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연구 논문

Lycopus lucidus 추출물이 장내 미생물군집 및 대사체 재구성 및 실험적 다낭성 난소 증후군 개선에 미치는 영향

99 조회수

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DOI:

10.3791/71084

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2026년 8월 28일

 ,  ,  , 
1Department of Gynecology, Cangzhou Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Hebei Province, 2Department of Gynecology, Heilongjiang Provincial Institute of Traditional Chinese Medicine Science

이 논문에서

요약

ZeLan 추출물은 DHEA로 유도된 PCOS 쥐의 내분비 및 대사 표현형을 개선했다. 16S rRNA 시퀀싱과 혈청 대사체학의 통합 분석 결과, 장내 미생물 알파 다양성의 부분적인 회복, 미생물 조성의 변화, 그리고 스테로이드 호르몬, 담즙산 및 단쇄 지방산을 포함한 대사체 변화가 나타났다.

초록

본 연구에서는 다낭성 난소 증후군(PCOS)에 대한 ZeLan 추출물의 치료 효과를 조사하고, 장내 미생물 군집-대사체 재구성과 그 연관성을 평가하였다. 24마리의 암컷 Sprague-Dawley 랫드를 대조군, dehydroepiandrosterone(DHEA)으로 유도된 PCOS 모델군, ZeLan 처리군으로 무작위 배정하였다(각 군 n = 8). 28일간의 중재 후, ELISA를 통해 혈청 호르몬 수치를 측정하였으며, 16S rRNA 유전자 시퀀싱을 이용하여 장내 미생물 군집 조성을 분석하고, UHPLC-Q-TOF-MS를 통해 혈청 대사 프로파일의 특성을 분석하였다. 미생물 군집-대사체 간의 연관성을 탐색하기 위해 다중 검정 보정을 적용한 Spearman 상관 분석을 수행하였다. ZeLan은 체중과 테스토스테론 수치(0.92 vs. 1.85 ng/mL, P < 0.05)를 감소시켜 PCOS 관련 표현형을 유의미하게 개선하였다. < 모델군과 비교했을 때, LH/FSH 비율과 인슐린 수치가 유의하게 낮았습니다(p < 0.05). 시퀀싱 결과, ZeLan은 미생물 알파 다양성을 부분적으로 회복시켰으며(Shannon 지수: 5.79 대 4.19), Firmicutes 대 Bacteroidetes 비율을 감소시켰습니다. ZeLan은 Lactobacillus 및 Ruminococcus의 풍부도 증가와 Bacteroides, Prevotella, Escherichia의 풍부도 감소와 연관이 있었습니다. 대사체학 분석을 통해 52개의 변화된 대사체 특성이 확인되었으며, 주요 변화는 스테로이드 호르몬, 리토콜산과 같은 담즙산, 그리고 낙산과 같은 단쇄 지방산을 포함했습니다. 이러한 결과는 ZeLan이 PCOS 관련 내분비 및 대사 장애를 개선하며, 장내 미생물 및 혈청 대사 프로필의 재구성(remodeling)과 연관이 있음을 시사합니다.

서론

다낭성 난소 증후군(PCOS)은 가임기 여성에게 발생하는 가장 흔한 내분비 질환 중 하나로, 사용된 진단 기준에 따라 전 세계 유병률이 6%에서 20% 사이로 추정됩니다1. 이 복잡한 대사 및 생식 장애는 고안드로겐혈증, 배란 장애, 다낭성 난소 형태를 포함하는 일련의 임상적 징후를 특징으로 하며, 이는 종합적으로 심각한 생식적, 대사적, 심리적 결과를 초래합니다2. 가임력에 미치는 직접적인 영향 외에도, PCOS는 제2형 당뇨병, 심혈관 질환, 자궁내막암을 포함한 장기적인 건강 합병증과 연관된 전신 질환으로 점점 더 인식되고 있으며, 이에 따라 전 세계의 개별 환자와 의료 시스템 모두에 상당한 부담을 주고 있습니다3. PCOS의 병태생리는 아직 완전히 이해되지 않았으나, 일반적으로 유전적 소인, 환경적 요인 및 생활 방식 결정 요인 사이의 복잡한 상호작용이 결합되어 환자에게서 관찰되는 특징적인 호르몬 및 대사 장애가 발생하는 것으로 알려져 있습니다4.

