이 프로토콜은 자유롭게 움직이는 C57BL/6J 마우스의 위 운동성을 지속적으로 모니터링하기 위해 유연한 생체 적합성 실리콘 스트레인 게이지의 제작 및 외과적 이식을 설명합니다. 이 방법은 정제된 실리콘 캡슐화와 안전한 헤드 마운트 커넥터 고정을 통해 안정적인 장기 기록을 제공합니다.
이 논문에서
요약
초록
이 프로토콜은 자유롭게 움직이는 C57BL/6J 마우스의 위 운동성을 장기 모니터링하기 위해 유연하고 생체적합성이 뛰어난 실리콘 스트레인 게이지의 제작 및 외과적 이식을 설명합니다. 의식이 있는 동물의 위 운동 활동에 대한 지속적인 평가는 마취와 침습적 절차가 정상적인 위장 생리를 변화시킬 수 있기 때문에 기술적으로 여전히 도전적입니다. 이러한 문제를 해결하기 위해 이 프로토콜은 스트레인 게이지의 정교한 실리콘 캡슐화와 헤드 마운트 커넥터 고정을 결합하여 장기 기록 시 장치의 안정성을 향상시키고, 정상적인 동물 활동과 관련된 기계적 손상으로부터 전기 회로를 보호합니다. 이 절차는 수술 후 15일 동안 위수축 활동의 신뢰성 있는 착상과 지속적인 기록을 가능하게 합니다. 대표적인 기록은 마취, 각성 기저선, 수술 후 회복, 수유 유도 조절 과정에서 뚜렷한 위운동 패턴을 보여준다. 조직학적 평가는 착상 부위 주변에서 경미한 국소 조직 반응만을 보여주며, 검사된 조건에서 장치의 생체 적합성을 뒷받침합니다. 이 프로토콜은 의식이 있는 쥐에서 안정적인 장기 위 운동성 기록을 재현 가능하게 하며, 유전자 변형 마우스 모델을 포함한 위장 생리학 및 질병 연구를 촉진할 수 있습니다.
서론
생의학 연구, 특히 위장 운동성 연구에서 생리적 활동을 정밀하게 모니터링하는 것은 소화 기전과 질병 병리를 이해하는 데 매우 중요합니다 1,2. 그러나 자유롭게 움직이는 동물의 위 운동성을 모니터링하는 현재 방법에는 상당한 한계가 있습니다. 영상 기술은 종종 운영 복잡성, 높은 장비 요구, 그리고 잠재적 방사선 노출 위험에 의해 제약을 받습니다 3,4. 풍선 기반 방법은 유용하지만, 일반적으로 자유롭게 움직이는 동물의 위운동성을 장시간 모니터링할 수 없으며, 종종 마취 상태에만 제한됩니다. 소노미크로메트리와 같은 최소 침습 접근법은 의식 있는 동물의 위 운동성을 기록할 수 없습니다6. 마찬가지로, 마노메트릭 방법은 주로 마취된 쥐에 적용된다 7,8,9. 또는 혈관 전극을 이용한 위 느린 파의 전기생리학적 기록이 위수축을 유발하는 근원조율기의 근전기 활동을 직접 포착하는 접근법으로 개발되었습니다10,11. 혈청 전극은 전기 리듬과 부정맥 감지에 매우 효과적이지만, 결과적으로 발생하는 기계적 힘을 직접 측정하지는 않습니다. 더욱이, 생체 내에서 얻은 세포외 기록된 느린 파동은 항상 진정한 세포 내 느린 파동을 충실히 반영하지 않을 수있으며, 표면 또는 혈관 전극에서 기록된 전기 신호는 국소적인 신경 활동에 크게 영향을 받을 수 있어 반드시 실제 위상 기계적 수축을 나타내지 않는다13,14.
반면, 실리콘 변형 게이지는 기계적 움직임 변화를 전기 신호로 변환하여, 생리적·병리학적 조건 모두에서 위와 장과 같은 속이 빈 내장 장기의 운동 패턴을 장기간 기록할 수 있게 합니다 15,16,17. 이 프로토콜의 전반적인 목표는 위장병학에서 가장 널리 사용되는 유전적 배경인 C57BL/6J 마우스의 위운동성 장기 모니터링을 위해 정제된 실리콘 스트레인 게이지를 제작하고 외과적으로 이식하는 것입니다. 이전에 설명된 변형 게이지 방법론18을 기반으로 하여, 이 프로토콜은 초박형(0.2mm) 센서 프로파일과 경량의 생체 적합성 704 실리콘 캡슐화를 포함하여 이전 설계에 비해 쥐 위벽에 가해지는 기계적 부하를 줄입니다. 또한, 모듈식 헤드마운트 커넥터 라우팅 전략은 수술 후 케이블 장력과 씹는 손상을 최소화하여 장기 녹화 시 장치의 안정성을 향상시킵니다. 이 프로토콜은 수술 후 회복과 섭식 등 다양한 생리 상태에서 의식 있는 쥐의 위기계적 활동을 장기적이고 직접적으로 측정하려는 연구자들을 위한 것입니다. 조직 유착 감소와 기능 장애 최소화는 제시된 검증 데이터 범위 내에서 해석되어야 하며, 이러한 매개변수에 대한 추가 정량적 평가는 향후 연구에서 중요한 방향으로 남아 있습니다.
프로토콜
이 연구는 과학기술부가 발표한 실험동물 처우에 관한 지침 의견에 따라 수행되었습니다. 모든 실험은 중국의학과학원 동물실험 윤리 위원회(번호 D2024-01-26-07)의 승인을 받았습니다.
1. 동물 준비
- 8주 된 건강한 야생형 C57BL/6J 수컷 마우스를 25± 3g으로 키우세요.
- 쥐를 22°C± 1°C, 55% ± 5% 상대습도, 12시간의 빛과 어둠 주기의 특정 무병원체(SPF) 조건 하에서 유지하세요. 우리 우리 한 개당 쥐 다섯 마리를 넘기지 않는 그룹하우스.
- 표준 식사와 물을 자유롭게 제공하세요. 수술 중 적절한 위벽 장력을 유지하기 위해 마취 유도 전까지 쥐가 음식과 물을 자유롭게 섭취하도록 허용하세요.
- 동물들이 실험실에 적응할 수 있도록 7일간 시간을 주고, 8일째에 실험을 시작하세요.
- 적응한 쥐들을 무작위로 실험 그룹에 배정하여 잠재적 선택 편향을 최소화합니다.
- 수술 24시간 전부터 각 쥐에 대해 신체 외모, 행동, 체중을 평가하여 임상 건강 평가를 실시하세요. 질병, 부상 또는 체중 감소 증상이 10% 이상 보이는 동물은 제외합니다.
- 마취 직전에 각 쥐의 체중을 측정하세요. 주입량을 20 mL/kg으로 계산하며, 이는 트리브로모에탄올 용량 250 mg/kg에 해당합니다.
