Name: 사포닌 - permeabilized 심장 섬유에 Respirometric 산화 인산화 평가 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-02-28T18:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 10 s
Description: 학습하세요 사포닌 투과 처리된 심장 섬유를 이용한 미토콘드리아 산화 인산화 평가 방법을. 고해상도 호흡 측정법으로 심장 생체에너지학 및 미토콘드리아 기능을 정밀 분석합니다.

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이 연구는 건강 연구와 게놈 캐나다의 캐나다 연구소에 의해 지원되었다. JS는 의료 연구, 심장과 캐나다의 행정 재단과 캐나다 당뇨병 협회 앨버타 헤리티지 재단의 급여 지원 수상 경력을 보유하고 있습니다. 실험실은 사포닌 - permeabilized 섬유 기술의 인수 중에 Oroboros 악기의 기술 지원을 인정하고 싶습니다.

<ol><li>Saks, V. A., Veksler, V. I., Kuznetsov, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permeabilized+cell+and+skinned+fiber+techniques+in+studies+of+mitochondrial+function+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Permeabilized cell and skinned fiber techniques in studies of mitochondrial function in vivo.</a> Mol Cell Biochem. 184, 81-100 (1998).</li>
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<li>Visscher, G. D. e, Rooker, S., Jorens, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pentobarbital+fails+to+reduce+cerebral+oxygen+consumption+early+after+non-hemorrhagic+closed+head+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Pentobarbital fails to reduce cerebral oxygen consumption early after non-hemorrhagic closed head injury in rats.</a> J Neurotrauma. 22, 793-806 (2005).</li>
<li>Kuznetsov, A. V., Veksler, V., Gellerich, F. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+mitochondrial+function+in+situ+in+permeabilized+muscle+fibers%2C+tissues+and+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Analysis of mitochondrial function in situ in permeabilized muscle fibers, tissues and cells.</a> Nat Protoc. 3, 965-976 (2008).</li>
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<li>Sena, S., Hu, P., Zhang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+insulin+signaling+accelerates+cardiac+mitochondrial+dysfunction+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Impaired insulin signaling accelerates cardiac mitochondrial dysfunction after myocardial infarction.</a> J Mol Cell Cardiol. 46, 910-918 (2009).</li>
<li>Boudina, S., Sena, S., O'Neill, B. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+mitochondrial+oxidative+capacity+and+increased+mitochondrial+uncoupling+impair+myocardial+energetics+in+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Reduced mitochondrial oxidative capacity and increased mitochondrial uncoupling impair myocardial energetics in obesity.</a> Circulation. 112, 2686-2695 (2005).</li>
<li>Lenaz, G., Genova, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+organization+of+mitochondrial+respiratory+complexes%3A+a+new+understanding+of+an+old+subject%5BTitle%5D)+AND+%22Antioxid+Redox+Signal%22%5BJournal%5D)">Structure and organization of mitochondrial respiratory complexes: a new understanding of an old subject.</a> Antioxid Redox Signal. 12, 961-1008 Forthcoming.</li>
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<li>O, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retarded+diffusion+of+ADP+in+cardiomyocytes%3A+possible+role+of+mitochondrial+outer+membrane+and+creatine+kinase+in+cellular+regulation+of+oxidative+phosphorylation%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Retarded diffusion of ADP in cardiomyocytes: possible role of mitochondrial outer membrane and creatine kinase in cellular regulation of oxidative phosphorylation.</a> Biochim Biophys Acta. 1144, 134-148 (1993).</li>
<li>Endo, M., Kitazawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((E-C+coupling+studies+in+skinned+cardiac+fibers%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Aspects+of+Cardiac+Muscle%22%5BJournal%5D)">E-C coupling studies in skinned cardiac fibers.</a> Biophysical Aspects of Cardiac Muscle. Morad, M. , Academic. New York. 307-327 (1978).</li>
<li>Veksler, V. I., Kuznetsov, A. V., Sharov, V. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+respiratory+parameters+in+cardiac+tissue%3A+a+novel+method+of+assessment+by+using+saponin-skinned+fibers%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial respiratory parameters in cardiac tissue: a novel method of assessment by using saponin-skinned fibers.</a> Biochim Biophys Acta. 892, 191-196 (1987).</li>
<li>Bangham, A. D., Horne, R. W., Glauert, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Action+of+saponin+on+biological+cell+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Action of saponin on biological cell membranes.</a> Nature. , 196-952 (1962).</li>
<li>Daum, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipids+of+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Lipids of mitochondria.</a> Biochim Biophys Acta. 822, 1-42 (1985).</li>
<li>Milner, D. J., Mavroidis, M., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Desmin+cytoskeleton+linked+to+muscle+mitochondrial+distribution+and+respiratory+function%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Desmin cytoskeleton linked to muscle mitochondrial distribution and respiratory function.</a> J Cell Biol. 150, 1283-1298 (2000).</li>
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<li>Kuznetsov, A. V., Wiedemann, F. R., Winkler, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+saponin-permeabilized+muscle+fibers+for+the+diagnosis+of+mitochondrial+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Biofactors%22%5BJournal%5D)">Use of saponin-permeabilized muscle fibers for the diagnosis of mitochondrial diseases.</a> Biofactors. 7, 221-223 (1998).</li>
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</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

