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방법 논문

신경퇴행과 관련된 노화: 설치류 뇌 조직학 단면에서 β-gal 활동과 Nissl 염색의 동시 평가

114 조회수

⸱

DOI:

10.3791/70676

⸱

2026년 7월 17일

 ,  , 
1Laboratorio de Neuroinmunología, Unidad de Investigación en Medicina Experimental, Facultad de Medicina-UNAM, Hospital General de Mexico "Dr. Eduardo Liceaga"

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

이 프로토콜은 노화 관련 β-갈락토시다제 활성을 검출하고, 노화 및 신경 완전성을 동시에 평가하기 위한 Nissl 염색을 수행하며, 노화 부담과 신경퇴행 간의 연관성을 조사하는 도구로 제시됩니다.

초록

세포 노화는 조직의 재생과 기능을 저해하는 되돌릴 수 없는 세포 주기 정지가 특징인 생리학적 과정입니다. 이 현상은 중추신경계(CNS) 내에 노쇠한 세포가 축적되면서 촉진되는 신경퇴행의 주요 원인으로 떠올랐습니다. 노화 세포는 만성 신경염증을 유지하고 신경 미세환경을 교란시키는 노화 관련 분비 표현형(SASP)을 획득합니다. 그 결과, 신경 발생, 시냅스 가소성, 신경 생존과 같은 필수 과정들이 저해됩니다. 방대한 문헌들은 세포 노화를 파킨슨병, 알츠하이머병, 다발성 경화증과 같은 여러 신경퇴행성 질환과 뇌 허혈, 외상성 뇌손상과 같은 급성 신경 관련 손상과 연관지어 있습니다.

노화 관련 β-갈락토시다제(SA-β-gal) 활성과 조직학적 절편의 Nissl 염색을 결합하여 동일한 조직 맥락에서 세포 노화와 신경 무결성을 동시에 평가할 수 있는 포괄적인 접근법을 제공합니다. 이 전략은 특정 취약한 영역(예: 해마나 피질)에 노화된 세포의 축적과 신경 손실 또는 조직 손상 사이의 공간적 상관관계를 정밀하게 할 수 있게 합니다. 노화의 기능적 지표와 신경 형태 및 밀도의 고전적 지표를 통합함으로써 이 접근법은 분석의 해석적 견고성을 강화합니다. 더불어, 노화 부담과 신경퇴행성 변화 간의 관계를 보다 정확하게 특성화할 수 있게 하여 제한된 조직 샘플에서 얻을 수 있는 정보 생산량을 극대화합니다.

더 나아가, 이 프로토콜은 신경퇴행성 질환의 설치류 모델에서 약물, 유전적 조작 등 중재에 반응하여 노화 세포 축적이 어떻게 일어나는지를 규명할 수 있어, 이러한 기여를 병태생리에 분석하는 강력한 도구를 제공합니다.

서론

세포 노화는 세포 주기가 본질적으로 되돌릴 수 없는 정지와 광범위한 고분자 변형을 동반하는 것으로 정의됩니다. 더불어, 노화 세포는 다양한 염증성 사이토카인, 성장인자, 프로테아제를 강력히 분비하는 과분비 표현형(SASP)을 획득합니다. 이 요인들은 함께 노화를 강화하고 조직 항상성에 영향을 미치는 염증성 미세환경 형성에 기여합니다. 중추 중추신경계에서는 노화 세포가 나이가 들수록 점진적으로 축적되며, 특히 노화 관련 병리에 취약한 부위에 집중됩니다. 세포 노화는 노화 및 신경퇴행성 질환과 관련된 기능 변화에 중요한 역할을 하며, 노화 세포의 부담은 정상 노화 동안 점진적으로 증가합니다. 중추신경계 내의 여러 세포 유형은 노화에 취약하며, 여기에는 성상교세포, 미세아교세포, 희소돌기교구, 뉴런,신경 줄기세포 등이 포함됩니다. 축적된 증거는 이러한 중추신경계 세포 집단의 노화가 알츠하이머병, 파킨슨병, 전두측두엽 치매, 근위축성 측삭경화증, 다발성 경화증5 등 여러 신경퇴행성 질환의 병리와 관련이 있음을 시사합니다. 신경퇴행성 질환은 세포 노화와 연관되어있으며, 노화 세포는 아밀로이드 β 플라크와 신경섬유 얽힘 근처에 축적되는 것으로 나타났습니다. 설치류 뇌에서 세월과 관련된 SA-β-gal 활성 증가가 보고되었으며(예: 3개월, 8개월, 17개월, 24개월), 통계적으로 유의한 상승은 가장 나이 많은 집단(24개월)에서 가장 두드러지게 나타났습니다7.

