치유 과정의 다양한 단계에서 생리학적 또는 병리학적 조건에서 다양한 치료제를 평가할 수 있는 쥐 피부 상처 모델이 기술되었습니다. 또한, 조직 복구 기간 동안 상처 수축 속도를 모니터링하기 위한 수동 평면측정 프로토콜도 상세히 안내되어 있습니다.
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치유 과정의 다양한 단계에서 생리학적 또는 병리학적 조건에서 다양한 치료제를 평가할 수 있는 쥐 피부 상처 모델이 기술되었습니다. 또한, 조직 복구 기간 동안 상처 수축 속도를 모니터링하기 위한 수동 평면측정 프로토콜도 상세히 안내되어 있습니다.
피부 상처 치유는 염증, 증식, 재형성의 조정된 단계들이 포함된 복잡한 생물학적 과정입니다. 상처 치유의 근본 메커니즘을 더 잘 이해할 필요가 있기 때문에, 절제 동물 상처 모델은 이 과정에 대한 지식을 심화하고 새로운 치료법 개발을 촉진하기 위해 널리 사용되고 있습니다. 이러한 모델에서는 펀치 생검을 이용한 피부 상처 유도가 표준화된 병변을 유도하기 때문에 자주 사용됩니다. 하지만 이 기법은 병변을 원형 형태로 제한하여 일부 실험 목적에는 적합하지 않을 수 있습니다. 이 맥락에서, 쥐의 측면에 표준화된 정사각형 모델을 사용하여 전층 절제 피부 상처를 유도하는 간단하고 재현 가능한 수술 프로토콜을 제시합니다. 이 방법론은 크기와 기하학적 크기가 다양한 병변을 생성할 수 있게 하여, 각 연구의 특정 목표에 맞춘 실험적 유연성을 높이고, 생리적 또는 병리학적 조건에서 치유 과정을 모니터링할 수 있게 합니다. 또한, 수작업 평면측정을 통한 상처 수축 속도를 모니터링하는 방법도 설명되어 있습니다. 이 프로토콜의 실행에는 세심한 주의와 기술적 숙련도가 필요하지 않지만, 고급 외과 기술은 필요하지 않습니다.
피부 상처 치유는 조직의 완전성을 회복하기 위해 여러 차례 조정된 사건으로 구성된 복잡하고 조직된 생물학적 과정입니다. 이 현상은 지혈과 염증, 증식, 재형성 등 뚜렷하지만 겹치는 단계를 거치며 진행됩니다. 염증기는 상처 형성 후 몇 분 후에 시작되며, 부상 후 24시간에서 48시간 사이에 최고조에 달하며, 면역 세포의 모집과 염증 매개체의 방출을 포함합니다. 증식 단계는 재상피화와 육아조직 형성으로 특징지어지며, 부상 후 4일에서 5일 사이에 시작되어 몇 주간 지속될 수 있습니다. 마지막으로 상처는 재형성 단계에 들어가며, 부상 후 3주에 시작되어 몇 달 또는 몇 년간 지속될 수 있으며, 조직 재조직이 특징입니다. 치유가 정상적으로 진행되지 않으면 만성 상처가 발생할 수 있으며, 이는 환자와의료 시스템 모두에게 큰 부담을 주어 새로운 치료법 개발의 필요성을 강조합니다.
동물의 모든 피부층(표피, 진피, 피하 조직)을 외과적으로 제거하여 절제 상처를 만드는 것은 염증, 육아조직 형성, 재상피화, 혈관신생, 그리고 재형성 과정을 조사할 수 있게 합니다. 최근 수십 년간 상처 치유 모델의 채택으로 수많은 발견이 이루어졌으며,이 과정을 촉진하는 분자 및 세포 사건에 대한 지식과 이해가 확장되었습니다. 생체 내 모델은 여러 세포 유형, 환경 단서, 파라크린 상호작용의 존재로 인해 완전한 치유 미세환경을 더 정확하게 나타내기 때문에 인간 상처 수리를 연구하는 가장 예측 가능한 도구로 남아있습니다. 이와 관련해, 쥐와 생쥐는 다루기쉽고 유지보수가 용이하기 때문에 널리 활용됩니다.
이 모델들에서는 펀치 생검이 표준 절제 수술을 제공하기 때문에 외과적 상처를 유도하는 데 자주 사용됩니다. 따라서 문헌에서 기술된 대부분의 실험 모델은7번부터 12번까지의 원형 병변 형성에 기반하고 있습니다. 이 접근법은 널리 받아들여지고 있지만, 대체 기하학적 구조의 사용은 상처 치유 연구를 위한 방법론적 접근을 다양화할 수 있습니다. 이와 관련해, 메스로 상처를 만드는 것은 펀치 생검13, 14, 15, 16, 17, 18에서 사용되는 표준 원형 패턴 밖에서 다양한 크기와 뚜렷한 형태의 병변을 생성할 수 있게 합니다. 더욱이 동물 모델 비교 연구에서는 메스 절개가다른 기법에 비해 초기 조직 손상을 덜 준다는 것이 입증되었습니다.