사포닌 - permeabilized 심장 섬유 기술은 체외에서 mitochondrial OXPHOS 산소 소비의 생체내 평가 사이에 독특한 타협을 제공합니다. 이 기법의 장점은 보존되어 있습니다 셀룰러 아키텍처로 격리 mitochondria에 비해 생리 관련을 증가 등이 있습니다. 플라즈마 막이 저하되는 동안, mitochondria 12를 포함하여 세포 멤브레인 구조, 14, sarcoplasmic reticulum 14, 근육 섬 유지 및 cytoskeleton 1, 17 그대로 남아 있습니다. 또한, mitochondria 및 cytoskeleton 일, 17 사이의 상호 작용도 변형입니다. permeabilized 섬유의 Mitochondria가 증가 안정성을 보여줍니다. 설치류 섬유 준비는 최대 24 시간 18,2하는 안정성을 보여주 6h 인간 섬유 샘플...

<table><tbody><tr><td>100% 에탄올</td><td>Fisher Scientific</td><td>HC600</td><td></td></tr><tr><td>70% 에탄올</td><td>Fisher Scientific</td><td>HC-1000</td><td></td></tr><tr><td>Adenosine 5&amp;#8242;-diphosphate monopotassium salt dihydrate (ADP)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A5285</td><td></td></tr><tr><td> esencially fatty acid&amp;#8211;free 우혈청 알부민</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A-6003</td><td></td></tr><tr><td>Antimycin A</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A8674</td><td></td></tr><tr><td>아스코르브산</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A4403</td><td></td></tr><tr><td>Adenosine 5&amp;#8242;-triphosphate disodium salt hydrate (ATP)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A2383</td><td></td></tr><tr><td>Atractyloside</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A6882</td><td></td></tr><tr><td>탄산칼슘</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C4830</td><td></td></tr><tr><td>Carbonyl cyanide p-(trifluoromethoxy) phenylhydrazone (FCCP)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C2920</td><td></td></tr><tr><td>Cytochrome c</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C7752</td><td></td></tr><tr><td>Digitonin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D141</td><td></td></tr><tr><td>Dithiothreitol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9779</td><td></td></tr><tr><td>Ethylene glycol-bis-(2-amin&amp;#8211;thylether)-N,N,N&amp;#8242;,N&amp;#8242;-tetraacetic acid (EGTA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E4378</td><td></td></tr><tr><td>글루탐산</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>27647</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H4034</td><td></td></tr><tr><td>이미다졸</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I5513</td><td></td></tr><tr><td>케타민</td><td>Pfizer Pharma GmbH</td><td></td><td>Ketaset</td></tr><tr><td>락토바이오닉산</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>153516</td><td></td></tr><tr><td>염화마그네슘 (MgCl&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M9272</td><td></td></tr><tr><td>염화마그네슘 6수화물 (MgCl&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;&amp;#8729;6H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M9272</td><td></td></tr><tr><td>말산</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M1000</td><td></td></tr><tr><td>MES</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M3671</td><td></td></tr><tr><td>N,N,N&amp;rsquo;,N&amp;rsquo;-Tetramethyl- pphenylenediamine Dihydrochloride (TMPD)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T3134</td><td></td></tr><tr><td>Oligomycin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>O4876</td><td></td></tr><tr><td>Phosphocreatine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7936</td><td></td></tr><tr><td>염화칼륨</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9541</td><td></td></tr><tr><td>수산화칼륨</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5958</td><td></td></tr><tr><td>시안화칼륨</td><td>Fluka</td><td>60178</td><td></td></tr><tr><td>인산일수소칼륨</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5655</td><td></td></tr><tr><td>Rotenone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R8875</td><td></td></tr><tr><td>Saponin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>47036</td><td></td></tr><tr><td>펜토바르비탈 나트륨</td><td>Ceva Sante Animale</td><td>1715 138</td><td>농도 54.7 mg/ml</td></tr><tr><td>피루브산 나트륨</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P2256</td><td></td></tr><tr><td>숙신산</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S3674</td><td></td></tr><tr><td>자당</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S7903</td><td></td></tr><tr><td>타우린</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8691</td><td></td></tr><tr><td>자일라진</td><td>Bayer AG</td><td></td><td>Rompun</td></tr><tr><td>ddH&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>얼음</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Oroboros Oxygraph-2k</td><td>Oroboros Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>킴와이프스</td><td>VWR international</td><td>21905-026</td><td></td></tr><tr><td>15ml 폴리프로필렌 원심분리 튜브</td><td>VWR international</td><td>89004-368</td><td></td></tr><tr><td>50ml 폴리프로필렌 원심분리 튜브</td><td>VWR international</td><td>89004-364</td><td></td></tr><tr><td>직선형 정밀 핀셋</td><td>George Tiemann &amp;amp; Co.</td><td>160-50B</td><td></td></tr><tr><td>곡선형 정밀 핀셋</td><td>George Tiemann &amp;amp; Co.</td><td>160-57B</td><td></td></tr><tr><td>직선형 수술용 가위</td><td>George Tiemann &amp;amp; Co.</td><td>105-402</td><td></td></tr><tr><td>멸균 수술용 메스 날</td><td>VWR international</td><td>BD371610</td><td></td></tr><tr><td>0.45-&amp;mu;m 시린지 필터</td><td>VWR international</td><td>CA28145-485</td><td></td></tr><tr><td>pH 미터</td><td>VWR international</td><td>CA11388-308</td><td></td></tr><tr><td>유리 페트리 접시</td><td>VWR international</td><td>89000-300</td><td></td></tr><tr><td>12-웰 폴리스티렌 조직 배양 플레이트</td><td>VWR international</td><td>82050-926</td><td></td></tr><tr><td>플레이트 교반기</td><td>VWR international</td><td>97042-594</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand 마그네틱 바</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-511-67</td><td></td></tr><tr><td>전자저울</td><td>VWR international</td><td>CA11278-162</td><td></td></tr><tr><td>10&amp;mu;l Hamilton 마이크로 시린지</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-815-1</td><td></td></tr><tr><td>25&amp;mu;l Hamilton 마이크로 시린지</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-824-7</td><td></td></tr><tr><td>50&amp;mu;l Hamilton 마이크로 시린지</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-824-5</td><td></td></tr><tr><td>Nalgene 세척병</td><td>Wilkem Scientific</td><td>LNA2407-1000</td><td></td></tr><tr><td>폴리스티렌 칭량 접시</td><td>VWR international</td><td>89106-750</td><td></td></tr><tr><td>해부 현미경</td><td>Olympus Corporation</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

