Name: dsRNA 주입하여 RNAi 간섭에 Drosophila 태아 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-11T11:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 30 s
Description: 배우세요 Drosophila 태아에 dsRNA 주입을 통한 RNAi 간섭 기법으로 기관 발달에 필요한 유전자를 식별하는 방법을. 이 기술은 발달생물학 연구에서 유전자 기능을 빠르게 분석할 수 있는 효과적인 역유전학적 접근법입니다.

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저자 dysfusion cDNA, Dys 항체 및 W 1118 파리, 스티븐 크루스 감사하고 싶습니다.

1. 배아 컬렉션 <ol><li> 25 새장을 설정 ° 2-4일 된 w 1118 flies.Grape 주스 플레이트를 사용하는 C는 수령 전에 1-2일 기간 동안 계란 컬렉션을 동기화하기 위해 하루 동안 매 시간마다 변경됩니다 </li><li> 25 1 시간에 대한 배아를 수집 ° C </li><li> 면도날로 중간에 가볍게 절단 포도 주스 한천의 사각형 조각을 잘라 한천의 라인을두고 </li><li> 포도 쥬스 한천의 조각에 포도 주스 플레이트에서 배아를 전송하는 금속 프로브를 사용하여 한천의 중간에있는 라인에 45도 각도에서 배아의 긴 축을 가진 직선에서 그들을 라인 업. 약 50 배아의 직선을하십시오. 라인에서 멀리 가리키는 후부 엔드와 모든 배아 지점 같은 방향을 확인하십시오. </li><li> 이중 스틱 테이프의 사각형 조각을 잘라 및 18x18mm 커버 슬립에 놓으십시오. </li><li> 커버 슬립을 더블 스틱 테이프와 배아를 들고 </li><li> , 유리 슬라이드에 커버 슬립을 플레이스 약 10 분 공중에 배아를 건조. </li><li> 700 할로 카본 오일의 얇은 층과 배아를 맡아, 지금은 주사를위한 준비. </li></ol> 2. 니들을 풀링 유리 모세관 튜브를 당겨 microinjection의 바늘을 만듭니다. 우리는 세계 정밀 악기 (모델 PUL - 1)에서 바늘 풀러를 사용합니다. 바늘 풀러 프로그램 사양은 다음과 같습니다 열 : 1, 지연 4. 3. 니들 필링 Eppendorf Microloader 팁 장착되어 Eppendorf p20 피펫을 사용하여 백업 부하 바늘은 일반적으로 1.5-2 μL dsRNA를 로드할 수 4. 니들 브레이크 <ol><li> 바늘을 깨는 전에 슬라이드로 coverslip을 넣으십시오. </li><li> 슬라이드 중간에 기름 한 방울과 슬라이드를 준비 </li><li> 공기 압력을 조정 Picospritzer III picopump 켭니다 </li><li> 샵 포인트를 작성, 표지 용지의 가장자리에 대한 가득한 바늘을 휴식. </li><li> 팁이 깨진 경우, Picospritzer III picopump 기슭 페달에 단계는, 일부 dsRNA는 바늘 끝 밖으로 누출됩니다. </li><li> coverslip으로 슬라이드를 꺼내주세요. </li><li> 전에 준비한 슬라이드의 중간에 오일 드롭에서 바늘을 삽입합니다. </li><li> 당신은 발 페달을 밟아 때 100 - 200pl dsRNA를 얻을 수있는 Picospritzer III picopump에 대한 설정을 조정합니다. dsRNA는 작은 비말로 볼 수 있습니다. </li></ol> 5. 