Name: E18 랫 두뇌의 Organotypic 슬라이스 문화 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-11T00:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 48 s
Description: 배우세요 E18 랫 두뇌의 오가노타이픽 슬라이스 배양법을 통해 신경발생 및 재생의학 연구를 수행하는 방법을. 바이브라톰을 활용한 정밀 절단과 장기 배양 기술을 익혀보세요.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

e18 랫 두뇌의 organotypic 슬라이스 문화

Organotypic Slice Culture of E18 Rat Brains

배아 쥐 두뇌에서 Organotypic 슬라이스 문화가 널리 두뇌 개발을 연구하는 데 사용됩니다. 인 - 생체내 시스템에 이점이 자주 있지만, organotypic 슬라이스 문화 한가 - 생체내 현재 가능하지 않습니다 조작의 번호를 수행할 수 있습니다. 지금까지 organtotypic 배아 두뇌 슬라이스 문화가, 시간 경과 현미경을 사용하여 개별 세포를 수행 ganglionic emanances (인 - utero의 electroporation에 의해 대상으로 어려운 지역)에서 유전자의 표현을 조작하는 데 사용되었습니다뿐만 아니라, 약리에 대한 연구. 이 비디오 프로토콜에서 우리는 쥐의 배아 일 18 배아에서 organotypic 슬라이스 문화를 만드는 방법을 보여줍니다. 프로토콜은 배아를 해부 낮은 용융 아가로 오스의 얼음에 그들을 포함, vibratome에 포함된 두뇌를 깔끔히하고, 마지막으로 문화 요리 필터에 조각 도금이 포함됩니다. 이 프로토콜은 쥐 및 생쥐 모두에 대해 서로 다른 배아 연령대에서 organotypic 슬라이스 문화를 만들기 위해 현재의 형태에도 적용됩니다.

E18 랫 두뇌의 Organotypic 슬라이스 문화

배아 설치류 뇌의 기관 유사 슬라이스 배양(Organotypic slice cultures)은 뇌 발달 연구에 널리 사용됩니다. 생체 내(in-vivo) 시스템이 갖는 이점이 많은 경우가 많지만, ...

제 이름은 Laura Elias이며, Arnold K. Stein 교수님 연구실에서 근무하는 신경과학 대학원생입니다. 저희는 이곳 UCSF의 재생의학 연구소(Institute for Regenerative Medicine)에 소속되어 있으며, 오늘은 E18 쥐 뇌의 유기배양 뇌 절편 배양법(organotypic slice culture)을 시연해 드리겠습니다.이 절차는 뇌를 적출하여 저융점 agarose에 매립한 후, vibratome으로 절편을 만들어 코로나 부분을 절단하고, 이를 슬라이스 배양 시스템에 배치하는 과정으로 이루어집니다. 이 슬라이스 배양 절차에 사용되는 몇 가지 중요한 도구와 시약이 있습니다. 뇌를 적출하기 위해서는 해부 현미경이 필요합니다.우리는 또한 이 V를 VT 1000 S vibram과 같이 사용하며, 이는 슬라이스를 절단하는 데 좋은 시스템입니다. 접착제가 중요할 수 있습니다. 우리는 뇌를 매우 잘 고정해 주는 이 lock 타입을 사용하는데, 적절하지 않은 종류의 접착제를 사용하면 절단 과정에서 뇌가 떨어져 나갈 수 있으며, 이는 문제가 될 수 있기 때문입니다.우리는 또한 슬라이스를 배양하는 동안 올려두는 밀리셀 필터(milli cell filters)를 사용하며, 이는 이 과정의 중요한 부분입니다. 자, 슬라이스 배양 과정을 시작하기 전에 미리 처리해야 할 몇 가지 단계가 있습니다. 우선 A CSF를 제조해야 하며, A CSF 제조를 마친 후에는 이를 얼음에 박아 차갑게 유지하는 동시에 카보젠(carbogen)으로 버블링을 시작해야 합니다.또한 4% agros를 준비해야 합니다. 이를 위해 low melt agros를 CSF에 녹인 후, 마이크로웨이브로 가열하고 뇌 조직을 매립할 때까지 50°C로 유지하십시오. 슬라이스 배양 배지도 만들어야 하며, 배지를 만든 후에는 37°C에서 예열하여 마지막에 슬라이스를 넣었을 때 적절한 온도가 되도록 하십시오.이제 도구를 준비하고 슬라이스 배양 과정을 시작할 준비가 되었습니다. 이제 배아 18일차 쥐 배아의 뇌를 이용하여 슬라이스 배양물을 만들겠습니다. 먼저 발가락 꼬집기 반응(toe pinch)을 통해 어미 쥐가 완전히 마취되었는지 확인하겠습니다.여기 보시면 쥐가 여전히 미세한 반사 반응을 보이고 있어, 발을 눌렀을 때 뒷다리를 약간 뒤로 빼는 것을 볼 수 있습니다. 이럴 때는 더 오래 기다리거나 재마취를 하여 반응이 나타나지 않게 해야 합니

organotypic-slice-culture-of-e18-rat-brains

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

organoptypic hippocampal 슬라이스 문화...

