Name: 초임계 유체 크로마 토그래피를 사용하여 정제를위한 기본 원칙 - 광고 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-11-11T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 32 s
Description: 배우세요 초임계 유체 크로마토그래피(SFC) 정제 기법을 통해 화합물 분리 원리와 OBD 기술 기반 컬럼을 활용한 분석에서 정제 규모로의 예측 가능한 확장성을 탐구하는 방법을 익히세요.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

1. 샘플 준비 <ul class="none"><li> 컴파 운드 혼합 1 : Coumarin, 이부 프로펜, 그리고 Carbamazepine, 20 MG / ML 메탄올 각 </li><li> 컴파 운드 혼합 2 : 이부 프로펜과 Carbamazepine, 메탄올의 각 MG / ML 20 </li><li> 컴파 운드 혼합 3 : 이부 프로펜과 Carbamazepine, (디메틸 sulfoxide) DMSO의 각 MG / ML 20 </li><li> 컴파 운드 혼합 4 : 10 MG / ML Fenoprofen, 15 MG / ML 케토프로펜, 20 MG / ML Flavone, 20 MG / ML의 이부 프로펜, 그리고 메탄올 20 MG / ML Coumarin </li></ul> 2. 실험 조건 <ol><li> 분석 크로마 토그래피는 워터스 방법 역 SFC 시스템에서 수행되었다. 칼럼 : Viridis SFC 2 - Ethylpyridine 칼럼, 5 μm의, 4.6 X 150mm, 부품 번호 186004937. </li><li> 예비 크로마 토그래피는 워터스 준비 100 SFC의 UV 감독 시스템에서 수행되었다. 열 : <ul><li> Viridis SFC 2 - Ethylpyridine OBD 컬럼, 5 μm의, 19 X 150mm, 부품 번호 186004945 </li><li> Viridis SFC 실리카 OBD 컬럼, 5 μm의, 19 X 150mm, 부품 번호 186004918 </li><li> Viridis SFC 2 - Ethylpyridine OBD 컬럼, 5 μm의, 19 X 100mm, 부품 번호 186004944 </li></ul></li><li> 다른 방법 매개 변수 : <ul><li> 칼럼 온도 : 40 ° C </li><li> Cosolvent : 메탄올 </li><li> 사출 볼륨, 유량, 그리고 그라디언트가 : 숫자에 보고된 </li></ul></li></ol> 3. 대표 결과 유량 예비 LC 분리에 사용되는 유량은 길이와 직경 열, 입자 크기 및 시스템 backpressure를 포함한 여러 요인에 의해 제한됩니다. 낮은 점도의 이산화탄소, SFC의 모바일 단계의 주요 구성 요소는 일반적으로 액체 크로마 토그래피에 사용되는보다 높은 흐름 속도의 사용이 가능합니다. 열 길이와 연관된 backpressure는 해상도를 높이기 위해 더 열을의 사용을 활성화도 낮습니다. 높은 유량은 분리를 완료하는 데 시간을 줄임으로써 처리량을 향상시킬 수 있습니다. 그림 1에 표시된 바와 같이, 색층 프로필은 열 볼륨 당 퍼센트의 변화로 표현되는 그라디언트의 기울기가 일정하게 유지 제공하는 다른 흐름 속도에서 동일합니다 ... 이것은 유량이 증가와 같은 비율의 실행 시간을 줄임으로써 수행됩니다. <img src="/files/ftp_upload/2604/2604fig1.jpg" alt="그림 1" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="그림 1"> 샘플 해산 및 솔벤트 로딩 혼합물에서 혼합물을 분리하면 샘플 주입하기 전에 완전히 용해되어야합니다. 메탄올, SFC 공동 용매 가장 일반적인, 일반 예비 분리를 위해 일반적으로 요구되는 높은 농도에서 모든 샘플을 solubilize하지 않습니다. 메탄올과 같은 용매의 대형 볼륨은 크로마 토그래피를 왜곡 수있는 강한 용매 효과에 의한 열의 대량 용량을 제한할 수 있습니다. 수정자 흐름 주입, 모든 워터스 준비 SFC 시스템의 표준 특허 구성이 용매 효과를 줄이기 위해 설계되었습니다. 디메틸 sulfoxide (DMSO)는 화합물의 다양한 유형을 solubilize을 정화 연구소에서 정기적으로 사용됩니다. 그림 2, 3 메탄올 주입하는 샘플에 비해 SFC의 DMSO 주사가 achiral 애플 리케이션을위한 높은 로딩과 더 나은 해상도로 발생할 수 방법을 보여줍니다. 