주사 <ol><li> 동일한 초점 비행기로 최초의 배반엽 배아의 후부 부분에 바늘 끝을 준비하고 30~50% 달걀 길이 주위 센터에서 배아를 주입. </li><li> 당신이 Picospritzer III picopump 기슭 페달 밟아 후, dsRNA의 작은 금액은 사출 사이트의 작은 점으로 표시됩니다. </li></ol> 6. Phenotypic 분석 <ol><li> 태아가 원하는 배아 단계로 개발할 때까지 주입 후 18 덮여 촉촉한 챔버 (플라스틱 페트리 접시) ° C에 슬라이드를 놓으십시오. </li><li> 이중 양면 테이프에서 배아를 제거하고 커버 용지의 가장자리로 밀어 프로브를 사용합니다. 헵탄를 사용하여 아래에 나일론 메쉬와 컬렉션 약병에 슬라이드에서 배아를 와시, PBT로 3 회 씻는다. Dechorionate 5 분 50 % 표백제로 배아하고 PBT로 3 회 씻는다. 수집 약병에서 나일론 메쉬의 한 부분으로 배아를 전송하고 배아를 공개 정착액 솔루션 (5ml 헵탄, 4.5ml PBS, 0.5ml 37 % 포름 알데히드)에 나일론 메쉬를 찍어. 30 분 대한 고정력있는 솔루션에 배아를 수정. eppendorf 튜브에 배아를 전송하고, 표준 프로토콜을 사용하여 배아를 immunostain, 메탄올과 배아를 Devitellinize. </li><li> 배아는 해당 애벌레 단계로 개발할 수 있습니다. </li><li> 중간에 할로 카본 700 기름 한 방울과 슬라이드를 준비 </li><li> 슬라이드 하나의 유충을 전송, 상단에 커버 슬립을하다 </li><li> 명시야 현미경으로 애벌레를 관찰. </li></ol> 7. 대표 결과 : dsRNA의 예는 Fig1에 표시됩니다 Drosophlia의 배아에서 dysfusion (dys) 유전자를 노크. GFP - dsRNA 주입 태아는 부정적인 통제하고 있습니다. Dys는 tracheal 융합 세포의 표현 bHLH PAS의 전사 인자이다. GFP - dsRNA 주입 배아가 정상 tracheal 융합을 표시하고, Dys 단백질이 융합 세포 (그림 1A)에 속해 있습니다. 한편, dys - dsRNA는 배아가 실패 지점 융합을 보여 주입하고, Dys 단백질이 융합 세포 (그림 1B)에 존재하지 않습니다. dsRNA는 배아가 애벌레 단계로 개발 주입하면 dys - dsRNA 주입 애벌레는 GFP - dsRNA 주입 대조군 (그림 1C)에 비해 실패 지점 퓨전 (Fig.1D)을 보여주었다. 이러한 결과는 효과가 Drosophila의 배아에 주입하여 dsRNA 내생 dys 유전자 표현의 다운 노크했다 <img src="/files/ftp_upload/2477/2477fig1.jpg" alt="그림 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. dys - RNAi에 의해 dys 기능의 제거 tracheal 퓨전 D를 보여efects. 배반엽의 배아 (W 1118)는 GFP - dsRNA (대조군) 또는 dys - dsRNA 중 하나와 함께 주입하고 tracheal 결함에 대한 assayed했다. (A) 단계 16 배아는 GFP - dsRNA로 주입과 α - Dys 및 MAb 2A12 그 얼룩이 tracheal 루멘 물들다. 눈에 띄게 융합있는 측면 트렁크는, 표시됩니다. 화살표는 측면 트렁크 Dys - 긍정적인 융합 세포를 가리 킵니다. (B) 16 단계 배아는 dys - dsRNA로 주입과 α - Dys과 MAb 2A12 물들다. 배아는 측면 트렁크 퓨전 (별표 제어 배아의 측면 - 트렁크 융합의 정상 위치를 나타냅니다)의 부족을 보여주었다. 없음 Dys 양성 세포는 dys - RNA 효과적으로 Dys 단백질을 폐지한다는 의미 관찰되지 않았습니다. GFP - dsRNA 또는 dys - dsRNA 중 하나와 함께 (C D)을 제 2 instar 애벌레는 tracheal 결함에 대한 밝은 - 필드 현미경으로 조사되었다. (C) 퓨전의 사이트는 GFP - dsRNA 주입 제어 애벌레의 별표로 표시됩니다. (D) 측면 트렁크 dys - RNA 주입 애벌레의 퓨즈에 실패, (*)는 측면 트렁크 융합의 정상 위치를 나타냅니다.

