엘라스틴 감작과 혈관 주위 엘라스타제를 이용한 쥐 복부 대동맥류 모델의 신뢰성 높은 생성

요약

이 프로토콜은 면역 감작 성분을 포함한 AAA 모델로서, 엘라스틴 감작과 혈관 주위 엘라스타제 적용을 사용하여 C57BL/6 마우스에서 복부 대동맥류(AAA)를 반복 가능하고 신뢰할 수 있게 유도하는 방법을 제공합니다.

초록

복부 대동맥류벽의 탄성 층층 기반의 열화는 복부 대동맥류(AAA)의 조직병리학적 특징입니다. 점점 더 많은 증거가 엘라스틴 분해와 관련 숙주 면역 반응이 AAA의 병인에 연관되어 있음을 시사하고 있습니다. 이러한 과정의 효과적인 모델링은 이 흔한 질병에 대한 이해와 치료를 향상시키는 데 중요합니다. 이전 AAA 모델들이 동맥류 유도를 위해 엘라스틴 교란 기법을 사용했으나, 많은 모델에서 엘라스타제만 사용된다는 점만으로는 엘라스틴 및 그 분해 산물(EDP)에 대한 지속적인 면역 반응을 설명하지 못합니다. 이 지속적인 면역 반응을 모델링하기 위해, 우리는 동맥류 유도 수술 7일 전에 피하 주입하여 C57BL/6 마우스를 EDP에 감작시키는 모델을 개발했습니다. 동맥류 유도 수술은 복부 대동맥을 노출시키고 대동맥 주변 구획에 국소 엘라스타제를 적용하여 쥐 대동맥에 엘라스틴과 EDP를 노출시키는 것을 목표로 진행합니다. 이 모이에이트가 노출되면 동물은 이전에 감수했던 항원들에 대해 면역 반응을 보여야 합니다. 7일 후 반복되는 '부스터' EDP 주사는 이 면역 반응을 전파시키는 역할을 합니다. 여기서는 C57BL/6 마우스에서 EDP를 이용한 다중 감작과 혈관 주위 엘라스타제 적용을 통한 AAA 유도 수술을 통해 신뢰성 있게 AAA를 생성하는 프로토콜을 설명합니다. 이 모델은 빠르고 적당한 비용으로 만들 수 있으며, 82%의 마우스에서 비디오 마이크로미터, 초음파로 73%, >>50% 확장을 비디오 마이크로미터로 64%, 초음파로 27%를 유도합니다. 이는 유도 수술 후 21일차 측정입니다. 이 기법은 수술 중 생존율 95%와도 관련이 있습니다.

서론

복부 대동맥류(AAA)는 전 세계적으로 >3,500만 명에게 영향을 미치며, 65-80세 남성의 4–8%에 해당합니다. 파열은 AAA에서 가장 치명적인 합병증으로, 동맥류의 기계적 벽 응력이 대동맥 조직의 강도를 초과할 때 발생하여 대량 출혈과 전체 사망률 80−90%에 달합니다^3,4. 현재 관리는 예방을 목표로 하며, 고위험군에 대한 초음파 선별과 파열 위험이 수리 위험을 초과할 때(보통 직경 5.5cm)에서 수술적 수리를 시행^합니다. 하지만 대부분의 AAA는 무증상이며, 많은 경우 우^{연히 진단}됩니다. 따라서 고위험 환자를 식별하고 AAA 성장을 줄이기 위한 비수술적 치료법을 개발하여 파열 위험을 줄이는 노력이 필요합니다.

AAA에 대한 의학적 치료법을 개발하려면 발병 기전을 더 잘 이해해야 합니다. 현재 여러 실험 모델이 사용되고 있으며, 여기에는 안지오텐신 II 주입⁷, 이종이식⁸, 염화칼슘^{도포 9}, 주입¹⁰ 및/또는 엘라스타제¹¹의 국소 적용을 이용한 소동물 모델 등이 포함됩니다. 각 모델은 AAA의 병리학적 기초에 대한 서로 다른 이해를 사용하며, 대부분은 시작 이후 수정, 개선 또는 다른 방법과 결합되어 왔습니다.

