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출처: 케이 스튜어트, RVT, RLATG, CMAR; 발레리 A. 슈뢰더, RVT, RLATG. 노틀담 대학교, IN
많은 동물 실험은 장기와 조직의 수확 및 테스트에서 수집되는 최종 데이터 수집 시간 지점에 의존합니다. 장기 및 조직의 수집을 위한 적절한 방법의 사용은 견본의 질 및 조직의 시험을 위해 수집되는 데이터의 분석에 영향을 미칠 수 있습니다. 동물의 안락사 방법은 또한 견본의 질에 영향을 미칠 수 있습니다. 이 원고는 쥐에 대한 적절한 부검 기술을 설명합니다.
1. 외부 검사
병변과 질량에 대한 신체의 육안 검사를 포함하는 신체의 총 외부 검사는 부검의 초기 단계로 수행되어야합니다. 헤어 코트는 탈모 부위를 검사해야합니다. 치아와 손톱은 과도한 성장이나 마모를 평가합니다. 입, 나레, 눈, 항문 및 생식기 개구부에서 모피의 얼룩을 주목해야합니다. 테이프 테스트, 피부 긁기 및 펠트 검사는 외부 기생충을 감지하기 위해 수행되어야합니다 (아래 절차 참조).
2. 복강 내부 총검사
3. 복부 장기
4. 흉부 구멍
5. 머리
장기 및 조직 수확의 부검 의미 사후 검사는 수확 된 장기의 분석에서 수집 된 최종 데이터 수집 시간 지점에 의존하는 많은 실험실 실험의 필수적인 구성 요소입니다. 따라서, 절차가 수집된 견본의 질에 현저하게 영향을 미칠 수 있기 때문에, 정확한 진단 부검 및 조직 수확 기술을 배우는 것이 중요합니다. 이 프리젠 테이션은 실험실 동물에서 복부, 생식 및 흉부 장기의 해부 및 추출 방법을 검토합니다.
절차를 시작하기 전에 동물 식별 번호, 성별, 주거 조건, 생년월일, 사망 일자, 연구 / 프로토콜 번호 및 원칙 조사자의 이름을 포함하는 양식을 시작해야합니다.
다음으로 해부 영역을 준비합니다. 가위, 집게, 멸균 메스 블레이드, 뼈 커터, 무딘 프로브, 작은 주걱 및 흡수할 수 없는 봉합사 물질을 포함하는 부검을 위해 지정된 벤치 덮개, 해부 트레이, 계측기를 내려 놓습니다. 조직학적 검사를 위한 장기 및 조직 수확은 조직이 고정 된 해결책에서 보존되어야 합니다. 달리 명시되지 않는 한 가장 일반적으로 사용되는 고정은 10% 중립 버퍼링 포르말린입니다. 조직 샘플은 고정 용액의 충분한 침투를 허용하기 위해 두께가 0.5-1cm여야합니다. 고정은 부패, 자동 lysis 및 퍼트 레파션을 방지합니다. 진행 중인 생화학 적 반응을 중지; 치료된 조직의 기계적 강도와 안정성을 증가시킬 수 있다.
동물의 안락사 방법은 또한 견본의 질에 영향을 미칠 수 있습니다. 쥐와 쥐에 대 한 가장 일반적으로 사용 되는 안락 사 방법은 이산화탄소 가스의 과다 복용. 동물은 챔버에 배치되는 자신의 홈 케이지에 남아 있으며, CO2는 점차적으로 챔버 볼륨 / 분의 10-30 %의 변위 비율로 챔버로 도입된다. 이것은 동물이 탄산에 의한 nociceptor 활성화와 연관되는 고통의 인식의 앞에 의식을 분실하는 원인이 됩니다. 호흡 정지가 발생하고 동물이 죽을 때까지 흐름은 챔버에서 유지됩니다.
안락사에 이어 먼저 병변과 질량에 대한 시체를 육안으로 검사하여 초기 외부 검사를 수행, 과도한 치아 성장, 또는 입에 모피의 얼룩, 나레, 귀, 눈과 항문 및 생식기 개구부. 보증하는 경우, 외부 기생충을 감지하기 위해 테이프 테스트, 피부 긁힘 및 펠트 검사를 수행합니다. 외부 검사가 완료되면 복강으로 시작하여 부검을 시작할 때입니다. 조직 샘플을 제거하기 전에 조직에서장기를 관찰하는 것이 중요합니다.
