Name: 마우스의 가로 대동맥 수축 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-04-21T18:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 25 s
Description: 배우세요 마우스 가로 대동맥 수축(TAC) 수술 기법으로 심장 비대와 심부전을 유도하는 방법을. 도플러 유속 측정으로 압력 과부하를 평가하고 심혈관 질환 기전 연구에 활용하세요.

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XHTW 의료 연구에 WM 켁 재단 고유 영 학자이며, 또한 NIH / NHLBI 보조금 R01 - R01 - HL089598 및 R01HL091947, 그리고 근육질 영양 장애 협회 부여 # 69238에 의해 지원됩니다. RJvO는 생리 게놈의 2008-2010 미국 생리 학회 박사 과정 이수 해안에서받는 것입니다. 이 작품은 또한 CaMKII가 마음에 신호를위한 Fondation Leducq 동맹에 의해 부분적으로 지원됩니다.

1 부 : 운영 필드의 작성 <ol><li> 운영 필드 75% 이소 프로필 알코올로 소독합니다. </li><li> 가열 패드와 적당한 온도에 있는지 확인하십시오. 권장 시스템 ° C ± 1 ° C. 37 유지 치료 패드에 연결된 Gaymar 순환 펌프입니다 심장 박동의 급속한 감소를 피하기 위해 그것은 수술 동안 정상 체온을 유지하는 것이 중요합니다. </li><li> 수술 도구는 수술 전에 뜨거운 구슬 살균기로 소독을하고 있습니다. 무딘 가위, 물론 곡선 집게 X 2, 벌금 45 ° 직각 집게 X 2, 직각 봄 가위, 가슴 견인기, 그리고 바늘 홀더 :.이 절차 들어, 다음과 같은 수술 도구가 필요합니다 </li><li> 커튼 applicators은 출혈의 경우를 대비해해야합니다. </li></ol> 2 부 : 준비 및 마우스의 삽관법 <ol><li> 마우스로 유도 챔버에 anesthetized 아르 2퍼센트 isoflurane 0.5 -1.0 L / 분 백퍼센트 O 2 혼합. </li><li> 헤어 가위는 neckline 중순 가슴 수준으로 모피를 면도하는 데 사용됩니다. </li><li> 마우스는 체온을 유지하기 위해 가열 패드 위에 부정사 위치에 배치됩니다. </li><li> 고무 밴드는 목에을 연장하기 위해 동물의 앞니 위에 배치됩니다. 한 손으로 곡선 집게를 사용하여 혀가 부드럽게 측면으로 조작할 수 있습니다. 다른 한편으로, endotracheal 삽관법은 PE 90 튜브를 사용하여 수행됩니다. endotracheal 튜브 그런 다음 숨을 125-150 / 분에서 하버드 볼륨 순환될 쥐 환풍기 사이클링 0.1 - 0.3ml의 갯벌 볼륨에 연결되어 있습니다. 1.0 L / 분 백퍼센트 O 2 - 수술 도중 마취가 0.5와 isoflurane 1.5-2 %에서 관리하고 있습니다. 마취의 올바른 수준 마우스 손톱 침대 (발가락 - 핀치 반사)에 압력을 적용하여 확인됩니다. </li><li> 외과 분야는 70 % 알콜 다음 betadine 솔루션으로 소독합니다. 이 절차는 세 번 반복됩니다. </li><li> 작업하는 동안 수술 부위의 오염을 방지하기 위해 무균 드레이프는 작업 필드 노출 떠나는 마우스 배치됩니다. </li><li> 멸균 장갑 세트 각 마우스에 사용됩니다. </li></ol> 파트 3 : 트랜스 대동맥의 결합 <ol><li> 두 번째 늑골을 부분 thoracotomy은 수술 현미경을 수행하고 흉골은 가슴 견인기를 사용하여 철회 있습니다. </li><li> 좋은 팁 45 ° 직각 포셉가 부드럽게 대동맥 아치에서 thymus과 지방 조직을 분리하는 데 사용됩니다. </li><li> 가로 대동맥의 신분에 따라, 6.0 실크 봉합사의 작은 조각은 innominate과 왼쪽 경동맥 동맥 (그림 1) 사이에 배치됩니다. </li><li> 두 느슨한 노트는 가로 대동맥 주위에 연결되어 있으며, 27의 작은 조각은 ½ 게이지 뭉툭한 주사 바늘을 가로 대동맥에 평행하게 배치됩니다. 