참고 : chiral 어플 리케이션의 경우,주의가 DMSO가 심각하게 전통적인 코팅 chiral 정지 단계를 손상시킬 수로 간주되어야합니다. DMSO는 샘플 용해도에 필요한해야하는 경우, 고정 chiral 컬럼이 선택되어야합니다. <img src="/files/ftp_upload/2604/2604fig2.jpg" alt="그림 2" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="그림 2"> <img src="/files/ftp_upload/2604/2604fig3.jpg" alt="그림 3" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="그림 3"> 선택성 SFC에서는 여러 열이 일상적 혼합물의 구성 요소에 대한 최고의 해상도와 피크 모양을 제공하는 확인하기 위해 테스트합니다. 화합물 사이 좋은 해결책은 고순도와 대상 화합물 isolations로 연결됩니다. 아래 예제에서, 2 ethylpyridine 컬럼 샘플 혼합물의 다섯 화합물의 우수한 분리를 보여줍니다. 그것은 다른 선택도를 가지고 있기 때문에 실리카 칼럼에 대한 분석 같은 샘플 혼합물은 세 구성 요소 봉우리를 보여줍니다. 0.8 분 정도하고 약간 이상 flavone과 fenoprofen coelute에서 Coumarin과 이부 프로펜 coelute. Flavone과 이부 프로펜은 또한 실리카 칼럼에서 용리 순서를 변경합니다. 케토프로펜 두 컬럼의 다른 봉우리에서 온 잘 구분합니다. <img src="/files/ftp_upload/2604/2604fig4.jpg" alt="그림 4" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="그림 4"> 스케일링 원유 샘플 혼합물은 일반적으로 유기 용매의 낮은 비율에서 시작하고 비교적 짧은 시간에 유기 용매의 높은 비율로 끝나는 심사 그라디언트로 분석됩니다. 관심의 화합물 잘 해결하는 경우 경사도가 정화 직접 확장할 수 있습니다. 모든 화합물은 일 전에 elute 경우전자 그라디언트의 완료 완벽하게 해결되며, 그라디언트의 길이에 간단한 감소가 허용됩니다. 수정된 그라디언트와 함께 SFC에 사용되는 빠른 흐름 속도가 상당히 목표 화합물의 정화에 필요한 총 시간을 단축. 스케일링 분리는 열 화학 및 입자의 크기뿐만 아니라 적절하게 크기를 조절 주입 볼륨 및 그라디언트와 일치해야합니다. 워터스 예비 SFC 열이 워터스 분석 SFC 컬럼에 우수한 침대 안정성과 유사한 성능을 보장 OBD 기술과 함께 포장됩니다. OBD 예비 열이 밀접하게 상응 분석 컬럼을 일치 밀도 잠자리에 포장됩니다. 이 혁신적인 절차는 우수한 안정성, 재현성, 그리고 효율적으로 예비 열을 생산하고 있습니다. 로딩 연구는 샘플 질량이 칼럼에서 로드할 수있는 얼마나 많은 결정하는 작은 규모에서 수행됩니다. 목표는 해상도를 손상시키지 않고 부하를 극대화하는 것입니다. 향상된 최대 해상도는 격리된 화합물에 대한 높은 부하와 더 순도가 발생합니다. 높은 열 부하는 후속 실험에 대한 충분한 자료를 구하기에 필요한 실행의 수를 줄일 수 있습니다. 로딩 연구에서 크로마 토그래피는 그림 5에 그려져 있습니다. 보수 35 μL 주입 부피는 혼합물에있는 화합물의 모든과 이후에 큰 열의에 예비 실행에 대한 크기를 조정합니다 사이 좋은 해상도를 보여줍니다. 600 μL의 총 볼륨 19 X 150mm 예비 SFC 칼럼에 주입했다. 그림 6은 절연을 위해 사용되는 대규모 크로마 토그래피와 최대 하중에서 소규모 수정 그라데이션을 사용하여 크로마 토그래피를 비교합니다. 절연 및 유지 시간과 시스템 볼륨 및 사출 모드를 포함하여 요인 수있는 분석 및 예비 chromatograms 사이의 해상도로 purification.The 차이에 대해 조사하고 도구로 분석 크로마 토그래피를 사용하는 경우 선택도는 중요한 요소 동일합니다. 특히, 특허 수정자 스트림 분사 모드 *는 용매 효과를 최소화하기 때문에 처리량과 효율성을 향상, 모든 워터스 예비 SFC 시스템에 대한 고용 수 있습니다. * 미국 특허 # 6,576,125 <img src="/files/ftp_upload/2604/2604fig5.jpg" alt="그림 5" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="그림 5"> <img src="/files/ftp_upload/2604/2604fig6.jpg" alt="그림 6" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="그림 6">

