Name: MicroCT를 사용하여 대비 향상된 베셀 영상 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-27T17:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 50 s
Description: 배우세요 MicroCT를 활용한 대비 향상 혈관 영상 기법으로 생쥐의 혈관 네트워크를 고품질 분석하는 방법을 알아보세요. 이 기술은 종양 연구와 치료 반응 평가에 활용됩니다.

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1. 동물 주입 정맥 꼬리 정맥 주입하기 전에, 꼬리 피부 살균 목적으로 이소 프로필 알코올 스크럽과 청소해야합니다. 낮은 죽은 공간을 사용하여 말초 꼬리 정맥을 통해 ½ CC U, 생쥐는 다음 20 MG 요오드 / ML iodinated bloodpool 대비 에이전트의 0.2 mL/20 G (캐나다, ON Binito 바이오 메디컬 (주) 오타와, eXIA 160XL)를 주입해야합니다 -100 28G ½ 인슐린 주사기 (제품 # 329461, 백톤 디킨슨과 회사, NJ, 미국). 2. 동물 준비 주입 10 분 후, 동물은 microCT 이미징 준비를해야합니다. 첫째, 동물은 분당 2.5 리터 비율로 100 % 산소 isoflurane 2 % 사용하여 상자에 anesthetized해야합니다. 안구 윤활 연고는 마취 동안 각막의 탈수를 방지하기 위해 적용해야합니다. 체온은 열 패드에 의해 37 ° C로 유지되어야합니다. 3. MicroCT 이미징 생쥐는 다음 라이브 동물의 스캔을 수행하는 능력을 microCT 단위 스캔해야합니다. 운동 유물과 안정성을 최소화하기 위해 생쥐는 공기와 배기 가스에 대한 규정이있는 상용 다중 양상 챔버 (Numira Biosciences, 솔트 레이크 시티, UT)에 삽입할 수 있습니다. microCT 검사, 젤 패드 (뜨거운 감기 치료 브레 이스, CVS 파마 운소켓, RI) 동안 동물에 저체온증 에피소드를 피하려면 (열 공장, 비스타, CA) 또는 Thermipaq 클레이 패드 (Thermionics, 스프링 필드, IL) 수 비슷해 토프트 사용됩니다. 37 마우스를 유지하기 위해 거품 침대 아래에 이러한 가열 패드를 놓습니다 ° C 동물​​과 직접 접촉을 피하고있는 동안. 이러한 체온, 호흡과 심장 박동과 같은 동물의 생체 신호는 스몰 애니멀 모니터링 및 SA 인 스트 루먼트 (스토니 브룩, 뉴욕)와 같은 게이팅 시스템을 사용하여 모니터해야합니다. 다음 이미지 프로토콜은 어떤 microCT 단위에 해당하는 검색 매개 변수를 확인하기 위해 지침으로 사용할 수 있습니다. 본 실험에 사용된 동물은 체적 중부 표준시 스캐너 GE에서 93 μm의 해상도 로커스을 (GE 헬스케어, 런던, 온타리오) 탐색에서 스캔했습니다. 이 용적 스캐너 Feldkamp 콘 빔 재건을 위해 3,500 X 1,750 CCD 검출기를 사용합니다. 전류, 전압 및 노출 시간의 플랫폼 독립적인 매개 변수는 각각 450 μA, 80 kVP 100 MS에서 지속적으로 유지되었습니다. 노출 시간의 표준 매개 변수는,보기 및 전망의 수 당 프레임은 다양한 수 있으며 약 20 분 총 스캔 시간이 100 MS, 각각 5-8, 그리고 360-720, 수있다. 이미지는 제조 업체의 독점 EVSBeam 소프트웨어로 복원되었습니다. 4. 이미지 렌더링 재건축 microCT 데이터는 고급 isosurface 한 차원 또는 Seg3D 이미지 처리 소프트웨어 (Seg3D 사용하여 2 차원 전달 함수 렌더링 이미지에 사용할 수 있습니다 <a href="http://www.sci.utah.edu/cibc/software">http://www.sci.utah.edu/cibc/software을</a> ). 5. 대표 결과 방법 섹션에서 언급한 설정을 eXIA160XL와 스캔 wildtype 마우스 첨부된 그림을 참조하십시오. <img src="/files/ftp_upload/2377/2377fig1.jpg" alt="그림 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. Seg3D 이미지 처리 소프트웨어 (Seg3D 사용하여 만든 wildtype 마우스의 2 차원 전달 함수 (2DTF) 렌더링 이미지 <a href="http://www.sci.utah.edu/cibc/software">http://www.sci.utah.edu/cibc/software을</a> ). 동물은 eXIA160XL를 주사 맞은 10 분 후 방법 섹션에서 언급한 설정을 93 μm의 해상도로 스캔 사시 microCT. 비디오 1. 360 ° Imagevis3D 이미지 처리 소프트웨어 (Imagevis3D, http://www.sci.utah.edu/cibc/software)를 사용하여 만든 wildtype 마우스의 회전 동영상을 기반으로 2 차원 전달 함수 (2DTF) 렌더링. 동물은 eXIA160XL를 주사 맞은 10 분 후 방법 섹션에서 언급한 설정을 93 μm의 해상도로 스캔 사시 microCT. <a href="/files/ftp_upload/2377/2377_Suresh_Prajapati_Representative_Results.mov">동영상을 보려면 여기를 클릭하십시오</a>