<ol><li>St Johnston, D., Nusslein-Volhard, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+of+pattern+and+polarity+in+the+Drosophila+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The origin of pattern and polarity in the Drosophila embryo.</a> Cell. 68, 201-219 (1992).</li>
<li>Venken, K. J., Bellen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+technologies+for+gene+manipulation+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Genet%22%5BJournal%5D)">Emerging technologies for gene manipulation in Drosophila melanogaster.</a> Nat. Rev. Genet. 6, 167-178 (2005).</li>
<li>Fire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potent+and+specific+genetic+interference+by+double-stranded+RNA+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Potent and specific genetic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans.</a> Nature. 391, 806-811 (1998).</li>
<li>Kennerdell, J. R., Carthew, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+dsRNA-mediated+genetic+interference+to+demonstrate+that+frizzled+and+frizzled+2+act+in+the+wingless+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Use of dsRNA-mediated genetic interference to demonstrate that frizzled and frizzled 2 act in the wingless pathway.</a> Cell. 95, 1017-1026 (1998).</li>
<li>Misquitta, L., Paterson, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+disruption+of+gene+function+in+Drosophila+by+RNA+interference+%28RNA-i%29%3A+a+role+for+nautilus+in+embryonic+somatic+muscle+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Targeted disruption of gene function in Drosophila by RNA interference (RNA-i): a role for nautilus in embryonic somatic muscle formation.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 96, 1451-1456 (1999).</li>
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</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

dsRNA 주입 방식 현재는 여기에 Drosophila tracheal 개발 유전자 기능의 매우 민감하고 신속한 분석이 가능합니다. 이 방법은 잠재적으로 다른 조직 및 장기 개발을위한 유전자 기능을 분석하기 위해 적용할 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>Halocarbon oil 700</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H8898</td><td></td></tr><tr><td>Picospritzer III 피코펌프</td><td>Parker Hannifin Corporation</td><td>051-0500-900</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 파이펫</td><td>Fisher Scientific</td><td>21170M</td><td></td></tr><tr><td>마이크로로더</td><td>Eppendorf</td><td>930001007</td><td></td></tr></tbody></table>

dsrna 주입하여 rnai 간섭에 drosophila 태아

RNAi Interference by dsRNA Injection into Drosophila Embryos

유전자 검사는 복잡한 생물 학적 과정을 한 통찰력을 확보하고 사용할 수있는 가장 강력한 방법 중 하나입니다. 수년 동안 유전자 조작을위한 많은 개선 및 도구 Drosophila 2 사용할 수 있습니다. 곧 두 번 좌초 RNA가 분해 RNA 간섭 (RNAi)가 Drosophila 장기 개발에 유전자 기능을 분석하는 강력한 반대로 유전자 접근 방법을 제공하기 위해 표시되었습니다 Caenorhabditis 엘레간스에서 개별 유전자의 활동을하는 데 사용할 수있는 프리와 멜로 3 초기 발견 이후 4, 5. 폐, 신장, 간, 그리고 혈관 계통을 포함한 많은 장기는, 분기 관 네트워크로 구성하는 중요 교통 유체 또는 가스 6, 7. Drosophila tracheal 형성의 분석은 다른 관형 기관 8 morphogenesis을 연구하는 훌륭한 모델 시스템을 제공합니다. 버클리 Drosophila 게놈 프로젝트는 tracheal 시스템에 표현됩니다 유전자의 수백을 보여주었다. 튜브 형성의 분자 및 세포 메커니즘을 연구하기 위해 도전 tracheal 개발에서 이러한 유전자의 역할을 이해하는 것입니다. 여기, 우리는 최저의 개별 유전자 발현에 Drosophila의 배아에 주입 dsRNA에 대한 자세한 방법을 설명했다. 우리는 성공적으로 dsRNA 주입에 의해 내생 dysfusion (dys) 유전자 발현을 무너 뜨 렸어. Dys는 tracheal 융합 세포의 표현 bHLH - PAS 단백질이며, 그것은 tracheal 지점 융합 9, 10 필요합니다. dys - RNAi 완전히 dys 표현을 제거하고 tracheal 퓨전 결함의 결과. 이것은 비교적 간단한 방법은 Drosophila의 tissure 및 장기 개발을위한 requried 유전자를 식별할 수있는 도구를 제공합니다.

RNA 간섭은 유전자의 기능을 분석하는 매우 효과적인 입증되었습니다<em&gt; Drosophila</em&gt; tracheal 개발. 최저의 유전자 발현에 플라이 배아에 dsRNA를 주입하기 위해 티베트 연구실에서 사용하는 자세한 프로토콜은 그림입니다. 이 기술의 조직 및 장기 개발에 필요한 심사 유전자의 가능성을 가지고<em&gt; Drosophila</em&gt;.

dsRNA 주입하여 RNAi 간섭에 Drosophila 태아

유전적 스크리닝은 복잡한 생물학적 과정에 대한 통찰력을 얻기 위해 사용할 수 있는 가장 강력한 방법 중 하나입니다 1. 수년 동안 많은 개선이...