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

<ul><li> 액체 크로마 토그래피의 기본 원리는 초임계 유체 크로마 토그래피 (SFC)에 적용할 수 있습니다. </li><li> 초임계 유체 크로마 토그래피는 증가 흐름 속도 빠르게 isolations을 만들고 처리량을 증가에서 실행할 수 있습니다. </li><li> 제한된 용해도와 샘플은 디메틸 sulfoxide의 용해와 SFC를 사용하여 정화하실 수 있습니다. 샘플 해산 DMSO를 사용하면 샘플 용해도와 관련된 불확실성을 감소하여 정화 작업이 쉬워집니다. </li><li> 메탄올에 녹아있는 동일한 샘플에 비해 DMSO에 녹아있는 샘플의 해상도와 로딩을 향상시킬 수 있습니다. 더 나은 샘플 해상도 높은 순도와 제품에 연결됩니다. 높은 로딩은 정화 과정의 효율성을 향상시킵니다. </li><li> 열 선택도는 혼합 구성 요소의 분리에 영향을 미칩니다. 빠른 그라디언트 서로 다른 컬럼을 심사하는 것은 예비 칼럼이 예제의 화합물을 분리에 사용할 수있는 대한 결정에 이르게. </li><li> 분석 및 예비 OBD 컬럼 사이 확장할 수있는 능력은 사출 볼륨, 경사 및 기울기 시간이 올바르게 크기 조정 및 화학 및 입자 크기가 일정하게 유지되어있는 크고 작은 비늘 모두에서 동일 분판에 연결됩니다. 열 확장성 따라서 높은 정화 처리 효율을 촉진, 최대 식별의 불확실성을 제거합니다. </li></ul>

<table><tbody><tr><td>분석소 SFC 시스템</td><td>Waters</td><td>자세한 정보는 www.waters.com</td><td>Analytical SFC System</td></tr><tr><td>SFC-UV Prep 100</td><td>Waters</td>에서 확인할 수 있습니다. 자세한 정보는 www.waters.com <td>Prep SFC System</td><td></td></tr><tr><td>Viridis&#8482에서 확인할 수 있습니다. SFC 2- 에틸 피리딘, 4.6 x 150 mm, 5 & m 컬럼</td><td>Waters</td><td>186004937</td><td>분석 SFC 크로마토그래피 컬럼</td></tr><tr><td>Viridis&#8482; SFC 2-에틸피리딘 OBD&#8482;, 19 x 150 mm, 5 &mu; m 컬럼</td><td>Waters</td><td>186004945</td><td>분취용 SFC 크로마토그래피 컬럼</td></tr><tr><td>Viridis&#8482; SFC 실리카 OBD&#8482;, 19 x 150mm, 5 & m 컬럼</td><td>Waters</td><td>186004918</td><td>분취용 SFC 크로마토그래피 컬럼</td></tr><tr><td>Viridis&#8482; SFC 2-에틸피리딘 OBD&#8482;, 19 x 100mm, 5 & m 컬럼</td><td>Waters</td><td>186004944</td><td>분취용 SFC 크로마토그래피 컬럼</td></tr></tbody></table>

초임계 유체 크로마 토그래피를 사용하여 정제를위한 기본 원칙 - 광고

Basic Principles for Purification Using Supercritical Fluid Chromatography - ADVERTISEMENT

초임계 유체 크로마 토그래피 (SFC)는 새로운 기술은 아니지만, 예비 SFC는 계측, 소프트웨어 및 화학의 발전과 함께 점점 더 인기를 끌고있다. SFC와 화합물을 분리를위한 기본 원칙은 대규모 예비 액체 크로마 토그래피에 대한 기본 규칙과 비슷합니다. 본 연구에서는, 우리는 유량, 용매 샘플 해산 및 혼합물에서 혼합물의 분리에 대한 열 선택도의 효과를 보여줍니다. 최적 침대 밀도 (OBD) 기술 1과 일치 화학 모여 열 큰 예비 분리에있는 작은 규모에서 간단하고 예측 가능한 확장성을 보장합니다.

초임계 유체 크로마 토그래피 (SFC)를 사용하여 혼합에서 화합물의 분리에 대한 기본 원칙은 예비 액체 크로마 토그래피의 기본과 비슷합니다.

Although supercritical fluid chromatography (SFC) is not a new technique, preparative SFC is becoming increasingly more popular with advances in ...

basic-principles-for-purification-using-supercritical-fluid

Without Section

극지 지질 추출물의 조성과 개별 glycerolipids의 지방산 조성은 간단하고 강력한 지질 프로파일 실험에서 결정됩니다. 이를 위해 glycerolipids는 얇은 층 크로마 토그래피에 의해 격리되고 그들의 아실 그룹의 transmethylation를 받게. 지방산 아실 methylesters는 기체 - 액체 크로마 토그래피에 의해 계량입니다.