이 프로토콜은 쥐의 측면 사각형 병변 모델을 사용하여 전층 절제 피부 상처를 유도하는 대체 외과적 방법론을 설명합니다. 제시된 접근법은 병변 부위의 표준화와 조직 수리 과정의 모니터링을 용이하게 합니다. 더 나아가, 생리학적 또는 병리학적 조건 하에서 피부 치유의 다양한 단계에 걸쳐 다양한 치료 전략과 생체재료의 효과를 평가하는 연구에도 적용 가능합니다.
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모든 실험 절차는 산타크루스 주립대학교(UESC)의 동물 이용 윤리 위원회(CEUA)의 승인을 받았습니다. 위스타 쥐(Rattus norvegicus)는 UESC 동물 번식, 유지 및 실험 연구소(LaBIO)/동물 시설에서 CEUA/UESC 프로토콜 No. 010/25에 따라 확보되었습니다. 모든 동물 시술은 NIH 실험동물 관리 및 사용 가이드에 따라 수행되었으며, 동물 복지 및 윤리적 사용에 관한 기관 지침을 준수했습니다. 실험 프로토콜의 전체 설계는 그림 1에 나와 있으며, 이 프로토콜에 사용되는 재료와 장비는 보조 자료로 이용 가능한 재료표 에 자세히 나와 있습니다.

그림 1: 쥐 모델에서 피부 상처 유도 프로토콜의 실험 설계. (A) 동물 진정 후 실험 부위를 면도하고; (B) 이소플루란으로 마취를 유도하고, 반사 상실 시 얼굴 마스크를 통해 적절한 마취면을 유지함; (C) 면도 부위의 방독을 수행하고, 캘리퍼스로 병변 크기를 표시하며, 멸균 메스를 사용해 외과 상처를 만듭니다; (D) 투명 필름 드레싱으로 병변을 보호하고 접착 백킹 페이퍼를 이용한 수동 평면측정; (E) 수술 후 트라마돌 염산염을 12시간마다 3일간 투여할 것; (F) 상처 유도 후 24시간 후에 실험적 치료를 적용; (G) 이전에 정해진 실험 시점에 안락사를 시행하고, 이후 분석을 위해 샘플 채취와 평면측정 추적을 진행합니다. 이 피규어는 저자들이 BioRender를 통해 제작했습니다. 갈방, M. (2026) https://BioRender.com/jsiygmf. 출판 허가증이 첨부되어 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보시려면 여기를 클릭해 주세요.
1. 동물과 취급
2. 수술 전 절차
3. 피부 상처 유도
4. 상처 부위의 수동 평면측정
5. 즉각적인 수술 후 관리
6. 치료
7. 안락사
8. 병변 부위의 측정

그림 2: ImitoWound를 이용한 병변 부적 측정. (A) 수동 평면측정에서 두 지점(A와 B)을 표시하고, 밀리미터 자로 그 사이의 거리(x) 를 측정합니다; (B) 병변 이미지를 소프트웨어에 업로드하고, 이전에 정의된 동일한 지점(A와 B)을 표시하여 원본 위에 겹쳐 넣습니다; 이전에 수집된 측정값(x)을 입력하여 스케일 보정을 진행하고; (C) 병변 부적 측정을 소프트웨어에 진행 알림; 면적 값이 자동으로 계산되어 시스템에서 제공될 때까지 기다립니다. 이 피규어는 저자들이 BioRender를 통해 제작했습니다. 레사 다 실바, M. (2026) https://BioRender.com/dzko62t. 출판 허가증이 첨부되어 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보시려면 여기를 클릭해 주세요.
9. 상처 수축률의 결정
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이 실험에서는 은설파디아진을 기준 처리제로 사용했습니다. 이 제품은 병변 유도 24시간 후 상처 침상에 국소 적용되었습니다. 은 설파디아진의 선택은 항균제로서의 확립된 임상 사용과 피부 상처 관리에 기반했다. 데이터는 중앙값과 2분위 범위로 제시되며, 실험 시점당 n = 5마리의 동물이 있습니다. 그림 3A 는 유도 분만일(D0)과 3일, 7일, 14일, 21일에 피부 상처의 거시적 진화를 보여주며, 이는 각 동물의 안락사일에 해당합니다. 그림 3B 는 ImitoWound 소프트웨어를 사용해 분석한 수동 상처 평면측정 데이터를 보여주며, 시간에 따른 면적 측정을 가능하게 합니다.
