Name: 모스의 효율적인 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 중재 변환 Physcomitrella patens /em (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-19T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 54 s
Description: 배우세요 Physcomitrella patens 원형질체의 효율적인 PEG 중재 유전자 변형 방법을. 드리젤라이스 소화와 마니톨 세척을 통해 안정적인 형광 단백질 발현을 얻을 수 있습니다. 이 기술은 유전자 기능 연구에 필수적인 도구입니다.

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1. Protoplasts 만들기 <ol><li> 페트리 접시에 mannitol 8퍼센트 9 ML을 추가합니다. </li><li> 주걱을 사용하여 5로부터 2-3 PPNH4 접시에서 칠일 오래된 이끼를 넣어 - 페트리 접시가 포함된 mannitol 인치 </li><li> 페트리 접시에 2 % Driselase 3 ML (시그마 D9515 - 25G)을 추가합니다. </li><li> 1 시간 동안 부드러운 잡고 상온에서 페트리 접시를 품어. </li><li> 100 μm의 메쉬 (BD 팰컨 352350)를 통해 원형질의 현탁액을 필터링합니다. </li><li> 5 분 250g에서 필터링된 정지를 스핀. 뜨는을 제거합니다. </li><li> 8 % mannitol 500 μL 매우 부드럽게 protoplasts를 다시 일시 중지합니다. </li><li> 문화 튜브 9.5 ML 8 % mannitol을 추가합니다. protoplasts가 완전히 정지되어 있는지 확인하십시오. </li><li> 여과 다시 정지 단계 (1.6, 1.7 및 1.8) 두 번 더 반복합니다. </li><li> 원형질 솔루션 10 μL를 가지고 hemocytometer에서 protoplasts을 계산합니다. </li><li> (그림 1 참조) ML 당 protoplasts의 숫자를 얻기 위해 10,000의 16 광장 지역에 원형질의 수를 곱하면됩니다. </li></ol> 2. 변환 <ol><li> 5 분 250g의 원형질의 정지를 스핀. 뜨는을 제거합니다. </li><li> 1,600,000 protoplasts / ML의 농도에서 MMG 솔루션 protoplasts를 다시 일시 중지합니다. </li><li> 20 분 상온에서 원형질의 현탁액을 품어. </li><li> 60 μg의 DNA를 포함하는 문화 튜브에 원형질의 정지 600 μL를 추가합니다. 튜브 부드럽게 소용돌이. </li><li> 원형질 / DNA 혼합물에 PEG / CA 솔루션을 700 μL를 추가합니다. 소용돌이는 튜브가 부드럽게 전체 혼합물은 균질 때까지. </li><li> 30 분 상온에서 혼합을 품어. </li><li> 이 대기 기간 동안, 셀로판과 PRM - B 접시 (80mm 직경의 원을, AA 포장 제한, 영국) 커버, 적어도 5 분 플레이트 표면에 수화 셀로판하실 수 있습니다. </li><li> 주걱으로 셀로판와 플레이트 사이에 갇혀있는 공기 방울을 제거하십시오. </li><li> W5 솔루션 3 ML과 혼합물을 희석. </li><li> 5 분 250g의 혼합물을 스핀. 뜨는을 제거합니다. </li><li> PRM - T의 녹은이 ML에서 다시 중지 protoplasts (이 솔루션은 42 ° C에서 액체 유지 수있는 protoplasts에 추가하기 전에). 플레이트 셀로판으로 덮여 PRM - B 플레이트마다 다시 중단 protoplasts 1 ML. Micropore (3M, 의료)와 접시를 넣어. 