Name: 체외에서 FluoroBlok 종양의 침략 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-07-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 53 s
Description: 학습하세요 FluoroBlok 종양 침략 분석을 통해 암세포가 기저막을 통과하는 능력을 측정하는 방법을. 형광 기반 기술로 HT 1080 및 NIH 3T3 세포주를 활용하여 침윤성과 비침윤성 세포를 비교하고 암 전이 메커니즘을 연구할 수 있습니다.

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BD calcein을 사용하는 포스트 - 라벨링 및 측정은 형광 염료 AM 그들은 BD Matrigel 매트릭스를 통해 침략과 BD FluoroBlok 막 통과 후 세포 quantitation에 대해 표시됩니다. 그 결과, 세포 침공만이 종​​점 측정 얻을 수 있습니다. <ol><li> ~ 80 %의 합류에 세포를 성장. </li><li> 준비 및 삽입 시스템을 rehydrate. <ol style="list-style-type:lower-alpha;"><li> -20 ° C 저장에서 패키지를 제거하고 실온에 와서 수 있습니다. </li><li> 호일 패키지를 열고 삽입 우물의 내부 500 μL 따뜻한 (37 ° C) 미디어를 추가할 수 있습니다. 접시, 37에서 2 시간 동안 rehydrate 허용 ° C 5 % CO 2. 참고 :이 uncoated BD 팰컨 FluoroBlok 셀 마이 그 레이션 컨트롤로 사용됩니다 24 Multiwell 삽입 시스템을 rehydrate 필요는 없습니다. </li><li> rehydration 후, 조심스럽게 멤브레인에 BD Matrigel 매트릭스의 계층을 방해하지 않고 삽입 우물에서 매체를 제거합니다. 시스템은 이제 사용할 준비가되었습니다. </li></ol></li><li> 세포 monolayers을 trypsinizing 5 X 10 4 셀 / ML에서 혈청없는 DMEM에있는 세포를 resuspending하여 셀 suspensions를 준비합니다. 참고 : 다른 세포 유형을 사용하는 경우 최적의 시딩 밀도를 결정하기 위해 필요합니다. 다공성 성장 표면에 세포 유형에 대한 최적의 시딩 밀도를 확인하려면, 시딩 밀도의 범위 (셀 / cm 2) 사용하는 브라켓 비유 공성 표면에 사용되는 시딩 밀도 (즉, flasks, 요리 접시). 예를 들어, 사이의 다양한 세포 농도에서 2.5 X 10 5 세포 / cm 2, 씨앗에서 현재 종자 5 X 10 4 5 X 10 5 세포 / cm 2 최적의 초기 시딩 밀도를 결정합니다. </li><li> 혀끝의 방으로 세포 현탁액 500 μL (2.5 X 10 4 세포)를 추가합니다. </li><li> 액세스 샘플 포트를 사용하여 기저 방으로 각 chemoattractant의 750 μL (DMEM에 5% FBS)을 추가합니다. </li><li> BD의 BioCoat 종양의 침략 시스템 및 uncoated BD 팰컨 FluoroBlok 37 ° C, 5 % CO 2 분위기에서 20~22시간 24 - Multiwell 삽입 플레이트를 품어. </li><li> 부화 후, 신중하게 혀끝의 실에서 매체를 제거합니다. 이것은 폐기물 컨테이너에 내용을 flicking하여 수행할 수 있습니다. 삽입 시스템의 바닥 표면을 만지지 마십시오. </li><li> 500 μL / 음 4 μg / ML Calcein HBSS에서 AM을 포함한 초 24 - 잘 접시에 삽입 시스템을 전송합니다. 37에서 1 시간 동안 품어 ° C 5 % CO 2. 그것이 cytosolic esterases로 녹색 형광 calcein로 변환됩니다 nonfluorescent 중요한 염료이기 때문에 Calcein AM 솔루션은 형광을 읽기 전에 하부 챔버에서 제거되지 않습니다. </li><li> 침입 세포의 형광은 하단 읽기 형광 플레이트 리더에 517분의 494 NM (예 / 엠)의 파장에서 읽습니다. 게인 설정은 경험적으로 결정 할 수도 있지만, 미드 이득이 충분 출발점되어야합니다. 너무 높은 이득 설정은 높은 형광 시료와 검출기의 포화로 이어질 수 있으며, 이것은 의미있는 결과의 인수를 방지할 수 있습니다. autogain의 사용 (귀하의 리더에서 지원하는 경우)하지 않는 것이 좋습니다. 거꾸로 형광 현미경은 결과를 확인하는 데 사용할 수 있으며이에게이 분석을 실행 처음 할 특히 유용합니다. 참고 : 그것은 삽입 시스템이 올바른 플레이트지도를 사용하여 읽는 것이 가장 중요합니다. 로딩 플레이트지도에 대한 자세한 내용은 www.bdbiosciences.com 또는 문의 BD 기술 지원 (labware@bd.com)에서 BD 기술 게시판 번호 436을 참조하십시오. 접시가 판독기에 삽입되는 등 적절한 플레이트 방향은 오른쪽으로 방향 왼쪽 상단 모서리와 BD Flacon 로고에 잘 A1이다. </li></ol> 데이터 감소 데이터는 다음과 같은 등식과 같이 표현된다 : <img src="/files/ftp_upload/1475/1475eqa.jpg" alt="방정식" /> 배경 %의 세포 침공의 계산하기 전에 빼서 수 있습니다 RFU = 상대 형광 단위.

