본 연구는 쥐의 경추증 모델링 방법과 도침 요법 중재 전략을 상세히 설명하여 관련 연구를 위한 시각화된 조작 프로토콜을 제공합니다.
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방법 논문
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본 연구는 쥐의 경추증 모델링 방법과 도침 요법 중재 전략을 상세히 설명하여 관련 연구를 위한 시각화된 조작 프로토콜을 제공합니다.
경추증(Cervical spondylosis, CS)은 만성 퇴행성 질환입니다. 경추 추간판의 퇴행성 변화와 그에 따른 병리적 변화는 주변 조직과 구조에 영향을 미치며, 이는 목 통증, 강직, 가동성 제한, 그리고 때로는 상지의 감각 저하 및 방사통과 같은 임상 증상으로 이어집니다. 이 중 신경근 압박이 가장 흔하게 나타납니다. 따라서 본 연구에서는 경추 신경근 압박을 통해 유도된 CS 쥐 모델을 구축하였습니다. 도침 요법은 국소 연부조직 유착을 해소하고 신경 압박을 완화함으로써 CS의 임상 치료에서 잠재적 효과를 보여주었습니다. 그러나 현재 동물 실험에서 시각화된 절차 프로토콜이 부족한 실정입니다. 본 연구는 CS 쥐 모델 구축을 위한 신뢰할 수 있는 방법과 그에 따른 도침 중재 프로토콜에 대한 상세한 설명을 제공합니다. 본 절차에서 우리는 모델 유도 과정, 도침 조작 단계, 치료 부위 선정, 쥐 보정 기술 및 주요 주의 사항에 대해 상세히 설명합니다. 또한, 본 연구에서는 근전도(EMG)를 사용하여 CS 모델의 성공적인 구축을 확인하였으며, 기계적 회피 역치, 보행 분석 및 신경근 조직 병리학을 통해 중재 효과를 평가하였습니다. 본 연구는 CS 쥐 모델 구축 및 도침 중재를 위한 참고 자료를 제공할 뿐만 아니라, 향후 작용 기전을 조사하는 연구를 위한 체계적이고 실행 가능한 실험적 틀을 제공합니다.
경추증(Cervical spondylosis, CS)은 흔한 퇴행성 척추 질환입니다. 핵심 병리 과정은 추간판의 퇴행에서 시작되며, 이는 추간 공간 협착, 골극 형성, 인대 비대 등 일련의 이차적 병리 변화를 유발합니다1,2. 이러한 병리적 변화는 목과 어깨의 뻐근함과 통증, 상지의 방사성 저림과 같은 다양한 임상 증상을 초래합니다. 심한 경우 운동 기능 장애나 심지어 사지 마비를 포함한 신경학적 손상이 발생할 수 있습니다2,3. 특히 최근 몇 년 사이 경추증의 발생률이 점차 증가하고 발병 연령이 낮아지면서 상당한 사회경제적 부담이 되고 있습니다4. 경추 추간판의 퇴행과 골극 증식은 인접한 뼈 및 연부 조직 구조를 침범하여 경추 척수강이나 추간공의 협착을 일으키고, 결과적으로 경추 신경근, 척수 및 척추 동맥을 포함한 주변 구조물을 압박할 수 있습니다1,2,3,4. 이 중 경추 신경근 압박이 가장 빈번하며, 전체 CS 사례의 약 60%–70%를 차지합니다5,6,7. 임상에서는 물리치료, 약물 중재 및 수술을 포함한 여러 치료법이 사용 가능하지만, 수술적 절차는 높은 비용, 상당한 외상 및 불확실한 수술 후 결과로 인해 대부분의 환자에게 비수술적 치료가 선호되는 옵션이 되었습니다4. 현대 의학 실무에서는 비스테로이드성 항염증제와 신경영양제가 흔히 사용됩니다. 이러한 약물들은 어느 정도 통증을 완화하고 질병의 진행을 늦출 수 있지만, 소화기계 손상 및 신장 손상과 같은 부작용이 동반됩니다8,9.
도침 요법은 전통 중의학의 침구 이론을 바탕으로 현대의 최소 침습 수술 기법을 결합하여 개발된 특징적인 치료 방식입니다. 이는 연부 조직의 유착을 박리 및 해소하고, 국소 염증 인자를 조절하며, 지역 미세 순환을 개선함으로써 효과를 나타냅니다10,11,12. 최근 몇 년 동안 경추증에 대한 도침의 임상적 효능이 널리 인정되었으며, 신경 압박 완화, 통증 경감 및 경추 운동 기능 개선에 있어 유망한 잠재력을 보여주었습니다13,14. 그럼에도 불구하고 동물 실험에 적용할 때, 도침 중재는 부정확한 위치 선정과 조작 깊이 제어의 어려움과 같은 과제에 직면해 있습니다. 한편, 이러한 임상적 관찰을 강력한 근거 기반의 결론으로 전환하기 위해서는 안정적이고 재현 가능한 동물 모델의 구축이 필수적인 전제 조건입니다. 척추 내 나일론 봉합사 방법은 추간공에 나일론 봉합사를 삽입하여 직접적인 기계적 압박을 유도함으로써, 임상적 신경근 압박의 병태생리학적 과정을 정밀하게 모사합니다15. 이러한 모델링 접근 방식은 모델링 주기가 짧고 압박 분절을 조절할 수 있다는 장점 또한 제공합니다15. 그러나 그 수술 절차는 상당 부분 개인의 경험에 의존하고 있으며, 상세하고 시각화된 조작 설명이 현재 부족한 실정입니다.
