화합물 투여 II

많은 실험에서는 경구 또는 국소 경로를 통해 화합물을 동물에 투여하여 실험 물질의 자연 섭취를 더 잘 모방할 것을 요구합니다.

경구 투여의 경우, 화합물은 식수에 용해되거나 동물이 섭취하는 음식에 통합 될 수 있습니다. 경구 투여의 또 다른, 더 정확한 방법은 큰 바늘을 사용하여 화합물을 위에 직접 넣는 구강 위입니다. 반면에, 국소 제제는 피부 표면에 직접 배치 할 수 있으며, 일반적으로 적용되는 부위에만 영향을 미치도록되어 있습니다. 이러한 각 전략에는 장점과 한계가 있으며 이에 대해서는 이 비디오에서 설명합니다. 그 다음에는 실험실 동물에서 이러한 화합물 투여 기술을 수행하는 방법과 그 응용 프로그램 중 일부를 시연합니다.

프로토콜에 대해 알아보기 전에 이러한 기술의 고려 사항, 이점 및 단점을 검토해 보겠습니다. 정제, 캡슐 또는 액체를 사용한 경구 투여는 인간에게 가장 일반적으로 사용되는 약물 투여 방법입니다. 그러나 정제와 캡슐은 설치류에게는 실용적이지 않으므로 일반적인 경구 투여는 화합물을 식수나 음식에 용해시켜 수행됩니다.

식수를 통해 투여할 때 자당은 기호성을 향상시키기 위해 종종 물에 첨가됩니다. 그러나 정상적인 물 섭취를 장려하고 단 맛 때문에 과도하게 마시지 않도록 미세하게 균형을 이루어야 합니다. 좋은 규칙은 10% 자당 용액으로 시작한 다음 섭취량에 따라 조정하는 것입니다. 동물을 경구로 투여하는 또 다른 방법은 특수 식품을 사용하는 것입니다. 펜벤다졸(fenbendazole)과 같은 일반적으로 투여된 화합물이 포함된 상업적으로 이용 가능한 사료가 있습니다. 설치류 사료 회사는 또한 실험 요구 사항을 충족하기 위해 특수 테스트 사료를 만들 수 있습니다.

이러한 형태의 경구 투여의 장점은 비침습적이고, 화합물을 지속적으로 투여하며, 인간의 경구 투여를 모방한다는 것입니다. 그러나 화합물 섭취는 음식이나 물의 수용, 화합물의 안정성 및 케이지에 존재하는 동물의 수에 따라 달라지기 때문에 정밀도가 부족합니다. 정확한 투여가 실험에 중요하지 않은 경우 이 비침습적 방법이 동물의 복지에 가장 적합합니다.

보다 정확한 경구 투여를 위해 구강 위(oral gavage)를 사용할 수 있는데, 이는 특정 시간에 지정된 부피로 화합물을 위에 직접 침전시킵니다. 그러나 적절하게 제지하지 않으면 동물에게 심각한 손상이 발생할 수 있으므로 이 기술을 수행하려면 적절한 훈련이 필요합니다.

국소 제제에는 크림, 로션, 연고, 스프레이 및 젤이 포함됩니다. 일반적으로 국소 제제는 적용되는 영역에만 영향을 미치도록 되어 있습니다. 그러나 의도적이거나 의도적이지 않을 수 있는 혈류에 흡수될 수도 있습니다. 이 흡수는 피부의 상태, 사용된 표면적, 물질의 농도, 접촉 기간 및 제제의 지질 용해도에 따라 달라집니다.

경구 및 국소 투여 방법의 배경에 대해 논의했으므로 이제 사료 또는 물을 통한 경구 투여부터 시작하여 프로토콜에 대해 알아보겠습니다.

투여 계산을 위해서는 먼저 투여할 의도된 투여량을 알아야 합니다. 둘째, 체중을 결정해야 합니다. 개별 동물의 무게를 측정하는 대신, 달리 명시되지 않는 한 쥐 또는 쥐 균주의 평균 체중을 계산에 사용할 수 있습니다. 셋째, 케이지당 동물의 수를 알고 있어야 하고, 넷째, 케이지당 하루 평균 물 또는 음식 소비량을 알아야 합니다.

용해된 화합물이 함유된 배합된 식품 또는 음용수는 화합물 불안정성으로 인해 표준 식품이나 물보다 더 자주 교체해야 할 수 있음을 기억하십시오. 일부 화합물은 빛에 민감하거나 시간이 지남에 따라 침전될 수 있습니다.

이제 생쥐와 쥐에서 경구 개비지를 수행하여 정확한 용량을 경구 투여하는 방법을 알아 보겠습니다.

첫 번째 단계는 절차에 적합한 바늘을 선택하는 것입니다. 이들은 스테인리스 스틸로 구성되어 재사용되거나 유연한 플라스틱 샤프트와 실리콘 팁으로 일회용입니다. 마우스의 경우 길이가 1.5인치인 20-25게이지 직선 또는 곡선 투여 바늘이 적합합니다. 쥐의 경우 18-20 게이지 직선 또는 곡선 도징 바늘을 선택하십시오. 올바른 바늘 게이지와 주사기 선택은 부피와 점도에 따라 달라집니다. Compound Administration I 비디오를 검토하여 이러한 요인의 영향을 이해하십시오. 두꺼운 액체를 투여하려면 Luer 잠금 주사기가 선호됩니다.

선택한 후 주사기를 바늘에 부착하여 바늘을 돌리지 않고도 배럴의 눈금을 읽을 수 있도록 합니다. 바늘이 식도에 삽입되면 회전이 조금이라도 식도를 파열시켜 동물을 죽일 수 있으므로 이것은 중요합니다. 다음으로, 투여할 용액의 올바른 부피를 주사기에 채웁니다.