<ol><li>Sethi, G., Ahn, K. S., Pandey, M. K., Aggarwal, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Celastrol%2C+a+novel+triterpene%2C+potentiates+TNF-induced+apoptosis+and+suppresses+invasion+of+tumor+cells+by+inhibiting+NF-%CE%BAB-regulated+gene+products+and+TAK1-mediated+NF-%CE%9AB+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Celastrol, a novel triterpene, potentiates TNF-induced apoptosis and suppresses invasion of tumor cells by inhibiting NF-κB-regulated gene products and TAK1-mediated NF-ΚB activation.</a> Blood. 109, 2727-2735 (2007).</li>
<li>Takada, Y., Kobayashi, Y., Aggarwal, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evodiamine+Aboloishes+Constitutive+and+Inducible+NF-%CE%BAB+Activation+by+Inhibiting+I%CE%BAB%CE%B1+Kinase+Activation%2C+Thereby+Suppressing+NF-%CE%BAB-regulated+Antiapoptotic+and+Metastatic+Gene+Expression%2C+Up-regulating+Apoptosis%2C+and+Inhibiting+Invasion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Evodiamine Aboloishes Constitutive and Inducible NF-κB Activation by Inhibiting IκBα Kinase Activation, Thereby Suppressing NF-κB-regulated Antiapoptotic and Metastatic Gene Expression, Up-regulating Apoptosis, and Inhibiting Invasion.</a> J. Biol. Chem. 280, 17203-17212 (2005).</li>
<li>Harikumar, K. B., Kunnumakkara, A. B., Ahn, K. S., Anand, P., Krishnan, S., Guha, S., Aggarwal, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+the+cysteini+residues+in+I%CE%BAB%CE%B1+kinase+and+NF-%CE%BAB+%28p65%29+by+xanthohumol+leads+to+suppression+of+NF-%CE%BAB-regulated+gene+products+and+potentiation+of+apoptosis+in+leukemia+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Modification of the cysteini residues in IκBα kinase and NF-κB (p65) by xanthohumol leads to suppression of NF-κB-regulated gene products and potentiation of apoptosis in leukemia cells.</a> Blood. , 113-2003 (2009).</li>
<li>Nair, A. S., Sishodia, S., Ahn, K. S., Kunnumakkara, A. B., Sethi, G., Aggarwal, B. B. D. eguelin <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((an+Akt+Inhibitor%2C+Suppresses+I%CE%9AB%CE%B1+Kinase+Activation+Leading+to+Suppression+of+NF-%CE%BAB-Regulated+Gene+Expression%2C+Potentiation+of+Apoptosis%2C+and+Inhibition+of+Cellular+Invasion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">an Akt Inhibitor, Suppresses IΚBα Kinase Activation Leading to Suppression of NF-κB-Regulated Gene Expression, Potentiation of Apoptosis, and Inhibition of Cellular Invasion.</a> J. Immunol. , 177-5612 (2006).</li>
<li>Partridge, J., Qian, S. Quantitative and High-Throughput Screening of Tumor Cell Invasion using a Cell-based Model. Society for Biomolecular Screening 2005 Conference. 2005 Sept 11-15, Geneva, Switzerland, , (2005).</li>
<li>An Improved In Vitro Device For Measuring Cell Invasion and Method for its Formation. US patent. , 6,740,501,B2 (2004).</li>
<li>Flaherty, P., Goldberger, A., Dery, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Fluorescent+Cell+Labeling+on+Tumor+Invasion+and+Screening+of+Anti-Metastatic+Compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Mole.+Biol.+Cell%22%5BJournal%5D)">Effect of Fluorescent Cell Labeling on Tumor Invasion and Screening of Anti-Metastatic Compounds.</a> Mole. Biol. Cell. 12, 46a-46a (2001).</li>
<li>Flaherty, P., Mannuzza, F., Ilsley, S., Maliakal, J., Wu, M. Screening of Anti-Metastatic Compounds by a Fluorescence Based Tumor Invasion Assay. Screentech 2001 Conference. 2005 Mar 12-16, San Diego, CA, , (2005).</li>
<li>Mannuzza, F., Flaherty, P., Wu, M., Ilsley, S. Development of a Quantitative, High-Throughput Assay System for the Discovery of Anti-Cancer Drugs. Proceedings of the Society for Biomolecular Screening. 1999 Sept 13-16, Edinburgh, SC, UK, , (1999).</li>
</ol>

