약물 보강 소설 장치 및 방법

이 비디오는 전통적인 조건화된 장소 선호와 자가 투여 절차를 결합하여 약물 남용을 연구하는 새로운 접근 방식을 보여줍니다. 먼저, 두 개의 서로 다른 조작 환경에 대한 기본 설정이 결정됩니다. 그런 다음 쥐가 독특한 조작 환경 중 하나에서만 코카인을 스스로 투여하는 자가 투여 세션이 시작됩니다.

조건화 후, 동물이 조작 환경 중 하나에서 보내기로 선택한 시간을 측정하고, 장소의 변화, 선호도 및 약물 자가 투여율을 측정하고 상관시킬 수 있습니다. 안녕하세요, 저는 텍사스 대학교 오스틴 캠퍼스 약리학 및 독성학과 약학대학의 크리스틴 엘 박사 연구실의 앨리슨 피두시아입니다. 저는 크리스틴 엘르입니다.

오늘 우리는 쥐의 약물 강화 및 중독을 연구하기 위해 여러 가지 방법으로 사용할 수 있는 새로운 장치를 보여드리고자 합니다. 우리는 실험실에서 이 절차를 사용하여 코카인 자가 투여의 상태 영향을 연구합니다. 시작하겠습니다.

약물 강화 실험을 준비하기 위해 먼저 수컷 쥐가 음식 보상을 위해 레버를 누르도록 훈련시킵니다. 다음으로 약물 자가 투여에 사용될 정맥 주사 카테터를 구성합니다. 카테터는 스테인리스 스틸 캐뉼라와 Celeste 튜브로 만들어지며 메탄올과 물로 세척해야 합니다.

그런 다음 수술 당일 준비하는 동안 공기 건조시키고 70 % 에탄올로 목욕시킵니다. 카테터가 완성되면 쥐는 약물 자가 투여가 가능하도록 경정맥 카테터 삽입 수술을 받습니다. 실험하는 동안 2.5%에서 4%의 불소로 쥐를 마취시킵니다.

다음으로 머리와 가슴을 면도하고 Betadine 용액으로 해당 부위를 소독합니다. 그런 다음 수술 후 멸균 패드에 놓습니다. 쥐를 동물 군집으로 돌려보내기 전에 몇 시간 동안 모니터링하십시오.

실험에 사용된 코카인을 제조하기 위해 0.9% 식염수, 헤파린 및 멘톤 용액 0.1ml를 매일 세척하여 카테터 개통성을 유지하고, 동물과 약물 전달을 준비한 동물의 체중에 따라 적절한 용량 농도의 등장성 식염수에 용해시킨다. 실험 중에 사용되는 장치를 살펴 보겠습니다. 실험에 사용되는 장치는 하우스 및 자극 조명이 장착된 두 개의 단일 레버 챔버와 운동 활동을 측정하는 데 사용되는 세 세트의 포토 빔으로 구성됩니다.

챔버는 건설 된 플렉시 글라스 골목으로 함께 연결됩니다. 골목은 흰색 줄무늬가 있는 두 개의 검은색 벽과 두 개의 금속 벽, 투명한 플렉시글라스 상단과 흰색 플렉시글라스 바닥으로 구성되어 있습니다. 두 개의 작동실에는 강철 그리드, 막대 바닥이 설치되어 있으며, 탈착식 금속 케이지 바닥이 있습니다.

시각 및 후각 단서는 조작자 챔버 내에 배치되어 독특하고 구별 가능한 환경을 만듭니다. 환경 중 하나에서 위협 요소는 코카인 주사에 액세스할 수 있습니다. 대체 환경에서 위협 요소는 식염수 주사에만 액세스할 수 있습니다.

시각적 신호는 전면 및 후면 벽과 케이지 상단 위에 부착된 흰색 또는 검은색 펠트 재료로 구성됩니다. 후각 신호는 챔버의 막대 바닥 아래에 위치한 면봉을 포화시키는 기름 기반 열 또는 계피의 감각입니다. 실험하는 동안 천칭자리 반응 및 운동 활동 데이터는 med PC 소프트웨어가 장착된 Med Pentium 100MHz 컴퓨터에 기록됩니다.

