이블을 그 구멍을 통과시킵니다.
7. 복부 안의 케이블 길이를 조절하고 근막에 고정하는 가방 끈 봉합선을 고정하세요. 케이블의 약간의 이동성을 허용하고; 너무 조이지 마세요.
8. 맞춤형 터널링 장치를 암양 오른쪽 옆구리의 피하 조직에 삽입하고 등 쪽으로 약 50–60cm 전진시킵니다.
9. 출구 위치를 확인해. 터널링 장치의 원위 끝에 작은 피부 절개를 하고 내부 코어를 제거합니다.
10. 터널링 장치를 통해 PVC 튜브 두 개를 추가로 통과시키세요. 세 개의 압력 라인과 풍선 카테터를 하나의 PVC 튜브에 연결한 뒤, 터널을 통과시키세요.
11. 플로우 프로브 케이블을 두 번째 PVC 튜브에 연결하고 터널을 통해 외부로 배출하세요.
12. 측면의 터널링 장치를 제거하세요.
13. 복강 절개술을 세 겹으로 마무리하세요: 근막, 피하 조직, 그리고 적절한 봉합사를 사용한 피부.
14. 케이블 출구 부위를 3-0 폴리글락틴 910 봉합사로 부분적으로 막으세요.
15. 양 오른쪽 옆구리에 폴리에스터 봉합사를 0개의 땋은 봉합사로 보관 주머니를 고정하세요. 마찰을 최소화하기 위해 파우치를 케이블 출구 부위에서 등쪽으로 2–3cm 위치시키세요. 피부 절개부터 닫기까지 총 수술 시간은 보통 4–4.5시간입니다.

6. 회복

1. 마취를 중단하고 구강위관을 제거하세요. 자발호흡이 확인된 후 암양을 기관관을 제거하세요.
   참고: 삽관 제거는 일반적으로 목 움직임, 깜빡임, 턱 긴장, 씹는 행동 등 흥분의 징후 후에 이루어집니다.
2. 암양에서 동맥선을 제거하세요.
3. 암양을 격리된 회복 구역으로 옮기세요. 동물이 독립적으로 서고 보행할 수 있을 때까지 흉골 누운 자세를 돕습니다.
4. 수술 후 진통을 위해 근육 내 부프레노르핀(0.015–0.05 mg/kg)을 8–12시간마다 투여합니다. 필요에 따라 수의의 지침에 따라 멜록시캄(0.3–1 mg/kg)을 투여합니다.
5. 급성 회복기 첫 3일간은 개별 우리에서 암양을 면밀히 관찰하세요.

7. 만성 주거 및 평가

1. 암양을 맞춤형 스탠션에 넣어 지속적인 혈역학적 모니터링을 가능하게 하면서 스트레스를 최소화하세요.
2. 외부로 나온 카테터를 모니터링 시스템에 연결하세요. 태아 대동맥압, 중심정맥압, 양수압, 대동맥혈류를 지속적으로 측정하세요.
3. 동맥 카테터에서 비정상적인 혈역학적 수치가 관찰되면 태아 혈액 가스 샘플을 채취하세요.
4. 수술 후 약 3일째에 멸균 30% 글리세린을 사용하여 풍선 팽창을 시작하세요. 풍선 용량을 하루에 1mL씩 늘리세요. 각 0.5 mL 증가 후 최소 5–10분간 태아 혈역학적 반응을 관찰하여 서맥 부재나 평균 동맥압 30 mm Hg 이하 상태를 확인하라. 전행성 상승 대동맥 혈류가 0이 될 때까지 팽창을 계속한다.
5. 10mL의 풍선 팽창으로 인해 순방향 흐름이 0으로 달성되지 않으면, 벤치 테스트된 최대 풍선 용량에 향해 계속 팽창시키기보다는 풍선 누출이나 위치 이상을 의심할 수 있습니다. 풍선을 공기를 빼고 카테터 검사나 초음파 영상을 사용해 누출이나 변위 여부를 평가하세요.