PCOS에 대한 현대적 치료 접근법은 주로 약물적 중재를 통한 증상 관리에 집중하고 있으며, 여기에는 생리 조절을 위한 경구 피임약, 인슐린 민감성 개선을 위한 metformin, 그리고 다모증 조절을 위한 항안드로겐 제제가 포함됩니다5. 하지만 이러한 전통적인 치료법은 증상 완화가 불완전한 경우가 많으며, 특히 임신을 희망하는 여성들에게는 장기적인 적용을 제한하는 부작용이 빈번하게 동반됩니다6. 이에 따라 보완 및 대체 의학적 접근법, 특히 총체적인 조절 메커니즘을 통해 부인과 질환 치료에 수세기에 걸친 경험적 근거를 축적해 온 전통 중의학(TCM)에 대한 관심이 높아지고 있습니다7. PCOS 관리를 위해 연구된 수많은 식물성 의약품 중에서, 혈액 순환 촉진, 어혈 제거 및 생리 조절에 전통적으로 사용되어 온 Lycopus lucidus Turcz. (중의학에서는 제란(ZeLan)으로 알려짐)이 상당한 주목을 받고 있습니다8. 발표된 화학성분 연구에 따르면, L. lucidus는 항산화 및 항염증 활성을 가진 폴리페놀과 플라보노이드가 풍부한 분획물을 함유하고 있습니다8,9. 따라서 본 연구에서는 표준화된 총 플라보노이드 함량을 추출물의 화학적 품질 관리 지표로 사용하였으나, 마이크로바이오타 및 대사 조절을 담당하는 특정 활성 단량체의 확인을 위해서는 향후 표적 화학성분 분석이 필요합니다.

장내 미생물군은 숙주의 대사 및 내분비 기능의 핵심 조절자로 부상했으며, PCOS를 포함한 다양한 대사 장애의 발병 기전에 관여한다는 증거가 점점 더 많아지고 있습니다10. 장내 미생물과 난소 기능 사이의 양방향 소통을 설명하기 위해 장-난소 축(gut-ovary axis)이라는 개념이 제안되었으며, 이는 미생물 대사산물, 면역 신호 전달 및 신경 내분비 경로에 의해 매개됩니다11. PCOS 환자 여성은 미생물 다양성 감소, Firmicutes 대 Bacteroidetes 비율의 변화, 그리고 Lactobacillus 및 Bifidobacterium 종과 같은 유익균의 풍부도 감소로 특징지어지는 장내 미생물 불균형(dysbiosis)을 일관되게 보이는 것으로 나타났습니다12. 이러한 미생물 군집의 교란은 장 투과성 증가, 전신적 저강도 염증, 그리고 담즙산 및 단쇄 지방산(SCFA) 대사의 변화를 포함한 여러 메커니즘을 통해 PCOS의 병태생리에 기여하며, 결과적으로 인슐린 민감성과 안드로겐 생합성에 영향을 미치는 것으로 생각됩니다13. 특히 프로바이오틱스, 프리바이오틱스 및 식이 조절을 포함하여 장내 미생물군을 표적으로 하는 중재법들이 PCOS 증상을 완화하는 데 유망한 결과를 보여주었으며, 이는 장-난소 축이 치료 표적이 될 수 있음을 뒷받침합니다14.

생물학적 시스템 내의 저분자 대사체에 대한 포괄적인 분석인 대사체학(Metabolomics)은 질병 상태와 관련된 대사 교란을 특성화하고 치료적 개입의 생화학적 효과를 평가하는 강력한 방법을 제공합니다15. 마이크로바이옴 프로파일링을 위한 16S rRNA 유전자 시퀀싱과 비표적 대사체학을 통합하면 장내 미생물 군집과 숙주 대사 사이의 관계를 체계적으로 조사할 수 있으며, 이를 통해 질병의 병인 및 치료 반응 모두에 수반될 수 있는 마이크로바이오타-대사체 상호작용에 대한 통찰력을 얻을 수 있습니다. PCOS 관리를 위해 장-난소 축을 표적으로 하는 이론적 근거와 부인과 질환에 대한 ZeLan의 전통적인 적응증에도 불구하고, 현재까지 ZeLan 추출물이 PCOS에서 장내 마이크로바이오타-대사체 인터페이스를 조절하는지 체계적으로 조사한 연구는 없었습니다. 이러한 지식의 공백은 ZeLan과 관련된 생물학적 반응에 대한 이해를 제한하며, PCOS 치료를 위한 이 식물성 개입의 합리적인 최적화를 저해합니다.

