U^k'₃₇ 고수온계의 비누화에 의한 지방산 메틸 에스테르의 전환

1. 재료의 설정 및 준비

1. 용매 추출 방법(초음파 처리, 삭스슬렛 또는 가속 용매 추출(ASE)을 사용하여 총 지질 추출물(TLE)을 획득한다.
2. 메탄올에서 5% H₂O로 2N KOH의 용액을 준비합니다.
   1. KOH와 메탄올은 화학 소매 업체에서 구입할 수 있습니다. 이러한 화학 물질은 순수하고 탄화수소가 없어야합니다.
      1. KOH의 어금니 질량은 ~56 개의 무뮤가 OH의 1^mol을 산출합니다 - KOH의 각 몰당. 따라서, 2N 농도를 달성하기 위해, 순수한 물 0.95 L및 메탄올의 0.05 L에 KOH 112 g을 용해시킨다.
      2. 물에 KOH의 용해는 외형이며 많은 양의 열을 생성합니다. 격렬한 반응을 피하기 위해 천천히 물에 KOH 펠릿을 추가하십시오.
   2. 자동 교반판에 0.95 L의 순수한 물에 KOH 펠릿 112 g를 녹입니다.
   3. 모든 KOH가 용해되면 0.05 L의 메탄올을 첨가하여 유기 바이오마커를 수성 용액으로 용해하는 데 도움을 주게 된다.
3. H₂O에서 6N 염산(HCl)의 용액을 준비한다.
   1. HCl은 화학 소매 업체에서 구입할 수 있습니다. 이 화학 물질은 순수하고 탄화수소가 없어야합니다.
   2. HCl은 일반적으로 13 N으로 농축됩니다. 따라서, HCl과 순수물의 1:1 혼합물은 HCl의 6.5 N 혼합물을 생성하며, 이는 이 실험의 목적을 위해 6N에 충분히 가깝다.
      1. 농축 된 HCl에 물을 추가하는 것은 exothermic이며 열을 생성하기 때문에 물에 HCl을 추가하는 것이 아니라 주변에 있는 다른 방법이 아닌 물에 추가해야합니다. 이로 인해 HCl이 튀어 나올 수 있습니다.
   3. 100mL 순수물을 함유한 비커에 100mL HCl을 부드럽게 천천히 붓고 HCl을 첨가하는 사이에 혼합물을 소용돌이치게 한다.
4. H₂O로 5% NaCl(테이블 소금)의 용액을 준비합니다.
   1. NaCl은 화학 소매 업체에서 구입할 수 있습니다. 이 화학 물질은 순수하고 탄화수소가 없어야합니다.
   2. 5% 용액의 ~1 L을 만드는 데 필요한 소금 덩어리를 계산하고 계량합니다(w/w). 물 무게 1 L ~1 kg 또는 1,000 g. 따라서, 950mL로 용해된 NaCl 50g은 5% 용액(50g+ 950g = 1,000g, 50g/1,000g = 0.05 또는 5%)을 준다.
   3. 자동 교반 판에 순수한 물에 NaCl 50 g을 부드럽게 넣고 용해될 때까지 기다립니다.
5. 다음 재료 획득: 2 청정 및 연소 (550 °C 6 h) 40 mL 보로실리케이트 유리 바이알 PTFE 줄 지어 모자; 온난화 오븐 또는 난방 블록; 연소 (6 h에 대한 550 ° C) 보로실리케이트 유리 파이펫 및 전구; pH 테이프 (산성 범위); 헥산 (헥산은 화학 소매 업체에서 구입할 수 있습니다. 이 화학 물질은 옵티마 등급 또는 동등한이어야한다).

2. 방법

1. 40mL 보로실리케이트 유리 바이알 중 하나에서 말린 TLE(에스테르 함유)로 시작합니다.
2. TLE 및 캡에 2N KOH의 약 10mL를 추가합니다.
3. 오븐이나 가열 블록에서 2.5h의 가열 블록에서 열을 때 에스테르본드(도 3)를갈라뜨기 위해 가열한다.
4. 열에서 샘플을 제거하고 실온으로 냉각 할 수 있습니다.
5. TLE(도3)에5% NaCl 용액의 약 10mL를 추가합니다. 이렇게 하면 수성 상과 유기 상 사이의 인터페이스가 발포에서 벗어나지 못하게 합니다( 추가). 뚜껑을 덮고 짧게 흔들어 주세요.
6. pH 2가^O를 프로토네이트하기 위해 도달할 때까지 소금에 절인 TLE에 6 N HCl을 추가하고 최종 제품, 안정적인 카복실산을 형성합니다(그림3;pH 용지를 사용하여 테스트하십시오). TLE가 착색된 경우 pH 2와 일치하는 색상이 변경될 수 있습니다.
7. 현재 에스테르가 없는 산성화된 용액에 약 20mL의 헥산을 추가합니다. 물에서 유기 화합물을 추출하기 위해 5 s에 대해 적극적으로 흔들어.
8. 수성 및 유기 단계가 완전히 분리될 때까지 설정합니다. 염, 이온, 물 및 반응되지 않은 HCl은 수성 상에 남아 있습니다. 유기 화합물은 이제 헥산에 있습니다.
9. 피펫을 사용하여 상퍼 헥산의 약 75%를 제거하고 다른 40mL 보로실리케이트 유리 바이알에 분배합니다.
10. 매번 약 10mL의 헥산을 추가하여 2.7 - 2.9두 번 반복하십시오.
11. 적절한 폐기물 용기에 남은 수성 혼합물을 폐기하십시오.
12. 헥산과 에스테르가 없는 유기물 "TLE- 수표가 함유된 바이알에 라벨을 붙입니다.