지금까지 실험 장치에 대해 알아보았으니, 이제 데이터를 수집하는 방법에 대해 알아보겠습니다. 실험 절차는 이틀 동안 지속되는 기본 선호도 테스트로 시작하여 8일 또는 16일 동안 지속되는 약물 자가 투여 세션으로 이어지며 조건부 장소 선호도 테스트로 끝납니다. 기준선 선호도 측정값을 수집하기 시작하려면 쥐를 20분 동안 두 조작실에 모두 접근할 수 있는 중앙 골목에 놓습니다.

쥐를 챔버에 넣은 직후 비디오 카메라, 메드 PC 소프트웨어 프로그램 및 타이머를 동시에 활성화하십시오. 20분 후 챔버에서 쥐를 꺼내 가정용 케이지에 다시 넣습니다. 마지막 기준선 검사 다음 날, 약물 자가 투여 세션을 시작합니다.

먼저 감각 신호를 배치한 다음 패널을 배치하여 플렉시글라스 중앙 골목에서 챔버로의 접근을 차단합니다. 이제 동물의 카테터 주입구를 장착된 약물 주사기에 연결하여 세션을 시작합니다. 먼저 동물을 방에 넣습니다.

조작실 문을 닫은 후, 1시간 동안 코카인이 접근할 수 있도록 의료 PC 프로그램과 타이머를 작동시킨다. 코카인은 점진적 비율의 강화 일정을 사용하여 투여됩니다. 이 일정은 연속적인 코카인 주사를 맞을 때마다 점진적으로 더 많은 지렛대 반응을 필요로 합니다.

각 주사는 격일로 킬로그램 당 0.75 밀리그램의 용량으로 구성됩니다. 대체 환경에서는 식염수 주사에도 점진적 비율 일정이 사용됩니다. 각 자가 투여 세션이 끝나면 약물 튜브에서 랩을 분리하고 챔버에서 제거한 다음 가정용 케이지에 다시 넣습니다.

마지막 자가 투여 세션 다음 날, 조건화된 장소 선호도 테스트를 실시합니다. 이 테스트의 절차는 기준 측정과 동일합니다. 이제 데이터를 평가하고 분석하는 방법을 살펴보겠습니다.

데이터 평가 및 실험자 블라인드 그룹 할당은 동물이 각 구획에서 보낸 시간을 결정합니다. 실험자는 비디오 테이프를 검토하여 장치 내에 배치된 후 5분 후부터 15분 동안 구획 사이의 출입구를 계산합니다. 기준선 선호도 및 CPP 테스트 점수를 결정하는 데 사용되는 것과 동일한 절차입니다.

기준선 측정과 컨디셔닝 후 CPP 점수의 차이는 약물 컨디셔닝 효과를 결정하는 데 사용됩니다. 컨디셔닝 후 차이 점수는 CPP 테스트 중 약물 쌍 구획에서 보낸 시간에서 돌출 쌍 구획에서 보낸 시간을 빼서 계산합니다. 기준선 차이 점수는 유사하게 계산되어 CPP 차이 점수에서 뺍니다.

약물 조절의 효과를 결정하기 위해 기준선에서 테스트 세션까지 다양한 점수 변화에 대한 통계 분석을 수행할 수 있습니다. 여기에 표시된 것은 기준선 및 CPP 테스트 점수의 대표적인 그래프입니다. CPP 테스트 점수는 코카인 환경에 대한 선호도를 나타내는 기준 점수보다 훨씬 높았습니다.

총 약물 이탈 반응 및 CPP 차이 테스트 점수에 대한 조건화 후 상관 관계 분석이 여기에 설명되어 있습니다. 코카인 장기 그룹은 약물 휴가 반응과 CPP 테스트 점수 사이에 유의미한 긍정적인 상관관계를 보인 유일한 그룹이었습니다. 우리는 쥐의 약물 강화를 연구하는 새로운 접근 방식을 위해 전통적인 상태, 장소 선호도 및 자가 투여 방법을 결합하는 방법을 보여주었습니다.

이 절차를 수행할 때 좋은 기록을 유지하는 것이 중요합니다. 그게 다야. 시청해 주셔서 감사드리며 실험에 행운을 빕니다.