중요하게도, AAA 조직학은 정상 층층 엘라스틴 매트릭스의 손실을 보여주며, 이는 만성 폐쇄성 폐질환의 폐 조직에서도 관찰된다^12,13. 매트릭스 메탈로프로테일라제 활성을 통한 엘라스틴 분해는 AAA 발병 기전과 흡연 사이의 중요한 연관성을 제공하며, 이는 AAA 형성의 가장 중요한 조절 위험 요인입니다^12,14. 특히 인간 AAA에서 대동맥 엘라스틴 감소, 엘라스틴 섬유 붕괴, 순환 엘라스틴 펩타이드 증가가 관찰되며, 이는 AAA 벽 확장성 증가와 관련이 있습니다^15,16. 따라서 엘라스틴 분해를 자극하는 것은 번역 가능한 AAA 모델을 만드는 데 매우 중요합니다. 엘라스틴 분해에 의존하는 기존 AAA 모델은 효과적이긴 하지만, 특히 대동맥 캐닐레이션을 사용하는 모델에서 높은 동물 사망률로 인해 복잡해질 수 있습니다.¹⁷번, 특히 국소 엘라스타제 적용에만 의존하는 모델에서는 동맥류 형성이 일관되지 않아 복잡해질 수 있습니다. 더불어, 유도 수술에 의존하는 모든 모델은 조작자의 학습 곡선과 기술적 변동성에 노출됩니다.

이러한 문제를 해결하기 위해, 우리는 숙주 면역 반응을 활용해 엘라스틴 분해 산물(EDP)을 주입하여 동물의 엘라스틴에 민감하게 만듭니다. 일주일 후, 동맥류 유도 수술은 표준화된 단계적 방식으로 진행되며, 대동맥주위에 엘라스타제를 적용하여 감작된 숙주가 면역 반응을 이끌어낼 수 있도록 EDP 모이에티를 생성합니다. 유도 수술 후 일주일 후 이어지는 '부스터' EDP 감작은 숙주 면역 반응이 계속되도록 보장합니다. 반복적인 면역 감작은 신뢰할 수 있는 대동맥 확장을 가능하게 합니다. 저희는 비용이 더 저렴하고, 유지보수가 용이하며, 질병이 빠르게 발생하고, 기술적 일관성을 갖추는 쥐 AAA 모델을 사용합니다.

이 모델은 대동맥 파열을 신뢰성 있게 유발하지 않으므로 AAA 파열과 관련된 요인 연구를 목적으로 하지 않습니다. 하지만 이 모델은 유도 수술 후 21일까지 점진적인 대동맥 확장을 신뢰성 있게 나타냅니다. 따라서 이 모델은 동맥류가 형성되는 과정에서 대동맥 확장을 감소시키거나 되돌릴 수 있는 치료적 기법을 연구하는 데 가장 적합합니다.