본 연구는 DHEA로 유도된 PCOS 쥐 모델에서 ZeLan 추출물의 치료 효능을 조사하고, 통합된 16S rRNA 시퀀싱 및 비표적 대사체학 분석을 통해 관련 장내 미생물군-대사체 변화를 평가하기 위해 설계되었습니다. 구체적으로, 체중, 혈청 테스토스테론, 황체 형성 호르몬 대 난포 자극 호르몬(LH/FSH) 비율 및 인슐린 수치를 포함한 PCOS 관련 표현형에 ZeLan 추출물이 미치는 영향을 평가하였으며, ZeLan 처리 후 장내 미생물군 조성 및 알파 다양성의 변화를 특성화하였습니다. 또한 ZeLan 중재와 관련된 차등 혈청 대사체 특성 및 농축된 대사 경로를 확인하였으며, 특정 장내 미생물 분류군과 주요 대사체 간의 상관관계를 탐색하였습니다. 이러한 목적을 통해 PCOS에서 ZeLan과 관련된 장-난소 축 조절에 대한 연합 멀티오믹스 근거를 제공하고자 하였습니다.

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프로토콜

본 연구의 모든 실험 절차는 국립보건원(National Institutes of Health)의 실험동물 관리 및 사용 지침에 따라 수행되었으며, 기관동물관리위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았습니다(승인 번호 IACUC-2023-0156).

동물

암컷 Sprague-Dawley 쥐(n = 24, 6주령, 체중 180–200 g)를 소속 기관의 실험동물센터에서 분양받아 통제된 환경 조건(온도 22 ± 2°C, 습도 50 ± 10%, 12시간 명/암 주기)에서 사육하였으며, 표준 설치류 사료와 정제수를 자유롭게 섭취하도록 하였다. 1주일간의 적응 기간 후, 동물을 세 개의 실험군(군당 n = 8)인 대조군, PCOS 모델군, ZeLan 투여군으로 무작위 배정하였다. 표본 크기는 PCOS 모델의 장내 미생물 군집 변화를 조사한 이전 연구들을 기반으로 결정하였으며, 검정력 분석 결과 군당 8마리의 동물을 사용했을 때 α = 0.05에서 알파 다양성 지수의 1.5배 차이를 검출하기 위한 검정력이 80%인 것으로 나타났다.

PCOS 모델 구축 및 치료 프로토콜

PCOS 모델은 참깨 오일에 용해된 dehydroepiandrosterone (DHEA; Sigma-Aldrich, USA)을 체중 100 g당 6 mg의 용량으로 21일 연속으로 목 등 부위에 피하 주사하는 잘 검증된 프로토콜을 사용하여 구축되었습니다. 대조군 동물에게는 동일한 부피의 참깨 오일 용매를 투여하였습니다. 전체 실험 일정은 7일간의 적응 기간, 21일간의 모델 유도 기간, 28일간의 중재 기간으로 구성되었으며, 적응 기간을 포함하여 프로토콜 56일 차에 최종 샘플링을 수행하였습니다 (Figure 1). ZeLan 추출물은 인증된 Lycopus lucidus Turcz.의 지상부를 수성 추출하여 제조하였으며, 고성능 액체 크로마토그래피를 통해 총 플라보노이드 함량이 2.5% 이상이 되도록 표준화하였으며, 이를 식물 추출물의 화학적 품질 관리 기준으로 삼았습니다. DHEA 유도 모델 구축이 완료된 후, ZeLan 군의 쥐에게는 ZeLan 추출물을 체중 kg당 200 mg의 용량으로 28일 연속으로 매일 경구 투여하였고, 대조군과 모델군에는 동일한 부피의 증류수를 투여하였습니다. 200 mg/kg 용량은 식물 추출물을 사용한 이전의 동물 실험 경험과 예비 내약성 고려 사항을 바탕으로 탐색적 약리학적 용량으로 선정되었으며, 정식 용량-반응 평가는 이번 설계에 포함되지 않았습니다. 실험 기간 동안 체중을 매주 기록하였습니다. 본 실험 설계에서 PCOS 모델 구축의 성공 여부는 DHEA 유도 프로토콜과 더불어 체중, 혈청 testosterone, LH/FSH 비율, 공복 insulin을 포함한 최종 내분비 및 대사 표현형을 사용하여 평가되었습니다. 난소 조직병리학적 검사, 난포 수 측정, 황체 정량 분석 및 연속적인 발정 주기 모니터링은 모델 확인 지표에 포함되지 않았으며, 따라서 난소 기능 장애에 대한 해석은 직접적인 조직 수준의 평가보다는 내분비 및 대사 측정값에 근거하였습니다.