피부를 절제하기 시작하려면 암컷의 골반과 남성의 프레덕트 위에 작은 컷을 놓습니다. 그런 다음 무딘 해부 기술을 사용하여 근막과 근육에서 피부를 풀어 주세요. 무딘 해부는 조직이 분리되고 절단없이 노출되는 근본적인 구조물이 있는 해부학 적인 해부에 있는 기술입니다. 이 기술에서 가위는 조직을 잘라내기보다는 조직을 분리하는 데 사용됩니다. 닫힌 팁은 조직으로 밀려 난 다음 자연 평면을 따라 조직을 분할하기 위해 열립니다. 이 과정은 조직의 스트레칭이 인접한 장기와 혈관에 손상을 초래할 수 있기 때문에 인내와 섬세한 터치가 필요합니다. 그런 다음 턱에 상처를 확장합니다. 다음으로, 횡방향은 뒷다리와 후방으로 앞쪽을 잘라내고, 무딘 해부를 사용하여 자궁 경부 부위와 가슴을 노출시합니다. 목에 있는 경마및 경동맥 혈관을 파열하지 않도록 여분의 주의를 기울여야 합니다.
여성의 경우, 피부가 절제된 상태, 주혈관의 흉골 꼭대기에서 복부 표면에 생식기 개구부까지 유방 조직을 관찰한다. 양쪽에서 측면으로 확장됩니다. 수유 또는 임신 한 여성은 유방 조직 볼륨을 증가시킬 것이며 우유가 존재할 수 있습니다. 유방 땀샘을 절제하려면 집게로 조직 가장자리를 잡고 무딘 해부를 사용하여 피부에 부착물을 풀어주세요. 선이 분리되면 후속 조직학적 분석을 위한 고정 솔루션에 배치할 수 있습니다.
이 단계에서는 목을 따라 마누브리움 흉골까지 이어지는 하악침선선과 짝을 이루고 하악에 위치한 담수성 침샘을 관찰할 수 있습니다. 이 땀샘의 제거는 혈관의 파열을 방지하기 위하여 자궁 경관 지역에서 일할 때 무딘 해부 및 추가 배려를 요구합니다. 일단 근본적인 근육에서 해방되면, 땀샘을 들어 올리고 잔류 부착물을 분리하십시오. 땀샘은 고정의 침투를 허용하기 위해 적어도 하나의 컷이 필요합니다.
또한, 당신은 기관지의 양면에 후두개에서 확장 기관체를 볼 수 있습니다. 그것은 유연한 능선, 광자 튜브입니다. 일반적으로 명확하지만 CO2를 가진 안락사는 거품이 맑은 액체처럼 보이는 폐와 기관에 액체 축적을 일으킬 수 있습니다. 피하 지방도이 지역에 존재합니다. 수량 및 증착을 위해 평가합니다. 뚱뚱한 동물은 피부가 두꺼워진 느낌으로 많은 양의 지방을 가질 수 있습니다.
신체 구멍을 열기 전에 복부, 늑간 및 노출된 목 근육 및 팔다리를 관찰하여 두껍게 하거나 질량 또는 변색을 합니다. 신체 구멍을 열려면 먼저 노출된 복근의 가장 caudal 지점에서 작은 횡반 절단을 하십시오. 그런 다음 장기에서 근육을 들어 올리고 라인나 알바를 따라 xiphoid로 자른다. 다음으로, 근육을 중간선에서 양쪽의 뒷다리 바로 위로 옆으로 해부합니다. 마지막으로 양쪽의 갈비뼈 곡선을 따라 잘라냅니다. 일단 바디 캐비티가 열리면, 복부 지방의 양과 축적을 평가하십시오. 건강한 동물은 복부 지방 패드와 구멍의 등대 표면을 따라 일부 지방을해야합니다. 이 조직의 색상을 관찰하고 이상을 주의하십시오.
이제 우리는 복부 기관의 수확을 시작할 준비가되어 있습니다. 먼저 진한 빨간색이고 위장의 낮은 곡률을 따라 위치한 비장을 찾는 것으로 시작합니다. 그것은 모양과 약간 매트 표면으로 일반이어야한다. 비장을 제거하려면 장기를 들어 올리고 위장에 부착물을 잘라낸다.
위장은 식도의 말단 끝에 위치하고 있습니다. 그것은 근육과 선 부분을 차별화, 두 톤 것으로 보인다. 음식의 존재를 느껴보십시오. 공복은 질병을 나타낼 수 있으므로 주의해야 합니다. 내용이 복강에서 장기를 오염시킬 것이기 때문에 위를 자르지 마십시오.