첫 번째 매듭은 빠르게, 바늘에 대해 연결된 두 번째로 다음과 바늘 즉시 직경 0.4mm의 수축을 항복하기 위해 제거됩니다. 가짜 제어 마우스에서 전체 과정은 대동맥의 결합을 제외하고 동일합니다. </li><li> 가슴 견인기을 제거하고 다시 부풀려 폐 2 초 동안 환풍기 모근에서의 유출이다. </li><li> 갈빗대는 중지 봉합 패턴 6.0 prolene의 봉합사를 사용하여 닫힙니다. </li><li> 피부는 지속적인 치료 패턴 6.0 prolene의 봉합사를 사용하여 닫힙니다. </li></ol> 4 부 : 포스트 수술 복구 <ol><li> 이후 수술 진통제 들어, 마우스가 buprenorphine (0.1 밀리그램 / kg) intraperitoneally로 주입됩니다. 수술 후 탈수의 징후가있다면, 멸균 생리가 intraperitoneally 주어집니다. </li><li> 마취는 점차 해제 위치로 낮춘 및 자발적인 호흡의 징후가 발생할 때 endotracheal 튜브가 제거됩니다. </li><li> 마우스가 발생하기 쉬운 위치로 이동하고 손난로에서 복구하는 허용됩니다. </li></ol> 5 부 : 트랜스 대동맥의 성공적인 결합의 확인 <ol><li> TAC 후 일주일은 마우스가 가로 대동맥의 결합에 의해 유도된 압력 과부하에 노출된 정도를 확인하기 위해 다시 anesthetized입니다. 37 유지 1.0 L / 분 백퍼센트 O 2, 체온 ° C ± 1 ° C. - 위에서 설명한 바와 같이, 마취는 0.5과 isoflurane 1.5-2 %로 유지 </li><li> 20 MHz의 도플러 프로브 흐름 판매율을 탐지하기 위해 45 ° 각도로 목의 왼쪽과 오른쪽 측면에 배치됩니다. 컴퓨터 기반의 도플러 신호 프로세서 (인더스 인 스트 루먼트, 휴스턴, TX) 도플러 신호를 표시하고 저장하는 데 사용되었다. 5 </li><li> 실험 프로토콜에 필요한 압력 과부하의 정도에 따라 오른쪽 경동맥 (RC) / 좌측 경동맥 (LC) 특정 범위 내에서 유동 비율만을 생쥐는 추가 분석을 위해 포함됩니다. 심각한 압력 과부하의 결과 어깨를 수축이 T를 리드 반면에 예를 들어, 압력 과부하의 중간 정도, 5-8의 비율로 연결80-10의 OA 비율 (그림 5.3A). 가짜 동물은 (운영하지만, 출혈도 잡았하지 않음) 그러나, ~ 1 (그림 5.3B)의 비율을 것으로 예상된다. </li></ol> 6 : 대표 결과 야생 형 생쥐의 전술에 따라 일반 외과 생존은 80-90 % 정도입니다. 가로 대동맥의 성공적인 수술 내고 5-10의 오른쪽과 왼쪽 경동맥 사이의 도플러 유속 비율 (RC / LC) (그림 1)으로 이어질 것입니다. 가짜 운항 마우스 (그림 2A)에 비해 압력 과부하와 생쥐는 수축 (그림 2B)의 죄어져 있음에 따라, 6-8 주에 1~2주 및 심장 팽창 이내에 심장 비대를 개발 예정이다. 유전자 - 수정된 생쥐가 다른 생존 속도를 전시 수도 있지만 TAC 후 첫 달 동안 사망률은 야생 형 생쥐에 (&lt;20 %) 일반적으로 낮습니다. 6,7 <img src="/files/ftp_upload/1729/1729fig1tmb.jpg" alt="그림 1" border="0" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. 도플러 속도 측정을 사용하여 트랜스 대동맥의 결합의 확인. 오른쪽 대표 도플러 속도 신호 (RC)과 왼쪽 경동맥 (LC) 동맥 육일 포스트 TAC. 이 음반은 ~ 6.8의 RC / LC 유동 비율과 함께 성공적인 결합을 보여줍니다. 하시기 바랍니다 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1729/1729fig1.jpg">여기를 클릭</a> 그림 1의 더 큰 버전을 볼 수 있습니다. <img src="/files/ftp_upload/1729/1729fig2.jpg" alt="그림 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 2"> 그림 2. TAC 다음 대표 전심 이미지. . 섐 - 운영 야생 타입 마우스 심장. B. 와일드 타입 마우스 심장 16주 포스트 TAC. 각 라인 = 1mm.