의 연결을 부상을 검사에 대한 Organotypic Hippocampal 슬라이스 문화 모델

이 프로토콜은 주동이의 철새 스트림에서 출생 후의 두뇌와 neuroblast 마이 그 레이션의 고해상도 시간 저속 영상에 최적화된 organotypic 슬라이스 분석을 설명합니다.

출생 후의 두뇌에의 연결을 마이 그 레이션의 고해상도 시간 경과 이미징을위한 Organotypic 슬라이스 분석

이것은 피라미드 뉴런에서 전기 레코딩을 만드는 목적 organotypic 문화 neocortical 슬라이스 준비를 준비하고 유지하는 프로토콜입니다.

네크로 텍스의 Organotypic 슬라이스 준비에서 전체 셀 녹음

E12.5 murine 배아 midbrain에서 organotypic 조각을 생성하는 방법을 설명합니다. organotypic 슬라이스 문화가 dopaminergic 신경이나 다른 복부 midbrain의 뉴런의 행동을 관찰하는 데 사용할 수 있습니다.

배아 복부 Midbrain의 Organotypic 슬라이스 문화 : Dopaminergic의 연결을 개발 연구하는 시스템 체외에서</em

대뇌 피질의 발달에서 유전자의 기능의 신속한 평가를 실시하기 위해, 우리는 관련된 방법을...

의 연결을 Morphogenesis의 연구를위한 방법 :<em&gt; 예 생체내</em배아 Murine 대뇌 피질에서&gt; RNAi의 Electroporation

이 비디오는 새끼 쥐의 뇌에서 유기형 해마 절편 배양을 준비하는 방법을 보여줍니다. 해마 절편에서 세포 생존력과 성장을 촉진하여 궁극적으로 유기형 절편 배양을 생성하는 데 필요한 해마 해미 해부 및 배양 조건과 관련된 단계를 간략하게 설명합니다.

Preparation of Organotypic Slice Cultures from a Rat Pup's Hippocampus(쥐 새끼의 해마에서 유기형 슬라이스 배양 준비)

이 비디오는 새끼 쥐의 뇌에서 rhinal cortex-hippocampus slice를 얻어 추가 분석을 위해 배지로 채워진 다중 웰 플레이트 내의 막질 삽입물로 배양하는 방법을 보여줍니다.

쥐 새끼 뇌에서 rhinal cortex-hippocampus 슬라이스 준비

전뇌와 소뇌의 슬라이스 배양 시스템을 사용하여 NG2 세포와 희소돌기아교세포를 연구하는 기술에 대해 설명합니다.  이 방법을 사용하면 조직 세포 구조를 유지하면서 세포 외 환경을 쉽게 조작할 수 있는 희소돌기아교세포 계통 내에서 세포의 증식 및 분화 역학을 조사할 수 있습니다.

Organotypic 슬라이스는 문화 희소 돌기 아교 세포 역학 및 수초화을 공부하기

여기에서 우리는 Organotypic 슬라이스 문화 기술을 사용하여 해마 출생 후 신경 세포를 연구하는 기술에 대해 설명합니다. 이 방법은 성인 신경의 체외에서 조작이 가능하며 배양 된 해마되는 약물의 직접 적용이 가능합니다.

출생 후 신경 발생의 연구 Organotypic 슬라이스 문화

우리는 마우스 전뇌의 오르노티픽 슬라이스 배양에서 유전자 로 코딩된 FRET 기반 센서 ATeam1.03YEMK의 세포 형 특이적 발현에 대한 프로토콜을 기술한다. 또한, 우리는 뉴런과 성상 세포에서 세포 ATP 수준의 동적 이미징을 위해이 센서를 사용하는 방법을 보여줍니다.

FRET 기반 센서 ATeam1.03YEMK를 사용하여 마우스 뇌의 오르가노티픽 조직 슬라이스에서 세포 내 ATP 이미징

여기에서, 우리는 라인 피질-해마 organotypic 조각의 준비를 설명합니다. 혈청의 점진적이고 통제된 박탈에서, 이 조각은 진화하는 간질 같이 사건을 묘사하고 간질 발생의 전 생체 권 모형으로 간주될 수 있습니다. 이 시스템은 자발적인 활동의 역학을 모니터링뿐만 아니라 간질 발생 과정을 통해 신경 염증 기능의 진행을 평가하기위한 훌륭한 도구를 나타냅니다.

라인 피질-해마 오르가노티픽 슬라이스 배양에서 간질 발생의 모델

배우세요 E18 랫 두뇌의 오가노타이픽 슬라이스 배양법을 통해 신경발생 및 재생의학 연구를 수행하는 방법을. 바이브라톰을 활용한 정밀 절단과 장기 배양 기술을 익혀보세요.

E18 랫 두뇌의 Organotypic 슬라이스 문화

더 많은 동영상 탐색