본 연구는 경추증 쥐 모델의 구축과 침도요법 중재의 전 과정에 대한 완전하고 상세하며 시각화된 실험 프로토콜을 제시합니다. 마취제가 기계적 회피 역치 측정에 영향을 주어 결과적으로 실험 결과에 간섭을 일으킬 수 있으므로16,17,18,19, 본 연구에서는 전용 쥐 보정 장치를 채택하였습니다. 본 논문은 쥐 모델 유도 과정, 단계별 침도 조작, 치료 부위의 정밀한 위치 선정, 쥐의 보정 및 고정 방법, 그리고 기타 주요 실험적 주의 사항에 대해 상세히 설명합니다. 기계적 회피 역치 측정, 전기생리학적 기록, 보행 분석 및 신경근 조직병리학적 관찰을 포함한 다각적인 평가 차원이 도입되었습니다. 본 연구는 경추증 쥐 모델의 모델 유도 및 침도 중재를 위한 시각화된 프로토콜을 제공함으로써, 기전 연구와 경추증 치료에 있어 침도요법의 효능 평가를 위한 방법론적 근거를 제공하는 것을 목표로 합니다.
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모든 실험 절차는 Beijing MDKN Biotech Company의 실험동물윤리위원회의 검토 및 승인을 받았으며 엄격하게 모니터링되었습니다(승인 번호: MDKN-2025-096). 모든 프로토콜은 미국 국립보건원(NIH)에서 발행한 실험동물 관리 및 사용 가이드라인을 엄격히 준수하여 수행되었습니다. 본 연구에 사용된 시약과 장비는 재료 표에 나열되어 있습니다.
1. 실험 동물 및 그룹
2. CS 모델의 구축
참고: 모델링 전 12시간 동안 모든 쥐에게 음식과 물을 제공하지 마십시오. 체중을 측정하고 기록합니다. 모든 수술 기구는 고압 증기 멸균기로 멸균합니다(그림 2A).
3. 보정 절차
4. 도침 치료
5. 기계적 회피 역치 (MWT) 테스트
참고: 쥐 및 마우스용 발바닥 기계적 통증 자극기를 사용하여 모델 구축 수술 전날, 수술 후 3rd일 및 14th일에 측정을 수행하십시오.
6. 근전도(EMG) 기록
참고: 모델 구축 후 3일 차에 생체 신호 수집 및 분석 시스템을 사용하여 휴지기 EMG를 수행하십시오.
7. 쥐의 보행 분석
참고: 침도요법 중재를 완료한 다음 날(모델 수술 후 수술 후 15일째)에 보행 분석을 수행하십시오. 보행 분석 시스템은 투명 벨트가 장착된 트레드밀, 벨트 아래에 위치한 고속 디지털 카메라 및 컴퓨터 워크스테이션으로 구성됩니다.
8. 신경근 조직의 HE 염색
참고: 모델 수술 후 15일째에 행동 테스트를 수행한 다음, HE 염색을 위한 신경근 조직 샘플을 수집하십시오.
9. 통계 분석
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기계적 철회 역치(MWT) 평가 결과, 모델 유도 전 모든 그룹에서 유사한 기저값이 나타났다. 모델링 및 가짜 수술 후 3일째에 가짜 수술군과 대조군 사이에 유의미한 차이는 관찰되지 않았다(p > 0.05). 반면, 모델군과 침도요법군은 가짜 수술군에 비해 MWT가 현저히 감소하였다(p < 0.01, 그림 4). 치료 완료 후, 침도요법군은 모델군에 비해 MWT가 유의하게 상승한 것으로 나타났다(p < 0.05, 그림 4).
근전도(EMG) 기록 결과, 3일 차에rd 모델링 및 가짜 수술 다음 날, 모델군과 침도요법군 모두의 휴식기 침 근전도(needle EMG)에서 세동 전위(fibrillation potentials) 및 양성 예파(positive sharp waves)와 같은 비정상적 ...
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적절한 동물 모델의 선택은 경추증(CS)의 병인 기전을 규명하고 치료적 중재를 엄격하게 평가하기 위한 필수 전제 조건입니다. 현재는 상대적으로 간단한 방법, 짧은 모델링 주기, 높은 재현성 및 신뢰성이라는 장점 덕분에 척추 내 나일론 봉합사법이 널리 채택되고 있습니다15,20. 이 방법은 압박 물질을 쥐의 척수강 내에 삽입하여 경추 신경근에 지속적인 압박을 가함으로써, 임상 상황에서 추간판 탈출증이나 골극 증식으로 인해 발생하는 신경근 압박의 병리적 상태를 재현합니다. 경추증과 관련된 이차적 손상 중 신경근 압박은 가장 흔하며, 일반적으로 목의 통증, 강직 및 상지로 방사되는 증상으로 나타나는 뚜렷한 임상적 발현의 주요 원인이 됩니다5,7,21. 이에 따라, ...
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모든 저자는 잠재적인 이해상충이 없음을 선언하였습니다.
본 연구는 중국 국가 핵심 연구 개발 프로그램(Grant No. 2023YFC3502703)과 후베이성 자연과학 재단 혁신 개발 공동 기금 핵심 프로젝트(Grant No. 2024AFD271)의 지원을 받았습니다.
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| 75% 알코올 | Shandong Anjie Gaoke Disinfection Technology Co. LTD | 75-500ml | |
| 침도(Acupotomy Needle) | Beijing Huaxia Blue Chip Biotechnology Co., Ltd. | HY0440 | |
| 부착 슬라이드 | CITOTEST | 188105 | |
| 생체 신호 획득 및 분석 시스템 | Techman | BL-420N | |
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