프로토콜

1. 초음파 영상

1. 쥐 준비해
   1. 쥐를 마취 유도 챔버에 넣으세요.
   2. 쥐가 마취될 때까지 1.8−2% 흡입된 이소플루란과 산소를 투여합니다. 아이소플루란 사용 시 마취 가스 캔스터가 마취 장치에 연결되어 휘발성 마취제 노출을 줄이도록 하십시오.
   3. 쥐를 37°C로 가열된 스테이지 위에 누운 자세로 눕히고, 코를 마취 코 콘 안에 넣습니다.
   4. 뒷다리를 라벨링 테이프로 무대에 붙이세요.
   5. 면끝 어플리케이터를 사용해 복부에 제모제를 바르고 30초간 기다리세요.
   6. 복부 털은 5cm x 5cm 면 거즈 패드로 제거하세요.
   7. 가열한 초음파 전송 젤을 쥐의 복부에 바르세요.
2. 복부에 38MHz 초음파 탐침을 대고 골반 거들을 확인하세요.
3. 대동맥을 초음파 프로브를 통해 적당한 후방 방향 압력을 가하면 압축되지 않는 관형 중앙선 구조로 식별합니다.
   참고: 하대정맥(IVC)은 대동맥 오른쪽에 있는 하하정맥 구조로 나타나며, 초음파 프로브를 통해 적당한 후방 방향 압력을 가하면 압축 가능합니다.
4. 복부 대동맥의 앞뒤 직경을 분기점까지 측정하세요.
5. 탐침을 대동맥 근위부로 이동시키고, 대동맥 앞쪽을 건너 정맥으로 들어가는 왼쪽 신정맥을 확인하세요.
6. 복부 대동맥의 앞뒤 직경을 왼쪽 신정맥이 복부 대동맥과 앞쪽으로 교차하는 지점까지 정확히 측정합니다.
7. 프로브를 근위로 옮기고 횡격막을 확인하세요.
   참고: 횡격막은 간과 함께 있는 고반 초음파 밴드로 식별할 수 있습니다.
8. 복부 대동맥의 앞뒤 직경을 바로 후측 직경으로 측정하여 복부에 진입하는 지점까지 측정하세요.
9. 쥐를 우리 안에 넣거나, 수건으로 안감을 깔아 37°C로 가열된 무대 위에 올려놓으세요.
10. 쥐가 마취에서 벗어날 때까지 관찰하세요.

2. 초기 엘라스틴 감작

1. 장갑, 안구 보호구, 마스크 등 개인 보호 장비를 착용한 상태에서 엘라스틴 분해 제품(EDP)을 준비하세요.
   1. PBS 현탁액 내 쥐 췌장 엘라스타제 제형을 0.475 단위/mL(단백질 4.75 단위/mg)로 얻습니다.
   2. 엘라스타제 168 μL을 5mg의 마우스 엘라스틴에 첨가하세요. 이 혼합물에 1X 인산염 완충 생리식염수(PBS)를 추가로 200 μL 추가한 후 피펫으로 혼합합니다.
   3. 엘라스타제와 엘라스틴 혼합물을 37°C에서 20분간 간헐적으로 부드럽게 교반하며 배양합니다.
   4. 엘라스타제와 엘라스틴 혼합물에 632 μL 콜드 1X PBS를 첨가합니다.
   5. 완전 프로인트 보조제 1mL를 추가하세요.
2. 쥐를 마취 유도 챔버에 넣으세요.
3. 쥐가 마취될 때까지 1.8−2% 흡입된 이소플루란과 산소를 투여합니다.
4. 쥐를 37°C로 가열된 스테이지 위에 엎드린 자세로 눕히고, 코를 마취 코 콘에 넣습니다.
5. 양쪽 옆구리에 50 μL의 EDP를 피하 주입하여 각 마우스 모두 총 100 μL EDP를 투여합니다.
6. 쥐를 수건으로 안감한 회복 바구니에 넣고 37°C로 가열된 무대 위에 올려놓습니다.
7. 쥐가 마취에서 벗어날 때까지 관찰하세요.