소장은 위장에 비열하고 열등하게 연결되어 있습니다. 소장에는 세 개의 뚜렷한 섹션이 있습니다. 첫 번째는 십이지장입니다 - 제주의 시작에 후방 위 괄약근에서 짧은 섹션. 담관은 여기에 들어가고 췌장 조직은 소장의이 부분에 더 단단히 부착됩니다. 제주는 중심 부분입니다. 림프조직으로 구성된 작은 타원형 부위인 페이어의 패치는 제주넘과 일루의 표면에서 관찰될 수 있다. 장막은 소장의 교차점인 소장에서 종결되는 소장 중 가장 긴 부분입니다. cecum 색상에 녹색 표시 하 고 매우 부드러운.
대장은 세쿰에서 항문까지 계속됩니다. 배설물 펠릿이 이 구조의 루멘 내에서 시각화될 수 있으므로 쉽게 식별할 수 있습니다. 크고 작은 내장은 혈관, 지방 및 림프절을 포함하는 막인 막인 막에 의해 몸에 고정됩니다. 이것은 장 내 제거 의 앞에 확대된 림프절 및 어떤 질량든지 검사되어야 합니다. 췌장은 위장의 후방에 위치한 확산 기관입니다. 회색색에 밝은 황갈색이며 불규칙한 가장자리가 있는 여러 개의 작은 엽으로 구성되어 있습니다. 췌장을 수확하려면 장기를 잡고 주변 막질 조직에서 부드럽게 애타게합니다. 이것은 장 내의 제거 전에 수행해야합니다.
위장으로 시작하여 항문으로 확장한 원피스로 전체 항을 제거하려면 먼저 직장에 합자를 배치한 다음 항문으로 앞쪽에 있는 대장을 잘라냅니다. 다음으로, 식도와 위장의 접합에 합자를 배치, 그 다음에 전체 장관을 해제 할 수 있으며, 모든 membranous 부착이 절단. 모든 것은 다음 간질에서 분리 될 수 있습니다, 섹션으로 잘라 고정.
신장은 뒤쪽의 근육에 대하여 있는 쌍기관입니다. 그들은 어두운 신장 콩의 크기와 색상이어야하며 매끄러운 표면을 가져야합니다. 신장에 즉시 전방은 작은 밝은 분홍색 결절로 나타나는 부신이다.
신장을 제거하려면 집게를 사용하여 분리하고 장기와 요관 사이를 잘라냅니다. 그런 다음 거친 외부 층을 벗겨 서 표면을 검사 할 수 있습니다. 긴 축을 따라 한 신장을 반으로 자르고 다른 신장은 반대로 자른다. 내의 모든 모래는 결정 이나 미네랄 예금의 존재를 나타낼 수 있습니다. 마지막으로, 색상이 어두운 빨간색이며, 그 여백은 선명한 가장자리로 부드럽게해야 간을 제거합니다. 간을 다룰 때는 간을 다룰 때, 그것은 friable 조직이기 때문에 주의해야 합니다. 기관의 무결성에 어떤 중단은 바디 구멍으로 혈액 이새는 귀착될 것이고 그밖 기관을 모호하게 할 것입니다.
간을 제거하기 위해 먼저 횡격막에서 멀리 떨어진 엽을 부드럽게 반사하고 혈관을 통해 구조에 절단합니다. 다음으로, 횡격막쪽으로 다시 간을 반사하고 중앙에 모든 엽을 연결하는 섬유 성 노드를 파악합니다. 마지막으로, 장과 위장에 대한 모든 첨부 파일을 끊으면서 장기를 들어 올립니다.
여성 생식 시스템은 자궁과 난소에 구성됩니다. 자궁은 양쪽 방향으로 확장 뿔짧은 Y 자형 구조입니다. 뿔은 나팔관과 난소에서 종료됩니다 - 신장 바로 아래에 위치합니다. 난소는 여포의 다른 성숙 단계로 인해 거친 표면을 가질 것이다.
난소를 제거하려면 동맥 부착물을 앞쪽으로 자르고 나팔관을 후방으로 자릅니다. 자궁을 제거하려면 자궁 경부 아래를 부드럽게 잡고 잘라냅니다. 절단 후, 몸과 자궁의 뿔을 들어 올려 신체 구멍의 부착물을 파괴합니다.