2. 변형 게이지 준비18
- 350 Ω 변형 게이지, 기본 크기는 3.6 mm × 3.0 mm, 격자 크기는 2.0 mm × 1.0 mm, 두께는 0.06 mm인 변형 게이지를 얻습니다. 감도 계수가 2.0% ± 1%(정확도 클래스 A)인 스트레인 게이지를 이중 에나멜 와이어(직경 0.15mm, 길이 100mm)에 미리 부착하세요.
- 변형 게이지 양쪽에 균일한 실리콘 고무층을 발라서 완전히 캡슐화된 장치의 두께가 약 0.2mm가 될 때까지 적용합니다. 노출된 부분이 없는 모든 표면을 완전히 덮어야 합니다.
- 납땜 지점에 실리콘 고무를 한 방울 더 바르고 면봉으로 고르게 펴서 스트레인 게이지가 완전히 캡슐화되도록 하세요. 최종 장치 크기가 약 6.0 mm × 8.0 mm인지 확인하세요.
- 실리콘 코팅이 매끄럽고 기포나 틈이 없는지, 최종 장치가 목표 치수와 일치하는지 확인하여 완전한 캡슐화를 확인하세요.
- 캡슐화된 변형 게이지를 실온(22°C ± 1°C)과 60%–70% 상대습도에서 최소 48시간 이상 환기되고 먼지가 없는 환경에서 경화시킵니다.
- 헤드 마운트 커넥터를 납땜인두, 납땜, 산성 없는 납땜 플럭스로 에나멜 와이어에 용접합니다.
- 아이리스 해부 겸자로 에나멜 선을 부드럽게 당겨 납땜 접합부의 완전성을 확인하세요. 연결이 선이 분리되지 않고 안전하게 유지되는지 확인하세요.
- 조립된 스트레인 게이지를 스트레인 게이지 센서 제로 세팅 박스를 통해 브리지 앰프에 연결합니다.
- 조립된 스트레인 게이지를 맞춤형 350 Ω 제로 세팅 박스와 브리지 앰프에 연결하여 회로 밸런스를 맞추고, 와이어 저항으로 인한 기준선 오프셋을 제거하고 사용 가능한 신호 범위를 극대화합니다. 모든 연결이 완료된 후, 캡슐화된 변형 게이지를 겸자로 공기와 0.9% 식염수에 부드럽게 구부리면서 획득 소프트웨어에서 출력 파형을 모니터링합니다. 명확한 파형 편향을 확인하여 적절한 전기 연결성, 방수 처리, 센서 감도가 있음을 확인하여 장치의 정상 기능을 확인하세요.
3. 스트레인지 이식을 위한 수술 절차
- 모든 수술 기구를 75% 에탄올로 멸균하세요. 준비된 변형 게이지 부품을 75% 에탄올에 15분간 담근 후, 0.9% 염화나트륨 용액에 15분간 담가.
- 0.9% 염화나트륨 용액에서 스트레인 게이지 부품을 제거하고, 추가적인 공기 건조나 헹구는 없이 즉시 외과적 이식을 진행하세요.
- 1.25% 트리브로모에탄올 용액(20 mL/kg)을 복강내 주입하여 마취합니다.
- 상업적으로 준비된 1.25% 트리브로모에탄올 용액을 추가 희석 없이 사용하세요. 용액은 빛을 차단한 호박색 병에 4°C에서 보관하고, 제조사의 유통기한 내에 사용하세요.
- 수술 기간 동안 10분마다 동물을 관찰하여 규칙적인 호흡과 촉각 자극에 대한 움직임 없음을 확인하세요. 올바른 마취 반사의 상실과 발가락 집는 철수 반사의 부재를 확인하여 적절한 수술적 마취 평면을 확인한다.
- 초기 투여량이 시술 내내 충분한 외과적 평면을 제공했기 때문에 보조 마취는 필요하지 않았습니다.
- 피드백 제어 가열 담요를 사용해 동물의 핵심 체온을 37.0°C ± 0.5°C로 유지하세요. 수술 중 각막 건조를 방지하기 위해 석유 안과 연고를 바르세요.
- 복부와 두개골에서 작은 동물용 머리깎이를 사용해 털을 제거하세요. 노출된 피부를 1% 포비돈-요오드 용액으로 소독한 후 75% 에탄올을 투여합니다(그림 1A–C).
- 복부를 멸균 수술용 드레이프로 덮으세요(그림 1D).
- 수술 부위를 멸균 수술용 거즈 수건으로 덮으세요. 갑상돌기에서 피부와 복부 근육을 따라 후방 방향으로 약 1.5–3.0cm 길이의 복측 중앙선 절개를 만듭니다. 두개골 꼭대기 시상봉합선을 따라 약 5.0–8.0mm 길이의 두 번째 세로 절개를 만듭니다(그림 1E,J).
- 동물의 체격에 따라 절개 길이를 선택하여 위 전리를 적절히 노출시키면서 봉합을 위해 조직 손상을 최소화하고 상처 봉합을 원활하게 합니다.
- 면봉으로 부드럽게 위를 외면에 제거하세요. 대망막을 분리하고 0.9% 생리식염수에 적신 면봉을 사용해 시술 내내 조직 수분 공급을 유지합니다(그림 1F).
- 촉촉한 면봉이나 둔탁한 겸자를 사용해 부드럽게 대망막을 위벽에서 분리하며, 인접한 혈관과 주변 조직에 손상을 주지 않도록 주의하세요.
- 노출된 위부에 3–5분마다 또는 조직 표면이 건조해지기 시작할 때마다 미온(37.0°C± 0.5°C) 멸균 0.9% 식염수를 바르어 조직 수분 유지를 유지하세요.
- 면봉과 박리 겸자를 사용해 피부를 부드럽게 아래 근육과 분리하여 두개와 복부 절개 사이에 연속적인 피하 터널을 만듭니다. 스트레인 게이지 어셈블리를 터널을 통과시키고, 헤드 마운트 커넥터를 이마에 위치시키며, 스트레인 게이지를 복부 부위에 올려놓습니다(그림 1G,J).
- 와이어를 복부 절개에서 왼쪽 외측 체벽을 따라 왼쪽 전肢 아래를 지나 등쪽 목을 지나 두개골 절개부까지 피하 터널을 통과시킵니다.
- 7-0 비흡수성 봉합사를 사용하여 위 관골의 혈관 표면에 스트레인 게이지를 봉합합니다(그림 1H). 큰 대망을 변형 게이지 위에 재배치하고 기능적 봉합 면적을 약 5.0 mm × 5.0 mm로 제한합니다.
- 긴장 게이지를 위 흉곽의 혈관면에 놓고, 긴 축과 연결된 와이어를 심장에서 유문까지 이어지는 종방향 근섬유와 평행하게 정렬합니다. 납땜 접합부를 복벽 쪽으로 향하게 하고, 납땜된 쪽은 머리를 향하고 반대쪽 끝은 유문 쪽을 향하게 합니다(그림 1H).
- 세 개의 고정 지점이 있는 연속 봉합선으로 인해 위 장막에 스트레인 게이지를 고정합니다. 후미(유문) 끝에 한 코, 두개(심장) 끝에 두 코를 연속으로 놓고, 상단 중앙선에서 단일 매듭으로 조립을 고정합니다(그림 1H).