<ol><li>Rockman, H. A., Ross, R. S., Harris, A. N., Knowlton, K. U., Steinhelper, M. E., Field, L. J., Ross, J. Jr, Chein, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88, 8277-8281 (1991).</li>
<li>Heineke, J., Molkentin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+cardiac+hypertrophy+by+intracellular+signaling+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Mol.+Cell.+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of cardiac hypertrophy by intracellular signaling pathways.</a> Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 7, 589-600 (2006).</li>
<li>Hartley, C. J., Reddy, A. K., Madala, S., Michael, L. H., Entman, M. L., Taffett, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+estimation+of+reduced+coronary+flow+reserve+in+mice+with+pressure+overload+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy.</a> Ultrasound Med. Biol. 34, 892-901 (2008).</li>
<li>Reddy, A. K., Taffett, G. E., Li, Y. -H., Lim, S. -W., Pham, T. T., Pocius, J. S., Entman, M. L., Michael, L. H., Hartley, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+signal+processing+for+use+in+mice%3A+applications%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Doppler signal processing for use in mice: applications.</a> IEEE Trans. Biomed. Eng. 52, 1771-1783 (2005).</li>
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</ol>

인간의 대동맥 협착증을 모방한 것이었 전술은 생쥐에서 심장 비대 및 심장 마비를 유발하는 일반적인 방법입니다. 대동맥 수축에 대한 대체 사이트는 오름차순 및 복부 대동맥을 포함합니다. 대동맥 수축 오름차순하면 좌심실 (LV)에 극도 더 빠른 과부하를 제공합니다. 반면, 복부 대동맥 수축 가능한 보상하는 수단으로 순환 그대로 큰 부분을 떠납니다.이 조사를 더받을 수있는 시간 종속 방식으로 적절한 LV의 과부하에 제공하는 등 따라서 8, TAC는 종종 선호하는 모델입니다. 이 절차는 연습, 기술적 도전 수 있지만, 우리는 야생 타입 마우스에 80-90%의 생존 비율을 달성했습니다. 가로 대동맥 수축의 죄어져 있음은 비대 개발의 정도와 심장 마비 및 팽창은 개발하는 기간을 결정합니다. 또한, 생쥐의 시대는 복구 속도와 심장 마비로 개발 속도론에 영향을 미칩니다. 이전 생쥐 (세&gt; 12 개월) TAC에 경동맥 동맥의 적응 반응을 개발하기 위해 오랜 시간이 걸...