성장 챔버에서 25 ° C에서 접시 보관하십시오. </li><li> 또는, protoplasts는 액체 도금 매체와 셀로판으로 덮여 PRM - B 접시에 도금 0.5 ML 1 ML에 다시 일시 중지하실 수 있습니다. 이것은 빠른 재생이 가능하지만, 재생 공장의 수가 낮습니다. </li><li> 성장 챔버는 16 시간에 대해 설정됩니다. 빛 8 시간. 어두운주기. </li><li> 사일 변환 후 신선한 선택 접시에에 셀로판를 이동합니다. </li></ol> 3. 대표 결과 : 변환의 예제는 그림 2에 표시됩니다. 이 예제에 사용되는 DNA는 hygromycin 모성 카세트를 들고 플라스미드 supercoiled 7.8 킬로바이트했다. 도금 protoplasts의 양은 사진을 50 %로 축소되었다. 사진은 식물이 선택 접시로 이동했다 2 주 후에 찍은. 변환 효율은 최대 60 μg에 DNA 농도의 영향을받지 않습니다. DNA의 높은 농도는 변화의 효율성에 해로운 있습니다. 데이터는이 방법 DNA 금액의 넓은 범위에서 일관된 결과를 제공하는 것으로 나타났다. 이 방법은 또한 효과적으로 표 1에 나타난 안정적인 transformants를 생성할 수 있으며, 우리는 이전에보고했던 14보다 훨씬 높은 선형 DNA의 마이크로 그램 당 4 안정적인 transformants에 대해받을 수 있습니다. 우리는 또한 마커로서 형광 단백질에 대한 유전자를 운반 supercoiled 플라스미드를 변환하여 변환 효율에 열 충격의 효과를 테스트. 열 충격을 3 분 동안 45 ° C 물 목욕에있는 혼합 잠복기하여 (단계 2.6 이내) 상온 보육 후 10 분 정도 진행되었습니다. 혼합물은 17 분에 대한 열 충격 후 즉시 상온의 물을 욕조에 incubated했다. 결과는 22시간 변환 이후에 기록되었다. 함께 취득 transformants 및 열 충격없이 비율은 (~ 25 %)과 매우 유사했지만 우리는 protoplasts (데이터가 표시되지 않음)의 생존 능력에 열 충격의 부정적인 효과를 관찰했다. <img src="/files/ftp_upload/2560/2560fig1.jpg" alt="그림 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. hemocytometer에서 protoplasts의보기. 원형질의 계산에 필요한 부분이 빨간색 사각형으로 표시됩니다. protoplasts를 (1.11 참조) 계산에 필요한 16 사각형을 참고하고, 이미지는 24 protoplasts의 카운트 (240000 셀 / ML)를 보여줍니다. <img src="/files/ftp_upload/2560/2560fig2.jpg" alt="그림 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 2"> 그림 2. 십팔일 오래된 과도 transformants 사진. Protoplasts은 트랜스되었습니다supercoiled 플라스미드의 표시 양의 형성. A : 15μg, B : 30μg, C : 60μg, D : 120μg. <table border="1"><tbody><tr><td> DNA (μg)의 금액 </td><td> 효율성 (tranformants / μg의 DNA) </td></tr><tr><td> 15, 플라스미드 supercoiled </td><td> 120 ± 24 </td></tr><tr><td> 30, 플라스미드 supercoiled </td><td> 145 ± 54 </td></tr><tr><td> 60, 플라스미드 supercoiled </td><td> 121 ± 60 </td></tr><tr><td> 120, 플라스미드 supercoiled </td><td> 71 ± 38 </td></tr><tr><td> 60, 플라스미드 선형 </td><td> 4 ± 1 </td></tr></tbody></table> 다양한 DNA 금액에 표 1. 변환 효율.

