컬럼 크로마토그래피를 이용한 총 지질 추출물의 정제

1. 재료의 설정 및 준비

1. 용매 추출 방법(초음파 처리, 삭스슬렛 또는 가속 용매 추출(ASE)을 사용하여 총 지질 추출물(TLE)을 획득한다.
2. 다음을 수집 : 연소 보로실리케이트 유리 파이펫과 전구, 실리카 젤, 헥산, 디클로로 메탄 (DCM), 및 메탄올.
   1. 이러한 재료는 모든 화학 소매 업체에서 구입할 수 있습니다. 시약은 순수하고 탄화수소가 없어야합니다.
3. 또한 연소 유리 울과 4mL 보로실리케이트 유리 바이알을 얻을 수 있습니다.
4. 프로시저 중에 열과 컬렉션 바이알을 지원하는 수단이 있는지 확인합니다. 예를 들어 클램프와 사악한 랙이 있는 스탠드입니다. 많은 실험실에서 여러 열과 컬렉션 바이알을 보관하는 맞춤형 랙을 설계했습니다(그림2). 이렇게 하면 많은 열을 동시에 실행할 수 있습니다.

2. 방법

1. 4mL 바이알에서 드라이 샘플로 시작합니다. 시료의 무게가 ~ 10 mg 이상 건조하면 실리카 겔이 유기물의 유한 질량과만 반응할 수 있으므로 다음 단계를 수행하기 전에 분할해야 할 수도 있습니다.
2. 소량의 헥산으로 샘플을 일시 중단합니다. 이것은 이 실험에 사용되는 세 개의 용매 중 첫 번째 및 최소 극성입니다.
3. 유리병 내부에 붙어 있는 샘플이 있으면 샘플을 5분 동안 초음파 처리합니다.
4. 깨끗한 핀셋 세트를 사용하여 소량의 유리 울을 파이펫 상단에 적재합니다. 다른 파이펫을 사용하여 유리 울을 파이펫 바닥으로 부드럽게 밀어 플러그를 형성합니다.
5. 실리카 젤을 파이펫으로 조심스럽게 옮기면 약 절반이 가득 찼습니다.
6. 기둥 아래에 4mL 폐기물 수거 유리병을 배치합니다.
7. 3권의 육산으로 파이펫에 실리카 젤을 담그세요. 이 컬럼을 조건화하고 기포를 제거하고 실리카 젤에서 불순물을 헹굴수 있습니다.
8. 최종 세척이 완료되면 폐기물 수거 유리병을 제거하고 유리병으로 교체하여 극성 분수를 수집합니다.
9. 육산의 전체 샘플을 파이펫을 사용하여 열에 조심스럽게 옮김합니다. 소량의 헥산으로 샘플 바이알을 두 번 더 헹이고 컬럼으로 옮습니다. 육사를 허용시 샘플이 실리카 젤에 완전히 흡수하기 위해 전달되었다. 시술 중에 실리카 젤이 건조해서는 안됩니다.
10. 열 아래의 수집 바이알이 거의 가득 찰 때까지 샘플 상단에 헥산을 계속 추가합니다(~4mL).
    1. 다음 용매로 시작하기 전에 모든 헥산이 실리카 젤에 들어가도록 허용합니다.
11. 중간 극성 컬렉션 바이알을 열 아래에 배치합니다.
12. 컬렉션 바이알이 거의 가득 차날 때까지 열 상단에 DCM을 추가합니다. 다시 말하지만, 다음 용매를 시작하기 전에 모든 DCM이 컬렉션 바이알을 입력하도록 허용합니다.
13. 극지 수집 바이알을 열 아래에 배치합니다.
14. 컬렉션 이 거의 가득 차날 때까지 열 상단에 메탄올을 추가합니다.