저자는이 문서에서 사용하는 시약 및 도구를 만들어 BD Biosciences의 직원입니다.

<table><tbody><tr><td>BD BioCoat 종양 침습 시스템(Tumor Invasion System)</td><td>BD Biosciences</td><td>354165 또는 354166</td><td></td></tr><tr><td>HT-1080 및 NIH/3T3 세포</td><td>ATCC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco&amp;rsquo;s Modified Eagle Medium (DMEM; 무혈청)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>칼슘 및 마그네슘이 없는 Dulbecco&amp;rsquo;s Phosphate Buffered Saline (DPBS)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>세포 이동 대조군으로 사용될 BD Falcon FluoroBlok 24-Multiwell Insert System</td><td>BD Biosciences</td><td>351157 또는 351158</td><td></td></tr><tr><td>DMEM 내 5% 태아 bovine serum (FBS)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>BD Calcein AM 형광 염료</td><td>BD Biosciences</td><td>354216 또는 354217</td><td></td></tr><tr><td>Hanks&amp;rsquo; Balanced Salt Solution (HBSS)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>세포 침습 후 라벨링을 위한 BD Falcon 24-well 플레이트</td><td>BD Biosciences</td><td>351147</td><td></td></tr><tr><td>바닥 측정 기능이 있는 형광 플레이트 리더</td><td>PerkinElmer EnVision (R), TECAN Infinite (R), Molecular Devices SpectraMax (R), BioTek Synergy (TM), BMG LABTECH PHERAstar.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