본 절차의 전반적인 목표는 초파리 배아에 이중 가닥 RNA를 주입하여 내인성 유전자 발현을 억제함으로써 기관 발달에 필요한 유전자를 식별하는 것입니다. 이를 위해 먼저 배아를 수집하여 일직선으로 정렬합니다. 그다음, 바늘을 준비하여 배아에 이중 가닥 RNA를 주입합니다.마지막으로, 배아를 습윤 챔버에 넣어 발달시킵니다. 결과적으로, 후기 단계 배아의 항체 염색이나 명시야 현미경을 통한 유충 관찰을 통해 초파리 기관지 분지 융합의 결함을 확인할 수 있습니다. 장기 발달에 필요한 유전자를 식별하기 위한 순방향 유전학 스크리닝과 같은 기존 방법과 비교했을 때 이 기술의 주요 장점은, 해당 유전자의 돌연변이체가 준비되기 전에 유전자 기능을 분석할 수 있는 비교적 간단하고 빠른 역방향 유전학적 접근 방식이라는 점입니다.이 방법은 D 기관계 발달에 필요한 핵심 유전자의 식별과 같이 발생 생물학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이는 척추동물의 기도, 순환계, 신장 도관 및 탐색 상피와 같은 포유류 기관의 형태 형성을 연구하기 위한 훌륭한 모델입니다. 일반적으로 이 방법이 처음인 연구자는 배아 정렬, 바늘 부러뜨리기, 배아 내 stranded RNA 주입과 같은 기술을 익히는 데 시간이 걸리기 때문에 어려움을 겪을 수 있습니다.배아마다 주입되는 이중 가닥 RNA의 양이 다르며, 합포체 포배기 배아의 모습에 대한 서술적 설명은 한계가 있기 때문에 이 방법의 시각적 시연이 매우 중요합니다. 합포체 포배기 배아에 적절한 양의 이중 가닥 RNA를 주입하는 것은 내인성 유전자의 발현을 효과적으로 억제하기 위한 매우 결정적인 단계이므로, 해당 과정을 익히는 데 어려움이 있을 수 있습니다.먼저 2~4일 된 W 1 1 1 8 초파리를 사용하여 25 °C에서 케이지를 설정합니다. 1~2일의 기간 동안 알 수집을 동기화하기 위해 낮 동안 매시간 포도당 플레이트를 교체하십시오. 수집 전, 25 °C에서 1시간 동안 syn city 또는 blaster derm 배아를 수집합니다. 직사각형 모양의 포도당 아가 플레이어를 준비한 다음, 면도날을 사용하여 아가 중앙에 선을 가볍게 긋습니다.금속 프로브를 사용하여 배아를 포도 주스 플레이트에서 포도 주스 한천 조각으로 옮깁니다. 약 50개의 배아를 한천 중앙의 직선상에 일렬로 배치하되, 배아의 장축이 직선과 45도 각도를 이루도록 합니다. 모든 배아의 후단이 직선의 반대 방향을 향하도록 동일한 방향으로 정렬되었는지 확인하십시오.양면테이프를 직사각형 모양으로 잘라 18 by 18 밀리미터 크기의 커버 슬립에 붙입니다. 커버 슬립에 붙은 테이프를 사용하여 배아를 집어 올립니다. 커버 슬립을 유리 슬라이드 위에 올립니다.배아를 양면테이프에 살짝 누르고 약 10분 동안 공기 중에서 건조시킵니다. 배아 위에 700 halo carbon oil을 얇게 덮어줍니다. 현미경 상에서 배아가 투명해질 때까지 약 10분 정도 기다립니다.유리 모세관을 가열 인발하여 마이크로인젝션용 니들을 준비합니다. World Precision Instruments 사의 니들 풀러(needle puller)를 사용하며, 프로그램 설정은 Heat one, delay four, back으로 설정합니다.Einor P 20 피펫과 einor micro loader 팁을 사용하여 이중 가닥 RNA 2 µL를 바늘에 충전합니다. 깨끗한 커버 슬립을 올린 슬라이드를 준비하고 테이프로 함께 고정합니다. 