<table><tbody><tr><td>Gaymar T/pump</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Model TP-500</td><td>순환수 펌프</td></tr><tr><td>온도 치료 패드</td><td>Harvard Apparatus</td><td>60-3414</td><td></td></tr><tr><td>핫 비드 멸균기</td><td>Fine Science Tools</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>둔단 가위</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5980</td><td></td></tr><tr><td>각진 스프링 가위</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5668</td><td></td></tr><tr><td>흉부 견인기</td><td>Fine Science Tools</td><td>17002-02</td><td></td></tr><tr><td>거친 곡선 핀셋</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5138</td><td></td></tr><tr><td>Dumont 미세 45&amp;#x00B0; 각도 핀셋</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-25</td><td></td></tr><tr><td>침홀더</td><td>Fine Science Tools</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>전기 면도기</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td>마우스 털 제거용</td></tr><tr><td>PE 90 튜빙</td><td>BD Biosciences</td><td>427420</td><td>삽관용</td></tr><tr><td>MiniVent (인공호흡기)</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Type 845</td><td></td></tr><tr><td>베타딘</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-027132</td><td>의료 소모품점에서 구매 가능</td></tr><tr><td>멸균 장갑</td><td>Mckesson</td><td>20-1565</td><td></td></tr><tr><td>실체 현미경</td><td>Unico</td><td>ZM186</td><td></td></tr><tr><td>6-0 실크 봉합사</td><td>Fine Science Tools</td><td>18020-60</td><td></td></tr><tr><td>27 &amp;frac12; 게이지 바늘</td><td>BD Biosciences</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>6-0 프로린 봉합사</td><td>Mckesson</td><td>3286</td><td></td></tr><tr><td>부프레노르핀</td><td>Institutional Animal Facility</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

마우스의 가로 대동맥 수축

Transverse Aortic Constriction in Mice

마우스의 가로 대동맥 수축 (TAC)은 압력 과부하 유발 심장 비대 및 심장 마비에 대해 일반적으로 사용되는 실험적인 모델입니다.<sup&gt; 1</sup&gt; TAC 처음 종종 심장 수축성의 임시 향상과 관련된 심장의 보상 비대로 연결됩니다. 시간이지나면서, 그러나, 만성 hemodynamic 과부하에 대한 반응은 심장 팽창과 심장 마비의 결과, maladaptive됩니다.<sup&gt; 2</sup&gt; murine TAC 모델이 처음으로 확인되었다 락맨<em&gt; 외</em&gt;.<sup&gt; 1</sup&gt; 이후 광범위하게 인간의 심장 혈관 질병을 모방하고 심장 비대 반응 및 심장 마비로 개발에 참여 근본적인 신호 프로세스를 명료하게하다하는 중요한 도구로 사용되고 있습니다. 등 (내사) 관상 동맥을 내림차순 왼쪽 앞쪽에의 완전한 폐색과 같은 심장 마비의 다른 실험 모델에 비해, 전술은 심장 비대 및 심장 마비의 개발에보다 점진적 시간 코스보다 재현성 모델을 제공합니다. 여기, 우리는 생쥐에서 외과 전술을 수행하는 단계별 절차를 설명합니다. 대동맥 결합에 의해 만들어진 압력 과부하의 수준을 확인하려면, 고주파 도플러 프로브가 오른쪽과 왼쪽 경동맥 동맥의 혈액 흐름 판매율 간의 비율을 측정하는 데 사용됩니다.<sup&gt; 3, 4</sup&gt; 80-90%의 수술 생존 속도, banding 가로 대동맥은 생쥐에서 왼쪽 심실 비대 및 심장 마비를 유도하는 효과적인 기술입니다.

마우스의 가로 대동맥 수축 (TAC)은 심장 비대 및 심장 마비 개발을 기본 메커니즘을 연구하기 위해 일반적으로 사용되는 실험적인 모델입니다. 여기, 우리는 절차가 생쥐에서 심장 비대의 재현성 학위를 만들 수있는 대동맥을 수축에 대해 설명합니다.

마우스에서의 대동맥 횡단 결찰술(Transverse aortic constriction, TAC)은 압력 과부하로 유도된 심비대 및 심부전을 연구하기 위해 흔히 사용되는 실험 모델입니다.

