화합물 투여 IV

심장 내, 후강 안와 및 발패드는 생물 의학 연구자들이 이러한 비정형 경로를 통해 화합물을 전달해야 하는 실험에 사용하는 특수 주입 방법 중 일부입니다.

심장 내 주사는 화합물을 좌심실로 전달하여 물질이 동맥 순환계로 직접 들어갈 수 있도록 합니다. 후향 안와 경로는 꼬리 정맥 주입의 대안이며 화합물을 정맥 순환으로 전달하는 데 사용됩니다. 그리고 발패드 주사는 동물의 뒷발에 물품을 피하 투여하는 것을 포함합니다. 이 비디오는 이러한 특수 주입 기술의 고려 사항, 절차 및 응용 프로그램을 보여줍니다.

이러한 관리 절차를 시작하기 전에 고려해야 할 몇 가지 배경 정보와 사항부터 시작하겠습니다.

심장 내 투여는 종종 초음파를 사용하여 바늘을 심장의 올바른 위치로 안내하는 방식으로 이루어집니다. 그러나 적절한 랜드마크를 사용하여 올바르게 수행되면 초음파 시각화를 사용하지 않고 투여를 수행할 수 있습니다. 이 절차는 전신 마취제를 사용해야 하며 생존 절차를 위해 동물당 한 번의 주사만 허용됩니다. 일반적으로이 주입에는 27-30 게이지 바늘이 사용되며 최대 투여량은 마우스와 쥐의 경우 각각 100 및 300 마이크로 리터입니다.

후향 안와 경로를 통한 정맥 주사의 경우, 안와 정맥 구조에 대해 충분히 이해하고 있어야 합니다. 마우스는 여러 정맥, 즉 상안와(supraorbital), 등쪽 비강(dorsal nasal), 하부 안구(palpebral) 및 표재성 측두엽(superficial temporal)이 수렴하는 부비동을 가지고 있습니다. 반면 쥐의 경우 여러 정맥의 네트워크 또는 신경총이 있습니다. 주사는 부비동 또는 신경총에 직접 수행됩니다. 심장 내 시술과 마찬가지로 이 시술도 전신 마취를 사용해야 하며, 생존 시술을 위해 하루에 한 번만 주사하고 한 눈에 총 두 번 주사하는 것이 좋습니다. 모든 주입과 마찬가지로 가장 작은 크기의 바늘(일반적으로 27-30 게이지)을 선택해야 하며 권장되는 최대 부피는 150입니까? L은 한쪽 눈.

논란에도 불구하고, 일반적으로 염증 및 종양 성장과 관련된 일부 연구에서는 발패드 주사의 사용이 여전히 필요합니다. 주사는 한 발로만 수행할 수 있으며 양측으로는 수행할 수 없습니다. 그리고 발패드 측정은 명백한 붓기가 발생하는 즉시 매일 수행해야 합니다. 주입에는 29-30 게이지 바늘이 권장되며 권장되는 최대 부피는 50 μL입니다. 주사 후 모든 동물은 통증의 징후, 음식 섭취 수준 및 정상적인 보행 상태에 대해 면밀히 모니터링해야 합니다. 일반적으로 병변이나 종양이 동물의 보행 능력을 방해하거나 음식과 물에 도달하는 데 방해가 될 경우 동물을 안락사시켜야 합니다.

이제 심장 주사부터 시작하여 주사 절차에 대해 알아 보겠습니다. 우리는 쥐에서 절차를 시연 할 것이지만 쥐에 대한 랜드 마크와 프로토콜은 비슷합니다.

첫 번째 단계는 주사기를 준비하는 것입니다. 마우스에는 29게이지 바늘과 1cc 주사기가 적합합니다. 그리고 심장 내 주사의 최대 부피는 100마이크로리터입니다. 용액을 그릴 때 플런저와 사출 재료 사이에 소량의 공기를 남겨 두십시오. 이것은 혈액이 심장에 놓일 때 주사기로 들어갈 수 있도록 하기 위한 것입니다.