다양한 연구들은 뇌손상의 기능적 또는 행동적 상관관계를 다루는 병리적 동물 모델에서 조직학적 변화와 인지 장애 및 대사 조절 이상과 같은 기능적 결과 간의 관계에 대한 중요한 통찰을 제공합니다 8,9.

광범위한 연구에도 불구하고, 노화 세포를 신뢰성 있게 식별하면서 다른 비증식 상태와 구별하는 단일 보편적 표지는 없습니다; 그러나 세포 노화의 가장 널리 사용되는 지표는 pH 6에서 검출되는 리소좀 효소인 노화 관련 β-갈락토시다제(SA-β-gal)로, β-갈락토사이드를 단당류로 가수분해하는 수분해 효소입니다. 주요 구분 요소 중 하나는 pH입니다. SA-β-gal은 pH 6에서 최적의 활성을 보이며, 이는 pH 7.4에서 작동하는 박테리아 β-갈락토시다제와 3에서 5 7,10 범위의 산성 pH 내에서 기능하는 내인성 리소좀 β-갈락토시다제와 대조적입니다.

세포 밀도와 뇌 세포구조는 신경 조직과 기능의 근본적인 결정 요인입니다. 특정 세포 집단의 공간적 분포와 풍부도는 회로 기능에 매우 중요하며, 이들의 정확한 정량화는 선택적 세포 취약성이나 손실을 포함하는 신경병리학적 상태를 연구하는 데 필수적입니다. 신경과학에서 표준적인 방법인 니슬 염색법은 신경 조직의 신경 밀도와 세포구조를 평가하기 위해 널리 사용되는 조직학적 기법입니다. 신경 세포 내 Nissl 소타를 선택적으로 표지함으로써, 이 방법은 뇌 영역 전반에 걸친 신경 집단을 신뢰성 있게 시각화하고 정량화할 수 있게 합니다11. 견고함 외에도 Nissl 염색은 기술적 단순성, 저비용, 비교적 짧은 처리 시간이 특징으로, 일상적인 신경해부학 및 신경퇴행 연구에 실용적이고 접근성 높은 도구입니다.

동일한 조직학 절편 내에서 Nissl 염색과 노화 관련 β-갈락토다아제(SA-β-gal) 활성을 결합하여 평가하여, 신경 온전성과 노화 세포 부담을 동시에 조사할 수 있는 견고하고 공간적으로 분해된 틀을 제공합니다. 이 통합적 접근법은 노화를 신경세포 손실과 세포구조 붕괴 등 영역별 신경퇴행성 특징으로 직접 매핑할 수 있게 합니다. 고전적 구조 마커와 노화 기능적 지표를 결합하면 데이터 해석이 강화되고 노화 세포 축적과 조직 기능 장애 간의 기전적 연관성을 밝히며, 제한된 샘플에서 분석 수율을 극대화할 수 있습니다.

중요한 점은, 이 전략이 조직 가용성이 제한적이거나, 종단적 또는 중재 기반 설계(예: 세노분해 또는 세노모픽 치료), 그리고 노화와 신경 취약성을 연관짓는 것이 중요한 복잡한 대뇌 구조에서의 영역별 분석에 특히 적합하다는 것입니다.

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프로토콜

모든 동물 시술은 실험실 동물의 관리 및 사용에 관한 기관 및 국가 지침에 따라 수행하며, 적절한 윤리 위원회로부터 사전 승인을 받아야 합니다. 이 프로토콜은 멕시코 국립자치대학교 의학 학부의 윤리 및 연구 위원회, 기관 동물 관리 및 사용 위원회(CICUAL, FM/DI/039/2023, CICUAL)의 사전 개정 및 승인된 실험동물 관리 및 사용 기준(NOM-062-ZOO-1999)을 준수합니다. 동물들은 Unidad de Medicina Experimental, Facultad de Medicina의 비바리움에서 공급되었습니다.

참고: 설치류 뇌 조직에서 노화 관련 β-갈락토시다제(SA-β-gal) 활성과 Nissl 염색을 동시에 평가하기 위해, 이 프로토콜은 -20 ± 1°C에서 냉동 절개한 4% 파라포름알데히드 고정 설치류 뇌를 사용합니다. 모든 섹션은 먼저 SA-β갤런 활도를 평가받고(1단계), 그 다음 Nissl 염색(2단계), 이후 안티페이드 마운팅 매체(3단계)로 장착됩니다. 처리 후 슬라이드는 밝야 광학 현미경으로 검사되어 관심 영역의 고해상도 이미지를 획득하여 추가 분석을 수행할 수 있습니다.