체외에서 fluoroblok 종양의 침략 분석

An In vitro FluoroBlok Tumor Invasion Assay

전이성 세포의 특징은 지하 세포막을 통해 공격해서 신체의 다른 부분으로 마이 그 레이션하는 그들의 능력입니다. 세포가 침입하기 위해 지하 막 내려 휴식뿐만​​ 아니라 마이 그 레이션 모두 분비 프로 테아제 수 있어야합니다. BD BioCoat 종양의 침략 시스템은 자신의 침략적 속성의 평가를 허용 조건과 세포를 제공합니다<em&gt; 체외에서</em<sup&gt; 1,2</sup&gt;. 그것은 BD 팰컨 FluoroBlok 24 Multiwell의 균일 BD Matrigel 매트릭스로 코팅되어 8.0 마이크론 기공 크기 PET 막과 함께 삽입 플레이트로 구성되어 있습니다. BD Matrigel 매트릭스의이 유니폼 레이어는 재구성 지하 막 역할<em&gt; 체외에서</em침략을 공부하기 위해 적절한 단백질 구조를 제시하는 동안&gt;은 비침습 세포 진정한 장벽을 제공합니다. 코팅 과정은 세포막을 통해 마이 그 레이션에서 비침습 세포를 차단, 멤브레인의 모공을 occludes. 반대로, 침략 세포로부터 자신을 분리하고 코팅 멤브레인를 통해 마이 그 레이션 할 수 있습니다. 세포 침공의 Quantitation 그러한 DiIC 같은 형광 색소를하거나 사전 또는 사후 세포 침공 라벨에 의해 얻을 수<sub&gt; 12</sub&gt; (3) 또는 calcein은 각각 오전과 침해 세포의 형광을 측정. BD FluoroBlok 막 효과적&gt; 99 % 효율에 490-700 nm의에서 빛의 통로를 차단 때문에, 찬란 - 라벨이 침공하지 않은 전지는 하단 읽기 형광 플레이트 리더에 의해 감지되지 않습니다. 그러나, 멤브레인의 아래쪽에 침공이 세포는 광원으로부터 차폐되지 더 이상하고 각 플레이트 리더로 ​​감지됩니다. 이 비디오는 calcein가 침입 세포를 감지하는 AM 사용하여 엔드 전지 침공 분석을 보여줍니다.

이 비디오는 형광 기반의 방법론을 사용하여 세포 배양 삽입을 통해 세포의 공격을 측정하는 방법을 보여줍니다.

체외에서 FluoroBlok 종양의 침략 분석

전이성 세포의 특징은 기저막을 뚫고 침습하여 신체 다른 부위로 이동하는 능력입니다. 세포는 반드시 ... 할 수 있어야 합니다.