시작하려면 흡입제 또는 주사 마취제를 사용하여 동물을 마취하십시오. 이 컬렉션의 다른 비디오에서 전신 마취 유지에 대한 고려 사항을 검토하십시오. 다음으로, 동물을 절연 플랫폼에 등쪽 누운 자세로 놓습니다. 그런 다음 앞다리를 플랫폼에 테이프로 붙이고 엉덩이 위의 복부를 가로질러 수평으로 테이프 조각을 놓습니다. 이것은 동물을 더욱 안정시키고 바늘이 삽입된 후 어떤 움직임도 피하기 위한 것입니다. 그런 다음 면봉을 사용하여 동물의 가슴에 70% 알코올을 적십니다.

주사 부위를 정확히 찾아내려면 먼저 xipoid와 manubrium 흉골을 찾습니다. 그런 다음 두 랜드마크 사이의 중간점을 찾습니다. 이 지점에서 1-2mm 왼쪽, 바늘 삽입 기준입니다. 솜 끝이 있는 애플리케이터를 사용하여 포비돈 요오드를 도포하여 바늘 삽입 부위를 표시합니다.

주입하려면 바늘을 테이블에 수직으로 향하게하고 약 2mm 깊이까지 삽입하십시오. 그런 다음 플런저에 아주 약간의 배압을 가합니다. 산소가 공급된 밝은 빨간색 혈액이 주사기 허브로 들어가야 하며, 이는 적절한 배치를 확인합니다. 주사기를 같은 지점에 놓고 30-60초 동안 천천히 꾸준히 재료를 주입합니다. 급속 주사는 세포가 뭉치고 동맥이 막히거나, 체온보다 현저히 낮은 물질로 인해 시스템에 충격을 주거나, 심실을 확장하거나 심장 박동을 방해할 수 있습니다.

재료가 주사기를 제거하면, 심장 근육을 손상시킬 수 있으므로 옆으로 움직이지 않고 천천히 조심스럽게 바늘을 제거하십시오. 그런 다음 즉시 앞다리와 복부에서 테이프를 풀고 동물을 절연 층 역할을 할 만큼 충분히 깊은 침구가 있는 깨끗한 케이지에 엎드린 자세로 눕힙니다. 이 회수 케이지의 절반은 열원에 있고 마취된 동물은 케이지의 가열된 쪽에 있습니다. 이것은 저체온증을 예방하고 동물이 마취에서 회복됨에 따라 원하는대로 가열 된 쪽에서 벗어날 수 있습니다.

다음은 쥐의 후안와신경총을 활용한 정맥 주사 방법에 대해 알아보겠습니다. 다시 말하지만, 우리는 마우스에 대한 절차를 시연할 것이지만 쥐에 대한 랜드마크와 프로토콜은 비슷합니다.

선택한 주사기에 적절한 바늘을 부착하고 주입 재료를 채웁니다. 일반적으로 가능한 가장 작은 주사기와 최대 부피가 150마이크로리터인 27-30 게이지 바늘을 사용한다는 것을 기억하십시오.

절차를 시작하려면 먼저 동물을 마취하십시오. 그런 다음 측면 누운 자세로 평평한 표면에 놓습니다. 이제 검지 손가락을 머리 꼭대기에, 엄지 손가락을 턱에 놓고 부드럽게 앞뒤로 당깁니다. 이것은 피부를 조이고 안구를 돌출시키는 것입니다. 기관에 압력을 가하거나 공기 흐름을 제한하지 않도록 주의하십시오. 여러 번의 주사를 계획하고 있다면 테트라카인이나 프로파라카인과 같은 국소 안과 마취제를 바르십시오.

45에서 눈의 내측 안각에 바늘을 삽입합니까? 코에 각도를 맞춥니다. 깊이는 결막 조직을 관통하고 안구 안와와 부비동으로 진행하기에 충분해야 합니다. 안와 뒤쪽에서 뼈와 만나지 않아야 합니다. 혈관 파열을 방지하려면 바늘이 삽입된 후 최소한의 움직임이 있는지 확인하십시오. 혈관이 무너질 수 있으므로 흡인하지 마십시오. 느리고 꾸준한 방식으로 기사를 주입하십시오. 그런 다음 바늘을 부드럽게 빼고 눈에 가벼운 압력을 가하여 출혈을 조절하고 지혈을 제공합니다.