시료 수집 및 처리

이후의 생화학, 마이크로바이오타 및 대사체 분석을 위해 세 그룹 모두에서 샘플(혈청 및 분변)을 수집하였습니다(그룹당 n = 8). 일주기 리듬 및 식이 관련 변동성을 줄이기 위해, 하룻밤 금식 후 오전 중에 최종 수집을 수행하였습니다. 마취 하에 복부 대동맥에서 혈액 샘플을 수집하고, 4°C에서 3,000 × g로 15분 동안 원심분리하여 혈청을 얻었으며, 이를 분주하여 호르몬 및 대사체 분석 시까지 -80°C에 보관하였습니다. 신선한 분변 샘플은 무균 조건 하에 맹장에서 멸균 크라이오튜브로 직접 수집하였으며, 운반 중에는 드라이아이스에 보관하고, 수집 후 10분 이내에 액체 질소로 급속 냉동시킨 뒤 16S rRNA 유전자 시퀀싱 시까지 -80°C에 보관하였습니다.

혈청 호르몬 측정

테스토스테론, 황체 형성 호르몬(LH), 여포 자극 호르몬(FSH) 및 인슐린의 혈청 농도는 제조사의 지침에 따라 상용 효소 결합 면역 흡착 분석법(ELISA) 키트(Cusabio Biotech, Wuhan, China)를 사용하여 정량하였습니다. LH/FSH 비율은 PCOS의 특징인 성선 자극 호르몬 불균형의 복합 지표로 계산되었습니다. 모든 시료는 두 번씩 반복 분석하였으며, 반복 측정값의 변동 계수가 15%를 초과하는 경우 재측정하였습니다. 분석 내(intra-assay) 및 분석 간(inter-assay) 변동 계수는 각각 10%와 15% 미만으로 유지되어야 했습니다. 잠재적 이상치는 원본 기록 및 분석 성능 정보와 대조하여 선별하였으며, 문서화된 기술적 이유 없이 통계적 근거만으로 값을 제외하지 않았습니다.

16S rRNA 유전자 시퀀싱 및 생물정보학 분석

제조사의 프로토콜에 따라 QIAamp DNA Stool Mini Kit (Qiagen, Germany)를 사용하여 맹장 내용물에서 총 세균 게놈 DNA를 추출하였습니다. DNA의 질과 양은 NanoDrop 분광광도법 및 아가로스 겔 전기영동을 통해 평가하였으며, DNA 추출물은 라이브러리 구축 전까지 -80°C에 보관하였습니다. 16S rRNA 유전자의 V3-V4 가변 영역은 Illumina 어댑터 서열이 포함된 유니버설 프라이머 338F (5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3') 및 806R (5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3')를 사용하여 증폭하였습니다. 앰플리콘 라이브러리를 구축, 정제, 정량한 후 동일 몰 농도로 풀링하였으며, Illumina NovaSeq 6000 플랫폼 (Novogene, Beijing, China)을 사용하여 paired-end 250 bp 리드로 시퀀싱하였습니다.