사포닌 - permeabilized 심장 섬유에 respirometric 산화 인산화 평가

Respirometric Oxidative Phosphorylation Assessment in Saponin-permeabilized Cardiac Fibers

mitochondria가 에너지 대사, 산화 스트레스, apoptosis, 노화, mitochondrial encephalomyopathies 및 약물 독성에 관련된으로 mitochondrial 기능의 조사는 심장 생리학의 중요한 매개 변수를 나타냅니다. 이것을 감안할 때, 심장 mitochondrial 기능을 측정하는 기술 수​​요에 있습니다. mitochondrial 기능을 측정하는 통합 접근 방식을 채택 한 기술은 respirometric 산화 인산화 (OXPHOS) 분석입니다. respirometric OXPHOS 평가의 원칙은 클락 전극을 이용하여 산소 농도를 측정 중심이다. permeabilized 섬유 번들 폐쇄 챔버 감소에 산소, 산소 농도를 소모로. 선택된 기판 - 억제 - uncoupler 적정 프로토콜을 사용하여, 전자는 mitochondrial 기능의 평가를 허용, 전자 수송 사슬의 특정 사이트에 제공됩니다. , mitochondrial 함수의 respirometric 분석하기 전에 기계적 및 화학적 준비 기술은 근육 섬유의 sarcolemma을 permeabilize로 활용하고 있습니다. 화학 permeabilization는 세포 구조를 유지하면서 선택적으로 세포막을 구멍에 사포닌 고용합니다. 본 논문은 철저히 mitochondrial OXPHOS을 평가하기 위해 산소 소비 측정에 대한 사포닌 피부 심장 섬유 준비에 관련된 단계를 설명합니다. 또한, 조언뿐만 아니라 특정 기판 문제 해결, 전자 수송 사슬의 특정 사이트에서 mitochondria 기능을 결정하는 데 사용할 수 있습니다 저해제와 uncouplers이 제공됩니다. 중요한 것은 설명 프로토콜은 쉽게 다양한 동물 모델과 인간의 샘플의 심장과 골격 조직에 적용할 수 있습니다.

respirometric 산화 인산화 분석과 함께 사포닌 - permeabilized 섬유 준비 mitochondrial 기능의 통합 평가를 제공합니다. 생리학 및 병리 학적 상태에서 Mitochondrial 호흡은 mitochondrial 상호 작용, 형태학 및 생화학 등 다양한 규제의 영향을 반영하실 수 있습니다.

사포닌 - permeabilized 심장 섬유에 Respirometric 산화 인산화 평가

미토콘드리아는 에너지 대사에 관여하므로, 미토콘드리아 기능의 조사는 심장 생리학의 중요한 매개변수를 나타냅니다.