이 절차는 마우스를 마취하고, 무균 수술을 위해 준비시킨 후 가열 패드 위에 배와 닿는 면이 위로 오도록 눕히는 것으로 시작합니다. PE 90 튜브를 사용하여 기관 내 삽관을 수행하고, 이를 설치류 전용 인공호흡기에 연결합니다. 다음으로, 두 번째 갈비뼈까지 부분 흉강 절개술을 시행하고 흉골을 견인합니다.횡대동맥을 확인한 후, 무명동맥과 왼쪽 경동맥 사이를 결찰합니다. 늑골을 닫고, 연속 봉합법으로 피부를 봉합합니다. 마지막으로 기관내 튜브를 제거하고 마우스가 회복되도록 합니다.안녕하세요, Baylor College of Medicine 분자 생리 및 생물 물리학과의 Zander Wars 박사 연구실 소속 Angela Dal Meda입니다. 오늘은 마우스의 횡대동맥 수축술 절차를 보여드리겠습니다. 저희 연구실에서는 심비대 및 심부전 발생의 기저 메커니즘을 연구하기 위해 이 절차를 사용합니다.이제 시작해 보겠습니다. 횡대동맥 협착 또는 TAC 수술을 시작하기 전, 75% isopropyl alcohol로 수술 부위를 소독하십시오. 가열 패드를 켜고 적절한 온도로 설정하십시오.권장하는 시스템은 37 ± 1°C로 유지되는 온열 치료 패드에 연결된 게이머 순환 수중 펌프입니다. 수술 전 핫비드 멸균기를 사용하여 수술 도구를 멸균하십시오. TAX 수술 절차를 위해 다음과 같은 수술 도구가 필요합니다.뭉툭한 가위 한 쌍, 45도 각도의 포셉을 대체할 수 있는 거친 곡선형 포셉 두 개, 각진 스프링 가위 한 쌍, 흉부 견인기 및 지침 홀더를 준비합니다. 출혈에 대비하여 면봉도 준비해야 합니다. 수술 부위 준비가 완료되면 마우스의 기관 삽관을 진행할 수 있습니다.기관 삽관을 준비하기 위해, 마우스를 유도 챔버에서 마취시키고 털 깎이 기구를 사용하여 목 라인부터 가슴 중간 높이까지의 털을 제거합니다. 마우스를 가열 패드 위에 앙와위로 놓습니다. 심박수의 급격한 감소와 갑작스러운 사망 가능성을 방지하기 위해 수술 중 정상 체온을 유지하는 것이 중요합니다.마우스의 발톱 바닥(nail bed)에 압력을 가해 완전히 마취되었는지 확인합니다. 동물의 앞니에 고무줄을 걸어 목을 신전시킵니다. 한 손에 곡선 핀셋을 쥐고, 다른 한 손으로 혀를 조심스럽게 옆으로 밀어냅니다. 기관(trachea)에 PE 90 튜브를 삽입합니다.다음으로, 기관 내 튜브를 Harvard volume cycled 설치류 인공호흡기에 연결합니다. 인공호흡기는 마우스의 체중에 따라 분당 125~150회의 호흡 횟수와 0.1~0.3 milliliters의 1회 호흡량으로 설정해야 합니다. 수술 부위 내부의 피부를 Betadine 용액으로 소독한 후 70% alcohol로 소독합니다. 수술 중 수술 부위의 오염을 방지하기 위해 이 과정을 세 번 반복하고, 수술 부위만 노출시킨 상태로 마우스 위에 멸균 드레이프를 덮습니다.이제 수술 과정 중 횡대동맥 결찰을 수행하겠습니다. 마취는 1.5~2% isof fluorine과 분당 0.5~1L의 100% oxygen으로 유지합니다. 마우스의 손톱 주변을 압박하여 마취 수준이 적절한지 확인하십시오.