<ol><li>Holdsworth, D. W., Thornton, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micro-CT+in+small+animal+and+specimen+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Micro-CT in small animal and specimen imaging.</a> Trends in Biotechnology. 20, 417-424 (2002).</li>
<li>Kindlmann, G. L., Weinstein, D. M., Jones, G. M., Johnson, C. R., Capecchi, M. R., Keller, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practical+Vessel+Imaging+by+Computed+Tomography+in+Live+Transgenic+Mouse+Models+for+Human+Tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Practical Vessel Imaging by Computed Tomography in Live Transgenic Mouse Models for Human Tumors.</a> Molecular Imaging. 4, 417-424 (2005).</li>
</ol>

모든 동물의 절차는 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 지침에 따라 실시되었으며 샌안토니오 텍사스 건강 과학 센터의 대학에서 기관 애니멀 케어 및 사용위원회 (IACUC)에 의해 승인되었습니다.

microCT를 사용하여 콘트라스트 향상 선박 영상이 기법의 최고 목표는 사는 생쥐의 혈관 네트워크 분석을 위해 고품질의 데이터 세트를 생성하기위한 최적의 방법을 제공하는 것입니다. microCT 이미징, 증가의 전망을 볼 숫자와 두 당 프레임의 번호를 더 이상 스캔 배 이루어집니다 부드러운 조직의 더 나은 신호 대 잡음 비율하십시오. 선박 식별 정확한 부드러운 조직 식별 및 뼈를 분화에 따라 매우 달라집니다. eXIA 160XL은 높은 무선 불투명한되는 재산과 다른 형태로 부드러운 조직과 뼈가있는 밀도 특성있는 요오드 기반입니다. 이것은 microCT 데이터 혈관에 초점을하는 것이 편리합니다. 2 차원 전송 기능은 더욱 렌더링하는 동안 선박의 대비와 뼈 사이의 구별을 향상시킵니다. 2 차원 전달 함수 이미지 렌더링, 색상 및 opacities의 경우에는 차례로 중부 표준시의 가치와 기울기 크기 ...

<table><tbody><tr><td>eXIA 160XL</td><td>Binito Biomedical, Inc.</td><td>eXIA160XL-01</td><td></td></tr></tbody></table>

microct를 사용하여 대비 향상된 베셀 영상

Contrast Enhanced Vessel Imaging using MicroCT

미세한 계산된 tomography (microCT)는 작은 동물을 삶의 해부의 고해상도 판매량 이미징을 제공합니다. 그러나, 다른 부드러운 조직 및 체액 사이의 대조 마이크로 - CT 영상 1 본질적 가난한 사람입니다. 이러한 상황에서 혈관의 시각화는 거의 불가능한 작업이됩니다. 이것을 극복하고 외인성 대비 에이전트가 사용할 수있는 혈관의 시각화를 향상시킬 수 있도록 지원합니다. 여기에, 우리는 쥐 모델에서 혈관 네트워크를 시각화를위한 방법론을 제시한다. 오랫동안 연기 수성 콜로이드 polydisperse iodinated 혈액 풀 대비 에이전트 eXIA 160XL을 사용함으로써, 우리는 살아있는 동물의 혈관을 찾기위한 이미지 수집 매개 변수와 볼륨 렌더링 기법을 최적화. 우리의 결과는 혈관에서 뼈 및 연조직 사이의 우수한 콘트라스트를 달성하는 것이 좋습니다, 다중 프레임 (보기마다 적어도 5-8 / 프레임) 및 360-720 전망 (전체 360 ° 회전) 인수는 필수되었습니다. 우리는 또한 2 차원 전달 함수의 사용 (어디 voxel 색상과 불투명도가 중부 표준시의 가치와 기울기 크기에 비례하여 할당했습니다), 해부를 시각이자, 혈관 네트워크의 구조를 강조 인치를 증명하고있다 이 유망한 작품은 유전자 변형 또는 이종 이식 종양 베어링 생쥐를 사용하여 안티 angiogenesis 잠복기 연구의 질적 및 양적 평가에 대한 기초를 낳는다.

microCT으로 대비 향상된 작은 동물 혈관 이미징 시리얼에 대한 신속하고 비용 효율 높은 처리량 기술이다<em&gt; 현장에서</em그들도 없군 혈관의 네트워크를 분석하고, 잠복기 치료 개입 (S)에 종양의 반응에 따라 종양에 대한 개발&gt; 시험.