3. 수술 준비

1. 수술 도구를 준비해.
   1. 톱니 겸자 2개, 날카로운 직선 겸자 1개, 각진 뾰족한 겸자 1개, 바늘 드라이버 1개, 가위, 최소 3개의 자가 고정식 자기 견인기, 1개의 피부 스테이플러, 1개의 폴리프로필렌 병뚜껑으로 수술용 키트를 조립하세요.
   2. 수술 직전에 4-0 폴리글리콜산 꼬임 봉합사를 키트에 멸균 상태로 추가하세요.
   3. 참고: 3-0 또는 5-0 봉합사도 충분합니다.
   4. 폴리프로필렌 병뚜껑에 멸균 가열한 1X PBS를 채우세요.
      참고: 멸균 1X PBS 병은 37°C의 온열기에 보관하여 리필할 수 있습니다.
2. 엘라스타제를 준비하세요.
   1. 돼지 췌장 엘라스타제 27 μL 5.1 mg/mL(단백질 ≥4.0 단위/mg)를 1X PBS 73 μL에 희석하여 10마리 마우스 수술용 최종 용량 100 μL(마우스 10 μL)를 만듭니다.
   2. 수술실 준비해.
   3. 면끝 어플리케이터, 테이퍼드 팁 면 팁 어플리케이터, 5cm x 5cm 거즈를 담은 비커를 오토클레이브하여 수술 전 수술 트레이 옆에 놓습니다.
   4. 현미경 스테이지 위에 37°C로 설정된 가열 패드 위에 자석 수술용 스테이지를 올려놓습니다. 가열 패드는 현미경 스테이지에 테이프로 고정하되, 수술 중 재배치할 수 있도록 자기 부품은 분리해 두세요.
   5. 흡수 패드나 종이 타월을 온열 패드 위에 올려놓으세요. 5cm x 5cm 거즈를 반으로 접어 마취용 코 콘 아래에 놓으세요.
   6. 제모제가 든 30mL 컵, 5% 포비돈-요오딘이 든 30mL 컵, 눈 윤활제 튜브, 수술용 테이프, 멸균되지 않은 5cm x 5cm 거즈, 멸균되지 않은 면 팁 적용기, 밀봉된 5cm x 5cm 알코올 면봉, 접착식 식품 서비스 필름 롤, 70% 에탄올 스프레이 병을 수술 부위 근처에 놓으세요.
   7. 1 mL 주사기에서 서방형 부프레노르핀 1.3 mg/mL를 75 μL 용량으로 뽑고, 30g 마우스 한 마리에 3.25 mg/kg 용량을 투여합니다.
3. 쥐를 수술 준비해.
   1. 마우스의 무게를 그램 단위로 측정하고 기록하세요.
   2. 쥐를 마취 유도 챔버에 넣으세요.
   3. 쥐가 마취될 때까지 1.8−2% 흡입된 이소플루란과 산소를 투여합니다.
   4. 쥐를 37°C로 가열된 스테이지 위에 누운 자세로 눕히고, 코를 마취 코 콘 안에 넣습니다.
   5. 부프레노르핀 75 μL을 피하 주입하세요.
   6. 뒷다리를 라벨링 테이프로 무대에 붙이세요.
   7. 면끝 어플리케이터를 사용해 복부에 제모제를 바르고 30초간 기다리세요.
   8. 복부 털은 5cm x 5cm 면 거즈 패드로 제거하세요.
   9. 쥐의 눈에 윤활제를 발라주세요.
   10. 5cm x 5cm 크기의 거즈 패드를 사용해 쥐의 복부에 포비돈-요오드를 바르고 건조시킵니다.
   11. 복부를 5cm x 5cm 알코올 면봉으로 닦으세요. 포비돈-요오딘을 다시 바르고 건조할 때까지 기다려 주세요.
   12. 마취 효과를 테스트해 쥐의 발가락을 꼬집어 반응이 없는지 확인하세요.
   13. 수술 단계 위에 접착식 식품 서비스 필름을 덮으세요.
   14. 수술 단계에 70% 에탄올을 뿌리고 건조시키세요.
   15. 손을 씻고 멸균 수술용 장갑을 착용하세요.

4. 수술 절차 (초기 엘라스틴 감작 후 7일)