1. 조직 절편 준비 및 노화 관련 β-갈락토시다제(SA-β-gal) 활성 검출

  1. 뇌 절편 준비
    1. Wu 등, 2021,12에서 이전에 설명한 프로토콜에 따라 4% 파라포름알데히드를 통한 심장 관류로 뇌를 얻습니다. 뇌를 4°C에서 장기 저장하기 위해 0.01% 아지드나트륨이 함유된 인산 완충 식염수(PBS)로 옮깁니다.
    2. 프로토콜을 진행하기 위해 뇌를 30% 자당 용액에 넣고 바닥으로 가라앉을 때까지 기다린 후 -20에서 -80°C에 보관합니다. 이 프로토콜은 쥐, 생쥐, 기니피그 등 다양한 설치류 뇌 조직에 사용될 수 있으며, 2-메틸부탄에 냉동 보관할 수 있습니다.
    3. 조직을 -20± 1 °C에서 냉동절부하여 균일한 절면을 최적 절단 온도(O.C.T.) 화합물(두께 20–40 μm)에 박고, 젤라틴 코팅 유리 슬라이드에 장착합니다.
    4. 조각을 유리 슬라이드에 장착하고 사용 전까지 차가운 환경에서 보관하세요.
  2. 노화 관련 β-갈락토시다제(SA-β-gal) 활성의 검출.
    1. 표 1에 표시된 용액에서 사용 당일에 신선한 SA-β-갤런 염색 용액을 준비하세요.
    2. SA-β-갤런 활성의 특이성을 보장하기 위해 용액을 pH 6.0으로 조정하세요.
      참고: 사용 전에 SA-β-갤런 염색액을 준비하세요; 수용액에 미리 혼합하는 것은 피하세요.
      5-브로모-4-클로로-3-인돌릴-β-D-갈락토피라노사이드(X-Gal)는 수용액에서 안정적이지 않습니다.
  3. 조직 슬라이드의 온도를 평형으로 맞추세요.
    1. 냉장고에서 슬라이드를 제거하세요.
    2. 슬라이드를 코플린 병에 넣고 실온(RT)에서 5분간 평형을 맞춥니다.
    3. 슬라이드를 덮을 만큼 충분한 PBS를 코플린 병에 넣어 절면에 수분을 공급하세요.
    4. 슬라이드를 저속 궤도 셰이커에 5분간 RT 상태로 올려놓으세요.
    5. 세탁을 한 번 반복하세요.
  4. 스테인을 위한 슬라이드를 준비하세요.
    1. 흡수성 종이를 사용해 슬라이드 가장자리에 남은 과도한 PBS를 부드럽게 제거하세요.
    2. 각 부위에 발수성 장벽을 그려 조직과 접촉하지 않도록 하세요.
  5. SA-β-갤 염색 수행
    1. 슬라이드를 습기 챔버에 넣으세요.
    2. 마이크로피펫을 사용해 각 절면당 약 200μL의 염색액을 추가하여 조직을 완전히 덮도록 합니다.
    3. 37°C에서 48시간 배양하세요.
    4. 배양 후에는 흡수지로 염색 용액을 제거하세요.
    5. 슬라이드를 코플린 병에 넣고 PBS를 넣어 슬라이드를 덮은 뒤, 저속 궤도 셰이커에 5분간 RT에서 부드럽게 교반합니다.
      참고: CO₂ 인큐베이터는 사용하지 마세요. 즉시 Nissl 스테인으로 넘어가세요.