MicroCT를 사용하여 대비 향상된 베셀 영상

마이크로 컴퓨터 단층촬영(microCT)은 살아있는 소형 동물의 해부학적 구조에 대한 고해상도 입체 영상을 제공합니다. 하지만 ... 사이의 대조도는

미세 컴퓨터 단층촬영(micro CT)을 이용한 조영 증강 혈관 영상 촬영 기술의 목적은 살아있는 마우스의 혈관 네트워크 분석을 위해 고품질 데이터 세트를 생성하는 최적의 방법을 제공하는 것입니다. 이는 생체 내(in vivo) 정맥 주사를 통해 방사선 불투과성 조영제를 투여함으로써 수행됩니다. 그 후, 마취를 유도하고 마우스를 다중 모드 챔버 내에 안정적으로 배치하여 micro CT 스캔 중 움직임으로 인한 아티팩트를 줄임으로써 micro CT 영상 촬영 준비를 마칩니다.스캔 후, micro CT 데이터는 재구성되어 시각화 소프트웨어로 로드됩니다. 절차의 마지막 단계는 2차원 전이 함수 파라미터를 조정하여 혈관의 가시성을 높이고, 구분을 위해 혈관, 뼈, 연조직에 서로 다른 색상을 부여하는 것입니다. 결과적으로, CT 불투과성 조영 증강 영상과 2차원 전이 함수 렌더링을 통해 살아있는 동물의 혈관 네트워크를 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.안녕하세요, 저는 텍사스 대학교 보건과학센터 샌안토니오 캠퍼스의 Greehey 어린이 암 연구소 소동물 영상 코어 센터의 Sue Resh와 PJA Patti입니다. 저는 마찬가지로 텍사스 대학교 보건과학센터 샌안토니오 캠퍼스의 Greehey 어린이 암 연구소 소속인 Charles Keller입니다. 오늘은 방사선 불투과성 혈액 풀 조영제를 사용하여 살아있는 동물의 혈관을 시각화하는 절차를 보여드리겠습니다.본 실험실에서는 형질전환 생쥐의 복합 자발성 종양 내 중간 및 대혈관을 연구하기 위해 이 절차를 사용합니다. 이제 시작해 보겠습니다. 먼저, 저사강(low dead space) 28.5게이지 0.5cc 인슐린 주사기를 사용하여, 20 mg/mL 농도의 요오드화 혈액 풀 조영제 Xia one 60 xl를 생쥐 체중 20 g당 0.2 mL씩 준비합니다.살아있는 마우스의 원위 꼬리 정맥을 통해 조영제를 주입합니다. 주입 10분 후, 마이크로 CT 영상을 촬영할 수 있도록 동물을 준비합니다.먼저, 100% oxygen에 2% isof fluorine를 섞어 분당 2.5 liters의 속도로 공급하는 아크릴 박스 내에서 동물을 마취합니다. 몇 분 후, 발가락을 집어 마취 깊이를 확인합니다. 다음으로, 움직임으로 인한 아티팩트를 최소화하기 위해 공기 공급 및 배기 장치가 갖춰진 맞춤 제작된 상용 멀티모달 챔버에 마우스를 배치하여 고정합니다.스캔하는 동안 동물이 지속적으로 마취 상태를

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

관상 혈관의 시각화는 심장 혈관 질병의 우리의 이해를 증진하기 위해 중요합니다. 여기에서 우리는 마이크로 계산된 Tomography (μCT) 이미징을위한 준비, radiopaque 실리콘 고무 (Microfil)로 murine 관상 vasculature을 perfusing위한 방법을 설명합니다.

마이크로 계산된 Tomography 이미징을위한 준비로서 역행 관류 및 마우스 관상 Vasculature의 작성

출처: Choi, J. P.  et al. 마우스 모델에서 대뇌 해면 기형의 유도 및 마이크로 CT 이미징.J. Vis. 특급 (2017)이 비디오는 쥐 뇌에서 대뇌 해면상 기형(CCM) 병변을 시각화하기 위해 마이크로 CT 이미징을 사용하는 방법을 보여줍니다. 뇌 조직에서 CCM 병변의 밀도와 위치를 평가하기 위해 샘플 준비, 이미징 및 3D 이미지 재구성 단계를 자세히 설명합니다.

