Name: 라이브 해부 Drosophila 태아 : 항체 스테 이닝에 의해 돌연변이 컬렉션을 검사 늘씬한 방법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-12-29T15:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 48 s
Description: 배우세요 Drosophila 태아의 라이브 해부 및 항체 스테이닝 방법을 통해 유전자 스크리닝 효율성을 높이는 기술입니다. 이 프로토콜은 발달생물학 및 신경과학 연구에 필수적인 도구를 제공합니다.

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우리는이 프로토콜을 개발하기 위해 공헌 니키 폭스 Aloisia 슈미트 감사드립니다. 이 작품은 KZ, NS28182하는 NIH RO1 부여에 의해 지원되었다.

<ol><li>Patel, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+neuronal+subsets+and+other+cell+types+in+whole-mount+Drosophila+embryos+and+larvae+using+antibody+probes%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Imaging neuronal subsets and other cell types in whole-mount Drosophila embryos and larvae using antibody probes.</a> Methods Cell Biol. 44, 445-487 (1994).</li>
<li>Desai, C. J., Gindhart, J. G., Goldstein, L. S., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Receptor+tyrosine+phosphatases+are+required+for+motor+axon+guidance+in+the+Drosophila+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Receptor tyrosine phosphatases are required for motor axon guidance in the Drosophila embryo.</a> Cell. 84, 599-609 (1996).</li>
<li>Sun, Q., Schindelholz, B., Knirr, M., Schmid, A., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+genetic+interactions+among+four+receptor+tyrosine+phosphatases+regulate+axon+guidance+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+and+cellular+neurosciences%22%5BJournal%5D)">Complex genetic interactions among four receptor tyrosine phosphatases regulate axon guidance in Drosophila.</a> Molecular and cellular neurosciences. 17, 274-291 (2001).</li>
<li>Schmid, A., Schindelholz, B., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combinatorial+RNAi%3A+a+method+for+evaluating+the+functions+of+gene+families+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+neurosciences%22%5BJournal%5D)">Combinatorial RNAi: a method for evaluating the functions of gene families in Drosophila.</a> Trends in neurosciences. 25, 71-74 (2002).</li>
<li>Fox, A. N., Zinn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+heparan+sulfate+proteoglycan+syndecan+is+an+in+vivo+ligand+for+the+Drosophila+LAR+receptor+tyrosine+phosphatase%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">The heparan sulfate proteoglycan syndecan is an in vivo ligand for the Drosophila LAR receptor tyrosine phosphatase.</a> Curr Biol. 15, 1701-1711 (2005).</li>
</ol>

우리는이 비디오 데모들은 지금 즉시 Drosophila 유전 발생학의 경험을 가진 사람에 의해 실행될 수있는 자료에 대해 충분하고 자세하게 사는 배아 해부와 얼룩을위한 방법을 표시했다 바랍니다. 물론, 상당한 연습은 여전히​​ 주로 해부 자신을 위해 필요합니다. 우리의 경험에서 라이브 절개 방법을 배우는 모든 사람이 그 / 그녀가 가장 빠르게 고품질의 못하였 느니라 해부를 생성할 수 있도록 갑자기 ... 다른 해부 프로토콜을 생성합니다. 이 과정은 전체 개발에 대한 개월이 필요합니다. 그러나, 대부분의 사람들은 연습을 몇 주 후에 고품질의 해부를 생성할 수 있습니다. 우리가 검사를 위해 살고 해부의 사용을 선호하지만 고정 해부 프로토콜은 배아 단계의 넓은 범위에 적용할 수 있기 때문에, 그들은 고정 해부를 대체할 수 없습니다. 예를 들어, 모터 축삭지도 phenotypes위한 DF 키트의 분석, 우리는 filopodia를 포함한 모터 축삭 지점,의 세부 사항은...