- 위와 다른 복부 장기들을 원래 해부학적 위치로 되돌려 놓으세요. 에나멜 철사를 복부 근육에 고정하여 앞뒤 움직임을 최소화하세요.
- 에나멜 선을 복부 근육에 고정하기 위해 봉합사와 함께 근육에 초기 매듭을 만들고, 두 선을 여러 번 감은 뒤 마지막 매듭을 묶어 선을 단단히 고정하세요.
- 복부 근육을 봉합한 후 6-0 흡수성 봉합사로 피부를 봉합합니다(그림 1I).
- 3% 과산화수소를 사용해 골막을 제거하여 전방 천문(그림 1J)을 노출시킵니다.
주의: 과산화수소는 자극 물질입니다. 적절한 개인 보호 장비를 착용하고 눈과 피부와의 접촉을 피하세요. - 노출된 두개골에 약 10초간 3% 과산화수소를 바르어 골막을 제거하고 경미한 출혈을 조절합니다. 즉시 멸균 면봉으로 용액을 제거하고, 멸균 식염수로 깨끗이 헹군 후 표면을 완전히 건조한 후 베이스 레진을 바르세요.
- 베이스 레진을 섞어 두개골에 바르세요. 헤드 마운트 커넥터를 수지에 눌러 자연스럽게 굳게 하세요. 고정된 커넥터 주변의 두피를 봉합하되, 헤드 마운트 커넥터의 원형 구멍은 노출된 상태로 두세요(그림 1K).
- 베이스 수지가 방해받지 않고 약 5분간 중합되도록 두세요. 완전한 경화를 확인하려면 겸자 끝으로 수지 표면을 살짝 만지세요.
- 초기 경화 단계에서 수지가 충분히 굳어 지지 없이 커넥터를 고정할 때까지 겸자로 헤드 마운트 커넥터를 안정화시킵니다.
- 수술 상처 주변에 포비돈-요오드 용액을 발라주세요. 수술 후 진통 및 항염증 치료를 위해 멜록시캄(0.2 mg/kg, 피하 투여)을 투여합니다.
- 마취에서 회복한 후에는 쥐를 다시 집 우리로 돌려보내세요. 멜록시캄(0.2 mg/kg, 복강 내 투여)을 하루 1회 이틀 연속으로 투여합니다.
- 쥐가 올바른 방향 반사를 회복하고 규칙적이고 안정적인 호흡을 보이며 정상적으로 움직일 수 있을 때만 집 우리로 돌려보내세요.
- 수술 후 최소 이틀 동안은 매일 쥐를 관찰하고, 그 이후로는 주 2회 이상 관찰하세요. 사전에 정의된 인도적 평가 기준에 따라 지속적인 체중 감소와 함께 운동 활동 감소를 보이는 동물을 인도적으로 안락사시킵니다.
그림 1. 외과적 이식 워크플로우와 위 운동성 기록 설정. (A) 복부에서 제모. (B) 포비돈-요오드 용액으로 소독. (C) 75% 에탄올로 세척. (D) 복부 위에 멸균 수술용 커튼을 부착하는 것. (E) 복부 중앙선 절개 및 두피 절개. (여성) 위 노출. (G) 변형 게이지 조립체의 피하 통과 및 위 제기(antrum)에 센서의 위치. (H) 위제기의 혈관층에 스트레인 게이지를 봉합하는 것, 즉 각막 부근과 유문 사이에 해부학적으로 위치함. (I) 복부 근육과 피부의 순차적인 봉합. (J) 3% 과산화수소를 사용한 골막 제거 후 전방 천문에 노출됨. (K) 헤드 마운트 커넥터의 고정 및 커넥터 구멍 주변의 두피 닫힘. (L) 자 옆에 표시된 맞춤형 스트레인 게이지 장치. (M) 기록실, 회전 정류기, 고정식 헤드마운트 커넥터, 브리지 증폭기, 데이터 수집 시스템, 컴퓨터 및 신호 분석 소프트웨어를 포함한 자유 이동 위 운동성 기록 장치의 회로도. 이 그림의 더 큰 버전을 보시려면 여기를 클릭해 주세요.
4. 위 운동성 기록
- 맞춤형 자유롭게 움직이는 원형 녹화 챔버를 2K 자동 초점 카메라 아래에 위치시켜 마우스의 연속적이고 동기화된 행동 모니터링을 가능하게 합니다.
- 녹음실은 투명한 원통형 플렉시글라스 용기(직경 35cm× 높이 45cm)를 사용하여 제작합니다.
- 챔버 위에 맞춤 행잉 플레이트(39.5 cm × 10.0 cm)를 장착하여 헤드 마운트 커넥터 케이블을 지지하세요.
- 행잉 플레이트를 챔버의 양쪽에 세운 두 개의 수직 스탠드로 지지합니다. 녹음 시 적절한 케이블 장력을 유지하기 위해 높이(최대 15.5cm)를 조절하세요.
- 마우스를 녹음실에 넣으세요. 헤드 마운트 여성 소켓을 회전식 정류자에 매달린 다채널 유연 녹음 테더에 연결합니다. 테더가 자유로운 이동, 회전, 먹이를 허용하는지 확인하세요.
- 수술 전 3일 연속으로 매일 60분씩 기록실에 쥐를 적응시키세요. 이식 후에는 마취된 쥐를 30분간 챔버에 넣어 생리적 안정을 기다린 후 연속 기록을 시작하세요.
- 플렉시브 테더의 반대쪽 끝을 브리지 앰프에 연결하고, 앰프를 PowerLab 8/35 데이터 수집 시스템에 연결하세요.
- 2.9단계에서 설명한 브리지 증폭기 밸런스와 스트레인 게이지 제로조정을 검증하세요. 라이브 신호를 최소 2분간 모니터링하고, 드리프트가 거의 없는 안정적인 기준선을 확인한 후에야 녹화를 시작하세요.
- LabChart 데이터 수집 소프트웨어(버전 8.0)에서 원시 위 신호 채널에 대해 샘플링 주파수 10kHz, 증폭 이득 10×로 하드웨어 설정을 설정하세요.
- 입력 전압 범위는 ±5 V, 브리지 여기 전압은 5 V, 하드웨어 저역 통과 필터는 100Hz로 설정되어 고주파 잡음을 최소화하면서도 신호 충실도를 유지하도록 설정하세요.
- 2K 자동 초점 카메라를 켜고 동시에 녹화 컴퓨터에서 데이터 수집 소프트웨어를 실행하세요.
- 전용 데이터 수집 템플릿을 사용하여 데이터를 수집하세요. 원시 위 긴장 게이지 신호를 위한 아날로그 채널 하나와 2K 자동 초점 카메라의 동기화된 비디오 채널 하나를 설정하세요. 모든 녹음은 네이티브 획득 소프트웨어 파일 형식(*.adicht)으로 저장하세요.
- 수술 후 회복 기간, 마취에서 각성 상태로 전환하는 과정, 그리고 식기 전 기준선 2분, 식사 후 2분, 식사 후 2분 단계로 구성된 6분간의 섭식 행동 검사를 수행합니다.
