Name: Drosophila의 코 확장 응답 (당) 어세이 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-04-29T00:00:00.000+00:00
Duration: 28 min 40 s
Description: 배우세요 Drosophila의 코 확장 응답(PER) 행동 분석법을 통해 곤충의 미각 선호도를 연구하는 방법을. 이 기술은 신경과학 및 행동생물학 연구에 필수적인 도구입니다.

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우리는 비디오 프레 젠 테이션에 카메라맨으로 봉사에 대한 폴 그레이엄 감사합니다.

굶주림 <ol><li> 첫째, 파리를 굶어. </li><li> 빈 병에 물을 배어 김 - 닦으의 작은 조각을 넣어. </li><li> 전송 20-30 잘 먹이가 빈 유리병에 날아. </li><li> 종이가 촉촉한 있는지 확인하기 위해 매 12 -24 시간을 확인합니다. </li><li> 36-72시간 위해 파리를 굶어. </li></ol> 파리를 수정 <ol><li> 하나 흡인기로 날아보세요. </li><li> 개방을 통해 200 μl 노란색 제보를 놓으십시오. 동시에 내리고 그것을 불고, 당신은 노란색 팁으로 파리를 그만두라 수 있습니다. </li><li> 부드럽게 움직일 수없는 지점으로 비행을 밀어 공기를 적용할 수 있습니다. </li><li> 레이저를 사용하여 비행의 눈을 약 마크를 넣어 다음 날 다시 빨아 및 팁 잘라. </li><li> 부드럽게 위치에 다시 파리를 불어하지만, 단지 아주 끝을 도달하기 전에, 코이 위치가 될 수있는 위치에서 절단 경사합니다. 이 경사 컷없이 할 수 있지만, 그것은 분명히 다음과 같은 과정을 쉽게합니다. </li></ol> 자당의 빅스 준비 <ol><li> Kimwipes의 6mm 폭 스트립 ® 종이 스레드로 열고, 그리고 콘 모양 심지 작은 조각 (&lt;1cm)로 분열 시키려고. </li><li> 이러한 작은 빅스는 자당 솔루션이나 물에 담근와 연락하여 코에게 제공했다. </li></ol> 컨트롤 및 실험 동물 준비 <ol><li> 어떤 tastants를 테스트하기 전에 비행을 4 %의 자당 솔루션을 제공합니다. 이것은 긍정적인 제어 역할을합니다. 응답하지 않은 비행기를 폐기하십시오. </li><li> 다음, 즉시 검사 DH 2 0. 대조군으로 작동합니다. 그것이 어떻게 반응 했는가하면 파리를 폐기하십시오. </li><li> 귀하의 tastants 테스트 후 이러한 컨트롤을 테스트합니다. </li></ol>

<ol><li>Dethier, V. G. The Hungry Fly. , Harvard University Press. Cambridge. (1976).</li>
</ol>

이 프레 젠 테이션에서, 우리는 코 확장 응답 분석의 모든 단계를 통과했습니다. 방법은 매우 간단 소리지만, 많은 다른 행동 assays에 많은 작은 것들이 작업에서 분석하지 못하도록 할 수 있습니다. 우리는 세심한주의가 필요 많은 같은 단계를 지났습니다. 자, 내가하는 가장 중요한 요소 중 일부를 reemphasize. 하나는 이러한 요소는 심지 모양입니다. 나는 아주 좋은 사례 중 일부를 표시해야하지만, 물론, 현실에서 모든 아주 좋은 아주 나쁜 사이에 연속 스펙트럼 것입니다. 처음에는, 당신은 아주 좋은쪽으로 가까운 것들을 사용하는 수도 있지만, 일일 귀하의 표준은 그리 좋은 범위에 조금씩 옮겨 시작 있습니다. &quot;좋은&quot;이라는 있도록 인간의 인식은 매우 쉽게 무의식적으로 이동하실 수 있습니다. 이것을 방지하기 위해 한 가지 방법은 당신이 실험에 사용된 윅의 사진을 찍을하고, 옆에있는 모든 사진의 측면을 비교하는 것입니다. 아니면, 적어도 잘 작동 빅스 중 하나 찍어 및 테스트 뻬흐하기 전에 잠시 동안 그것을 보곤. ...