<table><tbody><tr><td>필라멘트 포함 붕규산 유리 관</td><td>Sutter Instrument Co.</td><td>BF120-60-10</td><td></td></tr><tr><td>Narishige 모델 PC-10 니들 풀러</td><td>Narishige International</td><td></td><td>가열 수준 58.9로 인발한 관</td></tr></tbody></table>

라이브 해부 drosophila 태아 : 항체 스테 이닝에 의해 돌연변이 컬렉션을 검사 늘씬한 방법

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

배아 발달의 단계 14 17 사이의 Drosophila의 배아는 쉽게 &quot;등심&quot;준비를 생성하기 위해 해부를하실 수 있습니다. 이러한 준비에서, 중추 신경 시스템은 중앙을 실행하고, 신체 벽 둘러싸인 있습니다. 여러 phenotypes는 그러한 준비를 사용하여 검사하고 있습니다. 대부분의 경우 필레는 항체 묻은 고정 전체 마운트 배아의 절개로 생성되었습니다. 이러한 &quot;고정 해부는&quot;그러나 일부 단점이 있습니다. 그들은 실행 시간이 소비되며,이 변이는 GFP 밸런서 염색체 이상 유지하는 주식에서 돌연변이 (GFP - 음수) 배아를 정렬하기가 어렵습니다. 2002 년부터, 우리 그룹은 고아 수용체에 대한 리간드를 식별 결핍 및 이소성 표현 화면을 실시하고 있습니다. 이 작업을 수행하기 위해서는, 우리가 사는 배아 해부하고 균형잡힌 라인의 수백을 포함하는 컬렉션의 항체 염색법에 대한 능률 프로토콜을 개발했습니다. 우리는 고정 절개로보다 라이브 절개로 주식의 대규모 컬렉션에 phenotypes을 검토하기 위해 상당히 더 효율적이라고 결론을 내렸다있다. 프로토콜 여기에서 설명한을 사용하여, 하나의 훈련 개인은 복합 현미경으로 각 라인 4-7 돌연변이 배아를 조사 phenotypes에 대해 하루에 10 라인까지 스크린 수 있습니다. 이렇게하면 한 줄에 최대 70 hemisegments가 40X 물 침지 렌즈 높은 배율의 점수이기 때문에 미묘한, 낮은 penetrance phenotypes를 부여 변이의 식별.

우리는 특정 genotypes의 Drosophila의 배아의 &quot;등심&quot;준비 창출을위한 능률적인 프로토콜을 설명합니다. 이 프로토콜은 유전자 화면의 다양한 효율적인 실행을 허용합니다. 또한 후반 배아의 구조 우수 시각화 수 있습니다.

라이브 해부 Drosophila 태아 : 항체 스테 이닝에 의해 돌연변이 컬렉션을 검사 늘씬한 방법

배아 발달 단계 14에서 17 사이의 초파리 배아는 쉽게 해부하여 "필렛(fillet)" 표본을 제작할 수 있습니다. 이 표본에서...