원시 시퀀싱 리드(Raw sequencing reads)는 QIIME2 (version 2022.2) 파이프라인을 사용하여 처리되었습니다. 페어드엔드(Paired-end) 리드는 디멀티플렉싱 및 병합 과정을 거쳤으며, Phred 점수 임계값 20 이상으로 품질 필터링을 수행한 후 DADA2로 처리하여 키메라 서열을 제거하고 앰플리콘 서열 변이(ASVs)를 생성하였습니다. 분류학적 분류는 naive Bayes 분류기를 사용하여 SILVA 138 참조 데이터베이스를 기반으로 수행되었습니다. 샘플 내 다양성과 풍부도를 평가하기 위해 Shannon 지수, Simpson 지수 및 Chao1 추정치를 포함한 알파 다양성 지표를 산출하였습니다. 리드 요약, ASV 풍부도 표, Good's coverage 및 희박화 곡선(rarefaction-curve) 파일을 포함한 시퀀싱 깊이 출력물은 데이터 가용성 섹션에 설명된 마이크로바이옴 데이터셋의 일부로 처리되었습니다. LDA 점수 임계값 2.0 초과 및 P < 0.05를 기준으로 Linear discriminant analysis effect size (LEfSe)를 사용하여 대조군(Control)과 모델군(Model) 비교에서 질환 관련 분류군을 식별하였습니다. ZeLan 관련 회복 효과는 모델군 대비 ZeLan 군에서 나타나는 분류학적 풍부도 변화의 방향을 비교하여 평가하였습니다.

비표적 대사체학 분석

혈청 대사체 프로파일링은 사중극자 비행시간 질량분석기가 결합된 초고성능 액체 크로마토그래피(UHPLC-Q-TOF-MS; Agilent 1290 Infinity II/6550, USA)를 사용하여 수행되었습니다. 혈청 시료(100 μL)를 내부 표준물질이 포함된 차가운 methanol:acetonitrile (1:1, v/v) 400 μL와 혼합하고, 볼텍싱한 후 -20°C에서 1시간 동안 배양하여 단백질을 침전시켰습니다. 14,000 × g에서 15분 동안 원심분리한 후, 상층액을 질소 기류 하에서 건조시키고 분석을 위해 100 μL의 acetonitrile:water (1:1, v/v)로 재구성하였습니다. 크로마토그래피 분리는 40°C로 유지된 ACQUITY UPLC HSS T3 컬럼(2.1 × 100 mm, 1.8 μm)에서 수행되었으며, 0.1% formic acid가 포함된 water를 이동상 A로, 0.1% formic acid가 포함된 acetonitrile을 이동상 B로 하여 0.30 mL/min의 유속으로 사용하였습니다. 대사체 분리를 위해 유기상의 비율을 5%에서 95%까지 증가시킨 후, 컬럼 세척 및 재평형화를 진행하는 기울기 프로그램(gradient program)을 사용하였습니다. 질량분석 데이터는 m/z 50–1200의 스캔 범위에서 양이온 및 음이온 전기분무 이온화 모드 모두에서 획득하였으며, 소스 파라미터는 모세관 전압 3.5 kV, 건조 가스 유량 10 L/min, 건조 가스 온도 325°C, 네뷸라이저 압력 35 psi, 프래그멘터 전압 120 V로 설정하였습니다.

원시 데이터 파일은 mzXML 형식으로 변환되었으며, 피크 검출, 머무름 시간 정렬 및 피크 면적 적분을 위해 R의 XCMS 패키지를 사용하여 처리되었습니다. 모든 혈청 추출물의 동일한 분취량을 혼합하여 준비한 품질 관리 샘플을 분석 시퀀스 전반에 삽입하여 기기 안정성을 모니터링했습니다. 결측치가 과도하거나 품질 관리 재현성이 불안정한 특징들은 통계 모델링 전에 제거되었습니다. 대사체 식별은 정확한 질량, 머무름 시간 및 MS/MS 파편화 패턴을 Human Metabolome Database (HMDB), METLIN 및 자체 스펙트럼 라이브러리와 대조하여 수행되었습니다. 다변량 통계 분석은 MetaboAnalyst 5.0을 사용하여 수행되었습니다. 후속 보고를 위해 유지된 대사체 특징들은 다변량 판별 기여도, 배수 변화 방향 및 통계적 근거를 통합한 복합 기준을 사용하여 우선순위를 정했으며, P 값은 다중 테스트를 고려하여 Benjamini-Hochberg 방법으로 보정되었습니다. 52개의 대사체 특징이 포함된 전체 주석 보고 표는 Supplementary Table 1로 제공됩니다. 경로 풍부성 분석은 Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) 데이터베이스를 사용하여 수행되었습니다.