<table><tbody><tr><td>HDR-HC1</td><td>카메라</td><td>Sony Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SMZ800</td><td>현미경</td><td>Nikon Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>P-IBSS</td><td>카메라 어댑터</td><td>Nikon Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1x DC10LN</td><td>카메라 어댑터</td><td>Optem, Qioptiq Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>257010</td><td>카메라 어댑터</td><td>Optem, Qioptiq Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TREKKER Mk2</td><td>삼각대</td><td>BENBO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gorillapod SLR</td><td>삼각대</td><td>Joby</td><td></td><td></td></tr><tr><td>iMac G5</td><td>컴퓨터</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Power Mac G5</td><td>컴퓨터</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>iMovie</td><td>소프트웨어</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MPEG Streamclip</td><td>소프트웨어</td><td>SQUARED 5</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

drosophila의 코 확장 응답 (당) 어세이

Proboscis Extension Response (PER) Assay in Drosophila

코 확장 응답 (당) 파리에서뿐만 아니라 꿀벌에서 사용되었습니다 맛을 행동 분석입니다. 파리의 입 (labellum)의 표면에 맛을 뉴런을 전시 sensilla라고 머리와 같은 구조가 없습니다. 매력적인 물질 labellum로 연락하게되면 파리가 재료를 소비하기 위해 코를 확장합니다. 코 확장 응답 (당) 분석이 맛을 행동 반응을 측정하고, 그것은 하나의 플라이 식품 환경 설정에 대해 배울 수있는 유용한 방법입니다. 같은 자당, 포도당 및 Fructose와 같은 다양한 설탕,의 솔루션은 비행을 매우 매력적입니다. 달콤한 솔루션에 혼합하면 aversive 물질의 효과도 PER의 감소로 테스트할 수 있습니다. 기본 절차의 단순에도 불구하고, 작동을 방지할 수있는 많은 것들이있다. 주의를 필요로하는 요인 중 하나는 파리의 반응 상태를 말합니다. 적절한 응답 상태로 비행을 제공할 필요 기아 시간은 36에서 72시간로 크게 다릅니다. 우리는 비 응답하거나 하이퍼 반응 개별 동물 밖으로 검사 수있는 파리의 상태 및 평가를 위해 컨트롤 시리즈를 만들었습니다. 또 다른 중요한 요인은 영향 수준과 단어로 설명하기 어려운 것입니다 labellum에 연락처의 위치입니다. 이 비디오 프레 젠 테이션이 방법의 재현성을 높일 것이 여러 다른 개선과 함께 모든 방법을 보여줍니다.

코 확장 응답이나 PER는 파리에서뿐만 아니라 꿀벌에서 사용되었습니다 맛을 행동 분석입니다. 코가 매력적인 물질과 접촉하게되면, 비행은 물질을 소비하기 위해 코를 확장합니다. 각종 당분의 솔루션은 비행을 매우 매력적입니다.

Drosophila의 코 확장 응답 (당) 어세이

주둥이 확장 반응(Proboscis extension response, PER)은 초파리뿐만 아니라 꿀벌에서도 사용되어 온 미각 행동 분석법입니다.
초파리 입의 표면에는...