1. 복부 대동맥을 노출하세요.
   1. 복부 중앙선을 따라 가위나 메스로 피부를 절개하여 음경 0.5⁻¹ cm 구간에서 음경까지 0.5⁻¹ cm 거리에서 귀골까지 이어집니다.
   2. 이빨 겸자로 피부를 잡고 살짝 위로 당겨 백선(linea alba)을 확인하는데, 이는 직근 사이에 무혈면으로 나타납니다.
   3. 가위를 사용해 백선을 절개하면서 피부를 계속 위로 당기세요. 복부 내부 구조는 피하고 백선만 잘라야 합니다.
   4. 자석 자기 유지 견인기를 설치하는데, 하나는 복벽 오른쪽을 후퇴시키고, 하나는 복벽 왼쪽을 후퇴시키며, 다른 하나는 절개 부위의 후리 쪽 구조물인 방광과 정낭 소포를 후퇴시킵니다.
   5. 촉촉한 면 팁 어플리케이터를 사용해 장을 제거하고 5cm x 5cm 크기의 촉촉한 거즈로 덮으세요. 또는 5cm x 5cm 크기의 촉촉한 거즈를 말아 쥐 복부 왼쪽에 장을 채우는 방법도 있습니다.
      참고: 쥐의 해부학적 구조와 견인기의 위치에 따라 최적의 시각화를 위해 장을 내장이 적출되거나 반대 방향으로 채워질 수 있습니다.
   6. 정중선에서 후방에 위치한 정맥과 복부 대동맥을 확인하세요.
   7. 면끝 부착기를 사용해 후방 혈관 구조를 덮는 조직면을 부드럽게 열어 후복막에 삽입합니다.
      참고: 관심 조직에 후방 방향으로 압력을 가한 후 면 어플리케이터 끝을 서로 분리하면 더 큰 접지력을 가합니다. 더 부드러운 접지력을 위해 면 어플리케이터 끝을 반대 방향으로 돌리세요.
   8. 측면 견인기를 더 깊게 배치하여 더 나은 견인력과 대동맥의 시야를 확보하세요.
   9. 면끝이 달린 어플리케이터를 계속 사용하여 대동맥의 측면 부착물을 부드럽게 분리하되, 이 단계에서 대동맥의 측면 부착물이 이방되지 않도록 하세요.
   10. 대동맥과 대동맥 사이의 평면을 계속 발전시켜 대동맥과 대동맥 사이에 삼각형 공간이 보일 때까지 진행합니다(그림 1).
       참고: 이 단계는 보통 왼쪽 신장정맥의 후미만 하는 것이 가장 쉽습니다.
   11. 둔한 박리나 날카로운 겸자를 사용해 대동맥을 쥐의 왼쪽 결합 조직과 요추 근육에서 분리하여 외측 대동맥 부착물을 풀어줍니다.
   12. 대동맥과 정맥 사이에 생긴 공간에 각진 날카로운 겸자를 놓고, 겸자를 부드럽게 반복해서 열고 닫아 후대동맥 부착물을 열어줍니다.
   13. 동일한 개방 및 폐쇄 기법을 사용하여 대동맥을 따라 후면을 발전시키며, 두부에서 꼬리부까지 진행합니다.
   14. 대동맥 전체의 비디오 미세미터 이미지를 확보하여 분석을 위해 저장하세요.
2. 혈관 주위 엘라스타제를 발라주세요.
   1. 피펫을 사용해 노출된 대동맥 길이를 따라 10 μL 엘라스타제 용액을 떨어뜨립니다.
      참고: 대동맥 내측과 외측 조직만 해리하면 엘라스타제가 고이는 홈통이 형성됩니다.
   2. 5cm x 5cm 크기의 촉촉한 거즈 패드를 열린 복부 위에 덮고 엘라스타제 용액을 10분간 배양합니다.
   3. 거즈 패드를 제거하고 멸균 1X PBS로 복부를 세 번 세척하여 잔류 엘라스타제 용액을 제거합니다.
3. 복부 닫아.
   1. 복부 장기를 원래 위치로 되돌려 놓으세요. 장의 비틀림이나 꼬임이 있는지 관찰하고 제거하세요.
   2. 이빨 겸자를 사용해 직근과 근막을 피부에서 떼어내어 0.25cm 크기의 피부 플랩을 만듭니다.
   3. 복근막을 4-0 꼬인 폴리글리콜산(또는 유사) 봉합사로 간단한 달리기 방식으로 봉합하며, 절개 모서리를 포함시키고 한 바이트 간격을 2mm를 넘지 않도록 주의하세요.
   4. 위에 덮인 껍질을 3⁻4 스테이플로 스테이플러로 고정합니다.

