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DOI: 10.3791/2607-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
내는, 둥지 및 비장은 쥐가 쉽게 실험실에서 수행하는 종 - 전형적인 활동입니다. 이 문서들은 쉽고 저렴하게 평가하는 방법을 설명합니다. 이러한 프로토콜은 마우스 스트레인, 뇌 병변 및 질환에 매우 민감합니다. 또한 그들은 생쥐에 대한 "환경 농축"를 구성하고, "3 RS"18 "다듬 는다"부분을 구현.
이 절차의 목적은 생쥐에서 종의 전형적인 행동을 특성화하는 것입니다. 먼저 튜브에 물질을 채우고 동물이 얼마나 많이 제거했는지 측정하여 굴을 파는 행동을 연구합니다. 둥지 둥지는 케이지에 배치되고 둥지의 완전성은 둥지 행동의 척도로 정량화됩니다.
식량 알갱이로 가득 찬 터널에 접근할 수 있는 상자에 쥐를 넣고 동물이 터널에서 얼마나 많이 회수하는지 측정하여 사재기 행동을 조사합니다. 이 일련의 테스트 결과는 쥐가 일상 생활 활동을 수행하는지 여부를 보여줍니다. 일반적으로 이 기술의 함의는 치매 치료법을 찾는 것으로 확장될 수 있는데, 이는 기능적으로 유사한 행동이 쥐와 인간 종 모두에서 손상되기 때문입니다.
쥐의 전형적인 행동은 인간의 일상 생활 활동에도 비유 될 수 있습니다. 그리고 알츠하이머병의 첫 번째 영향은 아침 식사를 준비하고, 신발 끈을 묶고, 식사를 계획하고, 쇼핑을 가는 것과 같은 일상 생활의 정상적인 활동을 억제하는 것입니다. 그리고 우리의 모델 알츠하이머 쥐를 통해 우리는 종의 전형적인 행동이 매우 억제되어 있음을 발견했습니다.
그래서 여기 우리는 직접적인 모델, 즉 알츠하이머병 환자가 집과 병원에서 볼 수 있는 일상 생활 활동과 종의 억제 사이의 거의 상동 모델을 가지고 있습니다. 마우스의 일반적인 행동 직경 68mm, 길이 20cm의 플라스틱 파이프를 차용합니다. 12mm MDF로 만든 플러그로 한쪽 끝을 밀봉합니다.
다음으로 굴을 파는 튜브의 열린 끝에서 1cm 떨어진 두 개의 구멍을 90도 각도로 뚫습니다. 각 구멍에 5cm 길이의 기계 나사를 삽입하고 제자리에 조입니다. 이제 튜브가 바닥에서 약 3cm 정도 올라와야 합니다.
한쪽 끝에는 굴에 200g의 음식 알갱이를 채우고 밤새 거주할 수 있도록 가정용 케이지에 넣습니다. 만약 생쥐가 무리를 지어 생활한다면, 사회적 촉진 효과로 인해 더 빠르고 철저하게 습관화될 것이다. 그러나 개별적으로 수용된 마우스에 대한 기본 테스트는 계속 실행해야 합니다.
그 후, 비식품 물질도 굴 행동을 측정하는 데 사용할 수 있습니다. 몇 가지 예로는 점토 공, 완두콩 대상 포진 및 모래가 있습니다. 동물이 익숙해진 후 오후 4:00경에 테스트 케이지에 완전한 굴을 파서 기본 테스트를 실행합니다.
48시간 간격으로 두 번의 기준선 테스트를 실행하는 것이 좋습니다. 두 시간 후. 굴에 남아 있는 물질의 무게를 내용물을 용기에 비워 측정합니다.
빌리지 않은 재료를 튜브에 다시 넣고 다음날 아침에 가정용 케이지에 다시 넣으십시오. 튜브를 제거하고 테스트를 위해 남아 있는 재료의 무게를 잰다. 마지막 기준선 측정 후 최소 48시간 후에 이 절차를 반복합니다.
C 57 블랙 6 마우스는 일반적으로 처음 2 시간 동안 약 70g, 하룻밤 사이에 거의 200g의 굴을 파냅니다. 해마 병변 마우스는 종종 5g 미만의 굴을 파냅니다. 파이온 병은 지질다당류와 마찬가지로 굴을 파는 것을 억제합니다.
투여 굴을 파는 것은 병든 뇌 균질산염을 주입한 후 10-12주에 파이온 병을 감지할 수 있는 반면, 임상 징후는 22주에만 나타납니다. 차용은 변형률 차이와 칼륨 이온 채널 소단위체의 녹아웃에 민감한 것으로 나타났습니다. 둥지 거동을 측정하려면 개별 케이지를 설치하고 바닥을 침구 재료로 0.5cm 덮습니다.
둥지라고 불리는 5cm 정사각형의 압축 면 안솜을 깊은 곳에 배치하고 각 케이지에 불을 붙입니다. 암흑기가 시작되기 약 1시간 전에 각 둥지 케이지에 마우스 한 마리를 넣고 결과를 평가합니다. 다음 날 아침.
찢어지지 않은 둥지에 불을 붙이는 양을 측정하고 5점 척도로 둥지를 평가합니다. 불을 붙인 둥지가 거의 손대지 않았을 때 1점이 주어지고, 불이 켜진 둥지의 90% 이상이 찢어진 거의 완벽한 둥지에 5점이 주어집니다. 수컷과 암컷 모두 둥지를 만드는 이유는 그들의 목적이 체온 조절뿐만 아니라 번식과 관련이 있기 때문입니다.
수컷과 암컷의 C 57 검은 여섯 마리 생쥐 둥지 점수는 같은 범위에 있습니다. 통제된 비교를 하지는 않았지만 대부분의 C 57 검은색 생쥐 6마리는 둥지 건설에서 4-5점을 받았습니다. 그러나 해마에 병변이 생기면 중앙값은 2라운드가 됩니다.
3점의 점수는 초과할 가능성이 없습니다. 사재기 행동을 측정하려면 물병을 삽입하고 사재기 튜브가 부착될 쪽에 구멍을 뚫어 홈 베이스 역할을 할 상자를 준비합니다. 직경 40mm의 튜브 주위에 45cm 길이의 철망을 굴려 사재기 튜브를 만듭니다.
육각 클립이나 와이어 꼬임으로 고정하십시오. 그런 다음 10cm 길이의 40mm 검은색 튜브에 밀어 넣습니다. 다음으로, 호딩 튜브를 이전에 준비한 상자에 연결하고 탈착식 나무 플러그로 근위 끝을 막습니다.
골판지 터널과 홈 케이지에서 더러워진 침구로 홈 박스를 준비합니다. 사재기 튜브에 대한 접근을 방지하십시오. 나중에 습관화할 수 있도록 이른 아침에 마우스를 상자에 넣고 사재기 튜브를 제거하고 말단 끝을 총 100g의 크고 작은 식품 펠릿의 혼합물로 채웁니다.
암흑기가 시작되기 직전. 다음 날 아침에 마우스가 사재기 튜브에 접근할 수 있도록 나무 플러그를 제거합니다. 다시 말하지만, 타이밍은 중요하지 않습니다.
홈 베이스 상자에 비축된 식품 알갱이를 모으고 무게를 잰다. 암컷 C 57 블랙 6 마리 마우스를 사용합니다. 비축량의 중간값은 약 50-70g입니다.
해마 병변은 축적을 강력하게 억제하는 반면, 전전두엽 피질 병변은 약한 효과만 있습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 대량에서 종의 일반적인 행동을 평가하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.
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