남성에서, 당신은 또한 프레추에 바로 앞에 위치한 preputial 땀샘을 관찰 할 수 있습니다. 그들은 큰 표시 하 고 거품 모양과 노란색에 회색. 이 땀샘을 제거하고 고정하는 것은 하안 증선과 유사합니다. 또한, 남성 생식 시스템은 정액 소포, 전립선 및 고환으로 구성됩니다. 정액 소포는 백색, "램의 뿔 모양" 구조는 오줌 방광에 앞쪽에 위치하고 전립선에 있는 중간선에 붙어 있습니다.
전립선은 일반적으로 밝은 황갈색으로 베이스의 오줌 방광을 둘러싸고 있습니다. 고환을 시각화하려면 하복부에 있는 복부 지방 패드를 잡고 앞쪽으로 당깁니다. 이것은 검사를 허용하기 위하여 음낭에서 고환을 당깁니다. 표면은 표면에 분명한 미세한 혈관화로 부드러워야 합니다.
부피는 고환의 낮은 마진을 따라 상단을 향해 테이퍼입니다. 꽃병 은 부피의 끝에 부착하고 전립선으로 다시 리드. 고환을 제거하려면 음낭의 부착물을 잘라 내고 꽃병을 잘라냅니다. 전립선 및 정액 소포를 제거하려면 오줌 방광의 기초를 잡고 전립선 아래 첨부 파일을 분리하면서 들어 올립니다.
흉부 구멍 내의 장기로 이동. 중요한 구조물을 노출하려면 부착물에서 갈비뼈에 다이어프램을 제거합니다. 다음으로, 양면의 갈비뼈를 통해 마누브리움 흉골 의 꼭대기까지 잘라낸 다음 뼈를 두개골 을 비정형 장기를 시각화합니다.
폐는 일반적으로 밝은 분홍색 색상, 매끄러운 표면과 질감에 해면. 그러나 CO2를 가진 안락사는 전체 폐 표면을 커버할 수 있는 어두운 빨간 얼룩의 결과로 폐 출혈을 일으키는 원인이 될 수 있습니다.
심장은 짙은 빨간색이고 심실은 근육질의 근육이며, 이는 촉감에 단단히 느껴집니다. 아드리아는 빨간색으로 어둡고 심실 의 상단에 앉아 있습니다. 그들은 훨씬 적은 근육과 flaccid 나타납니다. 심근 낭이라고 불리는 얇은 반투명 막이 심장을 둘러싸고 있습니다.
흉선은 심장앞쪽에 위치하며 기관 지 위에 자리 하고 있습니다. 그것은 질감에 부드러운해야합니다. 당신은 전에 설명 한 대로 기관을 볼 수 있습니다., 그리고 식도 는 기관 바로 뒤에 거짓말 하 고 심장 뒤에 거짓말 하 고 위장에 다이어프램을 통과 하는 매우 얇은 튜브.
흉부 구멍에서 장기를 제거하려면, 흉선 바로 위에 기관지를 잡고 서 포셉에 단지 전방절단을 합니다. 손아귀를 유지하면서 기관차를 caudally 들어 올리고 폐의 부착물을 흉곽의 척추 표면에 잘라내립니다. 식도는 가슴 구멍이없는 심장과 폐를 들어 올릴 수 있도록 절단해야 할 수도 있습니다.
심장이 신체를 위해 제거 된 후, 잔류 혈액과 혈전을 제거하기 위해 식염수로 씻어 내거나 대문을 통해 고정으로 채웁니다. 폐가 절제되면 기관 주위에 느슨한 합자를 배치하십시오. 다음으로, 기관지의 루멘에 고정제를 포함하는 주사기에 부착된 바늘을 실어, 합자를 조입니다. 그런 다음 폐가 팽창 될 때까지 고정을 주입하십시오. 마지막으로, 바늘을 제거하고 누출을 방지하기 위해 합자를 더 조입니다.
설치류 부검 및 조직 수확에 관한 지식의 이 호흡으로, 이러한 절차와 관련된 현재 실험실 실험의 일부를 살펴 보자.
진단 부검은 암 전이 실험에서 일반적인 종점입니다. 이 예에서, 조사원은 설치류의 비장에 암세포를 주입한 다음, 30~60일 후에, 중요한 간 전이를 드러내는 부검을 실시했습니다.
조직 추출은 종종 샘플의 미세한 해부학 연구에 도움이되는 조직학적 분석이 뒤따릅니다. 고정, 포함, 단면 및 조직의 염색 프로토콜에 따라, 연구원은 이 기관에 있는 현미경 구조물을 공부하고, 원자 수준에서 유전 또는 약리학적 인 내정간섭의 효력을 밝힐 수 있습니다.