8. 부정

1. 모니터링 카테터와 플로우 프로브 케이블을 분리하고 외부 파우치에 보관하세요.
2. 암양을 진정시키고 기관삽관하세요. 마취를 유지하고 초기 수술과 동일한 프로토콜로 구위관과 혈관 카테터를 삽입하세요.
3. 암양을 수술실로 옮겨. 동물을 수술대 위에 눕히고, 암양 아래에 온열 장치를 올려놓으세요. 모든 팔다리를 고정하세요.
4. 초기 절차에 설명된 비침습적 모니터를 적용하세요.
5. 압력 카테터와 플로우 프로브를 모니터링 시스템에 다시 연결하세요.
6. 이전 복강절개와 자궁 절개 부위를 다시 열어보세요. 실험용 태아를 외부에 배치하세요.
7. 거즈를 사용해 태아 머리를 안정시켜 등을 대고 있는 자세를 유지하세요.
8. 심장 내 심초음파(ICE) 탐침을 입을 통해 태아 식도에 삽입하고 경식도 심초음파(TEE)를 시행합니다.
9. 풍선 위치 이미지를 획득하고 심초음파, 유속, 압력 데이터를 수집합니다. 풍선을 방풍시키고 측정을 반복하세요.
10. 태아에게 헤파린(10,000 U)을 투여하세요. 탯줄을 결찰하고 포화 염화칼륨을 배꼽정맥에 주입해 이완 중인 심장을 멈추게 합니다.
11. 실험용 태아를 제거하세요. 흉강을 다시 열고 풍선 위치, 이동, 감염 증거를 평가하세요.
12. 심장을 절제하고, 심박수를 측정하며, 심근 조직 샘플을 채취하세요.
13. 대조 태아에 대해서는 8.6–8.12단계를 반복합니다.
14. 마취 상태에서 펜토바르비탈나트륨을 사용해 암양을 안락사시키세요.

결과

수술 결과

쌍둥이를 임신한 암양 세 마리가 복강 절개술과 자궁절개술을 받았습니다. 세 마리의 태아(각 암양 한 명씩)가 풍선 이식을 받았고, 쌍둥이들이 대조군 역할을 했습니다. 이 시술들은 임신 주수 119± 1.4일, 산모 체중 73± 4.2kg으로 시행되었습니다.

세 명의 실험 태아 모두 수술 중이나 급성 회복기 동안 수술 합병증 없이 최소 1주간 생존했습니다. 기저 심초음파에서는 어떤 태아에서도 기존의 심장 이상이 발견되지 않았습니다. 풍선 팽창은 수술 후 약 3일째에 시작되어 위에서 설명한 프로토콜에 따라 멸균 30% 글리세린을 사용해 점진적으로 증가하였습니다. 인플레이션은 태아 혈역학이 안정적일 경우 전행성 상승 대동맥 흐름이 줄거나 제거될 때까지 계속되었다.

두 명의 태아에서는 풍...

토론

풍선을 왼쪽 심방(LA)에 삽입한 승모판 유입 폐색의 태아 양 모델은 이전에 기술된 바^{있습니다 13}; 그러나 주요 한계는 승모판 유입 제한의 지속 기간이 짧다는 점이었습니다. 좌심실(LV) 유입 제한이 더 길어질수록 HLHS와 유사한 변화가 더 뚜렷하게 유발될 것으로 제안되었습니다 ^8,13. 따라서 LA 풍선은 임신 주수에 더 빨리 이식되어야 합니다. 하지만 어린 태아는 조직이 더 취약하고 몸 크기가 훨씬 작아(120일 기준 약 2.5kg, 임신 100일 기준 1kg) 더 간단하고 안전하며 덜 침습적인 기술이 필요합니다.

본 연구는 HLHS와 유사한 생리학을 유도하는 태아 승모판 유입 폐쇄 모델을 확립하기 위한 정교한 외과적 ...