5. 수술 후 관리

1. 수술 단계에서 쥐를 꺼내 수건으로 안감을 깔고 37°C로 가열된 회복 바구니에 올려놓습니다.
2. 쥐가 마취에서 벗어날 때까지 관찰하세요.
3. 수술 후 4일간 매일 쥐를 관찰하며 전반적인 건강 상태와 복부 절개 상태를 관찰하세요.
4. 수술 후에는 위에서 설명한 대로 동맥류의 성장을 모니터링하기 위해 반복 초음파를 시행합니다.
5. 스테이플러는 수술 후 일주일 후이거나 1차 초음파 시점에 제거하세요.

6. 반복 엘라스틴 감작 (동맥류 유도 수술 후 7일)

1. 초기 엘라스틴 감작에 대해 앞서 설명한 것과 동일한 과정을 수행하여, 완전한 프로인트 보조제 대신 불완전 프로인트 보조제를 단일 대체하여 EDP 용액을 같은 방식으로 준비합니다.

7. 조직 채취 절차

1. 수술 후 21일째에 다양한 분석을 위해 조직을 채취합니다.
2. 유도 수술 때와 같은 방식으로 쥐를 준비하세요.
3. 유도 수술 때와 같은 방식으로 대동맥을 다시 노출시키며, 조직학적 분석을 위해 채취할 표본을 손상시키지 않도록 주의해야 합니다.
   참고: 이 시점에서 쥐는 접착 흉터가 생겼기 때문에, 둔한 해리 대신 집자를 이용한 날카로운 해부가 더 필요할 수 있습니다.
4. 비디오 마이크로메트리 이미지를 확보하세요.
5. 혈액을 채취해 분석하고 쥐를 안락사시키기 위해 심장 천자를 시행하세요.
6. 장갑, 안구 보호구, 마스크 등 적절한 개인 보호 장비를 착용한 채 쥐를 세척하여 분석하세요.
   1. 조직이 유세포분석(또는 유사) 분석용으로 지정된 경우, 혈관 확장기 없이 1X PBS를 100−120 mm Hg로 8 mL 용량으로 관류합니다.
   2. PCR 분석 대상이 지정된 조직이라면, 좌심실에 혈관 확장제(0.1M 마데노신 및 0.01 mM 니트로프루시드 나트륨)를 투여한 후 RNA 안정화 용액을 투여합니다.
   3. 조직학 분석이 지정된 조직이라면, 혈관 확장기를 이용한 1X PBS를 좌심실에 관류한 후 10% 완충된 포르말린 인산염을 투여합니다.
7. 조직학적 분석에 필요한 조직을 구조적으로 손상시키지 않도록 주의하여 원하는 조직을 채취하세요. 봉합사나 표시제로 방향을 표시하세요.

결과

총 28마리의 수컷 C57BL/6J 마우스가 이 수술 프로토콜을 받았으며, 그중 1마리는 IVC 손상으로 인한 수술 전 사망률(3.6%)을 기록했습니다. 추가로 3건의 지연 사망이 있었는데, 그중 1건은 절개 탈장으로, 나머지 2건은 원인 불명으로 사망했으며, 총 21일 생존율은 85.7%였다. 마취 유도부터 마취 투여 종료까지 평균 시간은 46.4± 8.0분이었습니다. 가짜 수술 마우스는 동맥류군과 거의 동일한 프로토콜을 받았으며, 초기 EDP 감작, 복강 절개술, 대동맥 노출, 반복 EDP 감작 과정을 포함했습니다. 주요 차이점은 가짜 그룹은 유도 수술 당시 국소 혈관 주위 엘라스타제를 투여받지 않았다는 점입니다.

대동맥 직경은 초음파 및 비디오 미세미터를 사용하여 측정하였습니다. 대표적인 초음파 및 수술 중 영상은 그림 2에 나와 있습니다. 대동맥류는 21일째 ...