<ol><li>Abel, S., Theologis, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+transformation+of+Arabidopsis+leaf+protoplasts%3A+a+versatile+experimental+system+to+study+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+J%22%5BJournal%5D)">Transient transformation of Arabidopsis leaf protoplasts: a versatile experimental system to study gene expression.</a> Plant J. 5, 421-427 (1994).</li>
<li>Wood, A. J., Oliver, M. J., Cove, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bryophytes+as+model+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Bryologist%22%5BJournal%5D)">Bryophytes as model systems.</a> Bryologist. 103, 128-133 (2000).</li>
<li>Schaefer, D. G., Zrÿd, J. -P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+gene+targeting+in+the+moss+Physcomitrella+patens%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+J%22%5BJournal%5D)">Efficient gene targeting in the moss Physcomitrella patens.</a> Plant J. 11, 1195-1206 (1997).</li>
<li>Schaefer, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+targeting+in+Physcomitrella+patens%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Plant+Biol%22%5BJournal%5D)">Gene targeting in Physcomitrella patens.</a> Curr. Opin. Plant Biol. 4, 143-150 (2001).</li>
<li>Kamisugi, Y., Cuming, A. C., Cove, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parameters+determining+the+efficiency+of+gene+targeting+in+the+moss+Physcomitrella+patens%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">Parameters determining the efficiency of gene targeting in the moss Physcomitrella patens.</a> Nucleic Acids Res. 33, e173-e173 (2005).</li>
<li>Cove, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+moss+Physcomitrella+patens%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Genet%22%5BJournal%5D)">The moss Physcomitrella patens.</a> Annu. Rev. Genet. 39, 339-358 (2005).</li>
<li>Kamisugi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanism+of+gene+targeting+in+Physcomitrella+patens%3A+homologous+recombination%2C+concatenation+and+multiple+integration%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">The mechanism of gene targeting in Physcomitrella patens: homologous recombination, concatenation and multiple integration.</a> Nucleic Acids Res. 34, 6205-6215 (2006).</li>
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<li>Sawahel, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+of+foreign+DNA+into+Physcomitrella+protonemal+tissue+by+using+the+gene+gun%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Transfer of foreign DNA into Physcomitrella protonemal tissue by using the gene gun.</a> Plant Mol. Biol. 10, 315-316 (1992).</li>
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<li>Hohe, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+and+highly+standardized+transformation+procedure+allows+efficient+production+of+single+and+multiple+targeted+gene-knockouts+in+a+moss%2C+Physcomitrella+patens%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Genet%22%5BJournal%5D)">An improved and highly standardized transformation procedure allows efficient production of single and multiple targeted gene-knockouts in a moss, Physcomitrella patens.</a> Curr. Genet. 44, 339-347 (2004).</li>
<li>Vidali, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Profilin+is+essential+for+tip+growth+in+the+moss+Physcomitrella+patens%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell%22%5BJournal%5D)">Profilin is essential for tip growth in the moss Physcomitrella patens.</a> Plant Cell. 19, 3705-3722 (2007).</li>
</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