충전된 바늘을 커버 슬립의 가장자리에 밀착시켜 날카로운 지점을 만듭니다.이중 가닥 RNA가 바늘 끝에서 흘러나옵니다. 피코 펌프의 풋 페달을 밟을 때, 슬라이드 중앙에 오일 한 방울을 떨어뜨려 준비합니다. 바늘을 오일 방울 속에 삽입합니다.풋 페달을 밟았을 때 피코 펌프에서 100 내지 200 picoliters의 이중 가닥 RNA가 배출되도록 설정을 조정하십시오. 이중 가닥 RNA는 작은 방울 형태로 나타납니다.첫 번째 배아의 후방 부위에 바늘 끝을 위치시킨 후 피코 펌프 발판을 누릅니다. 주입 부위에 이중 가닥 RNA가 작은 점 형태로 나타날 것입니다.슬라이드 위의 배아에 이중 가닥 RNA 주입을 완료합니다. blastomere 단계가 아닌 배아는 모두 제거합니다. 커버 슬립을 플라스틱 페트리 접시와 같이 덮개가 있는 습윤 챔버에 넣고, 배아가 원하는 배아 또는 유생 단계까지 발달할 때까지 18 °C에서 배양합니다.원하는 배아 단계까지 발달한 배아의 경우, 프로브를 사용하여 양면테이프에서 배아를 제거하고 커버슬립의 가장자리로 밉니다. 헵탄을 사용하여 배아를 씻어내어 바닥에 나일론 메쉬가 있는 수집 바이알로 옮깁니다. 배아를 PBT로 세 번 세척하고 50%Bleach에서 5분 동안 처리한 후, 다시 PBT로 세 번 세척합니다.피펫을 사용하여 수집 바이알에서 나일론 메쉬 조각으로 배아를 옮긴 후, 나일론 메쉬 조각을 고정액에 담급니다. 배아를 30분 동안 고정합니다. 고정액의 하층을 제거합니다.그 후 메탄올로 고정합니다. 배아를 에펜도르프 튜브로 옮기고, 원하는 유생 단계까지 발달한 배아를 위한 표준 항체 염색 프로토콜을 사용하여 두 가지 A 12 및 diffusion 항체로 면역 염색합니다. 슬라이드 중앙에 halo carbon 700 오일을 한 방울 떨어뜨리고, 오일 방울 양옆에 작은 커버 슬립 두 개를 배치하여 슬라이드를 준비합니다. 유생 한 마리를 슬라이드로 옮긴 후 오일 방울 위에 커버 슬립을 덮습니다.명시야 현미경으로 유충을 관찰합니다. 확산 이중가닥 RNA와 GFP 이중가닥 RNA 주입의 대표적인 결과가 여기에 제시되어 있습니다.GFP 이중 가닥 RNA가 주입된 배아는 정상적인 기관 융합을 보이며, 융합 세포 내에 확산 단백질이 존재합니다. 화살표는 외측 몸통 확산 양성 융합 세포를 가리키며, 별표는 정상 융합 위치를 나타냅니다.하지만, 이중 가닥 RNA가 주입된 배아에서는 분지 융합에 실패하며, 융합 세포에서 확산 단백질이 나타나지 않습니다. 삼각형은 이중 가닥 RNA가 주입된 배아가 유충 단계로 발달했을 때 분지 융합에 실패한 부위를 나타냅니다. G-F-P-R-N AI 유충은 별표로 표시된 바와 같이 정상적인 기관 분지 융합을 보여줍니다.반면, diffusion RN AI 유충은 삼각형으로 표시된 가지 융합 실패 양상을 보였습니다. 이러한 결과는 초파리 배아에 이중 가닥 RNA를 주입하여 내인성 diffusion 유전자 발현을 억제했을 때의 효과를 보여줍니다. 이 절차를 수행할 때는 발달이 완료된 후 모든 enseal blaster 배아를 사멸시켜야 한다는 점을 기억하는 것이 중요합니다.이 기술은 발생 생물학 분야의 연구자들이 초파리의 기관 발달에 관여하는 새로운 유전자들의 기능을 탐구할 수 있는 길을 열어주었습니다. 이 영상을 시청하고 나면, 초파리 배아에 이중 가닥 RNA를 주입하여 내인성 유전자를 넉다운시키는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다.