본 절차의 전반적인 목적은 편광 측정(polarographic measurements)을 위해 사포닌 투과(Saponin perme) 심근 섬유를 준비하는 것입니다. 이는 먼저 마우스에서 심장을 적출함으로써 수행됩니다. 절차의 두 번째 단계는 최대 6~8개의 섬유가 느슨하게 연결된 심근 섬유 다발을 기계적으로 준비하는 것입니다.다음으로, 사포닌(saponin)을 사용하여 심장 다발을 화학적으로 투과화합니다. 그 후, 심장 다발을 세척하여 남아 있는 사포닌과 대사물을 제거합니다. 최종적으로, 폴라리그래피(polari graphic) 측정을 통해 미토콘드리아 산화적 인산화에 대한 통찰을 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.안녕하세요, 저는 캘거리 대학교 생화학 및 분자생물학과 Jane Sheer 박사님 연구실의 Curtis Huey입니다. 오늘은 사포닌 투과 심근 섬유(saponin perme cardiac fibers)를 준비하는 절차를 보여드리겠습니다. 저희 연구실에서는 이 절차를 통해 인시튜(in situ) 미토콘드리아 산화적 인산화를 평가합니다.그럼 시작하겠습니다. 이 절차를 시작하려면 해양 생물의 심장을 적출하여 얼음 위에 놓인 RP 용액이 담긴 페트리 접시에 넣으십시오. 해부 현미경을 사용하여 결합 조직이나 지방을 조심스럽게 제거하십시오.심장을 중격(septum)을 따라 절반으로 자른 후, 좌심실의 심내막 표면에서 10~25 mg(습중량)의 조직을 절제합니다. 심근의 기계적 손상을 최소화하기 위해 절개 방향이 섬유 방향과 일치하도록 합니다. 분리한 조직 소시료를 얼음 위에 놓인 RP 용액이 담긴 별도의 페트리 접시에 넣습니다.심장을 섬유 방향을 따라 직경 1~1.5 mm의 세로 조각으로 자릅니다. 매우 주의하며 날카로운 핀셋과 메스를 사용하여 조각을 2~4 mm 길이로 짧게 자릅니다. 섬유 다발을 기계적으로 분리합니다.최종 섬유 다발은 작은 접촉 부위로 연결된 최대 6~8개의 섬유를 포함해야 하며, 습중량 기준 1~3 mg 사이여야 합니다. 육안으로 보았을 때, 심장 조직은 원래의 붉은색에서 옅은 분홍색으로 변해야 합니다. 12웰 플레이트를 얼음에 올려 심장 섬유 다발 준비를 시작하십시오.칼슘 오염을 최소화하기 위해 웰을 RP 용액으로 헹굽니다. 50 µg/mL의 사포닌이 포함된 얼음처럼 차가운 RP 용액 3 mL를 웰 중 하나에 넣습니다. 그런 다음 기계적으로 준비된 섬유 다발을 해당 웰로 옮깁니다.섬유

respirometric-oxidative-phosphorylation-assessment-saponin

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

광근의 lateralis의 조직 검사, 정제 미토콘드리아의 준비, 호흡계 프로파일 링하는 방법이 설명되어 있습니다. 작은 부피의 근육 사용은 임상 연구 애플리케이션이 기술에 적합하다.

경피적 바늘 생검에 의해 획득 골격근 조직에서 고립 된 미토콘드리아의 준비 및 호흡계 평가

제시된 방법은 최소한의 마우스 골격근에서 분리된 미토콘드리아를 사용하여 마이크로플레이트 기반 호흡 측정 분석 모음의 수행을 위한 단계별 지침을 제공합니다. 이러한 분석은 일반적으로 사용되는 동물 모델에서 미토콘드리아 산소 소비량의 기계론적 변화/적응을 측정할 수 있습니다.

높은 처리량 마이크로 호흡 측정을위한 마우스 골격근의 최소 수량에서 미토콘드리아 격리 사용

다음 프로토콜은 분리된 작동 랫드 심장에서 포도당 및 지방산 산화 속도의 정량적 측정을 위한 완충액의 준비 및 활용을 설명합니다. 샘플 분석 및 데이터 해석에 사용되는 방법도 논의됩니다.

격리 된 작업 쥐의 심장에서 포도당과 지방산 산화의 가격의 결정 방법

고해상도 호흡율은 미토콘드리아의 산소 소비를 결정하는 데 사용된다. 이것은 미토콘드리아 호흡 사슬 복합체 '(I-IV) 호흡 속도, 최대 미토콘드리아 전자 전달계 용량 및 미토콘드리아 외막 무결성을 결정하기위한 간단한 기술이다.