여기서 제시하는 방법은 Physcomitrella patens의 protoplasts으로 간단하고 일관된 DNA 변환이 가능합니다. 이 방법은 원래 Arabidopsis 1 개발하지만, 여기는 Physcomitrella patens, 간단하고 다른 식물의 protoplasts 잘 수행하는 입증되었다. 따라서,이 방법은 약간의 수정을 다른 식물 수종에 적용할 수 있습니다. 최적화에 대한 가능성이 수정은 MMG의 원형질 농도, MMG와 PEG / 칼슘 용액에 배양 시간을 포함합니다. transformants의 숫자가이 시점 (표 1)까지 D​​NA 농도와 선형 증가하기 때문에 우리는 우리의 일상적인 실험 60 μg의 DNA를 사용하도록 선택할 수 있습니다. 우리는 식물의 대규모 인구의 추가 심사 및 분석을 위해 이용할 수있는 하나의 60 μg의 DNA 변환에 약 7,000 과도 transformants 또는 200 안정적인 transformants를 얻을 수 있습니다. 변형 protoplasts은 액체 도금 매체 또는 PRM - T와 함께 중 전염 수 있습니다. 재생 효율이 액체 도금 매체를 사용하는 경우 낮은이지만 protoplasts가 supercoiled plasmids로 변환했을 때, 우리는이 방법을 선택합니다. 마찬가지로 표 1에 보였다, supercoiled 플라스미드 DNA와 함께 한 변환은 더 많은 transformants를 생성하기 때문에, 우리는 여전히 액체 도금 매체와 식물의 큰 숫자를 얻을 수 있습니다. 또한, 액체 도금 매체와 protoplasts을 전파하는 것은 실험 9,15를 허물고 같은 RNAi과 같은 과도 phenotypes를 관련된 실험을위한 중요합니다 빠른 재생을 허용합니다. 또한 상단 한천의 부재는 immunostaining 및 RT - PCR 9,15 쉽게 공장 절연을 허용합니다.

