마우스에 Transthoracic Echocardiography

심장초음파검사를 수행하기 전에 마우스를 가열된 EKG 보드 위에 놓고 스테이지에 내장된 ECG 전극에 일시 중지를 테이프로 붙입니다. 실험 내내 적절한 마취 수준과 체온이 유지됩니다. B 모드라고도 하는 짧은 축 모드를 사용합니다.

모든 심근벽뿐만 아니라 내측 및 내측 유두 근육을 모두 쉽게 볼 수 있을 때 적절한 이미지를 얻을 수 있습니다. 보기 모드를 M 모드로 변경하여 수축기 심장 기능의 측정값을 평가하고 정량화할 수 있습니다. 좌심실 후벽을 표적으로 한 후 조직 도플러 이미징 모드를 사용하여 이완기 기능 측정을 정량화할 수 있습니다.

4개의 챔버 보기 모드에서는 승모판막과 중격 벽의 적절한 이미지를 얻을 수 있습니다. 마지막으로 맥파 도플러 모드로 변경하여 승모판 혈류 패턴을 시각화할 수 있습니다. 안녕하세요, 제 이름은 베일러 의과대학 분자생리학 및 생물물리학과의 잰더 워즈 박사 연구실의 조나단 리프레스입니다.

오늘은 생쥐의 경흉부 초음파 심장 조영술 절차를 보여 드리겠습니다. 우리는 실험실에서 이 기술을 사용하여 시간 경과에 따른 심장 기능과 치수를 연구합니다. 시작하자.

이미징 연구 하루 전에 마우스를 마취하고 이발기를 사용하여 목선에서 가슴 중간 높이까지 털을 면도합니다. 그 후 제모 크림으로 남아있는 체모를 제거하고 듀라 루프 젤을 양쪽 눈에 도포하여 공막의 건조를 방지합니다. 마취된 마우스를 ECG 리드가 내장된 가열 패드 위에 누운 자세로 놓습니다.

체온을 유지하려면 마취 시스템에 연결된 콧방울 안에 주둥이를 배치하여 시술 내내 안정적인 상태의 진정 수준을 유지하십시오. 필요한 경우 마취 수준을 조정하여 분당 450회 이상 또는 50회의 목표 심박수를 얻을 수 있습니다. 또는 BPM은 직장 프로브를 부드럽게 삽입하여 가열 패드를 통해 체온을 지속적으로 모니터링하고 조정합니다.

체온과 심박수의 미미한 변화도 심장 기능에 영향을 미치므로 좁은 범위 내에서 체온을 유지하는 것이 중요합니다. 생쥐에서. 네 발에 전기 젤을 바르고 ECG 전극에 테이프로 붙입니다.

이 절차를 시작하려면 초음파 젤 층을 가슴, 주로 심장 위에 있는 부위에 바르십시오. 초음파 이미징을 방해할 수 있는 젤 내의 기포를 피하십시오. 마우스를 약간 위쪽 위치에 고정하고 마이크로 매니퓰레이터를 사용하여 약간의 각도로 머리를 위로 올립니다.

프로브와 심장 사이에 90도 각도로 초음파 프로브를 고정합니다. 단축 심초음파 측정을 시작하려면 프로브를 흉부 쪽으로 엄하게 내립니다. 프로브를 흉골 바로 위에 놓으면 신호가 왜곡될 수 있으므로

먼저 2차원 이미징 또는 B 모드를 수행하여 흉골 단축당 보기를 얻고 프로브의 보기 영역을 조정하여 완전한 이미지를 얻습니다. 동물의 심장 크기에 따라 이 방향의 적절한 이미지에는 좌심실과 우심실 벽의 약간의 부분이 포함됩니다. 화살표는 전외측 및 후방 내측 유두근, 좌심실의 후방 및 전방벽, 뇌실 중격 벽, 우심실 벽의 약간 부분을 나타냅니다.

다음으로, 심장 치수를 정밀하게 측정하고 수축기 좌심실 기능의 매개변수를 나중에 평가하기 위해 획득한 이미지를 수축성 저장하기 위해 1차원 보기를 제공하는 심초음파를 사용합니다. 흉골 주위 단축을 계속 보면서 조직 도플러 이미징 또는 TDI를 수행하여 심근 운동의 속도를 측정할 수 있습니다. 관심 영역은 방사형 축 평가를 위해 후방 좌심실 벽을 포함하도록 표시됩니다.