토론

1990년 쥐에서 처음 기술된 이후, 엘라스타제 기반 AAA 모델은 여러 차례 수정되어 다양한 동물(^{10, 19, 20, 21, 22, 23})에서 사용되었습니다. 일부 변형에는 대동맥 캐닐레이션이 포함되며, 이는 사망률을 높이고 대동맥 병리에 외상성 요소를 도입할 가능성이 있습니다¹⁷. 덜 침습적인 변형으로는 동물^식수에 용해하는 3-아미노프로피오니트릴 푸마레이트 염(β-아미노프로피오니트릴(BAPN))이 있습니다. 모델 수정의 대부분 이...

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
1 mL Tuberculin Syringes	벡톤 딕킨슨	309628
10% Buffered Formalin Phosphate	피셔 케미컬	SF100-4
70% Isopropyl Alcohol Swabs	카디널 헬스	S-16183
Angled sharp forceps	듀몽	I I25 I-35
AutoClip 9mm (Skin stapler)	미크론	427630
베타딘	아틀란티스 컨슈머 헬스케어	67618-155-16
면화 거즈 패드	다이너렉스 코퍼레이션	3223
면화 팁 애플리케이터	퓨리탄 메디컬 제품	25-806 2WC
돼지 췌장 엘라스타제 (단백질 mg당 4.0 단위 이상)	시그마-알드리히	E1250	수용액 4 ℃에서 보관
쥐 췌장 엘라스타제 (단백질 mg당 4.75 단위)	엘라스틴 제품 주식회사	MS838	수용액 (0.1 mg in 1 mL PBS) 4 ℃에서 보관
엘라스틴	MP 바이오메디컬	101636	수용액 4 ℃에서 보관
Enersight 데스크탑 소프트웨어	라이카	https://www.leica-microsystems.com/products/microscope-software/p/enersight/
Ethiqa XR (수정 방출 부프레노르핀)	피델리스	NDC 86084-100-30
안약	옵틱스케어	Opx-4242
Flexacam i5 (스테레오)	라이카	https://www.leica-microsystems.com/products/microscope-cameras/p/12730536-leica/
프뢰이드의 완전 보조제	MP 바이오메디컬	642851	수용액 4 ℃에서 보관
프뢰이드의 불완전 보조제	MP 바이오메디컬	642861	수용액 4 ℃에서 보관
장갑 (멸균)	앵코르	7824PF
피하 주사 바늘 (23 G)	벡톤 딕킨슨	305145
피하 주사 바늘 (27 G)	벡톤 딕킨슨	305109
아이소스파이어 (아이소플루란)	데크라 수의학	07-894-8943
라벨링 테이프	피셔 사이언티픽	15959
마스크	듀칼 코퍼레이션	1540
바늘 드라이버	스칸란	6006-36
Omnicon F/air 마취 가스 캔이스터	A.M. 빅퍼드 인코퍼레이티드	80120
Press'N Seal	글래드	12587704417
RC2 설치류 회로 컨트롤러	베트 에퀴프 인코퍼레이티드	922100
RNAlater 안정화 용액	써모피셔 사이언티픽	AM7021
가위	파인 사이언스 툴	14005-12
피부 스테이플 (클립)	미크론	205016
소형 설치류 워머 히터	스토엘팅	53851
소형 설치류 워머 스테이지	스토엘팅	53812
스테레오 현미경 M60	라이카	https://www.leica-microsystems.com/products/light-microscopes/stereo-microscopes/p/leica-m80/
스트레이트 샤프 포스펙스	듀몽	I I 25 I-30
SurgiSuite 자기 고정 자동 견인 장치 세트 및 스테이지	켄트 사이언티픽	13-005-180
타호 휴대용 산소 농축기	베틀랜드 메디컬	595-2300A
톱니 포스펙스	파인 사이언스 툴	11043-08, 11042-08
Vevo 2100 초음파	후지필름 비주얼소닉스	EDU00496
Visorb 폴리글리콜산 봉합사	CP 메디컬	397A
VWR 흡수제	VWR	95057-860