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 성분 </td></tr><tr><td> PPNH 4 </td><td> 1.84 MM KH 2 PO 4 3.4 MM 칼슘 (NO 3) 2 1 ㎜ MgSO 4 2.72 MM의 Diammonium의 tartrate 54 μm의 FeSO 4 0.7 H 2 O 9.93 μm의 H 3 BO 3 1.97 μm의 MnCl 2 0.4 H 2 O 0.23 μm의 CoCl 2 0.6 H 2 O 0.19 μm의 ZnSO 4. 7H 2 O 0.22 μm의 CuSO 4. 5H 2 O 0.10 μm의 나 2 무 4 0.2 H 2 O 0.168 μm의의 KI 고체 매체에 0.7 %의 한천을 추가합니다. </td></tr><tr><td> PRM - B </td><td> 6 % mannitol과 0.8 %의 한천과 함께 PPNH 4. 접시를 따르고 전에 10 ML 1M CaCl 2-1 패를 추가합니다. </td></tr><tr><td> PRM - T </td><td> 6 % mannitol과 0.6 %의 한천과 함께 PPNH 4. 0.5 ML 1M CaCl 사용하기 전에 2-50 ML을 추가합니다. </td></tr><tr><td> 액체 도금 매체 </td><td> 한천없이 8.5 %의 mannitol과 PPNH 4. 0.5 ML 1M CaCl 사용하기 전에 2-50 ML을 추가합니다. </td></tr><tr><td> 2 % Driselase </td><td> Driselase 4 G (시그마 D9515 - 25G) 8 % mannitol 200 ML에 추가합니다. 30 분 부드럽게 저어. 상온에서 30 분 알을 품다. 4 ° C, 5 분 부드럽게 저어. 상온에서. 펠렛을 삭제, 10 분 2천5백그램를 스핀. 10 ML aliquots 얼어붙은 0.22 μm의, 그리고 저장과 필터. 사용하기 전에 실온의 물을 욕조에 녹여. </td></tr><tr><td> MMG </td><td> 0.4 M mannitol 15 MM MgCl 2 4 MM MES (산도 5.7) </td></tr><tr><td> PEG / CA </td><td> 4g PEG4000 3 ML H 2 O 2.5 ML 0.8 M mannitol 1 ML 1M CaCl 2 </td></tr><tr><td> W5 </td><td> 154 MM NaCl 125 MM CaCl 2 5 MM KCl 이 MM MES (산도 5.7) </td></tr></tbody></table>

모스의 효율적인 폴리에틸렌 글리콜 (peg) 중재 변환 physcomitrella patens</em

Efficient Polyethylene Glycol (PEG) Mediated Transformation of the Moss Physcomitrella patens

<p class="jove_content"변환하기&gt; 간단하고 효율적인 방법<em&gt; Physcomitrella pantens</em&gt; protoplasts이 설명되어 있습니다. 이 방법은을 위해 프로토콜에서 적응됩니다<em&gt; Physocmitrella</em&gt; protonemal 원형질과<em&gt; Arabidopsis</em&gt; mesophyll의 원형질 변환<sup&gt; 1</sup&gt;. 상동 재조합 효율 mitotic를 받아야하기 위해 용량으로 인해<em&gt; Physcomitrella patens</em&gt;은 최근에 중요한 모델 시스템으로 등장했습니다<sup&gt; 2</sup&gt;. 이 용량은 유전자의 높은 주파수 타겟팅 가능<sup&gt; 3-9</sup같은 다른 모델 식물을 볼 수 없습니다&gt;<em&gt; Arabidopsis</em&gt;. 이 시스템을 최대한 활용하기 위해, 우리는 이끼 세포에 DNA를 제공하기 위해 효과적이고 쉬운 방법이 필요합니다. 이 이끼를 변환하는 가장 일반적인 방법은 입자 충격 아르<sup&gt; 10</sup&gt; 그리고 PEG - 중재 DNA 이해<sup&gt; 11</sup&gt;. 입자 폭격 높은 변환 효율을 생산할 수 있지만<sup&gt; 12</sup&gt;, 유전자 총을 많은 실험실에게 즉시 제공되지 않으며 프로토콜은 표준화하기가 어렵습니다. 한편, PEG 중재 변화 전문 장비를 필요로하지 않으며, 살균 후드가있는 모든 실험실에서 수행할 수 있습니다. 여기, 우리는 모스 protoplasts의 변환을위한 간단하고 매우 효율적인 방법을 보여줍니다. 이 방법은 이전에 보고된 가장 효율적인 프로토콜의 개선입니다 DNA의 마이크로 그램 당 120여 과도 transformants를 생성할 수 있습니다<sup&gt; 13</sup&gt;. 간단, 효율성 및 재현성 때문에,이 방법은 일상적인 변화뿐만 아니라 transformants의 다수를 요구하는 프로젝트에 적용할 수 있습니다.</p