여기서 배아를 수집하는 절차를 살펴보겠습니다. 바이알에서 파리를 꺼내 5구 수집 챔버의 튜브로 옮깁니다. 그다음 챔버 위에 포도 농업용 플레이트를 올리고 파리가 몇 시간 동안 알을 낳도록 둡니다.배아가 적절한 단계에 도달하면, 붓을 사용하여 그레이프 플레이트에서 양면 테이프로 옮깁니다. 이제 배아를 콘 밖으로 굴려 배측(ventral side)이 아래로 향하게 하여 한천 블록 위에 일렬로 세웁니다. 중앙을 보면 왁스 직사각형과 양면 테이프 조각이 부착된 슬라이드가 있습니다. 양면 테이프의 한쪽 끝을 배아가 늘어선 블록 위로 뒤집어 배아에 접촉시켜 슬라이드로 옮깁니다.이제 배아들이 즉시 등 쪽이 위로 향하게 됩니다. 왁스 사각형으로 둘러싸인 슬라이드 영역에 PBS를 추가하여 배아를 덮습니다. 위쪽은 슬라이드의 측면도이며 아래쪽은 평면도입니다.유리 해부침을 사용하여 난막(viel membrane)을 따라 절개합니다. 배아의 뇌 영역을 찔러 들어 올린 후, 유리판 위에 일렬로 배치합니다. 그 다음 각 배아를 해부하여 필레(filet) 형태로 만듭니다.절차가 끝나면 필렛 처리된 배아가 여러 줄로 배열된 슬라이드가 준비됩니다. 이제 고정 단계로 넘어갈 준비가 되었습니다. 안녕하세요, 저는 Caltech 생물학부 Kaizens 연구실의 포닥 피터 리(Peter Lee)입니다.안녕하세요, 저는 Caltech Kaizen 연구실의 대학원생 Ashley Wright입니다. 저는 Caltech의 교수인 Kaizen이며, 저희 연구팀은 초파리의 신경계 발달 연구를 수행하고 있습니다. 오늘은 살아있는 opal 배아를 해부하는 절차를 보여드리겠습니다.저희는 이러한 방법들을 사용하여 고아 수용체(orphan receptor) 리간드를 탐색해 왔습니다. 수용체 융합 단백질을 이용해 배아를 생체 염색함으로써, 세포 표면 단백질이 과발현된 세포주 컬렉션을 스크리닝하는 방식으로 이를 수행합니다. 또한 저희 연구실에서는 배아의 표현형을 연구하고 유전적 스크리닝을 실시하기 위해 이 절차를 사용하고 있습니다.저는 안내 표현형에 대한 운동 행동 결핍 스크리닝을 수행했습니다. 이제 시작하겠습니다. Peter가 구체적인 방법을 보여드릴 것입니다.먼저, 스패튤라를 사용하여 배아 수집 챔버의 각 배럴에 해당하는 포도 농업용 알 수집 플레이트에 효모 페이스트를 소량 도포합니다. 다음으로, 초파리 바이알에 이산화탄소 가스를 주입하여 초파리를 마취시킵니다. 수백 마리의 초파리를 수집 챔버로 직접 옮깁니다.그 다음 챔버를 알 수집 플레이트로 덮고 아래로 누릅니다. 20인치 길이의 라벨링 테이프를 사용하여 한천 플레이트의 중앙부터 시작해 챔버와 플레이트를 함께 고정합니다. 테이프는 알 수집 플레이트 위로 겹쳐지게 됩니다. 파리가 깨어나면, 수평 상태로 어두운 실온에서 2~3시간 동안 배양합니다. 배양이 끝나면 파리를 아래로 쳐서 내린 후 수집 플레이트를 교체합니다.제거한 플레이트의 각 섹터에 배아가 100개 미만인 경우, 충분한 수의 배아가 수집될 때까지 2시간 간격의 수집을 계속 수행하십시오. 수집된 배아는 동봉된 서면 프로토콜의 사양에 따라 풀링(pooling)할 수 있습니다.배아를 노화시키려면, 90 mm 원형 여과지를 물에 적셔 페트리 접시 뚜껑에 놓고, 그 위에 배아가 담긴 수집 플레이트를 뒤집어 놓습니다. 원하는 온도에서 원하는 기간 동안 플레이트를 배양하십시오. 슬라이드에 양면테이프를 붙여 배아의 단계 설정 및 분류를 위한 슬라이드를 준비합니다. 그런 다음 S 슬라이드 위에 직사각형 모양의 그레이프 아가(grape agar) 조각을 올립니다.에거(egger)는 10~15개의 배아가 5~10줄로 들어갈 수 있을 만큼 충분히 커야 합니다. 배아가 원하는 단계에 도달하면 인큐베이터에서 배아를 꺼냅니다. 