- 수술 후 1일, 3일, 5일, 7일, 10일, 15일에 09:00부터 15:00 사이에 녹화를 수행하세요. 동물을 챔버에 넣은 직후 기록을 시작하고, 10분 이후에 수집한 데이터를 분석에 사용하여 생리적 안정을 보장하세요.
- 먹이 주기 전에 12시간 동안 단식을 먹입니다. 6분 동안 위운동성을 연속적으로 기록하며, 식사 전 2분, 동물이 먹이를 시작한 후 2분의 급식 주기, 식후 2분으로 구성됩니다.
- 다음 중 하나라도 충족하는 녹음은 분석에서 제외됩니다: (i) 커넥터 고장 또는 전선 파손으로 인한 신호 손실; (ii) 증폭기 입력 범위를 초과하는 미루기 또는 주행으로 인한 심한 움직임 아티팩트; 또는 (iii) 단일 녹음 세션 중 기준선 진폭의 20% 이상인 불안정한 신호 또는 기준선 드리프트.
5. 신호 처리 및 통계 분석
- 완전한 하드웨어 연결을 구축하고, 하드웨어 및 소프트웨어 필터링 워크플로우를 적용하여 원시 생물학적 신호를 처리하고, 위 운동파를 운동 인위에서 분리합니다.
- 생물학적 신호를 브리지 증폭기와 데이터 수집 시스템의 내장된 아날로그 저역 통과 필터를 통해 라우팅합니다. 아날로그 저역 통과 필터 차단 주파수를 100Hz로 설정하여 고주파 전자기 잡음과 전력선 간헐을 줄이고 기본 원시 데이터 채널을 생성합니다(그림 S1).
- 데이터 수집 중에는 하이패스, 노치, 안티앨리어싱 필터와 같은 추가 하드웨어 필터를 적용하지 마십시오.
- 획득 소프트웨어의 스무딩 모듈을 사용하여 스무딩된 분석 채널을 생성합니다(그림 S2). 채널 드롭다운 메뉴에서 스무딩을 선택하고, 스무딩 타입으로 삼각형(Bartlett)을 선택하며, 창 폭을 10초로 설정하세요(그림 S3).
참고: 10초 삼각형 윈도우는 호흡 및 운동 아티팩트를 감쇠하면서 기저 쥐 위 느린 파동(~5 사이클/분; ~0.083 Hz)의 진폭과 리듬을 유지하는 적응형 디지털 저역 통과 필터로 기능합니다. - 기준선 보정, 디트렌딩, 리샘플링, 채널 오프셋 조정, 신호 정규화 등 추가적인 디지털 전처리 단계를 적용하지 마십시오.
- 부드럽게 처리된 파형을 새로운 분석 채널(채널 2)으로 저장하고, 원시 신호(채널 1)와 함께 동일한 네이티브 획득 소프트웨어 파일(*.adicht)에서 외부 변환 없이 저장하세요(그림 S3 및 S4).
- 분석할 위해 평탄화된 위 운동 신호를 추출하세요. 각 실험 조건에 대해 안정적이고 대표적인 연속 2분 기록 창을 선택하면서 움직임 및 행동 관련 인공물을 최소화합니다(그림 S4).
- 동기화된 비디오 녹화를 사용해 무작위로 2분간의 연속 녹화 창을 선택하세요. 안정된 기준선을 가진 구간만 포함하고 움직임 인공물, 미용 행동, 운동 활동이 없습니다.
- 지정된 POD 1–15에서 연속된 2분 녹화 구간 하나를 추출합니다. 심마취 상태에서 기록된 위 운동 파형과 완전히 의식 상태에서 기록된 파형을 비교하세요.
- 4.12단계에서 설명한 대로 09:00부터 15:00 사이의 모든 녹화를 표준화하여 생체 변동이 위운동성에 미치는 영향을 최소화합니다.
- 급식 실험에서 나온 6분 연속 녹화 한 편을 세 개의 연속된 2분 주기로 나누어 분석하는데, 이 기간은 식전 기초선, 활성 급식 주기, 식사 후 단계를 나타냅니다.
- 동물이 지속적으로 씹기 시작할 때 동기화된 비디오 녹화를 통해 먹이 시작을 식별하세요. 먹이 주기를 이후 2분 간격으로 정의하고, 먹이가 몇 초만 지속되는 녹음은 제외합니다.
- 평활화된 파형에서 평균 순환 주파수(사이클/분), 순환 진폭(μV), 곡선 아래 면적(AUC; mV·s·min−1)을 정량화합니다. 피크 투 피크 간격 분석을 통해 수축 주파수를 결정하고, 선택한 기록 구간에 걸쳐 정류된 수축 신호를 적분하여 AUC를 계산합니다(그림 S5).
- 데이터 수집 소프트웨어인 Data Pad의 순환 측정 모듈을 사용하여 선택한 각 녹음 구간에 대한 평균 순환 주파수를 자동으로 계산하여 피크 검출을 수행합니다(그림 S5).
- 기준선을 선택한 기록 간격 내의 최소 신호 전압으로 정의합니다. 데이터 패드 모듈의 최소 적분 함수(Integral Relative to Minimum function)를 사용하여 AUC를 자동으로 계산합니다(그림 S5).
- 수축성 진폭을 Data Pad 모듈을 사용하여 평균 순환 높이로 자동으로 측정하며, 각 2분 기록 구간의 평균 피크-저 높이를 계산합니다(그림 S5).
- 모든 실험 조건에서 빈도, 진폭, AUC 데이터를 그래픽으로 요약하고 통계적으로 분석합니다.
- 심부 마취와 완전히 의식 있는 상태 간의 위 운동성 지표를 비교하세요.
- POD 1부터 POD 15까지의 위운동성의 종방향 변화를 평가합니다.
- 활성 섭식 단계와 식사 전 및 식사 후 단계의 위 운동성 지표를 비교합니다.
- 통계 분석에 미리 정의된 기록 품질 기준을 충족하는 모든 데이터를 포함하세요. 통계적 이상치 탐지나 통계적 기준에 따른 관측 제외는 하지 마십시오.
- 통계 분석 전에 데이터 정규성과 분산의 균질성을 평가하세요. 정규 분포 데이터를 일반 일방향 분산 분석(ANOVA) 또는 비쌍 t-검정을 사용해 분석합니다. 비정규분포 데이터는 Kruskal–Wallis 검정 또는 Mann–Whitney U 검정을 사용하여 분석합니다.
- Shapiro–Wilk 검정을 사용하여 데이터 정규성을 평가하고, Brown–Forsythe 검정을 사용하여 분산의 동질성을 평가합니다. 일원 ANOVA를 사용하여 균등 분산을 가진 정규 분포 데이터를 분석하고, 비정규 분포 또는 불균등 분산을 가진 데이터를 Kruskal–Wallis 검정을 사용해 분석합니다.
- 필요에 따라 일원 ANOVA 후 Tukey 검정 또는 Kruskal–Wallis 검정 후 Dunn 검정을 사용한 사후 다중 비교 검정을 수행하십시오.
