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이 연구는 PRILE 지침(보충 파일 1)에 따라 수행 및 보고되었으며, 전체 실험 작업 흐름은 PRILE 플로우차트(보충 문서 2)에 요약되어 있습니다.
표본 선택
주의: 발치된 인간 치아는 잠재적인 생물학적 위험이 될 수 있습니다. 모든 샘플은 장갑, 마스크, 보호 안경 등 적절한 개인 보호 장비(PPE)를 착용하여 취급하세요. 모든 생물학적 폐기물은 기관 및 지역 규정에 따라 지정된 생물학적 위험 용기에 폐기해야 합니다.
연구 프로토콜은 지역 기관 심사 위원회(MIU-IRB-2122)의 승인을 받았습니다. Baranwal 등(8)을 기반으로 한 G*Power(v3.1.9.7)를 이용한 검정력 분석 에서, 그룹당 표본 크기가 12명일 경우 효과 크기 0.586에 근거한 유의한 차이를 감지하는 데 80%의 검정력을 제공한다고 밝혔습니다. 미스르 국제대학교 구강악안면외과에서 신선히 발치된 단일 뿌리 영구 하악구금구(Vertucci 클래스 I)를 24개를 채집하였다. 이 치아들은 교정 또는 치주 문제로 발치되었으며, 이 연구와는 무관합니다. 발치 직후에는 치주 스케일러를 사용해 부착된 연부 조직이나 치석을 제거하고, 치아는 흐르는 물로 세척했습니다. 소독과 수분 유지를 위해 샘플은 4°C의 0.1% 티몰 용액에 보관되어 사용되었습니다. 치아는 8배 확대 렌즈로 검사되었으며; 골절, 이전 근관 치료, 석회화 또는 흡수성 병변이 있는 환자는 연구에서 제외하였습니다.
샘플 준비
주의: 모든 근관 치료용 줄, 바늘, 다이아몬드 디스크는 적절한 날카로운 용기를 사용하세요.
크라운은 시멘토-에나멜 접합부에서 고속 다이아몬드 디스크를 수냉 하에 사용해 제거하여 뿌리 길이를 표준화했습니다. 작업 길이(WL)는 크기 10 K-파일을 끝 공에서 보이게 한 후 1mm를 빼서 정했습니다. 운하에는 400 × g에서 HyFlex EDM 글라이드 패스 파일(10/.05)이 미리 플레어링되었습니다. 계측은 HyFlex EDM OneFile(25/가변 테이퍼)을 사용해 전체 진동 측정을 완료했습니다.
최종 관개 프로토콜은 17% EDTA 다음에 2.6% NaOCl을 사용하여 수행되었습니다.
참고: 화학 관개제 폐기물은 실험실 안전 기준에 따라 적절히 라벨링된 화학 폐기물 용기통에 폐기하십시오. 각 용액은 20 사이즈, 0.02 테이퍼 은-니켈 활성화 팁이 장착된 초음파 장치를 사용해 30초간 초음파 활성화되었습니다. 팁은 WL보다 2mm 짧게 배치되었고, 중간 출력 설정(약 45kHz)에서 수동 초음파 관개(PUI) 모드로 작동하여 팁이 운하 벽에 걸리지 않고 자유롭게 진동하도록 했습니다.
폐쇄 프로토콜
샘플은 마이크로소프트 엑셀을 이용한 컴퓨터 생성 시퀀스를 사용하여 편향 없는 분포를 위해 두 그룹(n = 12)으로 무작위로 배분되었습니다.
- SC 그룹: 운하는 종이 끝으로 말렸습니다. NeoSealer Flo는 제조사의 관 내 팁을 이용해 관의 관상 3분의 1에 주입되었고, 25 사이즈 HyFlex EDM 마스터 콘에 얇은 실러층을 덧입힌 후 천천히 WL에 장착되었습니다.
- CLC 그룹: 0.02 테이퍼 마스터 콘을 실러에 담근 후 WL에 장착했습니다. 25 사이즈 핑거 스프레더가 WL에서 1mm 이내로 삽입되어 측면 공간을 만들었습니다. 보조 원뿔(미세-미세 크기)은 실러로 코팅된 후 같은 스프레더를 사용해 측면으로 압축하여 운하가 가득 찰 때까지 압축했습니다.
출입구는 캐빗으로 봉인되었습니다. 폐쇄의 품질과 공허 없음은 디지털 구강 내 센서와 65 kV 및 7 mA로 작동하는 X선 장치를 사용해 방사선 촬영으로 검증되었습니다. 충전층 밀도를 3차원적으로 평가하기 위해 두 가지 직교 각도(구측-설측과 원측근측)에서 방사선을 촬영했습니다. 이 이미지들은 2배 확대 렌즈로 분석되었습니다. 샘플은 밀봉제가 완전히 굳도록 37°C, 100% 습도에서 14일간 보관되었습니다.