수집 플레이트에서 숙성된 배아를 양면테이프로 옮깁니다.젖은 붓을 사용하여 배아를 테이프 위에 고르게 펼칩니다. GFP 해부 현미경을 통해 SOAR 배아의 적절한 GFP 발현 여부를 확인하여 유전자형을 판별합니다. 본 실험에서는 balancer curly arm, GFP의 발현이 없는 배아를 선택함으로써 유전자형 분석을 수행합니다.배아 유전자형 분석은 사용되는 밸런서(balancer)에 따라 달라지므로, 수행 방법에 대한 자세한 내용은 첨부된 서면 프로토콜을 참조하십시오. 다음 단계로, 끝이 뭉툭한 해부용 바늘을 사용하여 배아를 양면테이프 위에서 부드럽게 굴려 고정합니다. 16단계에서 장은 세 개의 띠 형태로 나뉩니다.이후 장은 꼬리 근처에서 대각선 띠 형태의 발달을 시작하고, 이어 말리면서 배아가 더 뚜렷해집니다. 다음으로, 해부침을 사용하여 각 배아를 난막이나 다른 배아 위에서 굴립니다. 테이프에 닿지 않도록 주의하며 배아를 들어 올려 포도당 아가 플레이트로 옮깁니다.코팅된 배아들을 한쪽 면이 한천 슬랩에 닿게 하고 후단이 아래를 향하도록 슬랩 위에 정렬합니다. 그다음 젖은 거름종이가 깔린 페트리 접시에 슬라이드를 넣고 배아가 원하는 연령에 도달할 때까지 실온에서 배양합니다. 해부를 위해, 양면테이프를 작은 직사각형 모양으로 잘라 생체 해부용 슬라이드를 준비합니다. 왁스 펜을 사용하여 슈퍼 프로스트 플러스(super frost plus) 슬라이드의 한쪽 끝 근처에 테이프를 부착합니다.테이프 주변으로 슬라이드 너비만큼이며 길이는 30 to 40 millimeters인 직사각형을 그립니다. 왁스와 테이프 사이에는 약 3 millimeters의 공간이 있어야 합니다. 그런 다음 슬라이드를 뒤집어 정렬된 배아 위에 조심스럽게 내려놓아 테이프가 배아에 닿게 함으로써, 그레이트 플레이트 슬랩(great plate slab)에서 테이프로 배아를 옮깁니다.배아의 후단이 아래쪽을 향하도록 배치해야 합니다. 이송 후 배아가 슬라이드 위에서 등쪽이 위를 향하게 놓이면, 인젝션 니들과 같이 니들 풀러로 제작한 유리 해부침을 사용하여 왁스 사각형을 채울 때까지 배아 위에 XPBS를 추가합니다. 배아의 후단부터 시작하여 등쪽 정중선을 따라 절개합니다.이제 배아의 앞쪽 끝을 찔러 들어 올립니다. 아래쪽부터 시작하여 배아를 버퍼 용액에 담근 상태로 테이프 스트립의 오른편으로 옮깁니다. 이러한 해부 및 이동 과정을 반복하여, agri slab의 각 행과 일치하도록 슬라이드 위에 배아들을 질서 있게 한 줄로 배열합니다.해부침을 사용하여 체벽의 플랩을 슬라이드 위로 부드럽게 누릅니다. 이때 표면의 조직이 늘어나거나 제거되지 않도록 주의하십시오. 바늘은 체벽 등쪽 가장자리의 전단과 후단 모서리에만 닿아야 합니다.운동 신경 축삭은 이만큼 뻗어 있지 않기 때문입니다. 등쪽으로는 슬라이드의 바늘 부분에 닿지 않도록 주의하십시오. 모든 배아를 전이하여 슬라이드에 고정한 후에는 바늘이 부러질 수 있기 때문입니다. 뇌 영역에서 네 개의 장관을 절단하고 장 전체를 배아에서 끌어내어 각 배아의 장을 제거하십시오.후장을 슬라이드 위로 밀어냅니다. 모든 해부가 완료되면, 파스퇴르 피펫 두 개를 사용하여 상온의 5% formaldehyde를 왁스 직사각형의 한쪽 모서리에 동시에 주입하고, 반대쪽 모서리에서 용액을 제거합니다. 총 약 6 mL의 부피를 사용하여 고정액을 세 번 교체합니다.배아를 고정액에 넣고 45분 동안 배양합니다. 메니스커스(액체 표면의 곡면)가 배아에 닿으면 배아가 파괴되므로 주의하는 것이 매우 중요합니다. 파스퇴르 피펫을 사용하여 고정액의 대부분을 제거합니다.두 개의 파스퇴르 피펫법을 사용하여 PBS로 3회 세척합니다. 그 후 PBT로 3회 세척하여 배아를 투과성 있게 만듭니다. 