2. 닛슬 스테인

  1. Nissl 작업 용액을 준비하세요.
    1. 표 2에 설명된 대로 재고 용액을 준비하세요.
    2. 기본 용액에서 15mL의 크레실 바이올렛 용액과 85mL의 아세테이트 완충제를 혼합하여 Nissl 작업 용액을 준비합니다.
    3. 침전물을 제거하기 위해 용액을 필터 페이퍼(4등급, 20-25 μm 기공 크기)로 여과합니다.
    4. 필터 용액 사용 후에는 37 °C에서 최소 30분(또는 수조에서 40–43 °C)을 예열합니다.
    5. 사용 직전에 0.1M 아세트산 10방울을 Nissl 작업 용액에 넣으세요.
      참고: Nissl 작업 솔루션은 하루에 최대 네 번까지 사용하세요; 하룻밤 보관하지 마세요.
    6. 양성 에탄올을 95mL의 절대 에탄올을 부피 플라스크에 첨가하고 0.1M 아세트산 15방울을 첨가하여 산성 에탄올을 준비합니다. 증류수를 넣어 100mL까지 담아 충분히 섞으세요.
  2. 슬라이드에 사전 조건을 넣으세요.
    1. 슬라이드를 코플린 병에 넣고 필요에 따라 PBS를 넣어 슬라이드를 덮고 37°C에서 5분간 배양하세요.
  3. 스테인 섹션.
    1. 미리 데워진 Nissl 용액에 슬라이드를 조심스럽게 담가세요.
    2. 슬라이드를 Nissl 용액에 5–20분간 배양합니다.
      참고: 시간은 조직 두께에 따라 다릅니다. 진한 보라색이 나올 때까지 5분마다 염색을 모니터링하세요.
  4. 부분을 세척하세요.
    1. 슬라이드를 증류수에 1분간 부드럽게 헹군 후 사용하세요. 신선한 증류수를 넣은 코플린 자에 슬라이드로 옮기고 1분간 더 마셔보세요.
    2. 염색 품질을 평가하세요. 밝야 현미경(10× 대가렌즈)으로 슬라이드를 관찰합니다.
    3. 밝야 현미경에서 배경이 최소화된 상태에서 강한 보라색 점염색을 확인하세요.
      참고: 배경이 과도할 경우, 산성 95% 에탄올에 슬라이드를 10초간 담가.
    4. 분화를 멈추기 위해 즉시 절대 에탄올로 10초간 옮기세요.
      참고: 필요하면 다시 염색하고, 색이 약하면 염색 단계(8.1-9.3)를 반복하세요.
  5. 슬라이드를 탈수하고 치우세요.
    1. 슬라이드를 자일렌에 최소 5분(필요하면 최대 2시간) 침그세요
      참고: 조직은 ~2분 이내에 건조되므로 빠르게 작업하세요.

3. 장착

  1. 마운팅 매체 준비
    1. 마운팅 매체 8mL와 자일렌 2mL를 섞습니다.
      참고: 필요한 부량만 준비하세요; 장착 매체는 빠르게 굳을 것입니다.
    2. 자일렌에서 슬라이드를 제거하고 가장자리를 부드럽게 닦아내세요. 슬라이드를 평평한 표면에 놓으세요.
    3. 조직 위에 마운팅 매개체 ~120 μL을 바릅니다.
    4. 커버슬립을 한쪽에서 천천히 놓아 거품이 생기지 않도록 하세요.
  2. 슬라이드를 건조시키고 이미지를 촬영하세요.
    1. 슬라이드는 RT에서 최소 5분간 건조시키세요.
    2. 밝야 현미경으로 관찰하며 관심 영역의 이미지를 획득하세요.
    3. 장착 후 마운팅 매체를 완전히 건조시키려면 24시간이 더 걸립니다.
  3. 슬라이드는 보관하세요.
    1. 슬라이드는 RT에 보관해 장기(수개월간 보관)하세요.

4. 노화 부담의 정량화

참고: 이 접근법은 정성적 평가로 적용됩니다; 그러나 연구 설계에서 요구되는 경우에는 정량적 분석까지 확장할 수 있습니다.