재치료
재처리는 ProTaper Universal 재처리 파일(D1, D2, D3)을 사용하여 시작되었습니다; 덴츠플리 시로나, 발레그, 스위스). 충전재 대부분을 제거한 후, ProTaper Next 파일 X2(크기 25, 테이퍼 0.06)와 X3(크기 30, 테이퍼 0.07)를 사용해 500 × g , 2.0 Ncm 토크로 추가 확대가 완료되었습니다. 각 파일 사이에 30게이지 측면 통풍 바늘을 사용해 5.25% NaOCl로 관개했습니다.
재치료의 임상 평가 지점은 X3 파일이 작업 길이를 완전히 달성하고 8배 확대 하에서 파일 플루트에 보이는 충전재 잔여물이 없는 시점으로 정의되었습니다. 이 기준은 시술의 표준화된 임상적 '중단 지점'을 나타냅니다. 하지만 이것이 관에서 모든 충전재를 완전히 제거한다는 의미는 아니며, 미세한 잔여물은 종종 상아질 불규칙 내에 남아 있으며, 입체현미경 평가 단계에서 정량화되었습니다.
재치료 시간은 디지털 스톱워치를 사용해 분 단위와 초 단위로 기록되었습니다. 타이밍 간격은 첫 재처리 파일(D1)이 코로나의 구타퍼차에 닿는 순간부터 시작되었으며, 관개, 파일 교체, 플루트 청소 중 활성 기기 사용 시간만 기록되도록 잠시 멈췄다. 최종 최첨단 줄(X3)이 정해진 작업 길이에 도달하면 타이밍이 종료되었습니다.
입체 현미경 평가
각 근은 다이아몬드 디스크를 수냉 하에 사용하여 구강과 설면에 약 0.5mm 깊이의 두 개의 표면 홈을 만들어 종방향 분할을 위해 준비했습니다. 그 후 멸균 끌의 날을 홈에 넣고 망치로 가볍게 두드려 뿌리를 쪼개었습니다. 각 절반은 8배 배율로 촬영되었습니다. 이미지는 ImageJ로 가져왔습니다. 표준화된 측정을 보장하기 위해 소프트웨어의 측정 척도가 먼저 보정되었습니다. "직선" 도구를 선택해 촬영한 물리적 자를 가로지르는 선을 그린 후, "스케일 설정" 대화상자를 열어 알려진 거리(1 mm)를 입력해 픽셀을 밀리미터(mm2)로 변환하는 방식으로 이루어졌습니다. 다음으로, "폴리곤 선택" 도구를 사용해 전체 근관 공간의 정확한 둘레를 수동으로 추적하여 전체 신경관 면적을 계산했습니다. 이후 같은 도구를 사용해 잔류 실러와 구타퍼차의 모든 보이는 섬의 경계를 추적하여 총 면적을 계산했습니다. 잔류 충전재의 비율은 잔여물의 총 면적을 운하 공간의 총 면적으로 나누고 100을 곱하여 계산했습니다.
세 개의 뿌리 수준인 관상, 중간, 첨단 잔재는 Sherif 등에 따른 다음 점수 체계로 평가되었다. 입체 현미경 분석의 한계와 일치하게, 구타퍼카와 실러를 구분하려는 시도는 없었다; 따라서 모든 잔류 잔해를 통틀어 '잔류 충전 물질'이라고 부릅니다.
통계 분석:
모든 분석은 본 연구에서 생성된 전체 원시 데이터셋(보충 파일 3)을 사용하여 수행되었습니다. 서수 데이터는 빈도와 백분율 값으로 제시되었습니다. 수치 데이터는 평균 값과 표준편차 값으로 제시됩니다. 데이터는 샤피로-윌크 검정을 사용해 정규 분포를 확인했으며, 정규 분포가 아닌 것으로 나타났습니다. SC와 CLC 그룹 간의 그룹 간 비교를 위해 Mann-Whitney U 검정을 사용했습니다. 세 가지 근 수준(관상, 중간, 첨단 근)에 걸친 그룹 내 비교에는 Kruskal-Wallis 검정이 사용되었고, 유의한 차이가 발견된 쌍대 비교에는 Dunn의 사후 검정이 적용되었습니다. 여러 단절 비교를 고려하고 Type I 오류 위험을 줄이기 위해 Bonferroni 보정이 적용되어 유의수준을 조정했습니다. 유의한 수준은 P < 0.05로 설정되었습니다. 통계 분석은 Windows 버전 4.3.1 R 통계 분석 소프트웨어 (재료표)를 사용하여 수행되었습니다.