토큰 반사(token reflex)의 부재를 확인합니다. 부분 흉강 절개술을 시행하여 수술을 시작합니다. 흉골의 머리 쪽 끝부터 두 번째 갈비뼈 높이까지 절개합니다.수술용 현미경을 사용하여 흉곽 견인기로 흉골을 견인합니다. 다음으로, 45도 각도의 미세 팁 포셉을 사용하여 흉선과 지방 조직을 대동맥궁으로부터 조심스럽게 분리합니다. 횡대동맥을 확인한 후, 무명동맥과 좌경동맥 사이에 6.0 silk 봉합사를 작게 잘라 배치합니다.횡대동맥 주위에 느슨하게 매듭 두 개를 묶고, 27.5게이지 둔탁한 바늘의 작은 조각을 횡대동맥과 평행하게 배치합니다. 첫 번째 매듭을 바늘에 밀착시켜 빠르게 묶은 다음, 두 번째 매듭을 묶고 즉시 바늘을 제거하여 직경 0.4 mm의 수축 부위를 만듭니다.횡대동맥을 결찰한 후, 흉부 견인기를 제거하고 인공호흡기의 유출구를 2초 동안 집어서 차단합니다. 폐를 조심스럽게 재팽창시키기 위해 6.0 proline 봉합사로 단속 봉합법을 사용하여 늑골을 폐쇄합니다. 마지막으로 6.0 proline 봉합사로 연속 봉합법을 사용하여 피부를 폐쇄합니다.수술 후 통증 완화를 위해, 마우스의 복강 내에 buprenorphine을 주사합니다. 수술 후 탈수 증상이 나타나면, 0.3~1 mL의 멸균 식염수를 복강 내로 투여합니다.마취제를 점차 줄여 꺼짐 위치로 조절합니다. 자발 호흡 징후가 나타나면 기관내 튜브를 제거한 후, 마우스를 복와위로 눕혀 가열 패드 위에서 회복하도록 합니다. 횡대동맥 결찰 후 일주일이 지나면, 횡대동맥 결찰로 인해 유도된 압력 과부하 정도를 결정하기 위해 마우스를 다시 마취합니다.마취 및 체온 유지 방법은 이전과 동일하게 수행합니다. 20 megahertz Doppler 프로브를 목의 좌우 양측에 45도 각도로 배치합니다. 경동맥 혈류 속도를 측정하기 위해, 컴퓨터 기반 Doppler 신호 처리기를 사용하여 Doppler 신호를 표시하고 저장합니다.실험 프로토콜에 필요한 압력 과부하 정도에 따라, 우측 경동맥(RC)과 좌측 경동맥(LC)의 혈류 비율이 특정 범위 내에 있는 마우스만 추가 분석 대상으로 포함합니다. 예를 들어, 중등도의 압력 과부하는 5~8의 비율을 나타내며, 더 강한 결찰로 인한 심각한 압력 과부하는 8~10의 비율을 나타냅니다. 반면, 샴(sham) 대조군 동물은 비율이 약 1일 것으로 예상됩니다.야생형 마우스에서 TAC 수행 후 일반적인 수술 생존율은 약 80~90%로 성공적입니다. 횡대동맥의 수술적 결찰을 통해 가짜 수술(sham operation)을 받은 마우스와 비교했을 때, 우측 및 좌측 경동맥 간의 도플러 혈류 속도 비율(RC/LC)이 5에서 10 사이로 나타납니다. 압력 과부하가 유도된 마우스는 결찰 정도에 따라 1~2주 이내에 심비대가 발생하고, 6~8주 후에 심장 확장이 나타날 것으로 예상됩니다.지금까지 마우스에서 횡대동맥 협착술을 수행하는 방법을 보여드렸습니다. 이 시술을 수행할 때는 정상 체온을 유지하고 혈액 손실을 최소화하는 것이 중요합니다. 이것으로 모든 설명을 마치겠습니다. 시청해 주셔서 감사하며, 귀하의 실험에 좋은 결과가 있기를 바랍니다.