세포 침습은 암의 진행과 혈관 신생에서 중요한 단계입니다. 인비트로(in vitro) 침습 분석은 일반적으로 BD 매트릭스, 겔 매트릭스와 같은 재구성된 기저막을 분해하고 세포 배양 인서트를 통해 이동하는 세포의 능력을 평가합니다. 종양 침습 분석은 세포를 Matrigel이 코팅된 Fluor block 인서트에 첨가하면서 시작됩니다.재구성된 기저막 화학 유인 물질을 기저 챔버에 첨가하고 시스템을 배양합니다. 하룻밤이 지나면 침습성 세포가 Matrigel 장벽을 분해하고, 주변광으로부터 형광 물질을 보호하는 특수 막인 플로라 블록 막을 통과할 수 있게 됩니다. 상단 챔버의 내용물은 버리고, 멀티웰 인서트를 형광 물질이 포함된 두 번째 플레이트에 추가합니다.배양 후, 생존 세포를 염색하면 육안과 마이크로플레이트 리더 모두로 검출할 수 있습니다. 안녕하세요, BD Biosciences Discovery LabWare의 Jeff Partridge입니다. 오늘은 플로어 블록 종양 침습 분석 절차를 보여드리겠습니다.이 절차를 통해 화학 유인 물질을 향한 기저막 통과 종양 세포의 침습을 연구합니다. 그럼 시작하겠습니다. 종양 침습 분석에 사용할 세포를 약 80% 합류도(confluence)까지 배양하십시오.본 실험에서는 HT 10 80 및 NIH 3T3 세포주를 사용합니다. HT 10 80 세포는 해당 시스템 내의 Matrigel 장벽을 이동 및 침습하는 것으로 입증되었으므로, 본 분석의 적절한 양성 대조군으로 사용됩니다. NIH 3T3 세포는 침습성은 없으나 이동성은 있으므로, 본 절차의 적절한 음성 대조군으로 사용됩니다.먼저, 영하 20°C 보관 중인 BD bio coat 종양 침습 시스템 패키지를 꺼내 실온에 둠으로써 시스템을 재수화합니다. 본 분석에는 멸균 기술이 필요하므로, 조직 배양 후드 내에서 인서트가 실온에 도달하도록 합니다. 패키지가 실온이 되면 이를 개봉하여 대상 세포가 통과하게 될 기저막을 재수화합니다.인서트 웰 내부에 500 µL의 따뜻한 배지를 넣고, 37 °C, 5% CO₂ 조건에서 2시간 동안 플레이트를 재수화합니다. 코팅되지 않은 BD Falcon Flora Block 24 멀티웰 인서트 플레이트는 침습 분석(invasion assay)을 위한 세포 준비용 세포 이동 대조군으로 사용되므로 재수화할 필요가 없습니다. 트립신을 사용하여 세포 단층을 분리하고, 세포를 serum-free DMEM에 5 × 10⁴ cells/mL 농도로 재현탁합니다.다른 세포 유형을 사용하는 경우, 최적의 파종 밀도를 실험적으로 결정해야 합니다. 코팅된 플레이트를 재수화한 후, 멤브레인 상의 MA gel 층을 건드리지 않도록 주의하며 인서트 웰에서 배지를 조심스럽게 제거하십시오. 이제 시스템을 사용할 준비가 되었습니다.MA 겔 층이 마르지 않게 하십시오. 세포 침습 분석을 시작하려면, Matrigel이 코팅된 구성과 코팅되지 않은 구성 모두에서 종양 침습 시스템의 상부 챔버에 각 세포 현탁액 500 microliters를 첨가하십시오. 다음으로, 샘플 포트를 통해 코팅된 플레이트와 코팅되지 않은 플레이트 모두의 하부 챔버에 화학 유인 물질 750 microliters를 첨가하십시오.기저 챔버를 채울 때 기포가 유입되지 않도록 하는 것이 매우 중요합니다. 이동 제어군으로서, 각 세포 현탁액과 화학 유인 물질을 코팅되지 않은 BD Falcon Flora Block 24 Multi WA 인서트 플레이트에 추가합니다. 종양 침습 시스템과 코팅되지 않은 Falcon Flora Block 24 Multi WA 인서트 플레이트를 다음 날까지 37 °C, 5% carbon dioxide 분위기에서 20~22시간 동안 배양합니다.배양이 완료되면 세포에 형광 염료인 calcium am을 염색할 준비가 됩니다. apical 챔버의 배지를 폐기물 용기에 털어내어 조심스럽게 제거합니다. 그런 다음, 즉시 인서트 시스템을 웰당 500 µL의 4 µg/mL 용액이 들어 있는 두 번째 24 웰 플레이트로 옮깁니다.Hank's balanced salt solution 내의 Calcium am. 마이그레이션 대조군을 사용하여 이 단계들을 반복합니다. 플레이트를 37°C, 5% carbon dioxide 조건에서 1시간 동안 배양합니다.인서트 시스템의 바닥 표면을 건드리지 마십시오. 칼슘과 함께 1시간 동안 배양한 후, 침투한 세포의 형광을 측정할 수 있습니다. 정확한 플레이트 맵을 사용하여 인서트 시스템을 읽는 것이 매우 중요합니다.플레이트의 올바른 방향은 웰 A1이 왼쪽 상단 모서리에 오게 하고, 플레이트를 리더기에 삽입할 때 BD falcon 로고가 오른쪽을 향하게 하는 것입니다. 형광은 하단 읽기 방식의 형광 플레이트 리더기를 사용하여 494 nm 및 517 nm 파장에서 측정합니다. 플레이트 리더기 데이터가 시각적 결과와 일치하는지 확인하기 위해 도립 형광 현미경으로 결과를 검증해야 합니다. 이 데이터는 두 가지 세포주인 HT 10 80 및 NIH 3T3의 세포 침습 분석을 통해 코팅된 플레이트와 코팅되지 않은 대조군 플레이트에서 얻은 전형적인 플레이트 리더기 데이터입니다.세포가 없는 웰의 데이터는 세포 침습 백분율을 계산하기 전에 차감할 수 있는 배경값을 나타냅니다. 다음 식을 사용하여 침습 백분율을 계산하십시오. 침습 백분율은 화학 유인 물질을 향해 매트리젤 코팅 막을 통과한 세포의 평균 상대 형광 단위(rfu)와 같습니다.이 값을 코팅되지 않은 VD flua 블록 막을 통해 화학 유인 물질 방향으로 이동한 세포의 평균 RFU로 나눕니다. 그 다음 이 값에 100을 곱합니다. 이 그래프는 HT 10 80 세포와 NIH three T three 세포 간의 세포 침습 백분율 비교를 보여주며, 보시는 바와 같이 HT 10 80 세포는 침습성이 있는 반면 NIH three T three 세포는 그렇지 않습니다.도립 형광 현미경으로 세포를 관찰했을 때, 그 결과는 플레이트 리더로 얻은 결과와 일치했습니다. 침습성 HT 10 80 세포는 matrigel을 통과하여 침습했을 뿐만 아니라 코팅되지 않은 막을 통해 이동했습니다. 반면, 비침습성 NIH three T three 세포는 matrigel을 통과하여 침습하지는 않았으나, 코팅되지 않은 막을 통해 이동했습니다.지금까지 꽃 모양 블록(floral block) 종양 침습 분석법 수행 방법을 살펴보았습니다. 이 실험 절차를 진행할 때는 플레이트를 수평으로 유지하고 기포 형성을 최소화하는 것이 중요합니다. 기포는 결과에 영향을 미칠 수 있기 때문입니다.이상입니다. 시청해주셔서 감사하며, 귀하의 실험에 좋은 결과가 있기를 바랍니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