  1. 노화 부담을 정의하면, 특정 관심 영역(ROI) 내에서 노화 관련 β-갈락토시다제(SA-β-gal) 양성 세포의 상대적 수로 정의합니다. 이 지표는 전체 셀 수에 대한 양의 셀 비율 또는 단위 면적당 양의 셀 밀도(cells/mm 2)로 표현할 수 있습니다.
  2. 관심 지역(ROI)을 선택하세요. 종과 연령에 적합한 뇌 지도를 사용하여 표준화된 신경해부학적 랜드마크를 기반으로 ROI를 식별합니다. 권장 영역에는 해마 하위영역(CA1, CA3, 치아회)과 명확한 층상 조직이 있는 피질 영역이 포함됩니다.
    1. 섹션당 ROI당 3–5개의 겹치지 않는 필드를 선택하세요.
    2. 동물당 최소 2–3개의 단면을 일정한 해부학적 간격으로 분석하세요.
    3. 모든 샘플에서 동일한 ROI 크기와 형태를 유지하세요.
    4. ROI 선택 시 실험 조건에 대해 조작자를 눈가림 없이 하여 편향을 최소화하세요.
  3. 이미지를 획득하세요.
    1. 디지털 카메라가 장착된 밝야 현미경을 표준화된 조건에서 이미지를 획득하세요:
      1. 일관된 배율을 사용하세요(예: 지역 개요는 10×, 정량화는 20× 또는 40×).
      2. 모든 샘플에서 일정한 조명, 노출 시간, 화이트 밸런스를 유지하세요.
      3. SA-β-gal 신호(파란색)의 포화를 피하고 Nissl 염색(보라색)을 명확히 시각화하세요.
      4. 이미지를 손실 없는 형식(예: TIFF)으로 저장하여 후속 분석을 할 수 있습니다.
  4. 이미지를 전처리하세요.
    1. 이미지 분석 소프트웨어(예: ImageJ/Fiji)를 사용하여 전처리를 수행합니다13.
      1. 필요하다면 이미지를 RGB 형식으로 변환하세요.
      2. 배경 감산을 적용해 조명의 불균형을 교정하세요.
      3. 상대적 신호 강도를 변경하지 않고 모든 이미지에서 대비를 균일하게 정규화합니다.
      4. 신호 경계를 왜곡할 수 있는 과도한 처리를 피하세요.
  5. SA-β-gal 양성 세포를 확인해.
    1. 세포질 내에 국한된 뚜렷한 파란색 침전물을 기반으로 양성 세포를 정의합니다. 색상 임계값을 사용해 파란 신호를 분리하세요(예: 경험적으로 결정된 색조/채도/강도 범위).
    2. 배경 염색을 배제하기 위해 음성 대조군(젊은 조직 또는 미처리 조직)을 사용하여 임계치를 검증합니다.
  6. Nissl 염색에서 관찰된 세포 프로필과의 형태학적 일관성을 확인한다.
  7. 양화 접근법
    1. 세포 기반 정량: SA-β-갤럭 양성 세포를 수동으로 또는 반자동 도구를 사용하여 세기. Nissl 염색을 사용해 동일한 ROI 내 셀의 총 수를 계산합니다.
    2. 결과를 다음과 같이 표현합니다:
      노화 부담(%) = (SA-β-갤럭시 양성 세포/총 세포) '100
    3. 밀도 기반 정량화: 단위 면적당 SA-β-갤런 양성 세포 수를 계산합니다:
      셀 밀도 = 양의 셀/ROI 면적(mm²)
    4. 임계값 정의 및 통제: 경험적으로 검출 임계값을 설정하기:
    5. 음성 통제를 사용해 배경 신호 레벨을 정의하세요.
    6. 민감도를 검증하기 위해 양성 대조군(예: 노화 뇌 조직이나 스트레스 유발 모델)을 포함시켰습니다.
    7. 실험 내 모든 샘플에 동일한 임계값 설정을 적용하세요. 재현성을 보장하기 위해 모든 임계값 매개변수를 문서화하세요.

5. 데이터 정규화 및 통계 분석

  1. 세포 밀도의 지역적 차이를 반영하여 노화 부담을 정규화하고; Nissl 염색을 사용해 ROI, 절편, 동물 간 평균 측정값인 ROI당 총 세포 수를 추정합니다. 실험 설계에 따라 적절한 검정(예: t-검정, ANOVA)을 사용하여 통계 분석을 수행하십시오.
  2. SEM 또는 SD 평균± 보고하며, 생물학적 복제 횟수(n)를 지정합니다.
  3. 블라인딩 및 재현성: 모든 양적 분석을 블라인드 조건에서 수행하세요. 재현성을 검증하려면 (a) 최소 두 명의 관찰자가 독립적으로 분석하거나, (b) 일부 이미지를 재분석하여 관찰자 내 변동성을 평가합니다.
  4. 정량화 전략의 한계: 가능한 경우 정량적 결과를 보완적인 표지자와 함께 해석하세요. 또한, 단면별 염색 강도의 변동성은 임계값 기반 정량화에 영향을 줄 수 있으므로 신중하게 통제해야 합니다.

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결과

노화 관련 β-갈락토시다제(SA-β-gal) 염색과 Nissl 염색의 결합 적용을 통해 동일한 뇌 부위 내에서 노화 세포 부담과 신경 세포 구조를 동시에 시각화할 수 있습니다.