- GraphPad Prism 버전 10.0을 사용해 모든 데이터를 분석하세요. 표준을 표준오차(SE)± 평균으로 보고합니다. p < 0.05를 통계적으로 유의미하다고 생각하라.
- 모든 통계 분석을 양측 검정으로 수행하세요. p < 0.05를 통계적으로 유의하다고 생각하자.
- 데이터 필터링과 매개변수 추출을 담당하는 연구자를 실험군과 처리에 눈가리게 하세요. 분석 전에 모든 데이터셋을 익명화하고 코딩하세요.
- 모든 원시 파형, 처리된 신호 및 관련 메타데이터를 네이티브 획득 소프트웨어 파일 형식(*.adicht)으로 보관합니다. 이 파일들과 내보내진 스프레드시트를 중앙 집중식 저장소에 저장하여 독립적인 검증을 가능하게 합니다. 관련 데이터셋과 통계 분석 파일은 합리적인 학술적 요청이 있을 경우 제공해 주십시오.
결과
마취 및 각성 상태에서의 위 운동성
마취가 위운동성에 미치는 잠재적 영향을 평가하기 위해, 마취 상태와 의식 있는 마우스 간에 위운동성 매개변수를 비교하였다(n = 6; 그림 2A, B). 마취 상태와 의식 상태 사이에서 빈도에 유의미한 차이가 관찰되지 않았습니다(각각 5.38 ± 0.13 대 5.48 ± 0.10 사이클 min−1 [cpm]; 비짝 t-검정: t = 0.4053, p = 0.6874). 마찬가지로 진폭(73.88 ± 10.79 대 60.79 ± 3.96 μV; Mann–Whitney U 검정: U = 68.5, p = 0.1620) 또는 곡선 아래 면적(AUC)(6.83 ± 1.26 대 7.47 ± 0.84 mV·s·min−1; Mann–Whitney U 검정: U = 102, p = 0.8437)는 두 조건 간에 유의미하게 차이가 났다. 이 대표적인 기록들은 마취 상태와 의식 상태에서 유사한 위운동성 지표를 보여준다.
그림 2. 스트레인 게이지 이식 후 대표적인 위 운동성 기록, 정량적 분석 및 위 조직학. (A,B) 마취 직후 (A) 및 의식 상태(B) (n = 6 마우스)에서 기록된 대표적인 위 운동성 흔적. (C–H) 수술 후 회복 기간 동안 1일(C), 3일(D), 5일(E), 7일(여성), 10일(G), 15일(H)에서 기록된 대표적인 위 운동성 흔적. H의 스케일 바는 패널 A–H에 적용됩니다: 50 μV, 15초(I–K) 위 운동 주파수 정량화(I; 브라운-포사이스와 웰치 분석: 다중 비교, F = 0.3898, p = 0.8762, 진폭 (J; 크루스칼-월리스 H 검정, H = 3.989, p = 0.6782), 곡선 아래 면적(AUC)(K; 크루스칼-월리스 H 검정, H = 0.8218, p = 0.9915) 종단 시간대(n = 6마리)에 걸쳐 측정했습니다. (L) 자발적 수유 전, 중, 후에 기록된 대표적인 위 운동성 흔적. 그늘진 부분은 2분간의 먹이 시간을 나타냅니다. 스케일 바: 100 μV, 30초 (M–O) 위 운동 주파수(M; 일반 일방향 분산 분석, F = 5.490, p = 0.0138), 진폭(N; Kruskal–Wallis H 검정, H = 0.3639, p = 0.8451), 그리고 AUC(O; 일반 일방향 분산 분석, F = 4.954, p = 0.0193)는 먹이 전, 중, 후에 (n = 7마리) 측정했습니다. (P–S) 정상 대조군 쥐(P)와 이식된 쥐에서 POD 7(Q), POD 10(R), POD 15(S)에서 헤마톡실린 및 에오신 염색된 위 절개를 검사했습니다. 패널 P에서 a는 근막, b는 점막하, c는 점막을 나타냅니다. 패널 S에 표시된 100 μm 스케일 바는 모든 조직학 패널(P–S)에 적용됩니다. 데이터는 표준오차± 평균으로 제시됩니다. *p < 0.05. 이 그림의 더 큰 버전을 보시려면 여기를 클릭해 주세요.
수술 후 위 운동성 변화
POD 1부터 POD 15까지 자유롭게 움직이는 쥐의 위운동성을 모니터링하여 수술 후 안정성을 평가하였다(n = 6; 그림 2C–K). 수술 후 초기 단계(POD 1–3)에서는 빈도가 기준 측정치와 크게 차이가 없었다(5.76 ± 0.27 대 5.38 ± 0.14 cpm; 브라운-포사이스와 웰치 분산 분석 [ANOVA], 다중 비교, p = 0.9670). 마찬가지로, 진폭(60.41 ± 3.41 대 56.43 ± 4.78 μV)에서도 유의미한 차이가 관찰되지 않았다. 다중 비교를 한 크루스칼-월리스 검정, p > 0.9999) 또는 AUC(6.34 ± 0.79 대 6.42 ± 0.92 mV·s·min−1; 다중 비교를 포함한 크루스칼-월리스 검정, p > 0.9999).
수술 후 중간 단계(POD 5–7) 동안 측정된 지표는 안정적이었으며, 빈도에 유의미한 차이가 없었다(5.49 ± 0.23 대 5.31 ± 0.22 cpm; p > 0.9999), 진폭(58.96 ± 5.40 대 63.29 ± 8.01 μV; p > 0.9999), 또는 AUC(7.52 ± 1.59 대 5.78 ± 0.69 mV·s·min−1; p > 0.9999)에 대응하는 기준값에 대비한 값입니다.
수술 후 후반부(POD 10–15)에서는 빈도에 유의미한 변화가 관찰되지 않았다(5.55 ± 0.42 대 5.41 ± 0.10 사이클/분); > 0.9999), 진폭(69.33 ± 21.04 대 56.33 ± 7.95 μV; p > 0.9999), 또는 곡선 아래 면적(AUC; 9.74 ± 3.87 대 9.00 ± 2.71 mV·s·min−1; p > 0.9999)를 해당 기준선과 비교하였습니다. 이 대표성 데이터는 검사된 조건 하에서 측정된 위 운동성 지표가 수술 후 관찰 기간 내내 안정적으로 유지되었음을 보여줍니다.
음식 섭취 시 위 운동성
자발적 고형 음식 섭취 시 위상 의존적 위운동성 변화를 특징짓기 위해 대표적인 위 운동성 기록을 얻었습니다 (n = 7; 그림 2L–O). 활성 급식 중에는 주기가 식기 전 기준선에서 유의미하게 감소했습니다(5.78 ± 0.30에서 4.44 ± 0.42 cpm; 다중 비교 후 일반 일원 ANOVA 결과 p = 0.0301). 반면, 섭식 전과 급식 단계 간 진폭은 크게 차이가 없었다(62.73 ± 3.31 대 77.33 ± 15.32 μV); 다중 비교를 포함한 크루스칼-월리스 검정, p > 0.9999). 먹이 시 AUC는 7.50 ± 0.61에서 4.92 ± 0.78 mV·s·min⁻1 로 감소했으나, 통계적 유의성에 이르지는 못했습니다(다중 비교 시 일반 일원 ANOVA p = 0.0611).