마우스 뇌의 대뇌 해면상 기형 병변에 대한 조영제 강화 마이크로 CT 이미징

이 방법은 실험적으로 유도된 심근 허혈이 있는 마우스에서 요오드화 조영제를 사용하여 심장 형태, 기능, 관류, 대사 및 생존력을 평가하기 위해 Quantum Micro-Computed Tomography(MicroCT)를 사용하는 방법을 설명합니다. 이 기술은 인간 심장 질환의 다양한 동물 모델의 비파괴 고처리량 종단 생체 내 이미징에 적용할 수 있습니다.

심근 구조, 기능의 생체 양적 평가에서 관류 및 생존 능력은 심장 마이크로 컴퓨터 단층 촬영을 사용하여

이 프로토콜은 대뇌 thromboemboli을 시각화 결합 된 근적외선 형광 (NIRF) 이미징 및 마이크로 컴퓨터 단층 촬영 (microCT)의 응용 프로그램을 설명합니다. 이 기술은 혈전 부담과 진화의 정량화 할 수 있습니다. microCT 기술은 금 나노 입자를 사용하여 살아있는 동물 내부 혈전 가시화하면서 NIRF 이미징 기술은 형광 절제 뇌 혈전 표지 가시화.

직접 대뇌 Thromboemboli 시각화를위한 결합 된 근적외선 형광 이미징 및 마이크로 계산 된 단층 촬영

이 문서는 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에 대동맥 직경 정량화에 대 한 murine 맥 관 구조 perfuse를 방사선 불 투과성 리드 기반 실리콘 고무를 사용 하 여 상세한 방법론을 설명 합니다.

Β-aminopropionitrile-유도 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에서 Aortopathy의 양적 마이크로 CT 분석

이 기술의 목적은 폐 인플레이션과 폐 동맥을 통해 무선 불투명 한 폴리머 기반 화합물의 주입을 통해 초기 산후 및 성인 마우스의 폐 동맥 네트워크의 전 생체 시각화입니다. 캐스팅된 조직에 대한 잠재적 응용 프로그램도 논의됩니다.

Micro-CT 화상 진찰을 위한 성인 및 초기 산후 마우스 폐의 혈관 주조

여기에서, 우리는 콜라겐 선택적 조영 증진과 함께 건강하고 병리학적인 큰 포유동물 전심의 고해상도 마이크로 컴퓨터 단층 촬영 이미지를 얻기 위한 프로토콜을 제시한다.

만성 질환을 앓고 있는 대형 포유류 심장 모델의 콘트라스트 강화 마이크로 컴퓨터 단층 촬영 이미징을 위한 조직 준비 기술

이중 수지 주조 마이크로 컴퓨팅 단층 촬영 또는 덕트(DUCT)는 두 관 시스템의 시각화, 디지털화 및 세분화를 동시에 통해 장기 아키텍처의 3D 분석을 용이하게 합니다. 덕트(DUCT)는 두 개의 방사성파크 수지의 전 생체 주입 을 결합한 다음, 마이크로 컴퓨팅 단층 촬영 스캐닝 및 지형 데이터의 세분화를 결합합니다.

덕트: 3D 간 분석을 위한 마이크로 컴퓨팅 단층 촬영 다음에 이중 수지 주조

여기서는 마이크로 엑스레이 계산단층 촬영을 사용하여 뮤린 뒷다리 혈관에 대한 시각화 및 정량화 방법을 설명합니다.

Murine 힌드사지 선박의 계산 단층 촬영 기반 3차원 시각화를 위한 샘플 준비

식이 유발 비알코올성 지방간 질환(NAFLD) 마우스 모델을 사용하여 NAFLD의 진행 단계를 평가하기 위한 비침습적 방법으로 새로운 생체 내 미세 컴퓨터 단층 촬영 이미징 기술의 사용을 설명하며, NAFLD 관련 간 조절 장애에 크게 관여하기 때문에 주로 간 혈관 네트워크에 초점을 맞춥니다.

비알코올성 지방간 질환의 진행을 평가하기 위한 새로운 생체 내 미세 컴퓨터 단층 촬영 이미징 기술

이 프로토콜에서는 마우스에서 성공적인 orthotopic 간 이식(OLT) 모델의 구현에 대해 논의합니다. 또한 마우스에서 성공적인 OLT 후 동종이식 개통을 추가로 분석하기 위한 보조제, 특히 microcomputationd tomography(microCT) 스캔을 활용하는 보조제에 대해서도 논의합니다.

Microcomputed Tomography 혈관 조영술을 활용한 마우스의 성공적인 Orthotopic 간 이식

배우세요 MicroCT를 활용한 대비 향상 혈관 영상 기법으로 생쥐의 혈관 네트워크를 고품질 분석하는 방법을 알아보세요. 이 기술은 종양 연구와 치료 반응 평가에 활용됩니다.

MicroCT를 사용하여 대비 향상된 베셀 영상

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