SA-β-갤런 염색 절차(1단계) 후, 밝야 현미경으로 슬라이드를 검사합니다. 성공적인 염색은 β-갈락토시다제 활성을 나타내는 세포 내에 국소적으로 나타나는 뚜렷한 파란색 침전물이 존재함을 나타냅니다(그림 1). 저배율에서 해마와 대뇌 피질과 같은 주요 뇌 영역을 식별할 수 있습니다(그림 1A). 더 높은 배율에서는 개별 세포가 특히 CA3 하위 영역과 같은 영역에서 세포 내 청색 염색을 보이는 것을 관찰합니다(그림 1B). 이 신호는 5-브로모-4-클로로-3-인돌릴 베타-D-갈락토피라노...

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토론

현재 중추신경계에서 노화 세포를 식별, 분리, 선택적으로 제거할 수 있는 강력하고 특이적인 도구의 제한적 접근성이 메커니즘 연구의 주요 장애물로 남아 있습니다. 이러한 방법론적 격차는 세포 노화가 신경병리에 미치는 인과적 기여를 단순히 질병 진행과의 상관관계와 분리하는 데 한계를 둡니다. 여기서 제시된 워크플로우는 SA-β-갤런 효소 검출과 Nissl 카운터 염색을 결합하여 정의된 신경해부학적 맥락 내에서 추정되는 노화 세포 부담을 지도화하여, 효소 판독을 신경퇴행성 영역의 세포구조 변화와 연결시킵니다. SA-β-gal 양성 세포를 지역적 세포구조와 함께 식별하는 것은 노화가 축적되는 위치와 병태생리에 어떻게 기여하는지 명확히 하는 데 도움이 될 수 있습니다.

여기서 설명한 구조적 및 노화 관련 변화 외에도, 누적된 증거는 면역 조절 장애와 염증 신호가 뇌 병리에 기여한다는 점...

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공개 사항

저자들은 공개할 것이 없습니다.

감사의 글

이 작업은 개인 아카데미코 총국장, UNAM(PAPIIT IN224624), 그리고 과학·인본·기술·혁신 비서국(SECIHTI) 프로그램인 국경 과학 프로그램(CBF-2025-I-1337), UNAM 박사 후보 프로그램(POSDOC)의 지원을 받았습니다. RJRC는 CONAHCyT로부터 1020262번 펠로우십을 받았습니다. VSV는 UNAM 개인 학술 총국(DGAPA) 산하 박사후 프로그램(Programa de Becas)에서 박사후 연구원 과정을 받았습니다.

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재료

```html
이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
2-메틸부탄SIGMAM32631-500ML
5-브로모-4-클로로-3-인돌릴 &베타;-D-갈락토피라노사이드 (X-갈)PROMEGAV394A-30부터 -10 °C까지 보관
구연산 MERCK251275-5G
크레질 바이올렛 아세테이트SIGMAC5042-10G
조직학용 DPX 마운탄트SIGMA06522-500ML
필터 페이퍼WhatmanWHA1001929
무수 아세트산SIGMA695092-500ML
소수성 펜 MERCKZ672548
조직학 등급 자일렌SIGMA534056-500ML
습도 챔버STAINTRAY25501
무수 염화 마그네슘SIGMAM8266-100G수화된 염화 마그네슘을 사용하는 경우 몰라리티를 조정합니다.
OCTSAKURA FINE TEK4583
인산 완충 식염수 (PBS)SIGMAP4417-50TAB상업용 정제를 사용합니다.
칼륨 페리시아나이드 (칼륨 헥사시아노페러(III))SIGMAP8131-100G
칼륨 페로시아나이드 (칼륨 헥사시아노페러(II) 삼수화물)SIGMAP9387-100G
무수 염화 나트륨SIGMAS2889-250G수화된 염화 나트륨을 사용하는 경우 몰라리티를 조정합니다.
염화 나트륨SIGMAS9888-2.5KG
인산 나트륨 (이수화 인산 나트륨 12수화물)SIGMA71649-500G
```

참고문헌

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  2. Chinta, S. J., et al. Cellular senescence and the aging brain. Exp Gerontol. 68, 3-7 (2015).
  3. Baker, D. J., Petersen, R. C. Cellular senescence in brain aging and neurodegenerative diseases: evidence and perspectives. J Clin Invest. 128 (4), 1208-1216 (2018).
  4. Kuźniar, J., et al. Connections between cellular senescence and Alzheimer’s disease—a narrative review. Int J Mol Sci. 26 (17), 8638(2025).
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