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
0 티-크론 봉합	코비디엔	88863374-62	주머니를 암양의 오른쪽 옆구리에 고정하는 거야
1 폴리소브 봉합사	코비디엔	CL-932	자궁에 가방 끈 봉합과 자궁 폐쇄
16 G 정맥 주사 카테터	BD	382259	수액 및 약물 투여를 위해
2-0 퍼마 핸드 실크 (바늘 없음)	에티콘	A185H	혈관 결찰 및 태아 혈관에 압력 카테터 고정을 위해
2-0 실크 봉합사	데메테크	SK262026B0P	카테터와 케이블을 태아 피부에 고정하고 태아 갈비뼈와 피부를 닫는 것입니다
22 G 혈관 내 카테터	BD	381423	동맥 혈압 모니터링을 위해
3-0 실크 봉합사	에티콘	K832H	태아 피부에 카테터와 케이블을 고정하는 거야
3-0 비크릴 플러스	에티콘	VCP944H	암양의 복강 수술 폐쇄
4-0 실크 봉합사	코비디엔	GS-64-M	태아의 심막에 고정 봉합을 위한
6 mm 유량 프로브	트랜스오닉 시스템 주식회사 (ADInstruments)	6PSS	혈류 측정을 위해
6-0 프로린 봉합사	에티콘	8805H	태아 왼쪽 심방에 있는 가방 끈 봉합
7-0 프로렌 봉합사	에티콘	8702H	태아 왼쪽 심방에 가방 끈 봉합을 하고 태아 조직에서 출혈을 멈추게 하는 데 사용했습니다
70% 이소토필 알코홀	아스펜 베테랑	11795782	국소 세척액
Acuson Acunav 초음파 카테터	존슨& 존슨	IPX8	태아 경식도 심초음파 검사를 위한 심장 내 심초음파 탐침
암피실린	호스피라 제약스	약학	항생제 예방
아트로핀	호스피라 제약스	약학	태아 발심부를 예방하기 위해
밥콕 조직 겸자	NIFTY 의료용품	1100-FCP-03	자궁 벽을 지탱하기 위해
풍선 카테터	수제		태아 좌심실로 가는 혈류를 차단하기 위해
블란트 필 바늘 18G	메드라인	SYR110021Z	V8 PVC 튜브를 주입 카테터 또는 남성-남성 연결기에 연결하는 방법
블란트 바늘 25G	SAI 주입 기술	B25-50	길슨 PVC 튜브를 주입 카테터 또는 남성-남성 연결기에 연결하는 방법
혈압 커프	로열 필립스	989803000000	비침습적 혈압 모니터링
부프레노르핀	호스피라 제약스	약학	수술 후 통증 조절: 농도 0.3 mg/mL, 용량 0.03 mg/kg
소작 연필	메드라인	ESRK3002L	전기소작술을 이용한 절단 및 해부
세파졸린	호스피라 제약스	약학	항생제 예방
센츄리언 헵록 주입 부위 어댑터	메드라인	HL50LT100	압력 라인을 막거나 주입하거나 혈액 채취를 할 때
클로라렙	BD	930825	국소 소독제
시프로플록사신	호스피라 제약스	약학	항생제 예방
쿨리 불독 용기 클램프 & nbsp;	NAZMED SMS SDN BHD	SMS-05-7237	태아 좌심방 클램프 사용
DELTA-CAL 트랜스듀서 시뮬레이터 및 테스터	보조 장치	MLA6595	압력 변환기 시뮬레이터/테스터
ECG 유도	3M	2570	심전도 모니터링
기관내관, 8-9 사이즈	코비디엔	86452, 86114, 또는 86454	기도를 확보하기 위해
유량 측정 장치	트랜스오닉 시스템 주식회사 (ADInstruments)	TS420	혈류 측정을 위해
길슨 펌프	길슨. 주식회사	F155006	태아를 위한 소량의 액체를 정밀하게 연속적으로 주입하기 위해
헤파린	호스피라 제약스	약학	항응고제: 1,000 USP 단위/mL
이소플루란	백스터 헬스케어 코퍼레이션	약학	마취제: 용량 1-5%
파우치가 있는 복강술 드레이프	메드라인	AAMI PB70	멸균 드레이프
M/M 어댑터	메드라인	DYNJADAPMM	압력 카테터용 남성-남성 어댑터
구위관	요르겐슨 연구소 주식회사	J0348R	위 및 반추위 감압을 위해
플라스틱 폐쇄관 클램프 (혈관 고정기)	카디널 헬스	X0029XO5ET	압력 카테터와 풍선 카테터의 튜브 클램프
염화칼륨	호스피라 제약스	약학	이완 상태의 태아 심장을 정지시키기 위해
PowerLab 시스템 (계측기 인터페이스, 쿼드 브리지 AMP)	보조 장치	FE224, PLCF1/4	혈압, 혈류, 심박수 기록
프로브 커버 키트	메드라인	DYNJE5930	심초음파 탐침의 멸균 덮개
프로포폴	프레제니우스 카비	약학	마취제: 농도 10 mg/mL, 용량 20-45 mg/kg/h
맥박 산소 측정기 설 클립	넬코르	PO736	맥박 산소측정 모니터링을 위해
길슨 펌프용 PVC 튜브 (주황색/녹색)	길슨. 주식회사	F117933	길슨 펌프 튜빙을 위해
신생아용 갈비 벌림기	서저리 리퍼블릭	550-020-030	태아 흉강 절개술을 위해
메스 #10 블레이드	바드-파커	371610	암양 피부 절개를 위한
펜토바르비탈 나트륨	호스피라 제약스	약학	암양 안락사를 위해서요
터널링 장치 (금속 원형 튜브)	에버빌트	해당 없음	케이블과 카테터를 암양 옆구리로 외부로 확장하기
탯줄 테이프	맥케슨	894782	부검 시 탯줄을 결찰하기 위해
V8 PVC 튜브 (마이크로 의료용 튜브)	사이언티픽 커모디티즈, Inc.	BB31785-V/8	태아의 압력 모니터링을 위한 액체 충전 카테터
베쿠로늄	호스피라 제약스	약학	수술 중 태아 움직임을 방지하기 위해
정맥 픽	피셔 사이언티브	50-19506098	압력 라인을 용기에 삽입하기
용기 루프	메드라인	DYNJVL03	상행 대동맥과 주요 폐동맥을 유지하기 위해
온열 담요	요르겐슨 연구소 주식회사	J1034B	동물의 체온 유지를 위해