여기에 설명된 mesothelial 통관 분석은 fluorescently 표시된 셀 및 촬영된 비디오 현미경 시각화하고 양적 난소암 다세포 spheroids 및 mesothelial 세포 monolayers의 상호 작용을 측정하기 위해 활용합니다. 이 분석은 난소 암 전이의 초기 단계를 모델.

체외 Mesothelial 정리 분석에서는 그것이 난소 암 전이의 초기 단계 모델

침입형 유체의 흐름은 고체 종양에서 상승되며 종양 세포 침공을 조절하실 수 있습니다. 여기에서 우리는 매트릭스에 포함된 세포에 침입형 유체 흐름을 적용한 다음 세포 침입에 미치는 영향을 측정할 수있는 기법을 설명합니다. 이 기술은 쉽게 다른 시스템을 연구하는 데 적용할 수 있습니다.

종양 세포 침략에 중간 유체 흐름의 효과를 측정하는 세 가지 차원 세포 배양 모델

이 비디오는 종양 세포 침입을 연구하기 위해 네이티브 매트릭스를 활용하는 기술을 설명합니다. 이 분석에 사용된 기술은 합성 또는 외부 매트릭스 없이 3D 환경에서 상피-중간엽 세포 상호 작용을 평가할 수 있는 기능을 제공합니다.