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Biology

생물학

우리의 단백질 표현 및 현지화의 postembryonic 규제를 식별할 수 sensitized 방법을...

에 Postembryonic Phenotypes을 식별하기 위해 RNAi 심사 C. elegans</em

이 책의 목적은 시각화 및 초파리에서 추출한 RNA에 향상된 북부 얼룩 프로토콜의 동작 단계를 논의 배아, 세포 및 조직을 melanogaster하는 것입니다. 이 프로토콜은 작은 RNA 종의 효율적인 검출에 특히 유용하다.

작은 RNA 종의 북부 오 탐지의 향상된 초파리 Melanogaster

RNA 간섭 (RNAi의) 기반의 유전자 녹다운 기술은 Tribolium 연구의 핵심이다. 여기서 우리는 Tribolium의 castaneum 우리의 애벌레의 RNAi 기술에 대한 개요를 제공합니다. 애벌레의 RNAi 연구자들이 다양한 상황에서 유전자의 기능을 연구 할 수 있도록, 기능 상실 표현형에 대한 빠른 액세스를 제공하는 간단하지만 강력한 기술이다.

레드 밀가루 딱정벌레의 애벌레 RNA 간섭, Tribolium castaneum

RNA interference (RNAi)는 유전자 기능을 밝히는 데 매우 유용한 도구입니다. 그러나 성체 이전 단계에서 RNAi를 사용하여 유전자를 표적으로 하는 능력은 주요 인간 말라리아 매개체인 Anopheles gambiae에서 제한됩니다. 번데기 발달 중 직접 주입을 통해 유전자 기능을 감소시키는 RNAi 프로토콜에 대해 설명합니다.

에 RNAi의 트리거 배달<em&gt; 아노 펠 레스 gambiae</em&gt; 번데기

여기, 우리는 실험실에서 중간 - 세균 딱정벌레, Dermestes maculatus (D. maculatus)를 양육하기위한 프로토콜을 제시한다. 우리는 또한이 종에서 유전자 기능을 연구하기 위해 배아 표현형을 분석 배아 및 부모의 RNAi를위한 프로토콜과 방법을 공유 할 수 있습니다.

양육 및 숨기기 비틀에 RNA 매개 유전자 최저를 두 번 좌초, Dermestes maculatus

이 문서에는 RNA 간섭 (RNAi) 곤충 먹이 체 관 부 수액에 대 한 식물의 혈관 조직을 통해 이중 가닥 RNA (dsRNA)의 구두 납품을 위해 개발 된 새로운 기술을 보여 줍니다.

체 관 부 식물 수액 공급 Hemipteran 곤충에 RNA 간섭을 유도 하 이중 가닥 RNA 구두 전달 방법

RNA 간섭은 특정 발달 단계에서 유전자 발현을 조작하기 위한 널리 적용가능하고 강력한 기술입니다. 여기서, 우리는 수중 다이빙 딱정벌레 Thermonectus marmoratus에서이 기술을 구현하기 위한 필요한 단계를 기술합니다, 구조 또는 행동에 영향을 미치는 유전자의 녹다운에 유전자 의 취득에서.

특정 발달 시점에서 유전자 발현을 조작하기 위한 강력한 도구로 수생 딱정벌레의 RNA 간섭

세균에 의해 생산된 dsRNA의 경구 투여는, 예쁜꼬 마선충에서 일상적으로 사용되는 RNA 간섭(RNAi)에 대한 전달 방법으로서, 성인 모기에 성공적으로 적용되었다. 우리의 방법은 주사를 사용하지 않고도 강력한 역 유전학 연구 및 전송 차단 벡터 연구를 가능하게합니다.

성인 Anopheles 감비아 모기에 효과적인 경구 RNA 간섭 (RNAi) 투여

RNA 간섭(RNAi)의 조작은 Trichogramma 말벌과 같이 크기가 작은 많은 기생충 종에서 만만치 않은 도전을 제시합니다. 이 연구는 Trichogramma denrolimi에서 효율적인 RNAi 방법을 설명했습니다. 본 방법론은 Trichogramma 말벌의 유전자 조절을 조사하기 위한 강력한 모델을 제공합니다.

계란 기생충의 RNA 간섭, Trichogramma dendrolimi Matsumura

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초파리의 형질전환을 위한 배아 미세주입

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