마지막으로 마우스와 랫드의 발판 주입 방법을 검토해 보겠습니다. 시작하려면 적절한 바늘을 연결하고 주사기에 올바른 부피를 채웁니다. 이 절차는 의식이 있는 동물에서 수행할 수 있습니다.

동물을 구속 튜브에 넣고 뒷발을 분리하고 억막 위의 피부를 잡고 펴십시오. 주사하기 전에 물이나 알코올로 발을 닦아 이물질을 제거하십시오. 발의 길이를 가로지르는 혈관을 피하기 위해 주사 랜드마크는 중앙에 있지만 정중선에서 약간 벗어나 발가락에 더 가깝습니다.

바늘을 주사 부위에 비스듬하게 놓고 뒤꿈치 쪽으로 향하게 합니다. 발 조직이 급격히 팽창하지 않도록 물품을 천천히 꾸준히 주입하십시오. 이렇게 하면 주입 물질이 피하 공간을 채울 때 발판이 부풀어 오를 수 있습니다. 작은 동물의 발에서는 주사로 인한 붓기가 발뒤꿈치까지 확장될 수 있는 반면, 큰 동물의 경우 더 국소적으로 나타날 수 있습니다.

주사 후 매일 동물을 관찰하고 지속적인 부기가 존재하거나 실험 프로토콜의 결과로 병변 또는 종양이 있는 경우 캘리퍼를 사용하여 발패드 측정을 수행합니다. 이 기구는 발 두께를 밀리미터 단위로 측정하고 붓기를 정량화하는 데 도움이 됩니다.

이제 심장 내, 후향 안와 및 발패드 주사를 활용하는 몇 가지 예시 실험에 대해 논의해 보겠습니다.

심장내 투여의 많은 응용 분야 중 하나는 암 전이의 동물 모델을 개발하는 것입니다. 여기에서 연구자들은 이 경로를 사용하여 뼈 집락화 경향이 있는 종양 세포를 주입했습니다. 그 후 며칠 동안 그들은 X선과 형광 이미징 기술을 사용하여 뼈의 종양 성장을 연구했습니다. 또 다른 연구에서는 호중구를 표지하는 특정 항체를 주입하기 위해 후향 궤도 경로를 사용했습니다. 그런 다음 생체 내 이미징의 도움으로 과학자들은 표지된 세포의 이동 패턴을 추적할 수 있었습니다.

마지막으로, 연구자들은 염증 반응을 분석하기 위해 발패드 주사를 사용하는 경우가 많습니다. 이 실험에서 연구자들은 인간 혈액 샘플에서 말초 혈액 단핵 세포를 분리하여 다른 테스트 항원과 혼합하고 용액을 동물의 발바닥에 주입했습니다. 마지막으로, 그들은 서로 다른 항원으로 인한 부종 반응을 정량화하기 위해 발 측정을 수행했습니다.

여러분은 일반적이고 전문화된 화합물 투여 기술에 대한 JoVE의 마지막 기사를 시청했습니다.

요약하자면, 첫 번째 부분에서는 가장 일반적인 비경구 경로를 검토했습니다. 두 번째 장에서는 경장 및 국소 절차에 대해 논의했습니다. 세 번째 편에서는 신생아의 피내(intradermal), 비강내(intranasal), 두개내(intracranial)와 같은 비정형적 절차의 첫 번째 세트를 다루었습니다. 마지막으로, 여기에서는 생물의학 연구자들이 특정 목적을 위해 실험실에서 사용하는 세 가지 추가 경로에 대해 논의했습니다.

이 시리즈를 시청한 후에는 다양한 투여 기술에 대해 훨씬 더 잘 이해하게 될 것이며 이러한 복합 투여 프로토콜과 관련된 일반적이고 구체적인 고려 사항도 알아야 합니다. 항상 그렇듯이 시청해 주셔서 감사합니다!