침전물에서 지질 생물지표의 초음파 추출

1. 필요한 재료 수집

1. 샘플 (잎, 먼지, 곰팡이, 껍질, 조직), 일반적으로 냉동, 동결 건조, 분쇄, 및 추출 하기 전에 균질화, 효율성을 극대화 하기 위해 그룹으로 추출. 세 가지 샘플을 추출합니다.
2. 샘플의 크기에 따라 4-60mL에 이르는 부피를 가진 바이알이 사용될 수 있다. 이 실험을 위해, 보로실리케이트 유리 바이알(40mL) 및 용매 안전 캡이 사용된다. 바이알, 보로실리케이트 유리 파이펫 및 계량 주석은 가능한 유기 오염 물질을 제거하기 전에 6 시간 동안 550 °C에서 연소되어야합니다.
3. 디클로로메탄과 메탄올은 대부분의 유기 지질 화학 실험실에서 일반적입니다. 그들은 사용하기 전에 실험실 도구와 유리 제품을 헹구기 위해 개별적으로 사용됩니다. 메탄올(MeOH; 9:1)에 디클로로메탄(DCM)의 혼합물이 많은 실험실에서 사용되어 광범위한 극성을 가진 바이오마커를 효율적으로 추출합니다. 용매는 유기 오염 물질이 없어야합니다.
4. 실온에서 초음파 처리 물 목욕을 사용합니다. 주요 과학 장비 소매업체에서 열 유무에 관계없이 다양한 초음파 장치 크기와 초음파 처리가 가능합니다.
5. 방수해야 바이알 랙은 초음파 욕조에 배치됩니다.
6. 용매 승인 화학 후드.

2. 샘플 준비

1. 연소된 계량 주석을 실험실 규모에 놓고 용기를 놓습니다.
2. 용매로 실험실 주걱을 헹구고 적절한 양의 샘플을 계량 주석으로 전송하고 질량을 기록합니다.
   1. 샘플의 질량은 유기물 함량에 따라 다릅니다. 상대적으로 유기물질 린(marine mud)은 여러 그램을 필요로 할 수 있으며, 유기물질이 풍부한 물질(잎 조직)은 훨씬 적게 필요할 수 있다.
3. 계량 주석의 모든 재료를 연소, 사전 계량 및 라벨이 부착된 바이알로 전송합니다. 바이알을 캡한 다음 계량 주석을 버립니다.
4. 추출할 각 샘플에 대해 2.1 - 2.3 단계를 수행합니다.

3. 추출

1. 전연소 파이펫과 전구를 사용하여 DCM:MeOH(9:1) 혼합물을 각 바이알로 ~20mL를 전송합니다(바이알은 약 절반정도 가득 있어야 함). 다음 샘플로 이동하기 전에 리캡 바이알을 다시 덮어 주므로 휘발성 용매가 증발하지 않습니다.
   1. DCM과 MeOH의 변동성은 다릅니다. 미수 시료 바이알로 인한 추출 용매의 증발은 극성을 변화시키고 따라서 추출할 수 있다.
2. 샘플 바이알을 방수 바이알 랙에 넣습니다.
3. 초음파 처리 욕조의 수위는 추출 용매의 상단까지 샘플 바이알을 침수 할 만큼 깊은지 확인하십시오. 물이 너무 많으면 바이알이 떠있을 수 있습니다. 물이 너무 적어 시료가 제대로 교반되는 것을 막을 수 있습니다.
4. 유리병 랙에 샘플이 있는 유리병을 초음파 욕조에 직접 놓습니다.
5. 실온에서 30분 동안 초음파 처리합니다.
6. 초음파 처리기에서 샘플 랙을 제거합니다. 퇴적물을 추출하는 경우 정착이 발생할 수 있도록 30 분 동안 설정하십시오. 샘플의 다른 세트를 추출하는 경우,이 시간에 초음파 처리기에 넣어.
7. DCM:MeOH 혼합물을 추출 유리병에서 제거하고, 연소 전구와 전구를 사용하여, 다른 사전 계량, 사전 연소 및 라벨이 부착된 40mL 바이알에 삽입한다.
8. 모든 샘플에 대해 3.1 - 3.7 3배 반복하십시오.
9. 추출된 샘플이 바이알에서 건조하고, 뚜껑을 벗기고, 후드에 호일로 느슨하게 덮어 두어 두드립니다. '추출된 잔류물'으로 라벨을 붙이고 보관하십시오.
10. 각 샘플에 대해 결합된 추출물을 'TLE'로 레이블을 지정합니다.