급식 중단 후에는 급식 주기에 비해 빈도가 크게 증가했습니다(5.84 ± 0.27 cpm; p = 0.0230). 마찬가지로 AUC는 4.92 ± 0.78에서 8.01 ± 0.82 mV·s·min−1 로 크게 증가했습니다 (p = 0.0228). 급식 및 식사 후 단계 간 진폭 차이는 관찰되지 않았다(77.33 ± 15.32 대 64.17 ± 5.65 μV; p > 0.9999). 식후 단계와 식기 전 기저선을 비교했을 때, 빈도(p = 0.9908), 진폭(p > 0.9999), 또는 AUC(p = 0.8784)에서 유의미한 차이가 발견되지 않아 관찰 기간 동안 측정된 운동성 매개변수가 기준선 수준으로 돌아왔음을 나타냈다.
위 조직학적 변화
PODs 7–15에서 채취된 위 조직의 조직학적 검사에서는 이식된 변형 게이지 인근에서 경미한 염증성 세포 침윤, 혼란스러운 세포 구조, 핵 이상 등 국소적인 염증 변화가 나타났습니다(그림 2P–S). 검사된 절편에서는 심각한 염증이나 광범위한 조직 손상이 관찰되지 않았습니다. 이러한 대표적인 조직학적 소견은 검사된 조건 하에서 착상 부위에 국소적인 조직 반응이 있음을 시사합니다.
그림 S1. 기초 생위 운동성 기록 채널 구축. 100Hz 로우패스 필터를 이용한 아날로그 하드웨어 필터링 후 데이터 수집 소프트웨어에서 획득한 원시 위운동성 신호의 대표적인 스크린샷입니다. 이 기준선 기록 채널은 이후 디지털 신호 처리 및 분석의 입력 역할을 합니다. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭해 주세요.
그림 S2. 데이터 수집 소프트웨어에서 평활화된 분석 채널을 생성하는 것. 데이터 수집 소프트웨어의 스무딩 기능을 사용하여 새로운 평활화 분석 채널을 생성하는 대표적인 스크린샷입니다. 부드화된 채널은 원시 위 운동성 기록에서 생성된 후 정량적 분석을 수행하였습니다. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭해 주세요.
그림 S3. 데이터 수집 소프트웨어에서 평활화 매개변수 설정. 디지털 신호 처리에 사용되는 데이터 수집 소프트웨어의 스무딩 설정을 보여주는 대표적인 스크린샷입니다. 삼각형(Bartlett) 스무딩 윈도우는 생리적 위 느린 파동 리듬을 유지하면서 호흡 및 운동 인위를 완화하기 위해 10초 윈도우 폭으로 선택되었습니다. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭해 주세요.
그림 S4. 정량적 분석을 위한 대표성 기록 창 선정. 정량적 분석을 위해 평활화된 위 운동성 추적에서 안정적인 2분 연속 기록 구간(회색 음영 영역)을 선택한 대표적인 예시입니다. 위 운동성 매개변수를 계산하기 전에 움직임 및 행동 관련 인위증을 최소화하기 위해 기록 창을 선택하였습니다. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭해 주세요.
그림 S5. 평활화된 파형에서 위운동성 매개변수를 정량화하는 것. 주요 위 운동성 매개변수를 정량화하는 데 사용된 데이터 수집 소프트웨어 Data Pad 및 분석 인터페이스의 대표적인 스크린샷입니다. 선택한 평활화된 기록 구간에서 평균 순환 주파수(사이클/분), 평균 순환 진폭(μV), 곡선 아래 적분적 면적(AUC; mV·s·min⁻1)을 계산하였습니다. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭해 주세요.
토론
이 정교한 프로토콜은 자유롭게 움직이는 쥐에서 장기적인 위운동성 기록을 위한 안정적이고 생체 적합하며 재현 가능한 접근법을 제공합니다. 중요한 단계는 실리콘 변형 게이지18의 제작으로, 이는 쥐의 위 관에 맞고 유문과 안저19와의 간섭을 최소화하는 최적화된 장치(전체 치수: ~6.0 mm × 8.0 mm; 기능면적: ~5.0 mm × 5.0 mm)를 제공합니다. 기존 강체 장치와 비교할 때, 704 실리콘 고무로 캡슐화는 우수한 기계적 유연성과 탄성을 제공하며(파손 시 신장 140%≥), 생리적 급식 시 위 팽창을 수용하면서 장치 파손이나 움직임 제한 가능성을 줄입니다. 더 나아가, 매끄러운 실리콘 캡슐화는 임플란트 주변 조직 부착을 줄여 종방향 기록 시 신호 품질 보존에 도움을 줄 것으로 기대됩니다. 수술 후 유착 형성과 장기 기계적 성능에 대한 체계적인 정량적 평가는 본 연구의 범위를 벗어났으나, 만성 기록은 이식 후 최대 15일간 안정적인 신호 품질과 지속적인 센서 민감도를 보여주었습니다. 얇고 매끄러운 실리콘 코팅은 과도한 조직 부착을 줄이는 데 도움을 주는 보호 장벽 역할도 합니다. 그럼에도 불구하고, 만성 장치 성능을 완전히 특성화하기 위해서는 정량적 접착 점수 분석과 전용 기계적 성능 테스트를 통한 추가 장기 검증이 중요할 것입니다. 마지막으로, 실리콘 스트레인 게이지와 헤드 마운트 커넥터를 통합하면 케이블 꼬임과 씹는 손상을 최소화하여 자유롭게 움직이는 동물의 장기 위 운동성 기록을 용이하게 합니다.
이 프로토콜의 핵심 수정 사항은 쥐가 마취 유도 전까지 자유롭게 음식에 접근할 수 있도록 한다는 점입니다. 기존의 위장관 수술 프로토콜과 달리, 수술 전 단식은 생략되는데, 이는 정상적인 음식 섭취로 인한 위 팽창이 위 혈통 표면의 시각화를 용이하게 하여 7-0 혈통 봉합 시술 시 점막 침투 위험을 줄일 수 있기 때문입니다16,19. 반면, 장기간 공복으로 인한 위붕괴는 조직 중복을 증가시켜 정확한 봉합 위치를 복잡하게 만듭니다. 그러나 이후 운동성 기록 세션에서는 식후 변동성을 최소화하기 위해 기준선 기록 전에 표준화된 12시간 단식 기간이 시행됩니다16,19.