변환하는 간단하고 효율적인 방법<em&gt; Physcomitrella pantens</em&gt; protoplasts이 설명되어 있습니다. 이 방법은을 위해 프로토콜에서 적응됩니다<em&gt; Physocmitrella</em&gt; protonemal 원형질과<em&gt; Arabidopsis</em&gt; mesophyll의 원형질 변환<sup&gt; 1</sup&gt;.

모스의 효율적인 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 중재 변환 Physcomitrella patens</em

Physcomitrella patens 원형질체를 형질전환하는 간단하고 효율적인 방법이 설명되어 있습니다. 이 방법은 Physcomitrella ...를 위한 프로토콜을 응용한 것입니다.

이 실험 절차의 전반적인 목표는 SCO Metre 원형질체를 형질전환하는 것입니다. 이는 먼저 Drizly를 사용하여 식물을 소화시켜 수행합니다. 다음으로, 원형질체를 mannitol로 세척하여 drizly를 제거한 후, DNA 및 peg와 함께 배양합니다.마지막으로, 형질전환된 원형질체를 플레이트에 도포하고 배양합니다. 최종적으로, 형광 현미경을 통해 형광 표지 단백질을 발현하는 형질전환 원형질체를 확인함으로써 결과를 얻을 수 있습니다. 본 실험 절차의 시연은 저희 연구실의 박사후연구원인 Y lu가 담당하겠습니다.이 기술의 주요 장점은 효율적이며 관심 단백질을 발현하는 원형질체를 일관되게 생성한다는 점입니다. 이끼 원형질체를 분리하려면, 먼저 스패튤라를 사용하여 페트리 접시에 8% mannitol 9 mL를 넣습니다. PP NH 4 플레이트 2~3개에서 5~7일 된 이끼를 mannitol에 옮깁니다. 이에 대한 내용 및 추가 시약 레시피는 함께 제공되는 서면 프로토콜을 참조하십시오. 다음으로, 2% drizly 3 mL를 첨가하고 실온에서 부드럽게 흔들어주며 1시간 동안 배양합니다.혼합물을 100 micron 메시로 여과하여 녹색의 균질한 현탁액을 얻습니다. 그 다음 여과액을 250 G에서 5분 동안 원심 분리합니다. 상층액을 매우 조심스럽게 제거합니다.원형질체를 500 µL의 8% mannitol에 재현탁합니다. 그다음 8% mannitol 9.5 mL를 추가로 넣습니다. 원형질체가 완전히 현탁되었는지 확인하십시오.용액을 250 G에서 5분 동안 다시 원심분리하여 세척 단계를 두 번 더 수행합니다. 상청액을 제거하고 원형질체를 다시 현탁합니다. 먼저 500 µL의 용액에 현탁합니다.그런 다음 혈구계수기(hemo cytometer)를 사용하여 8% mannitol 9.5 milliliters를 첨가합니다. 분리된 원형질체에 DNA를 형질전환하기 위해 현탁액 10 microliters 내의 원형질체 수를 측정합니다. 먼저, 원형질체 혼합물을 250 G에서 5분 동안 원심분리합니다.상층액을 제거하고 원형질체(protoplasts)를 MMG 용액에서 mL당 1.6 million으로 재현탁합니다. 현탁액을 상온에서 20분 동안 배양합니다. 그다음, 60 µg의 DNA가 들어 있는 배양 튜브에 원형질체 용액 600 µL를 첨가합니다. 흔들어 섞어줍니다.PEG 칼슘 용액 700 µL를 조심스럽게 첨가하고 흔들어 섞습니다. 이 대기 시간 동안 샘플을 실온에서 30분 동안 충분히 배양합니다. PRMB 플레이트를 셀로판으로 덮습니다.그런 다음 현탁액을 3 mL의 W5 용액으로 희석하고 250 ×g에서 5분 동안 원심분리합니다. PEG를 제거하기 위해 원형질체(protoplast)를 2 mL의 PRMT 용액에 재현탁하고, 셀로판으로 덮인 PRMB 플레이트당 1 mL씩 분주합니다. 플레이트를 배양기 내 25 °C에서 보관합니다.마지막으로, 형질전환 4일 후에 셀로판을 새로운 선택 배지로 옮깁니다. 이 그림은 하이그로마이신 저항성 카세트를 운반하는 15 µg의 super coiled plasmid DNA로 형질전환되어 원형질체로부터 재생된 18일 된 식물의 예시를 보여줍니다. 여기서는 동일한 super coiled plasmid DNA 30 µg을 원형질체에 형질전환하였습니다.이 샘플에는 60 micrograms의 plaid DNA가 형질전환되었습니다. 마지막으로, 이 식물들은 hygromycin 저항성 카세트를 포함하는 동일한 super coiled plasma DNA 120 micrograms로 형질전환된 원형질체로부터 재생되었습니다. 형질전환 효율은 최대 60 micrograms의 DNA 농도까지는 영향을 받지 않습니다.하지만 DNA 농도가 너무 높으면 이 과정에 방해가 됩니다. 데이터에 따르면 이 방법은 한 학기 동안 광범위한 DNA 양에 대해 일관된 결과를 제공합니다. 적절하게 수행한다면 이 기술은 3시간 이내에 완료할 수 있습니다.이 절차 이후에 일시적 RNAi 및 유전자 녹아웃과 같은 추가적인 방법을 수행하여 유전자 기능에 관한 추가적인 의문점을 해결할 수 있습니다.

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이 프로토콜은 녹색 미세조류 클로렐라 심가리스(Chlorella vulgaris)의 핵 게놈에 관심 유전자를 통합하기 위한 Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation(AMT)의 활용을 간략하게 설명하여 안정적인 형질전환체를 생산합니다.

Agrobacterium tumefaciens-Medited Genetic Engineering of Green Microalgae, Chlorella vulgaris (녹색 미세 조류, 클로렐라 심가리스의 Agrobacterium tumefaciens-Mediated Genetic Engineering of Green Microalgae, Chlorella vulgaris)

우리는 P. capsici  에도 적용 가능한 Phytophthora palmivora의 아그로박테리움 매개 변형을 위한 간단하고 효과적이며 재현 가능한 프로토콜을 제시합니다.

아그로박테리움 매개 피토프토라 팜미보라의 변형을 위한 간소화된 방법

게놈과 phenotypic 유사 콘텐츠의 집합 내에서 게놈 변화의 영양소 스트레스 결과에 따라 일부 아마 품종을 재배. 특정 사이트에서 복잡한 삽입 다양한 영양 정권 아래에서 성장과이 사이트 주변의 유전자 표현의 변화와 연결되어 있습니다.

플렉스의 변경을 물려 전할 수있는 환경을 유도

배우세요 Physcomitrella patens 원형질체의 효율적인 PEG 중재 유전자 변형 방법을. 드리젤라이스 소화와 마니톨 세척을 통해 안정적인 형광 단백질 발현을 얻을 수 있습니다. 이 기술은 유전자 기능 연구에 필수적인 도구입니다.

모스의 효율적인 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 중재 변환 Physcomitrella patens

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