안녕하세요. 이번 발표에서는 식도로의 Proboscis 신장 반응 분석법을 수행하는 방법을 보여드리고자 합니다. Proboscis 신장 반응(PER)은 초파리와 꿀벌 모두에서 사용되는 미각 행동 분석법입니다. 초파리의 Proboscis가 유인 물질과 접촉하면, 초파리는 해당 물질을 섭취하기 위해 Proboscis를 신장시킵니다.수크로스, 글루코스, 프럭토스와 같은 다양한 당분 용액은 초파리에게 매우 매력적입니다. PR은 다리를 통한 접촉으로도 관찰될 수 있지만, 본 발표에서는 구기(proboscis)의 접촉에 집중하고자 합니다. 따라서 PR 분석의 첫 번째 단계는 초파리를 굶기는 것입니다.기아 상태 조건을 최적화하는 것은 이 분석법에서 가장 중요한 요소 중 하나입니다. 여기서 중요한 점은 크게 두 가지입니다. 하나는 기아 시간이며, 다른 하나는 기아 상태 이전 파리의 체구 크기입니다.그리고 이 둘 사이에는 양의 상관관계가 있는 것으로 보입니다. 파리의 크기가 크고 살이 쪄 있다면, 파리를 더 많이 굶겨야 합니다. 여기서 체구의 크기는 파리 먹이의 영양 상태와 바이알 내 파리의 밀도에 따라 달라집니다.적절한 예시를 보여드리겠습니다. 이 바이알을 보시면 파리들이 너무 과밀하지 않은 것을 확인하실 수 있습니다. 바이알 하나당 약 100에서 150마리의 PPE가 들어 있습니다.초파리가 우화하자마자 신선한 먹이가 있는 곳에 3~5일 동안 더 유지한 후, 종이가 들어 있는 빈 바이알로 옮깁니다. 이 종이는 항상 습한 상태로 유지하며, 기아 시간은 24시간에서 96시간까지 다양할 수 있습니다. 기아 시간에 대해서는 나중에 다시 설명하겠습니다.PER 분석을 위해 파리를 고정하는 방법은 다음과 같습니다. 먼저, 파리 한 마리와 흡입기(aspirator)를 준비합니다. 그다음, 200 µL 노란색 팁을 흡입구 위에 씌웁니다.이제 동시에 뒤집으며 바람을 불어넣습니다. 파리를 노란색 팁 쪽으로 밀어 올린 후, 공기를 살살 가해 파리가 움직일 수 없는 지점까지 밀어 올립니다. 면도날을 사용하여 파리의 눈 부근에 표시를 한 다음, 파리를 다시 빨아들이고 팁의 끝부분을 절단합니다. 이제 다시 조심스럽게 바람을 불어 파리를 원래 위치로 되돌립니다.하지만 완전히 끝에 도달하기 직전에, probos가 위치할 지점에 SL 절개를 가하십시오. SL 절개 없이도 가능하지만, 이를 수행하면 이후 과정이 확실히 더 수월해집니다. 이제 파리 아래쪽의 노

proboscis-extension-response-per-assay-in-drosophila

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

확인된 뉴런과 먹이 행동에서 칼슘 신호의 동시 녹화 Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster은 한 세기 이상에서 많은 중요한 생물 학적 과정의 분자 및 세포 기초를 이해하기 위해 사용되었습니다 유전자와 behaviorally 다루기 쉬운 모델 시스템이다. Drosophila 잘 플라이 행동의 유전적 기초에 대한 통찰력을 얻기 위해 악용되었습니다.

분석의 방법 Drosophila 행동

이 비디오는 리간드 결합 및 형광 이미징을 사용하여 초파리에서 감각 뉴런 반응을 감지하는 방법을 보여줍니다. 리간드는 뉴런 수용체에 결합하여 칼슘 유입을 일으킵니다. 칼슘은 지표 복합체에 결합하여 형광 방출을 유발하여 리간드에 대한 신경 반응을 확인합니다.

Drosophila의 감각 뉴런에서 생리적 반응 감지

이 비디오 문서에서는, 우리는 초파리 비행 성인 과일의 후각에 의존 식품 검색 행동에 대한 배고픔이나 포만감의 효과를 측정 할 수있는 자동화 된 분석을 설명합니다.