때때로 연구원은 혈관 신생과 같은 생리적 과정을 연구하기 위해 조직을 제거합니다. 여기서, 실험자는 혈관 성장을 자극하기 위하여 쥐의 막질 조직을 외장했습니다. 그런 다음, 그들은 몇 가지 섹션을 수확하고 혈관 네트워크 성장에 관련된 세포 역학을 연구하기 위해 혈관의 세포를 얼룩지게하는 마커로 처리했습니다.
실험실 동물에서 진단 부검 및 조직 수확 단계를 자세히 설명하는 JoVE의 비디오를 방금 시청했습니다. 추출 절차가 수집 된 데이터의 해석에 영향을 미치지 않도록 장기 제거 및 보존에 적합한 기술을 사용하는 것이 중요합니다. 언제나처럼, 시청주셔서 감사합니다!
장기 및 조직 적출에 대한 부검을 의미하는 사후 검사는 적출된 장기의 분석에서 수집된 최종 데이터 수집 시점에 의존하는 많은 실험실 실험의 필수 구성 요소입니다. 따라서 이 절차가 수집된 샘플의 품질에 큰 영향을 미칠 수 있으므로 올바른 진단용 부검 및 조직 채취 기술을 배우는 것이 중요합니다. 이 프레젠테이션은 실험실 동물에서 복부, 생식 및 흉부 장기를 해부하고 추출하는 방법을 검토합니다.
절차를 시작하기 전에 동물 식별 번호, 성별, 주거 조건, 생년월일, 사망일, 연구/프로토콜 번호 및 연구 책임자의 이름 등 동물의 완전한 이력을 포함하는 양식을 시작해야 합니다.
다음으로 해부 부위를 준비합니다. 벤치 덮개, 해부 트레이, 가위, 집게, 멸균 메스 날, 뼈 절단기, 무딘 프로브, 작은 주걱 및 흡수되지 않는 봉합사 재료를 포함하여 부검용으로 지정된 도구를 놓습니다. 조직학적 검사를 위한 장기 및 조직 적출은 조직을 고착 용액에 보존해야 합니다. 달리 명시되지 않는 한, 가장 일반적으로 사용되는 정착제는 10% 중성 완충 포르말린입니다. 조직 샘플의 두께는 고정액이 충분히 침투할 수 있도록 0.5-1cm여야 합니다. 고정은 부패, 자가 분해 및 부패를 방지합니다. 진행중인 생화학 반응을 중단시킵니다. 처리된 조직의 기계적 강도와 안정성을 높일 수 있습니다.
동물의 안락사 방법도 샘플의 품질에 영향을 미칠 수 있습니다. 생쥐와 쥐에게 가장 일반적으로 사용되는 안락사 방법은 이산화탄소 가스를 과다 투여하는 것입니다. 동물은 챔버에 놓인 가정용 케이지에 남겨지고 CO2는 챔버 부피/분의 10-30%의 변위율로 점차적으로 챔버 내부로 유입됩니다. 이로 인해 동물들은 탄산에 의한 통각(유해) 수용기 활성화와 관련된 통증을 인식하기 전에 의식을 잃게 됩니다. 그런 다음 호흡 정지가 발생하고 동물이 죽을 때까지 챔버에서 흐름을 유지합니다.
안락사 후에는 먼저 사체에 병변과 종괴, 과도한 치아 성장, 입, 코, 귀, 눈, 항문 및 생식기 입구의 털 얼룩이 있는지 육안으로 검사하여 초기 외부 검사를 수행합니다. 필요한 경우 테이프 테스트, 피부 긁기 및 펠트 검사를 수행하여 외부 기생충을 감지합니다. 외부 검사가 완료되면 복강부터 시작하여 부검을 시작할 때입니다. 조직 샘플을 제거하기 전에 장기를 현장에서 관찰하는 것이 중요합니다.
피부를 절제하기 시작하려면 암컷의 경우 골반 바로 앞에, 수컷의 경우 포피 위에 작은 절개를 놓습니다. 그런 다음 둔기 해부 기술을 사용하여 근막과 근육의 피부를 느슨하게 합니다. 둔기 해부는 조직을 분리하고 기본 구조를 절단하지 않고 노출시키는 해부학 적 해부 기술입니다. 이 기술에서 가위는 조직을 절단하는 것이 아니라 조직을 벌리는 데 사용됩니다. 닫힌 팁은 조직 안으로 밀어 넣은 다음 열어 자연면을 따라 조직을 분할합니다. 이 과정에는 인내심과 섬세한 손길이 필요한데, 조직이 늘어나면 인접한 장기와 혈관이 손상될 수 있기 때문입니다. 그런 다음 상처를 턱까지 연장합니다. 다음으로, 뒷다리 앞쪽과 앞다리 뒤쪽을 가로 절개하고 둔기 절개를 사용하여 경추 부위와 가슴을 노출시킵니다. 목의 경정맥 및 경동맥 혈관이 파열되지 않도록 각별한 주의를 기울여야 합니다.
