2011년 1월 27일
microCT으로 대비 향상된 작은 동물 혈관 이미징 시리얼에 대한 신속하고 비용 효율 높은 처리량 기술이다 현장에서 시험.
현미경 컴퓨터 단층 촬영 또는 마이크로 CT를 사용한 조영제 강화 혈관 이미징 기술의 목표는 살아있는 마우스의 혈관 네트워크 분석을 위한 고품질 데이터 세트를 생성하기 위한 최적의 방법을 제공하는 것입니다. 이는 생체 내에서 무선 불투명 조영제의 정맥 주사에 의해 이루어집니다. 그런 다음 마취를 유도하고 동물을 다중 모드 챔버에 안전하게 배치하여 마이크로 CT 스캔 중 모션 아티팩트를 줄임으로써 동물을 마이크로 CT 이미징을 준비합니다.
스캔 후 마이크로 CT 데이터가 재구성되어 시각화 소프트웨어에 로드됩니다. 절차의 마지막 단계는 2차원 전달 기능 매개변수를 조정하여 혈관의 가시성을 개선하고 구별을 위해 혈관, 뼈 및 연조직에 다양한 색상을 제공하는 것입니다. 궁극적으로 CT 불투명 대비 향상된 이미징 및 2차원 전달 함수 렌더링을 통해 살아있는 동물의 혈관 네트워크를 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.
안녕하세요, 저는 샌안토니오에 있는 텍사스 대학교 보건 과학 센터의 Khe 아동암 연구소 소아 암 연구소 부서의 소동물 이미징 코어의 PJA Patti인 Sue Resh입니다. 저는 샌안토니오에 있는 텍사스 대학교 보건 과학 센터의 그리히 소아암 연구소(Greehey Children's Cancer Research Institute)의 찰스 켈러(Charles Keller)입니다. 오늘 우리는 radio opaque blood pool 조영제를 사용하여 살아있는 동물의 혈관을 시각화하는 절차를 보여 드리겠습니다.
우리는 실험실에서 이 절차를 사용하여 형질전환 마우스에서 복잡한 자발적 종양의 중간 및 대형 혈관을 연구합니다. 시작하겠습니다. 이 절차를 시작하려면 낮은 데드 스페이스 28 및 반 게이지 하프 cc 인슐린 주사기를 사용하여 요오드화 혈액 풀 1밀리리터당 요오드 20밀리그램 20밀리그램 조영제 Xia one 60 xl을 얻습니다.
조영제를 원위 꼬리 정맥을 통해 살아있는 마우스에 주입합니다.주입 후 10분. 마이크로 CT 촬영을 위해 동물을 준비합니다.
먼저 100% 산소에 2%의 불소를 연결한 아크릴 상자에 2.5리터의 동물을 마취합니다. 몇 분 후 발가락 꼬집기를 수행하여 마취 깊이를 확인합니다. 다음으로 움직임 아티팩트를 최소화하기 위해 공기와 배기를 제공하는 맞춤형 상업적으로 이용 가능한 다중 모드 챔버에 마우스를 배치하여 마우스를 안정화합니다.
스캔 중 동물의 지속적인 마취를 보장하기 위해 2%의 불소와 100%의 산소가 포함된 공기 공급을 유지하십시오. 마우스가 준비되면 살아있는 동물 스캔을 수행할 수 있는 마이크로 CT 장치에서 스캔할 수 있습니다. 마우스가 포함된 다중 모드 챔버를 심부름 배기 튜브에 연결합니다.
체적 CT 스캐너 GE Explorer 궤적을 사용하여 93마이크로미터 해상도로 동물을 스캔할 수 있습니다. 이 체적 측정 스캐너는 펠드 캠프 콘 빔 재구성을 위해 3, 500 x 1750 CCD 검출기를 사용하여 450 마이크로 암페어의 전류, DP 킬로 전압의 전압 및 100 밀리 초의 노출 시간으로 플랫폼 독립적 인 매개 변수를 일정하게 설정합니다. 혈관의 뼈와 연조직 사이의 우수한 대비를 달성하기 위해 표준 매개변수는 보기당 5-8개의 프레임과 완전한 360도 회전을 위한 360-720개의 보기로 변경할 수 있으며, CT 스캔 후 약 15-20분의 총 스캔 시간을 사용합니다.
제조업체의 독점 EVS 빔 소프트웨어로 이미지를 재구성합니다. 마우스가 마취에서 완전히 회복될 때까지 마우스를 계속 모니터링합니다. 일단 재구성되면 마이크로 CT 데이터는 고급 동위원면 1차원 또는 2차원 전달 함수에 사용할 수 있습니다.
SEG 3D 이미지 처리 소프트웨어를 사용하여 이미지를 렌더링하여 3차원 데이터 세트의 2차원 투영을 렌더링하고 2차원 전달 함수를 사용하여 혈관과 뼈의 구별을 더욱 향상시킵니다. 이미지를 렌더링하는 동안 전달 함수를 기반으로 광선 샘플에 색상과 불투명도를 할당하면 CT 값과 기울기 크기에 따라 달라집니다. CT 값 히스토그램에서 제공하는 안내에 따라 전달 함수를 수동으로 조정하여 표시된 관심 영역과 물체를 강조 표시합니다.
다음은 Xia one 60 xl을 주입한 야생형 마우스의 마이크로 CT 스캔에서 2차원 전달 함수 렌더링 이미지를 보여주는 대표적인 결과입니다. 방금 살아있는 마우스의 혈관 네트워크 분석을 위한 고품질 데이터 세트를 생성하는 방법을 보여드렸습니다. 이 기술은 형질전환 또는 이종이식 마우스를 사용한 전임상 연구에서 항혈관신생의 정성적 및 정량적 평가에 매우 잘 사용될 수 있습니다.
이 절차를 수행할 때 조영제의 완벽한 꼬리 정맥 주사를 받고 호흡으로 인해 발생할 수 있는 운동 아티팩트를 최소화하는 방식으로 동물을 배치하는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 그게 다야. 시청해 주셔서 감사드리며 실험에 행운을 빕니다.
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이 기사는 마이크로CT를 사용한 대조 강화 소형 동물 혈관 이미징 기법을 다루고 있으며, 이를 통해 생쥐의 혈관 네트워크를 고품질로 분석할 수 있습니다. 이 방법은 신속하고 비용 효율적이며, 종양 발달 및 치료 반응의 고처리량 검사에 적합합니다.
Contrast-enhanced microCT vessel imaging enables high-resolution, quantitative visualization of vascular networks in live rodent models, directly supporting preclinical evaluation of anti-angiogenic therapies. This methodology addresses the challenge of distinguishing soft tissue and vasculature, providing critical data for target validation and mechanistic de-risking in oncology drug discovery. Its integration into early discovery and translational workflows enhances predictive confidence and informs portfolio advancement decisions.
This vessel imaging method fits within the continuum from early discovery through lead identification and preclinical validation, particularly in oncology and vascular biology programs.