통계 분석

모든 통계 분석은 SPSS 버전 26.0 (IBM Corporation, Armonk, NY, USA) 및 R 소프트웨어 (버전 4.2.1)를 사용하여 수행되었습니다. 연속형 데이터는 평균 ± 표준편차(SD)로 표기하였으며, 추론 통계 분석 전 Shapiro-Wilk 검정을 통해 정규성을 평가하였습니다. 정규 분포를 따르는 데이터의 경우, 다중 그룹 비교를 위해 일원 분산 분석(one-way ANOVA) 후 Tukey의 사후 검정을 실시하였으며, 비정규 분포 데이터의 경우 Kruskal-Wallis 검정과 Dunn의 사후 검정을 사용하였습니다. 장내 미생물 분류군과 혈청 대사체 간의 상관관계는 Spearman 서열 상관계수를 사용하여 평가하고 계층적 군집 분석 히트맵으로 시각화하였습니다. 상관관계 P-값은 Benjamini-Hochberg 위양성 발견률(false-discovery rate) 방법을 사용하여 다중 검정 보정을 거쳤으며, 방향성이 일관되고 통계적으로 유의미한 상관관계만을 해석하였습니다. 조정된 P-값 임계값이 별도로 지정되지 않는 한, 양측 P-값 < 0.05를 통계적으로 유의미한 것으로 간주하였습니다.

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결과

ZeLan 추출물이 PCOS 임상 표현형에 미치는 영향

DHEA 투여는 대조군(Control group)과 비교하여 체중, 혈청 테스토스테론 농도, LH/FSH 비율 및 공복 인슐린 수치의 유의미한 상승을 통해 입증된 바와 같이 쥐에서 PCOS 유사 내분비 및 대사 표현형을 유도하였습니다(모두 P < 0.05). Shapiro-Wilk 검사를 이용한 분포 평가 결과, Table 1에 요약된 주요 체중 및 호르몬 평가 지표에 대해 모수 분석이 가능하다는 것이 확인되었습니다. 28일간의 ZeLan 추출물 처리는 이러한 대사 및 호르몬 이상을 유의하게 개선했습니다. 체중은 7일간의 적응 기간을 포함하여 프로토콜 56일째인 처리 기간 종료 시점에 기록되었습니다. Table 1에 제시된 바와 같이, 모델군(Model group)의 체중(291.12 ± 15.35 g)은 대조군(227.45 ± ...

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토론

본 연구는 ZeLan 추출물이 DHEA 유도 쥐 모델에서 PCOS 관련 내분비 및 대사 표현형을 개선하며, 이러한 효과가 장내 미생물 군집 구성 및 혈청 대사 프로필의 긍정적인 변화와 연관되어 있다는 증거를 제공합니다. 통합 멀티오믹스 분석 결과, ZeLan 처리는 고안드로겐혈증, 상승된 LH/FSH 비율 및 인슐린 저항성을 개선하는 한편, 장내 미생물의 알파 다양성을 일부 회복시키고 미생물 구성을 재균형화하며 PCOS 병태생리에 관여하는 여러 대사 경로를 정상화하는 것으로 나타났습니다. 이러한 발견은 전통 중약 성분에 대한 생물학적 반응에 대한 현재의 이해를 확장하며, PCOS 중재를 위한 잠재적 표적으로서 장-난소 축(gut-ovary axis)에 대한 추가 연구를 뒷받침합니다.

ZeLan 처리 후 혈청 testosterone 및 LH/FSH 비율의 감소는 flavonoid와 phenolic 화합물을 함유한 식물 추출물의 항안드로겐 특성을 입증한 이전 연구들과 일치합니다

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공개 사항

저자들은 선언할 이해상충 관계가 없습니다.