여성의 경우, 피부가 절제된 상태에서 마누브리움의 흉골 상단에서 복부 표면의 생식기 개구부까지 유방 조직을 관찰합니다. 양쪽에서 측면으로 확장됩니다. 수유 중이거나 임신한 여성은 유방 조직의 부피가 증가하고 모유가 있을 수 있습니다. 유선을 절제하려면 집게로 조직 가장자리를 잡고 둔기 절개를 사용하여 피부에 부착된 부분을 느슨하게 합니다. 분비샘이 분리되면 후속 조직학적 분석을 위해 고정액에 넣을 수 있습니다.
이 단계에서는 턱밑 침샘을 관찰할 수 있는데, 이 침샘은 짝을 이루어 하악골에 위치하며 목을 따라 마누브리움 흉골까지 뻗어 있습니다. 이러한 분비샘을 제거하려면 둔기로 절개해야 하며, 경추 부위에서 작업할 때 혈관 파열을 방지하기 위해 각별한 주의가 필요합니다. 밑에 있는 근육에서 벗어나면 땀샘을 들어 올리고 남아 있는 모든 부착물을 잘라냅니다. 땀샘은 고정제가 침투할 수 있도록 적어도 한 번의 절단이 필요합니다.
또한 후두개에서 기관지의 분기점까지 확장되는 기관을 볼 수 있습니다. 융기된 연골관으로 유연합니다. 평상시에는 맑지만, CO2를 이용한 안락사는 폐와 기관에 거품이 많은 맑은 액체처럼 보이는 액체가 축적될 수 있습니다. 피하 지방도 이 부위에 존재할 것입니다. 수량과 증착에 대해 평가하십시오. 비만 동물은 피부가 두꺼워지는 느낌과 함께 지방이 많을 수 있습니다.
체강을 열기 전에 복부, 늑간 및 노출된 목 근육 및 팔다리에 두꺼워짐, 덩어리 또는 변색이 있는지 관찰하십시오. 체강을 열려면 먼저 노출된 복부 근육의 가장 꼬리 지점에 작은 가로 절단을 합니다. 그런 다음 장기에서 근육을 들어 올리고 linea alba를 따라 xiphoid까지 자릅니다. 다음으로, 정중선에서 양쪽 뒷다리 바로 위까지 옆으로 근육을 절개합니다. 마지막으로 양쪽 갈비뼈의 곡선을 따라 자릅니다. 체강이 열리면 복부 지방의 양과 축적량을 평가합니다. 건강한 동물은 복부 지방 패드와 충치의 등쪽 표면을 따라 약간의 지방을 가지고 있습니다. 이 조직의 색깔을 관찰하고 이상이 있는지 기록하십시오.
이제 복부 장기 적출을 시작할 준비가 되었습니다. 짙은 빨간색이고 위의 아래쪽 곡률을 따라 위치한 비장을 찾는 것으로 시작하십시오. 모양이 규칙적이고 표면이 약간 무광택이어야 합니다. 비장을 제거하려면 장기를 들어 올리고 위에 부착된 부착물을 잘라냅니다.
위는 식도의 말단에 있습니다. 그것은 근육과 선 부분을 구별하는 투톤으로 보입니다. 음식의 존재를 느껴보십시오. 공복은 질병의 징후일 수 있으므로 주의해야 합니다. 내용물이 복강의 장기를 오염시킬 수 있으므로 위를 자르지 마십시오.
소장은 원위와 아래쪽으로 연결되어 있습니다. 소장에는 세 가지 뚜렷한 부분이 있습니다. 첫 번째는 십이지장(duodenum)으로, 위 후괄약근에서 제주눔(jejunum)의 시작 부분까지의 짧은 부분입니다. 담관이 여기로 들어가고 췌장 조직이 소장의 이 부분에 더 단단히 부착됩니다. 제주눔은 중앙 부분입니다. 림프 조직으로 구성된 작은 타원형 영역인 Peyer's Patches는 jejunum과 ileum의 표면에서 관찰할 수 있습니다. 회장은 소장과 대장의 교차점에 위치한 맹장에서 끝나는 소장의 가장 긴 부분입니다. 맹장은 녹색을 띠며 매우 부드럽습니다.