이 방법은 우발적으로 기관에 삽입되는 것을 방지하기 위해 삼킴 반사가 손상되지 않은 의식이 있는 동물에게 항상 수행해야 합니다. 이 절차에서는 적절한 구속 기술을 사용하는 것이 중요합니다. 마우스의 경우 머리 아래쪽의 피부를 잡고 목덜미를 단단히 잡습니다. 이렇게 하면 머리가 좌우로 움직일 기회가 최소화됩니다. 또한 몸이 머리에서 꼬리까지 일직선으로 매달려 있는지 확인하십시오. 비틀리면 간침을 식도에 삽입하는 데 방해가 됩니다. 뒷다리도 몸의 회전을 방지하기 위해 안정되어야 합니다.

쥐를 제지하려면 목 양쪽에 있는 검지와 중지를 사용하여 어깨 너머로 쥐를 잡습니다. 이렇게 하면 쥐가 머리를 좌우로 돌리는 것을 방지할 수 있습니다. 엄지손가락, 셋째손가락, 넷째손가락은 가슴을 둘러싸고 있어 동물이 앞뒤로 움직이지 않도록 한다.

동물을 적절하게 제지한 후에는 곡선이 아래를 향하고 목의 자연스러운 곡선과 일직선이 되도록 바늘을 놓습니다. 그런 다음 바늘을 오른쪽이나 왼쪽에서 diastemata를 통해 인두 뒤쪽을 향해 비스듬히 앞니와 어금니 사이에 삽입합니다. 이제 바늘을 구강에 넣었으므로 코가 위로 향할 때까지 바늘을 사용하여 머리를 뒤로 기울입니다. 이 시점에서 바늘은 식도로 쉽게 미끄러져야 합니다. 바늘이 위에 놓이면 화합물을 부드럽게 침전시킵니다. 그런 다음 동물에서 바늘을 제거하고 회전하지 않도록 하십시오. 바늘을 억지로 내리지 않는 것이 중요합니다. 저항이 느껴지면 제거하고 다시 시도하십시오. 시술을 수행하는 동안 동물이 청색증 또는 호흡 곤란의 징후를 보이거나 입에서 용액이 흘러나오면 즉시 투여 바늘을 제거하고 동물을 우리로 풀어주어야 합니다.

마지막으로, 실험실 동물에 대한 국소 투여 절차를 검토해 보겠습니다. 동물을 마취하는 것으로 시작하십시오. 이것은 일반적으로 동물이 빠르게 회복할 수 있도록 속효성 흡입제를 사용하여 수행됩니다. 마취 관리에 대한 자세한 내용은 이 컬렉션의 다른 비디오를 참조하십시오.

그런 다음 이발기를 사용하여 적용 부위의 모든 털을 제거합니다. 상처를 방지하려면 클리퍼의 평평한 표면을 피부에 대고 자라는 모발과 반대 방향으로 면도하십시오. 그런 다음 물로 피부를 닦고 거즈 패드로 말리십시오. 이제 솜 끝이 있는 어플리케이터를 사용하여 물질을 피부에 직접 바릅니다. 최상의 결과를 얻으려면 두꺼운 층을 한 번만 바르는 대신 연고나 크림을 여러 겹 얇게 바르십시오. 그루밍으로 인해 국소적으로 도포된 화합물을 우발적으로 섭취하는 것을 방지하려면 작은 목걸이나 방패를 배치하여 동물이 영향을 받는 신체 부위에 닿지 않도록 하십시오. 또한, 케이지 메이트의 동종 그루밍을 방지하기 위해 동물을 개별적으로 수용해야 합니다.

이제 이러한 대체 투여 경로에 대해 이해했으므로 오늘날 생물 의학 연구에서 어떻게 사용되고 있는지 살펴보겠습니다.

구강 위장관의 중요한 응용 분야 중 하나는 위장관에 대한 직접적인 영향을 연구하기 위해 물질을 정밀하게 투여하는 것입니다. 여기에서 연구원들은 이 방법을 사용하여 변형된 프로바이오틱 효모를 동물의 위장으로 직접 전달했습니다. 그런 다음 그들은 소장에서 조직된 림프 결절인 Peyer's patches를 해부하여 전달된 미생물의 부착을 연구했습니다.

비침습적 구강 경로는 식품 매개 감염의 자연적인 방식을 모방하는 데 사용할 수 있습니다. 이 실험에서 과학자는 오염된 음식의 섭취를 통해 쥐에서 리스테리아 모노사이토제네스의 경구 전염에 대한 모델을 개발했습니다. 감염 후 연구진은 소장, 결장, 비장, 간, 담낭과 같은 다양한 장기를 적출하여 이러한 조직으로의 감염 확산을 분석했습니다.

마지막으로, 일부 연구자들은 자외선이 일광 화상으로 이어질 수 있는 메커니즘을 연구하는 데 관심이 있습니다. 여기에서 과학자들은 국소 경로를 사용하여 UV 보호제인 표피 멜라닌의 생성을 유도하는 약리학적 물질을 적용했습니다. 그 후, 그들은 인간 연구와 유사한 프로토콜을 사용하여 자외선에 의해 유발된 홍반에 대한 국소 도포제의 보호 효과를 조사했습니다.

경구 및 국소 투여를 다루는 JoVE의 두 번째 복합 투여 방법을 시청했습니다. 이제 사료나 물을 사용하여 동물을 경구 투여하는 방법과 보다 정확한 구강 배뇨 투여를 수행하는 방법을 이해해야 합니다. 마지막으로, 국소 투여에 대한 고려 사항과 방법, 그리고 이러한 다양한 기술의 응용에 대해 알아야 합니다. 언제나 그렇듯이 시청해 주셔서 감사합니다!