이 단계는 배아가 메니스커스에 덜 민감하게 만드는 역할도 합니다.마지막 세척 후, 슬라이드를 기울여 PBT를 조심스럽게 제거하고 왁스로 둘러싸인 영역의 모서리에 Kimwipe를 짧게 접촉시켜 과잉 용액을 제거합니다. 미리 분주된 피펫맨을 사용하여 블로킹 용액 200 µL를 즉시 첨가하고 상온에서 10~30분 동안 블로킹합니다. 이후 Kimwipe를 사용하여 블로킹 용액을 닦아냅니다.그 다음, 블로킹 용액에 희석한 원하는 1차 항체 200 microliters를 즉시 첨가합니다. 슬라이드를 습윤 플레이트에 넣고 4 °C에서 하룻밤 동안 배양합니다. 본 실험에서는 운동 뉴런 축삭을 표지하기 위해 단클론 항체 1D4를 사용합니다.다음 날, 4 °C에서 디쉬를 꺼내고 로킹 플랫폼 위에서 PBT를 사용하여 배아를 3회 세척하며, 세척당 최소 15분 동안 진행합니다. 모든 세척 단계에서 로킹 중에 슬라이드가 완전히 잠길 수 있도록 충분한 양의 PBT가 있는지 확인하십시오. 배아 세척이 끝나면 이전과 동일하게 슬라이드를 블로킹합니다.블로킹 후 즉시 2차 항체와 블로킹 용액 200 µL를 첨가하고 실온에서 2시간 동안 배양합니다. 여기서는 Alexa 488 goat anti-US 2차 항체가 사용되었으며, 이는 로다민(rhodamine)과 함께 근섬유를 표지하는 데 사용됩니다. 다시 한번 로킹 플랫폼 위에서 PBT로 회당 최소 15분씩 3회 세척합니다.슬라이드를 다른 트레이로 옮겨 잔류 세제를 제거합니다. 그 다음 PBS로 5분 동안 두 번 세척합니다. PBS에서 슬라이드를 꺼내고, 킴와이프(chem wipe)로 웰에 남아 있는 PBS의 대부분을 닦아낸 후, 즉시 70% glycerol 500 microliters를 첨가합니다.글리세롤은 배아와 굴절률이 동일하므로, 이 단계를 수행하면 염색 결과가 더 잘 보이게 됩니다. 배아를 실온에서 2시간 동안 또는 4°C에서 하룻밤 동안 투명화하십시오. 그 후 킴와이프로 글리세롤을 제거합니다. 글리세롤을 거의 모두 제거하면 배아가 평평해지며, 적게 제거하면 더 3차원적인 구조를 유지하게 됩니다.글리세롤을 제거한 후, 1번 커버슬립을 덮습니다. 이제 배아를 이미징할 준비가 되었으며, 해부 및 염색된 배아는 면역형광현미경으로 관찰할 수 있습니다. 여기서는 운동 신경 축삭 표지 항체인 1D4로 염색된 해부된 배아를 보여줍니다.이 이미지는 면역형광법을 이용한 시각화에 HRP 면역조직화학법이 사용된 일반적인 이미지들과 외관상 유사합니다. 운동 신경 축삭 분지의 세부 사항을 더 명확하게 확인할 수 있는 더 고품질의 이미지를 얻는 것이 가능합니다. 액틴에 결합하는 rho domine 표지 phin으로 공동 염색하면 근육을 동시에 시각화할 수 있습니다.이는 HRP 염색으로 얻을 수 있는 것보다 근육의 층 구조와 조직을 더 명확하게 보여줍니다. 여기에서 1D-4 운동 뉴런 축삭은 녹색으로, 근육은 빨간색으로 표시되어 있습니다. 지금까지 돌연변이 계통 모음에서 살아있는 초파리 배아를 박리하는 방법을 시연하였습니다. 이러한 절차를 수행할 때는 lio, armadillo, GFP balanced stock과 같이 다루기 쉬운 계통부터 시작하여 한 번에 몇 가지 계통씩만 진행하는 것이 중요합니다.해부 숙련도가 높아지고 속도가 빨라지면 하루에 최대 10개 라인까지 처리할 수 있으며, 이를 통해 약 20일의 기간 동안 200여 개의 돌연변이 라인 컬렉션을 스크리닝할 수 있습니다. 따라서 모든 단계를 능숙하게 수행하게 되면 매우 효율적인 절차가 됩니다. 이것으로 모든 설명을 마치겠습니다. 시청해 주셔서 감사하며, 실험에 좋은 결과가 있기를 바랍니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