종양 세포 침입 분석: 상피-중간엽 세포 상호 작용을 평가하기 위한 3D 체외 네이티브 매트릭스 기반 방법

일반적으로 사용되는 체외에서 세포의 이동 및 침윤을 조사하기위한 고도의 접근 방법이 설명되어 있습니다. 첫 번째 방법은 세포 운동성을 측정하는 세포 상처 폐쇄 분석이다. 두 번째 방법은 화성과 세포의 침략적인 능력을 평가하는 트랜스 웰 마이그레이션 및 침입 분석이다.

체외 세포 이동 및 내습 분석 실험에서

이 비디오 기사는 암세포 침입을 유도하는 호르몬, 사이토카인 및/또는 성장 인자의 역할을 조사하기 위해 수정된 체외 방법에 대해 설명합니다.

수정<em&gt; 시험관</em&gt; 침공 분석은 호르몬, 중재 암 세포 침략의 사이토 카인 및 / 또는 성장 인자의 잠재적 인 역할을 확인하는

주변 정상 조직의 침입은 악성 종양을 정의하는 특징입니다. 우리는 여기에서 여러 진행성 인간 암 모델로 예시된 자연 3D 바이오매트릭스로의 침입에 대한 간단한 반자동 마이크로 플레이트 분석을 제공합니다.

3 차원 (3D) 종양 회전 타원체 침공 분석

종양 세포의 Orthotopic intracranial 주사 공부 뇌 종양 생물학, 진행, 진화, 그리고 치료 응답을 암 연구에 사용 되었습니다. 여기 선물이 형광 분자의 단층 촬영 종양 xenografts 실시간 intravital 이미징 및 종양의 정량화 임상 세포종 모델에서 대량 제공.

Vivo에서 이미징 세포종 Xenografts의 형광 분자 단층 촬영

여기, 양적 측정 마이그레이션 및 시간이 지남에 조건 하에서 여러 치료 세포종 뇌 종양 줄기 세포의 내 습을 라이브 세포 이미징 기술을 설명 합니다.

라이브 셀 이미징 분석 실험 연구 세포종 뇌 종양 줄기 세포 이동과 내 습을

방광 암 침공을 관리 하는 프로세스는 바이오 마커 및 치료 개발을 위한 기회를 나타냅니다. 여기 우리는 종양 spheroids 시간 경과 화상 진 찰, confocal 현미경 검사 법의 3 차원 문화를 통합 하는 방광 암 침공 모델 제시. 이 기술은 침략 과정의 기능을 정의 하 고 치료제 심사에 대 한 유용 합니다.

침공을 공부 하 고 방광 암에서 치료제를 평가 하기 위한 3 차원 셀 문화 시스템

시험관내 세포 침습 분석기는 단백질 매트릭스를 함유하는 세포 배양 삽입을 사용하여 침입 및 이동을 위한 세포 전이를 정량화함으로써 암 전이의 잠재력을 측정하는데 사용된다. 세포는 단백질 매트릭스와 다공성 막을 통해, 화학유도제를 향해, 그 때 가벼운 현미경 검사법에 의해 정량화되기 위하여 도전됩니다.

종양 발생 세포 행동의 척도로 시험관 내 침략 분석에서 마우스 유방 종양 세포의 사용

이 프로토콜은 이중 생물 발광 이미징에 의해 종양 진행 및 혈관신생을 실시간으로 모니터링하는 종양 베어링 마우스 모델의 확립을 설명합니다.

종양 진행 및 혈관 신생의 이중 생물 발광 이미징

학습하세요 FluoroBlok 종양 침략 분석을 통해 암세포가 기저막을 통과하는 능력을 측정하는 방법을. 형광 기반 기술로 HT 1080 및 NIH 3T3 세포주를 활용하여 침윤성과 비침윤성 세포를 비교하고 암 전이 메커니즘을 연구할 수 있습니다.

체외에서 FluoroBlok 종양의 침략 분석

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