접촉 슬라이드 분석 및 현미경을 통한 토양 미생물 시각화

1. 토양 슬라이드 소우주 준비

1. 표면 (0-6"깊이)에서 정원 토양을 수집하고 150g 토양을 두 개의 별도 컵으로 무게.
   1. 토양에 유기물의 밀도가 높은 경우 무게는 100g입니다.
2. 한 컵 "치료"와 다른 "제어"라고 레이블을 지정합니다.
3. 수분 함량을 변경하는 데 필요한 양의 물을 계산합니다.
   1. 수분 함량은 종종 현장 용량에 가깝습니다.
      
4. 졸업한 실린더로 증류수의 양을 측정합니다.
5. 증류수 양을 두 개의 바이알에 붓습니다.
6. 하나의 유리병 "치료"와 다른 "제어"를 라벨.
7. "치료" 토양의 건조 중량 기준에 따라 1%의 최종 토양 포도당 농도에 대한 충분한 포도당으로 "치료" 유리병에서 물을 수정합니다.
8. 200 mg NH₄NO_3을 "치료"유리병에 넣고 개정을 용해하기 위해 저어줍니다. 질산염은 토양 미생물을 위한 양분의 질소 근원 역할을 합니다.
9. "제어" 바이알을 수정하지 마십시오.
10. 약 50 mg의 작은 알리쿼트에서 "치료"유리병의 내용을 "치료"컵에 섞습니다. 각 알리쿼트 추가 후 주걱으로 저어.
11. 작은 알리쿼트에서 "컨트롤" 유리병의 내용을 "컨트롤" 컵에 섞습니다. 각 알리쿼트 추가 후 주걱으로 저어.
12. 4개의 깨끗한 현미경 슬라이드를 라벨: 2개의 "처리" 및 2개의 "제어" 슬라이드.
13. "처리" 슬라이드 두 개를 "처리" 토양 컵에 삽입하고 두 개의 "제어" 슬라이드를 "제어" 토양 컵에 삽입합니다. 각 슬라이드의 2cm를 토양 표면 위에 투사하고 두 슬라이드 사이에 간격을 두십시오.
14. 컵에 플라스틱 랩으로 덮고 고무 밴드로 고정하십시오.
15. 공기를 허용하기 위해 랩을 여러 번 뚫지만 과도한 증발을 방지합니다.
16. 두 컵의 무게를 기록합니다.
17. 7일 동안 지정된 구역/인큐베이터에서 토양으로 채워진 컵을 실온에서 배양합니다.

2. 슬라이드 염색 및 현미경 검사법

1. 두 컵의 무게를 기록합니다.
2. 슬라이드 제거 시 토양 수분을 계산합니다.
3. 각 슬라이드를 경사 위치로 누르고 철회하여 각 컵에서 두 개의 슬라이드를 제거하여 슬라이드의 위쪽 면이 방해받지 않도록 합니다.
4. 슬라이드의 측면을 식별하고 표시하여 염색하고 관찰합니다.
5. 벤치 상단의 슬라이드를 부드럽게 탭하여 큰 토양 입자를 제거합니다.
6. 젖은 종이 타월을 사용하여 슬라이드의 아래쪽 면을 청소하십시오. 실온에서 슬라이드를 건조시다.
7. 보호 고글을 착용하고 각 슬라이드를 집게로 잡고 슬라이드를 40 % (v /v) 아세트산에 넣고 연기 후드 아래에서 1-3 분 동안 담급니다.
8. 부드러운 물 줄기 아래에서 여분의 산을 씻어 내보냅니다.
9. 드롭퍼 병을 사용하여 슬라이드 표면을 페놀 로즈 벵골으로 덮습니다. 용기 위에 얼룩진 랙의 슬라이드를 지원하여 과도한 얼룩을 잡습니다. 슬라이드 표면에서 미생물을 제거 할 수있는 힘으로 씻지 마십시오.
10. 5-10 분 동안 슬라이드를 염색하십시오. 필요에 따라 더 많은 얼룩을 추가합니다.
11. 슬라이드를 부드럽게 씻고 과도한 얼룩을 제거합니다.
12. 실온에서 슬라이드를 건조시키십시오.
13. 오일 침지 목표를 사용하여현미경(도 1)을사용하여 슬라이드를 관찰한다.

그림 1. 현미경 아래 슬라이드.