씬 크로마 토그래피 (TLC)에 의해 Arabidopsis thaliana 폴라 Glycerolipid의 프로파일은 기체 - 액체 크로마 토그래피 (GLC)와 결합

방법은 hypoxia - 국소 빈혈 신생아의 생화 학적 마커를 측정하는 설명되어 있습니다. 접근 방식은 고압 액체 크로마 토그래피 (HPLC)와 가스 크로마 토그래피 질량 분석계 (GC / MS)를 사용합니다.

신생아 Hypoxia의 생화 학적 측정

단백질 정제의 과정에서 사용될 적합한 소수성 상호 작용 크로마 토그래피 (혼성 집적회로) 미디어를 식별하는 자동화된 방법을 설명하고있다. 방법은 자동화된 버퍼 블렌딩, 동적 시료 루프 주입, 순차 열 선택, 다중 파장 분석 및 분할 분획 eluate 컬렉션을 포함하여 중간 압력 액체 크로마 토그래피 시스템을 활용합니다.

단백질 정제에서 사용하기 위해 자동화된 소수성 상호 작용 크로마 토그래피 칼럼 선정

여기서 우리는 매우 적극적인 Hsp104, hexameric AAA + 단백질 효모, 단백질 disaggregation에 커플 ATP의 가수 분해로부터의 정화를 위해 프로토콜을 설명합니다. 이 제도는의 친화력 정화를위한 His6 - 태그 구축을...

Hsp104의 정화, 단백질 Disaggregase

이 프로토콜은 세포에서 유리 및 에스테르화된 생체 활성 지방산의 추출 및 분석을 보여줍니다. 지방산은 안정 동위원소 희석, 키랄 액체 크로마토그래피, 전자 포획, 대기 화학 이온화, 다중 반응 모니터링 질량 분석법(SID-LC-ECAPCI-MRM/MS)을 사용하여 정확하게 정량화됩니다.

타겟 안정 동위 원소 희석 액체 크로마 토그래피 - 질량 분광법 분석을위한 세포 지질 추출

열매의 휘발성 화합물 분석을위한 신속한 방법을 설명합니다. 샘플의 homogenate의 헤드 스페이스에 존재하는 휘발성 화합물은 급속하게 분리되어 표면 탄성파 (SAW) 센서와 결합 초고속 가스 크로마 토그래피 (GC)로 검색됩니다. 데이터 처리 및 분석을위한 절차도 논의하고 있습니다.

전자 코를 사용하여 과일 휘발성 분석

아가로 오스 겔 전기 영동을 이용한 DNA 조각의 분리를위한 기본적인 프로토콜이 설명되어 있습니다.

의 DNA 조각의 분리를위한 아가로 오스 젤 전기 영동

후각 신호는 곤충의 여러 가지 행동을 중재하고, 휘발성 화합물의 수백 수십 구성 종종 복합 혼합물이다. 곤충 antennal 엽의 멀티 채널 녹음과 가스 크로마토 그래피를 사용하여, 우리는 bioactive 화합물의 식별하는 방법을 설명합니다.

곤충 Antennal 엽에 가스 크로마토 그래피 - 멀티 유닛 레코딩 (GCMR)를 사용하여 강한 휘발성 물질의 식별

질량분석법(UPLC-MS)과 결합된 초고성능 액체 크로마토그래피에 의한 비표적 대사 산물 프로파일링은 대사를 조사하는 강력한 기술입니다.  이 문서에서는 시료 조직 및 준비, 데이터 수집, 데이터 분석, 품질 관리 및 대사 산물 식별을 포함하여 혈청의 비표적 대사 산물 프로파일링에 사용되는 일반적인 워크플로우를 간략하게 설명합니다.

울트라 성능 액체 크로마토 그래피 - 질량 분석법 (UPLC-MS)에 의해 혈청 대규모 비 타겟 Metabolomic 프로파일

타겟이 불분명 한 대사는 대사 프로파일의 스냅 샷을 생성하는 가설을 제공합니다. 이 프로토콜은 혈청 세포 또는 조직에서 대사 산물의 추출 및 분석을 보여줍니다. 대사 산물의 범위는 액체 - 액체 상 추출을 사용하여 조사하는, 마이크로 ultraperformance 액체 크로마토 그래피 / 차동 분석 소프트웨어에 결합 고해상도 질량 분석법 (UPLC-HRMS).

Ultraperformance 액체 크로마토 그래피 고해상도 질량 분석 (UPLC-HRMS)를 사용하여 생물 소스에서 타겟이 불분명 한 대사

배우세요 초임계 유체 크로마토그래피(SFC) 정제 기법을 통해 화합물 분리 원리와 OBD 기술 기반 컬럼을 활용한 분석에서 정제 규모로의 예측 가능한 확장성을 탐구하는 방법을 익히세요.

초임계 유체 크로마 토그래피를 사용하여 정제를위한 기본 원칙 - 광고

더 많은 동영상 탐색