또 다른 중요한 절차적 수정은 마취 요법의 선택입니다. 흡입 마취는 설치류 수술에 널리 사용되지만, 여기서 설명하는 이중 부위 수술 절차는 동물의 반복적인 재위치와 두개골 수술 부위의 접근을 방해받지 않고 머리에 연결해야 합니다. 데이터 수집은 또한 맞춤형 기록 챔버에 연결된 가벼운 테더에 의존하는데(그림 1M), 이는 제한 없는 가정 내 케이지 환경에 비해 동물의 움직임을 제한할 수 있습니다. Meile 등은 자유롭게 움직이는 쥐의 위장 운동성을 기록할 수 있는 무선 변형 게이지 텔레메트리 시스템을 개발했다22. 하지만 이 텔레메트리 장치의 크기와 무게는 성인용 C57BL/6J 마우스와 쉽게 호환되지 않아 이 모델에서의 직접적인 적용이 제한적입니다. 따라서 여기서 설명한 유선 구성은 연속적인 신호 획득을 유지하면서 쥐에서 장기 위 운동성 기록을 위한 실용적인 접근법을 나타냅니다. 이러한 조건에서 복막 내 투여 1.25% 트리브로모에탄올은 수술 전 과정 동안 수술적 접근이 방해받지 않도록 합니다. 1.25% 트리브로모에탄올의 사용은 빠른 유도, 신뢰할 수 있는 외과적 마취, 그리고 미세봉합에 필요한 우수한 근육 이완 효과로 뒷받침됩니다. 화학적 안정성을 보장하고 분해를 최소화하기 위해 상업적으로 준비된 작업 용액을 사용해 4°C에서 빛으로부터 보호하여 보관했습니다. 트리브로모에탄올은 부적절하게 준비되거나 취급될 경우 일시적인 위장 억제나 조직 자극을 유발할 수 있지만, 최근 연구들은 적절한 품질 관리 절차 하에 사용될 때 그 효능과 안전성을 입증했습니다23. 이 보고서들과 일치하게, 본 연구에서는 수술 후 장장염이나 복막염을 포함한 부작용이 관찰되지 않았습니다.
현재 프로토콜에는 여러 제한점이 있습니다. 첫째, 대표적인 조직학적 평가에서는 국소적인 수술 후 조직 변화가 나타났으나, 본 연구에서는 염증 반응이나 수술 후 유착의 정량적 평가를 포함하지 않았습니다. 이 프로토콜은 포괄적인 병리학적 평가보다는 재현 가능한 장치 제작과 정확한 해부학적 이식을 위한 방법론적 안내서로 주로 개발되었습니다. 따라서 반정량적 조직학적 평가, 맹검 병리학적 평가, 그리고 수술 후 유착의 정량적 평가는 본 연구의 범위를 벗어났다. 그럼에도 불구하고, 대표적인 헤마톡실린 및 에오신 염색 절편에서는 혈관 표면에 국한된 경미하고 국소적인 조직 변화가 나타났으며, 검사된 절편에서 광범위한 조직 손상의 증거는 없었습니다. 향후 정량적 조직학적 분석과 표준화된 유착 점수 분석을 포함한 연구들은 장기 조직 반응에 대한 보다 포괄적인 평가를 제공할 것입니다.
마지막으로, 현재의 검증은 주로 위 운동성 기록과 조직학적 관찰에 초점을 맞추고 있습니다. 위 배출, 장 전체 이동 시간, 대변 펠릿 배출 등 보완적인 생리학적 평가는 이 초기 검증 연구의 범위를 벗어났습니다. 이러한 측정이 위장 기능을 보다 포괄적으로 평가할 수 있지만, 수술 후 기록 기간 동안 관찰된 안정적이고 리드미컬한 위 수축력 패턴은 착상 절차가 검사된 조건에서 신뢰할 수 있는 위 운동성 기록을 유지했음을 시사합니다. 그럼에도 불구하고, 이러한 보완적인 생리학적 검사를 통한 전반적인 위장 기능 평가는 이 만성 기록 접근법의 향후 검증을 위한 중요한 방향으로 남아 있습니다.
이러한 한계에도 불구하고, 프로토콜은 의식이 있는 쥐의 위운동성 장기 평가를 위한 실험 도구 상자를 확장합니다. 관찰된 기저 위 주파수는 이전에 외광강력 변환기19 및 혈관 전기생리학적 기록10을 사용해 보고된 값과 일치하며, 대표적인 섭식 관련 변화는 포유류 모델에서 이전에 기술된 생리적 반응과 일치한다. 그럼에도 불구하고, 신호 진폭과 AUC의 절대값은 센서 제작, 증폭 설정, 외과적 이식 조건 등 실험 변수에 따라 달라지므로, 각 실험 설정의 맥락 내에서 해석되어야 합니다. 이 프로토콜은 기능 소화불량, 당뇨병성 위마비, 수술 후 장폐 모델을 포함한 위 생리학 및 질환의 종단적 연구에 유용할 수 있으며, 의식적인 기록 조건에서 치료 중재 평가를 용이하게 할 수 있습니다.
공개 사항
저자들은 본 논문에서 보도된 연구에 영향을 미칠 수 있는 알려진 경쟁 재정적 이해관계나 개인적 관계가 없다고 선언한다.
감사의 글
저자들은 변형 게이지 준비 및 실험 절차 최적화에 기여한 중국 의학원 기초의학과학연구소의 Yikuan Xie의 도움을 감사드립니다. 이 연구는 중앙공익연구소 기초 연구기금(ZZ-JQ2023002), 중국의학과학원 과학기술혁신프로젝트(CI2026A03401), 중국 국가자연과학기금(82174281 및 82230123)의 지원을 받았습니다.