대장은 맹장에서 항문까지 계속됩니다. 이 구조의 루멘 내에서 배설물 알갱이를 시각화할 수 있으므로 쉽게 식별할 수 있습니다. 소장과 대장은 혈관, 지방 및 림프절을 포함하는 막인 장간막에 의해 신체에 고정되어 있습니다. 이것은 장관을 제거하기 전에 비대해진 림프절과 종괴에 대해 검사해야 합니다. 췌장은 위 뒤쪽에 위치한 확산 기관입니다. 그것은 밝은 황갈색에서 회색이며 불규칙한 가장자리가있는 여러 개의 작은 엽으로 구성됩니다. 췌장을 적출하려면 장기를 잡고 주변 장간막 조직에서 부드럽게 놀립니다. 이것은 장관을 제거하기 전에 수행해야 합니다.
위부터 시작하여 항문까지 이어지는 전체 요로를 한 조각으로 제거하려면 먼저 직장에 결찰을 한 다음 항문 바로 앞쪽에 있는 대장을 절단합니다. 다음으로, 식도와 위의 접합부에 결찰을 삽입한 다음 전체 장관을 들어 올리고 막질 부착물을 절단할 수 있습니다. 그런 다음 전체를 장간막에서 분리하고 섹션으로 자르고 고정할 수 있습니다.
신장은 등 근육에 위치한 쌍을 이루는 기관입니다. 짙은 강낭콩의 크기와 색이어야 하며 표면이 매끄러워야 합니다. 신장 바로 앞쪽에는 부신이 있으며 작은 연한 분홍색 결절로 나타납니다.
신장을 제거하려면 겸자를 사용하여 신장을 분리하고 장기와 요관 사이를 절단합니다. 그런 다음 거친 외부 층을 벗겨내어 표면을 검사할 수 있습니다. 한쪽 신장은 장축을 따라 반으로 자르고 다른 하나는 가로로 자릅니다. 내부의 모래는 결정 또는 광물 침전물이 있음을 나타낼 수 있습니다. 마지막으로 짙은 빨간색을 띠고 가장자리가 매끄럽고 가장자리가 파삭파삭해야 하는 간을 제거합니다. 간은 부서지기 쉬운 조직이므로 취급할 때 주의해야 합니다. 장기의 무결성이 손상되면 혈액이 체강으로 누출되어 다른 장기가 가려집니다.
간을 제거하려면 먼저 횡격막에서 엽을 부드럽게 반사하고 구조 앞쪽의 혈관을 절단합니다. 다음으로, 간을 횡격막 쪽으로 다시 반사시키고 모든 엽을 중앙으로 연결하는 섬유결절을 잡습니다. 마지막으로, 장기와 위에 대한 모든 부착물을 절단하면서 장기를 들어 올립니다.
여성의 생식 기관은 자궁과 난소로 구성되어 있습니다. 자궁은 뿔이 양방향으로 뻗어 있는 짧은 Y자 모양의 구조입니다. 뿔은 신장 바로 아래에 위치한 나팔관과 난소에서 끝납니다. 난소는 난포의 성숙 단계가 다르기 때문에 표면이 거칠어집니다.
난소를 제거하려면 동맥 부착물을 앞쪽으로 자르고 나팔관을 뒤쪽으로 절단합니다. 자궁을 제거하려면 자궁 경부 아래를 부드럽게 잡고 자릅니다. 절단 후 몸체와 자궁의 뿔을 들어 올려 체강의 부착물을 부수십시오.
남성의 경우 포피 바로 앞쪽에 위치한 포피선도 관찰할 수 있습니다. 그들은 크게 보이며 거품이 많은 것처럼 보이는 회색에서 황색을 띱니다. 이 땀샘의 제거 및 고정은 턱밑샘과 유사합니다. 또한 남성 생식 기관은 정낭, 전립선 및 고환으로 구성됩니다. 정낭은 흰색이며 "숫양의 뿔 모양" 구조로 방광 앞쪽에 위치하며 전립선의 정중선에 부착되어 있습니다.
전립선(일반적으로 밝은 황갈색)은 기저부의 방광을 둘러싸고 있습니다. 고환을 시각화하려면 하복부에 위치한 복부 지방 패드를 잡고 앞으로 당깁니다. 이렇게 하면 음낭에서 고환을 당겨 검사할 수 있습니다. 표면은 매끄러워야 하며 표면에 미세한 혈관화가 분명해야 합니다.