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인간 상처 치유에 대한 지식이 상당히 발전했음에도 불구하고, 본질적인 어려움과 한계로 인해이 분야 연구에는 실험 모델의 활용이 필수적이다. 이 맥락에서 본 프로토콜은 기존 기법의 대안으로 쥐 옆구리에 메스로 유도하는 전층 절제 상처 모델을 기술하는 것을 목표로 했습니다. 원형 펀치 생검과 관련된 등쪽 부위는 피부 치유 연구에서 가장 널리 사용되는 방법입니다. 그러나 측면을 대체 해부학적 부위로 사용하는 것도 잘 문서화되어 있으며, 조직 수리 평가에 동등한 적용성이 입증되었습니다21, 22, 23. 다른 마우스 모델과 마찬가지로, 이 프로토콜은 상처 수축 과정의 영향을 받는데, 이 현상은 부상 후 피부 수축을 담당하는 근육층인 판니쿨루스 카르노수스(pannicul...
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저자들은 상충하는 이해관계가 없다고 선언한다.
우리는 바히아 주립 자원 재단 (FAPESB)와 니벨 수페리오르 석좌 석유 재단 (CAPES)에 감사드립니다; 재정 지원을 위해 미생물학 및 생명공학 대학원 프로그램인 Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduação(PROPP/UESC, PPGBBM/UESC)도 지원했습니다. 또한 수술실과 장비를 제공해 준 수의병원(HVET/UESC)에도 감사드립니다.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 알코올 (에탄올 70%) | Dinâmica | P.01.0024.006.06.81 | 항균 |
| 해부용 핀셋 | Sigma-Aldrich | F3892 | 스테인리스강 |
| 붕대 | 어느 것이나 | 해당 없음 | 상처 보호 |
| 캘리퍼 | Mitutoyo | 530-104 | 상처 경계 설정 |
| 클로르헥시딘 0.2% 수성 소독액 | Riohex | 해당 없음 | 항균 |
| CO2 챔버 | Bonther | D149F1LYSZ | 마취 유도 |
| 크레이프 붕대 | Cremer | 818765 | 15 cm x 1,25 m |
| 일회용 라텍스 장갑 | Descarpak | e0530101 | 비 멸균 |
| 거즈 패드 | Cremer | 819342 | 7.5 x 7.5 cm |
| 하강 주사기 | Dercarpack | e0324201 | 바늘 포함 1 mL |
| ImageJ | Image J | https://imagej.net/ij/ | 면적 측정 |
| ImitoWound | ImitoWound | https://imito.io/pt/imitowound | 면적 측정 |
| 인접 종이 타월 | Scott Smart | 48260 | 일반 청소 |
| 아이소플루란 | Cristália | 7.89668E+12 | 흡입 마취제 |
| 절차용 라텍스 장갑 | 절차용 라텍스 장갑 절차용 라텍스 장갑 | 개인 보호 장비 | |
| 비누 | 어느 것이나 | 해당 없음 | 상처 부위 세척 |
| Mayo 가위, 직선, 날카로움/날카로움 | Fine Science Tools | 14001-12 | 스테인리스강 |
| 밀리미터 자 | 어느 것이나 | 해당 없음 | |
| 모르핀 황산염 | Sigma-Aldrich | M8777 | 주사용 용액 1 mg/mL |
| 종이 시트 | 어느 것이나 | 해당 없음 | |
| 영구 마커 | 어느 것이나 | 해당 없음 | 피부 표시 |
| 포비돈-요오드 | Rioquimica | ZK48BN72E | 소독제 |
| 해부용 메스 블레이드 번호 23 | Descarpak | 740801 | 스테인리스강 |
| 해부용 메스 손잡이 번호 4 | Sigma-Aldrich | 해당 없음 | 스테인리스강 |
| 스테인리스강 면도날 | Wilkinson | N/A | 머리 제거 |
| 멸균 수술용 장갑 | Descarpak | e0212101 | 멸균 |
| 수술용 마스크 | 어느 것이나 | 해당 없음 | 비 멸균 |
| 트라마돌 하이드로클로라이드 | UniãoQuímica | 7.89601E+12 | 용액 주사 50 mg/mL |
| 투명 필름 드레싱 | Vital derme | 1503 | 15 cm x 10 m |
| 투명 폴리프로필렌 접착 테이프 | 투명 폴리프로필렌 접착 테이프 투명 폴리프로필렌 접착 테이프 | 상처 보호 | |
| PVC 커버가 있는 수의학 온열 담요 | Prevtech | MSO2VT001 | 체온 유지 |
| 방수 접착 테이프 | Cremer | 819113 | 10 cm x 4.5 m |
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