얻은 파형은 확장기 기능을 평가하기 위해 4개의 피크를 가지며 IVRT ePrime AP 프라임 및 I-V-C-T-S 프라임은 수축기 속도를 나타냅니다. 이러한 매개변수는 나중에 대표적인 결과 섹션에서 설명합니다. 맥파 도플러 또는 PWD는 심근 조직의 특정 깊이에서 작은 영역 내의 혈류 속도를 측정하는 데 사용할 수 있습니다.

트랜스 승모판 흐름 패턴을 이미지화하려면 트렌델렌버그 위치에서 동물을 뒤로 기울이고 프로브가 심장의 정점과 직교하도록 프로브를 위쪽으로 기울입니다. 이제 ISO 불소 수치를 높여 심박수를 300-350BPM으로 낮추면 승모판막의 움직임이 느려집니다. 비교 연구의 경우 동물 간에 유사한 심박수를 유지하는 것이 중요합니다.

승모판막의 움직임을 판막을 가로지르는 흐름을 측정하기 위한 기준점으로 시각화합니다. 승모판 전체의 흐름 패턴을 측정합니다. PWD를 사용하면 두 개의 파동이 특징적으로 보이는데, 하나는 심실 조기 EWA의 수동적 충전을 나타내고 다른 하나는 심방 수축기의 활성 충전을 나타냅니다.

건강한 심장에서 심방파의 EWA 속도는 A파보다 약간 큽니다. 모든 측정이 완료되면 동물이 가열된 ECG 패드 위에서 회복하고 마취를 끌 수 있도록 합니다. 쥐가 깨어나면 우리로 되돌립니다.

여기서는 좌심실 전방 및 후벽, 뇌실 내 중격벽 및 측벽을 보여주는 흉골 주위 단축축을 따라 얻은 2D 심장 초음파 이미지 또는 B 모드를 보여줍니다. 좌심실 내강의 직경은 좌심실 내경으로 측정할 수 있습니다. 별표는 우편 내측 유두 근육을 나타냅니다.

다음 2D 심장초음파 이미지 또는 B 모드는 최대 속도에서 E를 결정하기 위해 승모판 위의 관찰 영역이 있는 정점 4개의 챔버 보기를 보여줍니다. MVAL은 승모판 전방 첨판을 나타냅니다. MVPL은 승모판막을 나타냅니다.

후방 첨판 RV는 우심실을 나타내고 LV는 좌심실을 나타냅니다. 이 대표적인 M 모드 트레이싱에서 큰 화살표는 끝 수축기 직경 ESD와 끝 이완기 직경을 나타냅니다. 좌심실의 EDD.

LV A WDS는 좌심실 전벽 두께를 나타내고 L-V-P-W-D-S는 각각 이완기 및 수축기 동안의 좌심실 후벽 두께를 나타냅니다. 좌심실 후벽의 조직 도플러 이미징을 위한 대표적인 추적이 여기에 나와 있으며, 여기서 IVRT는 ISO 체적 이완 시간을 나타내고 IVCT는 ISO 체적 수축 시간을 나타냅니다. e프라임파는 좌심실의 조기 이완기 충전 중 승모판 고리의 움직임에 해당하며, APR 파는 LV S 프라임의 후기 충전 중 심방 수축기에서 발생하며 수축기 속도를 나타냅니다.

승모판 첨판 팁의 맥파 도플러 기록은 승모판 유입 속도 패턴을 제공하여 초기 이완기 속도, 이완기 수축이 있는 후기 이완기 속도 및 비율에 대한 E를 도출할 수 있습니다. IVRT는 또한 이완기 기능과 충전 압력을 특성화하는 데 유용한 변수입니다. 이 추적에서 ET는 건강한 심장의 배출 시간을 나타냅니다.

EWA 속도는 여기에서 관찰된 파동보다 약간 큽니다. 안녕하세요, 방금 마우스에서 경흉부 심장 초음파를 수행하는 방법을 보여 드렸습니다. 이 절차를 수행할 때 동물을 적절하게 다루고 그에 따라 마취 수준도 조정하는 것을 기억하십시오.

그게 다야. 시청해 주셔서 감사드리며 실험에 행운을 빕니다.