부고환은 고환의 아래쪽 가장자리를 따라 있으며 위쪽으로 갈수록 가늘어집니다. 정관은 부고환의 끝에 부착되어 전립선으로 다시 연결됩니다. 고환을 제거하려면 음낭의 부착물을 자르고 정관을 자릅니다. 전립선과 정낭을 제거하려면 방광의 바닥을 잡고 전립선 아래의 부착물을 절단하면서 들어 올립니다.
흉강 내의 장기로 이동합니다. 중요한 구조를 노출시키려면 갈비뼈에 부착 된 다이어프램을 제거하십시오. 다음으로, 흉곽 흉골 상단까지 양쪽의 흉곽을 측면으로 절단한 다음 뼈를 두개골로 반사하여 흉기관을 시각화합니다.
폐는 일반적으로 밝은 분홍색이며 표면이 매끄럽고 해면질입니다. 그러나 CO2를 이용한 안락사는 폐출혈을 일으켜 폐 표면 전체를 덮을 수 있는 검붉은 반점을 유발할 수 있습니다.
심장은 짙은 빨간색이고 심실은 근육질로 되어 있어 만졌을 때 단단하게 느껴집니다. 심방은 더 짙은 빨간색이며 심실 상단에 있습니다. 그들은 훨씬 덜 근육질이고 흐물흐물해 보입니다. 심낭(pericardial sac)이라고 하는 얇고 반투명한 막이 심장을 둘러싸고 있습니다.
흉선은 심장 앞쪽에 위치하며 기관 위에 있습니다. 질감이 부드러워야 합니다. 앞에서 설명한 것처럼 기관을 볼 수 있으며, 식도는 기관 바로 뒤와 심장 뒤에 있으며 횡격막을 통해 위로 가는 매우 얇은 관입니다.
흉강에 있는 장기를 제거하려면 먼저 흉선 바로 위의 기관을 잡고 겸자 바로 앞쪽에 수직으로 절단합니다. 움켜쥔 상태를 유지하면서 기관을 꼬리 쪽으로 들어 올리고 흉곽의 척추 표면에 대한 폐의 부착물을 모두 잘라냅니다. 흉강에서 심장과 폐를 들어 올릴 수 있도록 식도를 절단해야 할 수도 있습니다.
몸에서 심장을 제거한 후 식염수로 씻어내어 잔여 혈액과 혈전을 제거하거나 대동맥을 통해 고정제로 채웁니다. 폐가 절제되면 기관 주위에 느슨한 결찰을 놓습니다. 다음으로, 고정액이 들어있는 주사기에 부착된 바늘을 기관 내강에 끼우고 합자를 조입니다. 그런 다음 폐가 부풀어 오를 때까지 고정제를 주입합니다. 마지막으로 바늘을 제거하고 합자를 더 조여 누출을 방지합니다.
설치류 부검 및 조직 적출에 대한 지식의 숨결을 바탕으로, 이러한 절차와 관련된 현재 실험실 실험 중 일부를 살펴 보겠습니다.
진단적 부검(diagnostic necropsy)은 암 전이 실험에서 흔히 볼 수 있는 종말점입니다. 이 예에서 연구자들은 설치류의 비장에 암세포를 주입한 다음 30일에서 60일 후에 부검을 실시하여 상당한 간 전이를 밝혔습니다.
조직 추출 후에는 종종 조직학적 분석이 이어지며, 이는 샘플의 현미경 해부학 연구에 도움이 됩니다. 조직의 고정, 포매, 절편 및 염색 프로토콜을 따름으로써 연구자들은 이러한 기관의 미세한 구조를 연구하고 원자 수준에서 유전적 또는 약리학적 개입의 효과를 밝힐 수 있습니다.
때때로 연구자들은 혈관 신생과 같은 생리적 과정을 연구하기 위해 조직을 제거합니다. 여기서 실험자들은 쥐의 장간막 조직을 외부로 분리하여 혈관 성장을 자극했습니다. 그런 다음, 그들은 몇 가지 절편을 채취하여 혈관 세포를 염색하는 마커로 처리하여 혈관 네트워크 성장과 관련된 세포 역학을 연구했습니다.
위치방금 실험실 동물의 진단적 부검 및 조직 적출 단계를 자세히 설명하는 JoVE의 비디오를 시청했습니다. 장기 적출 및 보존을 위한 적절한 기술을 사용하여 적출 절차가 수집된 데이터의 해석에 영향을 미치지 않도록 하는 것이 중요합니다. 언제나 그렇듯이 시청해 주셔서 감사합니다!
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