재료
```html
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 1% Povidone-Iodine Solution | 장먼 헝젠 제약 유한 공사, 광둥, 중국 | 500 mL | 피부 소독 |
| 1.25% 바로 사용 가능한 트리브로모에탄올 용액 | 난징 아이베이 바이오테크놀로지 유한 공사, 장쑤, 중국 | M2910 | 추가 준비나 희석 없이 직접 사용. |
| 2K 자동 초점 카메라 | 선전 뤼랴 기술 유한 공사, 광둥, 중국 | CM717-25442 | 행동 모니터링 |
| 3% 과산화수소 용액 | 리콘 메디컬 테크놀로지 유한 공사, 산동, 중국 | 100 mL | 두개골 준비 |
| 바늘이 달린 6-0 흡수성 봉합사 | 진환 의료 제품 유한 공사, 상하이, 중국 | R611 | 복부 근육 및 피부 봉합 |
| 7-0 비흡수성 봉합사 | 닝보 청허 현미경 기기 공장, 절강, 중국 | 45/35 | 변형률 게이지 고정 |
| 75% 에탄올 | 리콘 메디컬 테크놀로지 유한 공사, 산동, 중국 | 500 mL | 기기 및 장치 소독 |
| 산성 무솔더 플럭스 | 프로킷's 인더스트리스 유한 공사, 상하이, 중국 | 8S005 | 전기 조립 |
| 동물용 미니 아코 무선 트리머 | AUX 그룹 유한 공사, 절강, 중국 | C6S | 털 제거 |
| 베이싱 수지 | 야마하치 치과 재료 유한 공사, 장쑤, 중국 | LSBR-NPS | 두개골에 머리 장착 커넥터 고정 |
| 원형 자유 움직이는 기록 챔버 | 베이징 신항 흥예 기술 무역 유한 공사, 베이징, 중국 | 맞춤형 제작 | 투명 원통형 플렉시글라스 용기(직경 35 cm 및 높이 45 cm)에 맞춤형 상단 걸이 플레이트(39.5 cm × 10.0 cm)와 높이 조절 가능한 지지대 2개(최대 15.5 cm)가 장착되어 있어 머리 장착 커넥터 케이블을 매달 수 있습니다. |
| 맞춤형 변형률 게이지(350 Ω) | 이양 허산 지구 광츠 전자 유한 공사, 후난, 중국 | 맞춤형 | 베이스: 3.6 mm × 3.0 mm; 그리드: 2.0 mm × 1.0 mm; 두께: 0.06 mm |
| 민감한 가위 | RWD 생명 과학 유한 공사, 광둥, 중국 | S12003-09 | 수술용 가위 |
| 일회용 마이크로 도포기 | 오원 메디컬 디바이스 테크놀로지 유한 공사, 광둥, 중국 | 소형 | 실리콘 도포 |
| 피드백 제어 전기 발열 담요 | 난징 신 샤오 위안 바이오테크, 장쑤, 중국 | H-KWDY-III | 수술 중 체온 유지 |
| GraphPad Prism | GraphPad 소프트웨어, LLC, 매사추세츠, 미국 | 버전 10.0 | 통계 분석 |
| 머리 장착 커넥터 | 베이징 신항 흥예 기술 무역 유한 공사, 베이징, 중국 | 맞춤형 제작 | 마우스 헤드스테이지 장착을 위한 맞춤형 2 × 3 핀 헤더; 핀 피치 1.27 mm, 핀 직경 0.44 mm, 터미널 꼬리 간격 4.90 ± 0.25 mm; 치수: 4.88 mm × 3.25 mm × 5.32 mm(L × W × H); 절연체 높이: 3.80 mm. |
| 아이리스 해부 포셉 | RWD 생명 과학 유한 공사, 광둥, 중국 | F12006-10 | 조직 해부 |
| LabChart 프로페셔널 소프트웨어 | AD인스트루먼트 유한 공사, 뉴사우스웨일스, 호주 | 버전 8.0 | 데이터 수집 및 신호 처리 |
| 멜록시캄 주사제 | 치루 동물 건강 제품 유한 공사, 산동, 중국 | 20 mL | 수술 후 진통 |
| 바늘 홀더 | RWD 생명 과학 유한 공사, 광둥, 중국 | F31047-12 | 수술 봉합 |
| 페트롤라툼 안과용 연고 | 데크라 제약 유한 공사, 노스위치, 영국 | 17033-211-38 | 마취 중 각막 보호 |
| PowerLab 8/ |
참고문헌
- Goyal RK, Guo Y, Mashimo H. Advances in the physiology of gastric emptying. Neurogastroenterol Motil. 2019;31(4):e13546.
- Febo-Rodriguez L, Chumpitazi BP, Sher AC, Shulman RJ. Gastric accommodation: Physiology, diagnostic modalities, clinical relevance, and therapies. Neurogastroenterol Motil. 2021;33(12):e14213.
- Servin-Vences MR, et al. PIEZO2 in somatosensory neurons controls gastrointestinal transit. Cell. 2023;186(16):3386-3399.e15.
- Jin M, et al. Cell membrane-functionalized bismuth oxyiodide nanodots as potential contrast agents for gastrointestinal tract imaging. Colloids Surf B Biointerfaces. 2025;245:114235.
- Xiao A, et al. H2S, a novel gasotransmitter, is involved in gastric accommodation. Sci Rep. 2015;5:16086.
- Adelson DW, et al. Coordinated gastric and sphincter motility evoked by intravenous CCK-8 as monitored by ultrasonomicrometry in rats. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2004;286(2):G321-G332.
- Ataka K, et al. Wood creosote prevents corticotropin-releasing factor-induced motility via 5-HT3 receptors in the proximal colon and 5-HT4 receptors in the distal colon in rats. Auton Neurosci. 2007;133(2):136-145.
- Chen CY, et al. Des-acyl ghrelin acts via corticotropin-releasing factor type 2 receptors to disrupt fasted stomach motility in conscious rats. Gastroenterology. 2005;129(1):8-25.
- Fujino K, et al. Ghrelin induces fasted motor activity of the gastrointestinal tract in conscious fed rats. J Physiol. 2003;550(Pt 1):227-240.
- Wang H, et al. Establishment of a radiotelemetric recording technique in mice to investigate gastric slow waves: Modulatory role of putative neurotransmitter systems. Exp Physiol. 2018;103(6):827-837.
- Yin J, Chen JD. Electrogastrography: Methodology, validation and applications. J Neurogastroenterol Motil. 2013;19(1):5-17.
- Rhee PL, et al. Analysis of pacemaker activity in the human stomach. J Physiol. 2011;589(Pt 24):6105-6118.
- Hasler WL, Soudah HC, Dulai G, Owyang C. Mediation of hyperglycemia-evoked gastric slow-wave dysrhythmias by endogenous prostaglandins. Gastroenterology. 1995;108(3):727-736.
- Coleski R, Gonlachanvit S, Owyang C, Hasler WL. Selective reversal of hyperglycemia-evoked gastric myoelectric dysrhythmias by nitrergic stimulation in healthy humans. J Pharmacol Exp Ther. 2005;312(1):103-111.
- Zhou L, Ke MY. Textbook of Gastrointestinal Motility: Basic and Clinical Aspects. Science Press; Beijing, China; 1991:262-278.
- Holmes GM, Swartz EM, McLean MS. Fabrication and implantation of miniature dual-element strain gauges for measuring in vivo gastrointestinal contractions in rodents. J Vis Exp. 2014;(91):51739.
- Chen QC, et al. Xiangbinfang granules enhance gastric antrum motility via intramuscular interstitial cells of Cajal in mice. World J Gastroenterol. 2021;27(7):576-591.
- Wang SY, Xie Y, Zhu B, Chen X; China Academy of Chinese Medical Sciences, assignee. Silicone strain gauge and physiological signal acquisition apparatus for animal hollow visceral organs. China Utility Model Patent CN221533769U. 2024.
- Zheng J, et al. Ghrelin regulates gastric phase III-like contractions in freely moving conscious mice. Neurogastroenterol Motil. 2009;21(1):78-84.
- Hüske C, et al. Towards optimized anesthesia protocols for stereotactic surgery in rats: Analgesic, stress and general health effects of injectable anesthetics. A comparison of a recommended complete reversal anesthesia with traditional chloral hydrate monoanesthesia. Brain Res. 2016;1642:364-375.
- Callahan LM, Ross SM, Jones ML, Musk GC. Mortality associated with using medetomidine and ketamine for general anesthesia in pregnant and nonpregnant Wistar rats. Lab Anim (N Y). 2014;43(6):208-214.
- Meile T, Zieker D, Königsrainer A, Glatzle J. New telemetry device for the measurement of gastrointestinal motility in rats and comparison with standard equipment. Int Surg. 2015;100(4):755-760.
- Black C, et al. Revisiting tribromoethanol as a safe and effective murine anesthetic for veterinary clinical and biomedical research. Vet Immunol Immunopathol. 2025;282:110909.