고해상도 호흡율은 투과성이 그대로 세포에서 미토콘드리아 기능을 평가하는

이 프로토콜 calorespirometry, 방열 및 에너지 대사를 평가 하는 비 침범 성 접근을 제공 하는 호흡의 직접 및 동시 측정에 설명 합니다. 이 기술은 총 세포 에너지 흐름을 모니터링 하 여 호 기성 및 혐 기성 경로 에너지 사용률에의 기여를 평가 하는 데 사용 됩니다.

Calorespirometry:에 대 한 강력 하 고, 비 침 투 적인 접근 세포 에너지 대사를 조사

고분해능 호흡계를 사용하여 산화 인산화를 평가하는 것은 미토콘드리아와 세포 에너지 대사의 기능 분석의 필수적인 부분이되었습니다. 여기에서는 챔버 및 마이크로 플레이트 기반 고해상도 호흡계를 사용하여 세포 에너지 대사를 분석하기위한 프로토콜을 제시하고 각 장치의 주요 이점에 대해 논의합니다.

챔버 및 플레이트 기반 호흡계를 사용하여 세포 및 조직의 생물 에너지를 평가하기위한 고해상도 호흡 측정법

여기에서는 마우스 골격근으로부터의 미토콘드리아를 분리하는 상세한 방법과 마이크로플레이트 기반 호흡 측정법을 사용하여 산소 소모율(OCR)에 의한 호흡의 후속 분석을 설명한다. 이 파이프 라인은 미토콘드리아 대사에 대한 여러 환경 또는 유전 적 개입의 효과를 연구하는 데 적용될 수 있습니다.

호흡 측정을 위한 마우스 골격근으로부터 미토콘드리아의 분리

형광 센서에 결합된 고분해능 호흡법은 미토콘드리아 산소 소비량과 반응성 산소 종(ROS) 생성을 결정합니다. 본 프로토콜은 투과화된 좌골 신경에서 미토콘드리아 호흡률 및 ROS 생산을 평가하는 기술을 기술한다.

고해상도 호흡 측정법에 의한 좌골 신경의 미토콘드리아 기능 평가

말은 뛰어난 유산소 운동 능력을 가지고 있어 말 골격근을 말 운동 생리학 연구와 포유류 미토콘드리아 생리학 연구 모두에 중요한 조직으로 만듭니다. 이 기사에서는 말 골격근의 미토콘드리아 기능을 종합적으로 평가하는 기술을 설명합니다.

말 골격근의 고분해능 불소 호흡 측정

고분해능 호흡 측정법에 의한 정자 미토콘드리아 기능 분석은 밀폐 챔버 시스템에서 자유롭게 움직이는 정자의 산소 소비량을 측정할 수 있습니다. 이 기술은 정자 미토콘드리아 특성 및 무결성에 대한 정보를 제공하는 인간 정자의 호흡을 측정하는 데 적용할 수 있습니다.

인간 정자의 미토콘드리아 기능을 평가하기 위한 고분해능 호흡 측정법

여기에서는 인간 또는 생쥐 근육의 신선한 투과화된 골격근 섬유에서 미토콘드리아 산화 인산화를 측정하는 포괄적인 방법을 설명합니다. 이 방법을 사용하면 미토콘드리아 호흡을 실시간으로 정량화하고 연료 선호도 및 대사 유연성을 평가하는 동시에 기존 미토콘드리아 네트워크와 멤브레인 무결성을 유지할 수 있습니다.

고분해능 호흡 측정법을 통한 인간 및 생쥐 골격근 섬유의 미토콘드리아 호흡 측정

학습하세요 사포닌 투과 처리된 심장 섬유를 이용한 미토콘드리아 산화 인산화 평가 방법을. 고해상도 호흡 측정법으로 심장 생체에너지학 및 미토콘드리아 기능을 정밀 분석합니다.

사포닌 - permeabilized 심장 섬유에 Respirometric 산화 인산화 평가

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