먹이 찾아 돌아다 행동에 대한 단일 비행 분석에 초파리

꿀벌(Apis mellifera)을 위해 개발된 코확장반응(PER) 조절프로토콜은 많은 곤충 종에서 여러 가지 학습 메커니즘을 연구하기 위한 생태학적으로 관련성이 있고 쉽게 정량화할 수 있는 수단을 제공합니다.

코 확장 응답 곤충의 행동 소성을 조사하기위한 프로토콜 : 기본, 바이오 메디컬에 응용 프로그램, 및 농업 연구

기계감각에 영향을 미치는 새로운 돌연변이를 식별하기 위해 MARCM 방법에 의해 생성된 돌연변이 클론에서 파리 강모의 촉각 자극에 대한 행동 반응을 측정하는 분석을 설계했습니다. 이 기술의 결합을 통해 그렇지 않으면 치명적일 수 있는 기계민감성 돌연변이를 식별할 수 있습니다.

의 Mechanosensation에 대한 행동 분석 클론의 MARCM은 기반<em&gt; 초파리</em

여기에서는 최대 100마리의 식초파리(Drosophila melanogaster)의 후각 반응을 분석하기 위한 행동 설정 및 데이터 분석 방법을 설명합니다. 이 시스템은 단일 또는 다중 후각 자극과 함께 사용할 수 있으며 신경 세포 하위 집합의 광유전학적 활성화 또는 침묵에 적응할 수 있습니다.

의 컴퓨터 추적하여있는 분석 후각 행동<em&gt; 초파리</em&gt; 네 사분면의 후각에

이 프로토콜의 전반적인 목표는 장쇄 사상 페로몬에 반응하는 Drosophila 후각 수용체 뉴런으로부터 단일 감각 기록을위한 낮은 휘발성의 냄새 물질을 제시하는 방법을 입증하는 것입니다.

에서 전기 생리 학적 기록<em&gt; Drosophila</em&gt; 낮은 휘발성의 냄새에 반응하는 Trichoid Sensilla

이 프로토콜 분석 초파리 애벌레 동시 optogenetic 그것의 후 각 신경의 자극에 대 한 응답에서의 탐색 동작 합니다. 630 nm 파장의 빛은 빨간색 이동 채널 rhodopsin 표현 개별 후 각 신경 세포를 활성화 하는 데 사용 됩니다. 애벌레의 움직임이 동시에 추적 하 고 디지털 기록, 사용자 작성 소프트웨어를 사용 하 여 분석.

초파리 애벌레 동작 Optogenetic 후 각 신경의 자극에 대 한 응답 추적

이 프로토콜의 목표는 Drosophila 애벌레에서 기계적 고치에 대한 향상된 분석법을 수행하는 방법을 보여주는 것입니다. 우리는 기계적 과민성 (알로디니아 및 과민증)이 Drosophila 애벌레에 존재한다는 것을 보여주기 위하여 여기에서 분석기를 이용합니다.

드로소필라 애벌레의 기계적 고치절 측정을 위한 향상된 분석 및 도구

이 논문은 CsChrimson 및 GtACR2를 활용하여 특정 뉴런을 활성화하고 침묵시키는 Drosophila melanogaster의 광유전학적 조작 방법을 제시합니다. 광유전학을 활용하여 열택 및 미각 행동을 탐구하고 이러한 과정을 제어하는 기본 신경 메커니즘에 대한 통찰력을 제공하는 네 가지 실험이 설명됩니다.

Drosophila melanogaster에서 신경 회로의 광유전학적 조작을 위한 행동 분석

배우세요 Drosophila의 코 확장 응답(PER) 행동 분석법을 통해 곤충의 미각 선호도를 연구하는 방법을. 이 기술은 신경과학 및 행동생물학 연구에 필수적인 도구입니다.

Drosophila의 코 확장 응답 (당) 어세이

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