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

이 비디오에서는 압력 과부하로 인한 심부전을 조사하기 위해 마우스에서 최소 침습적 횡단 대동맥 수축에 대한 실험 프로토콜을 시연합니다.

마우스 모델의 횡방향 대동맥궁 밴딩: 좌심실에서 고압 유도를 위한 마우스의 최소 침습 기술

이 프로토콜의 목적은 비 침습적 및 M B- 모드 초음파 심장 검진 및 컬러 / 맥파 도플러 촬상을 이용하여 횡 대동맥 수축에 의해 생성 된 심장 질환의 마우스 모델에서 심장 구조적 및 기능적 변화를 평가하는 것이다.

심 초음파 이미징에 의해 가로 대동맥 수축의 마우스 모델에서 심장 형태 학적 평가 및 기능 변경

심장 비대와 리모델링을 유도하는 복부 대동맥 수축의 쥐 모델을 설명합니다. 효율적이고 재현성이 높으며 최소 침습적 방법을 사용하여 심근 비대 및 기능 장애 연구를 위한 간단하면서도 유용한 플랫폼을 제공합니다.

쥐의 복부 대동맥의 수축을 통해 심장 리모델링의 모델

기관 삽관과 인공 호흡기의 사용을 제거하면서 최소 침습 가로 대동맥 수축 (MTAC)는 일반 가로 대동맥 수축 (TAC)의 본질을 절약합니다. 그것은 특히 병진 연구에서 좌심실 과부하에 높은 처리량 연구를위한 매우 바람직한 방법으로 증명한다.

마우스의 최소 침습 가로 대동맥 수축

이 프로토콜의 목표는 단계별로 설명 하는 최소 침 습 가로 대동맥 수축 (TAC) 생쥐에서의 기술. 삽 관 법 그리고 일반적으로 사용 되는 표준 절차 필수는 환기의 제거, 최소 침 습 전술 수술 절차를 간소화 하 고 동물에 긴장을 감소 시킨다.

왼쪽된 심 실 비 대의 유도 대 한 생쥐에서 최소 침 습 가로 대동맥 수축의 기술

여기, 선물이 측면 thoracotomy 통해 가로 대동맥 수축 (TAC)의 프로토콜. 이 기술은 압력 과부하 및 마우스 활용 표준 전술 실험실 설정에서에서 심장 마비를 시뮬레이션을 최소 침 습, 닫힌 가슴 수술입니다.

마우스에 가로 대동맥 수축 유도를 폐쇄 가슴 모델

이 프로토콜은 흡수 가능한 봉합사를 사용하여 일시적인 심근 비대증을 얻는 향상된 방법을 제시하며 압력 과부하를 제거 한 후 좌심실 비대 감소를 시뮬레이션합니다. 심근 대위 축 대 사전 조절에 대 한 연구에 대 한 가치가 있을 수 있습니다.

과도 심근 비대증을 얻기 위해 흡수 가능한 봉합사와 횡단 대동맥 수축 을 작동

본 프로토콜은 자체 제작 견인기를 사용하여 최소 침습적 횡 대동맥 수축(TAC) 절차를 사용하여 수정되고 단순화된 기술을 설명합니다. 이 절차는 인공 호흡기 또는 현미경없이 수행 할 수 있으며 압력 과부하를 유발하여 결국 심장 비대 또는 심부전으로 이어집니다.

생쥐의 횡방향 대동맥 수축에 대한 수정된 기술

마우스 heterotopic 심장 이식 모델은 거부하고 면역 반응의 메커니즘을 연구를위한 중요한 방법으로 많은 수사관에 의해 입증되었습니다. 그러나, 관련 기술은 여전히​​ 도전하고 있습니다. 표준 기술을 수정하여 우리는 1000 개 이상의 이식 성공을 있었다.

마우스의 Heterotopic 심장 이식

마우스 작은 창자 이식 모델은 면역 거부하고 화면의 새로운 immunosuppressive 약물 mechanismes을 연구하는 중요한 도구로 인식되었습니다. 그러나이 모델은 관련된 기술이 매우 기술적으로 도전하기 때문에 사용하는 제한됩니다. 이제 우리는 수정 기법을 소개합니다.

마우스에 작은 창자 이식

배우세요 마우스 가로 대동맥 수축(TAC) 수술 기법으로 심장 비대와 심부전을 유도하는 방법을. 도플러 유속 측정으로 압력 과부하를 평가하고 심혈관 질환 기전 연구에 활용하세요.

마우스의 가로 대동맥 수축

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