감사의 글

본 연구는 허베이성 중의약관리국 과학연구 계획 프로젝트 (그랜트 번호 2021316)의 지원을 받아 수행되었습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
아세토니트릴Fisher Chemical / Thermo Fisher ScientificA955-4Optima LC-MS 등급, 4 L; 이동상 및 시료 재구성용
ACQUITY UPLC HSS T3 컬럼Waters Corporation186003539100 Å, 1.8 μm, 2.1 × 100 mm; UHPLC 분리
아가로스 겔 전기영동 시스템Bio-Rad Laboratories1704486Mini-Sub Cell GT 수평 전기영동 시스템; DNA 품질 평가
Agilent 1290 Infinity II/6550 UHPLC-Q-TOF-MSAgilent TechnologiesG7120A/G7167B/G7116B/G6550B6550 iFunnel Q-TOF MS와 결합된 1290 Infinity II UHPLC 모듈 세트; 혈청 비표적 대사체학 플랫폼
DADA2 알고리즘Bioconductor버전 1.24.0ASV 생성 및 키메라 제거; R 4.2.1/Bioconductor 3.15 워크플로와 일치하도록 추론된 버전
데히드로에피안드로스테론 (DHEA)Sigma-Aldrich / MilliporeSigmaD4000PCOS 모델 유도; 체중 100g당 6mg; CAS 53-43-0
증류수Invitrogen / Thermo Fisher Scientific10977015UltraPure DNase/RNase-Free 증류수; 대조군 및 모델군의 경구 투여용 용매
개미산Fisher Chemical / Thermo Fisher ScientificA117-50Optima LC-MS 등급, 50 mL; LC-MS 이동상용 0.1% 첨가제
인체 대사체 데이터베이스앨버타 대학교 / HMDBHMDB 5.0대사체 주석 데이터베이스
Illumina NovaSeq 6000 플랫폼Illumina20012850페어드 엔드(paired-end) 250 bp 16S rRNA 시퀀싱을 위해 시퀀싱 서비스 제공업체가 사용한 시퀀싱 시스템
Lycopus lucidus Turcz. 초본Beijing Tongrentang Chinese Medicine Co., Ltd.배치 ZL-20230315제란(ZeLan) 수성 추출물을 위한 인증된 식물성 원료
메탄올Fisher Chemical / Thermo Fisher ScientificA456-4Optima LC-MS 등급, 4 L; 혈청 대사체학을 위한 단백질 침전
METLIN 데이터베이스스크립스 연구소(Scripps Research)METLIN 클래식 2023대사체 질량 분석 주석 데이터베이스
NanoDrop 분광광도계Thermo Fisher ScientificND-ONE-WNanoDrop One 미세 부피 UV-Vis 분광광도계; DNA 양 및 순도 평가
QIAamp Fast DNA Stool Mini KitQiagen51604맹장 내용물로부터의 DNA 추출; 50-prep 대변 DNA 키트
QIIME2QIIME2 개발팀버전 2022.216S rRNA 서열 처리
R 소프트웨어R Foundation버전 4.2.1통계 분석 및 XCMS 처리
테스토스테론, LH, FSH 및 인슐린 측정을 위한 혈청 ELISA 키트Cusabio BiotechCSB-E05100r; CSB-E12654r; CSB-E06869r; CSB-E05070r혈청 호르몬 및 인슐린 정량을 위한 쥐 테스토스테론, LH, FSH 및 인슐린 ELISA 키트
참기름Sigma-Aldrich / MilliporeSigmaS3547DHEA 주입용 용매
펜토바르비탈 나트륨Sigma-Aldrich / MilliporeSigmaP3761마취; 50 mg/kg 복강 내 투여
SPSS 소프트웨어IBM Corporation버전 26.0통계 분석
범용 16S rRNA 프라이머 338F/806RSangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.맞춤 합성: 338F/806RV3-V4 영역의 증폭; 338F ACTCCTACGGGAGGCAGCAG, 806R GGACTACHVGGGTWTCTAAT
XCMS 패키지Bioconductor / R버전 3.18.0피크 검출, 머무름 시간 정렬 및 적분
제란 추출물자체 제조 수성 추출물배치 ZLE-20230402경구 투여 처리; 표준화된 총 플라보노이드 ≥2.5%

참고문헌

  1. Joham AE, Norman RJ, Stener-Victorin E, et al. Polycystic ovary syndrome. Lancet Diabetes Endocrinol. 2022;10(9):668-680.
  2. Islam H, Masud J, Islam YN, et al. An update on polycystic ovary syndrome: a review of the current state of knowledge in diagnosis, genetic etiology, and emerging treatment options. Womens Health (Lond). 2022;18:17455057221117966.
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