Drosophila의 hemocytes은 개발 배아의 전체를 통해 분산. 이 프로토콜은 찬란 표시된 hemocytes와 배아를 사용하여 이러한 마이 그 레이션을 마운트 및 이미지하는 방법을 보여줍니다.

라이브 영상 Drosophila melanogaster 배아 Hemocyte 마이 그 레이션

성인의 준비 Drosophila</em씬 Sectioning 및 현미경 분석을위한> 눈

애벌레의, Pupal 및 성인의 해부 및 Immunohistochemistry<em&gt; Drosophila</em&gt; 망막

면역염색은 조직 내의 특정 세포 유형과 단백질을 시각화하는 효과적인 기술입니다. 초음파 처리를 활용함으로써, 여기에 설명된 프로토콜은 면역 염색 전에 후기 단계의 배아와 유충에서 Drosophila melanogaster 조직을 해부해야 할 필요성을 완화합니다. 우리는 포름알데히드가 고정된 전체 산 유충의 면역 염색을 위한 효율적인 방법론을 제공합니다.

늦게 단계 배아와 애벌레의 초음파 - 촉진 면역 형광 염색<em&gt; 초파리</em&gt; 조직<em&gt; 제자리에서</em

초파리의 성체 구조는 상상 원반이라고 하는 주머니와 같은 구조에서 파생됩니다. 이러한 디스크의 분석은 조직 결정, 구획 경계 설정, 세포 증식, 세포 운명 사양 및 평면 세포 극성을 포함한 많은 발달 과정에 대한 통찰력을 제공합니다. 이 프로토콜은 광/형광 현미경 검사를 위해 가상 디스크를 준비하는 데 사용됩니다.

해부하고, 상상 디스크의 면역 염색에서 초파리

이 연구는 후기 단계 -16 Drosophila melanogaster 배아의 운동 뉴런 예측을 시각화하기위한 표준 면역 조직 화학 법을 상세히 설명합니다. FasII 항체로 염색 된 고정 배아의 필렛 된 준비는 신경 발달 중에 모터 축삭 돌연변이 및 표적인지에 필요한 유전자를 특성화하는 강력한 도구를 제공한다.

배아 운동 뉴런의 Axonal 투영 패턴의 시각화<em&gt; Drosophila</em

우리는 친유성 형광 염료를 사용하여 Drosophila 배아 운동 뉴런의 역행 추적방법을 기술한다.

친유성 형광 염료를 사용하여 Drosophila 배아 모터 뉴런의 역행 추적

여기서, 우리는 후기 배아 초파리 남성 생식선을 생생하게 이미지화하는 데 필요한 해부 프로토콜을 제공한다. 이 프로토콜은 정상적인 조건 하에서 또는 트랜스제닉 또는 약리학적 조작 후에 동적 세포 과정의 관찰을 허용할 것이다.

후기 배아 초파리 고나드의 해부와 라이브 이미징

이 프로토콜은 기존의 GFP/mCherry-tag 접근법을 사용하여 검출하기 어려운 저농도 단백질 또는 번역 후 변형의 실시간 이미징을 가능하게 하는 맞춤형 항체 기반 형광 라벨링 및 초기 초파리 배아에 주입하는 방법을 설명합니다.

형광 항체 주입을 통한 살아있는 초파리 배아의 저농도 단백질 및 번역 후 변형 시각화

이 연구는 참수, 고정, 동결 절제, 형광 염색, 면역 염색 및 이미징을 포함하는 조직 처리를 위한 단순화된 프로토콜을 제시하며, 이는 공초점 및 다광자 이미징으로 확장될 수 있습니다. 이 방법은 복잡한 해부에 필적하는 효능을 유지하며 고급 운동 기술의 필요성을 우회합니다. 정량적 이미지 분석은 광범위한 조사 잠재력을 제공합니다.

향상된 뇌 형광 염색 및 면역 염색을 위한 초파리 머리의 직접 동결 절편

이 글에서는 시약을 경제적으로 사용하고 소수의 상상 디스크를 쉽게 다룰 수 있는 효율적인 상상 디스크 해부 및 항체 염색 프로토콜을 설명합니다.

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