평가는 마우스에 둥지 건설, 그리고 비장을내는

본 절차의 목적은 생쥐의 전형적인 종 특이적 행동을 특성화하는 것입니다. 먼저, 튜브에 재료를 채우고 동물이 이를 얼마나 제거하는지 측정하여 굴 파기 행동을 연구합니다. 케이지에 둥지 재료를 배치하고 둥지의 완성도를 정량화하여 둥지 짓기 행동의 척도로 측정합니다.

사료 펠렛으로 가득 찬 터널이 있는 상자에 마우스를 넣고, 동물이 터널에서 얼마나 많은 양을 회수하는지 측정하여 저장 행동을 조사합니다. 일련의 테스트 결과는 마우스가 일상 생활 활동을 수행하는지 여부를 보여줍니다. 일반적으로, 마우스와 인간 종 모두에서 기능적으로 유사한 행동이 손상되기 때문에, 이 기술의 함의는 치매 치료제 탐색으로 확장될 수 있습니다.

마우스의 전형적인 행동은 인간의 일상생활 활동에 비견될 수 있습니다. 알츠하이머병의 초기 증상은 아침 식사 준비, 신발 끈 묶기, 식단 계획 세우기, 쇼핑 가기와 같은 정상적인 일상생활 활동의 수행 능력을 저하시키는 것입니다. 당사의 알츠하이머 모델 마우스에서는 종 특유의 행동들이 매우 심하게 억제됨을 확인할 수 있습니다.

여기 알츠하이머 환자가 가정과 클리닉에서 보이는 일상생활 동작과 마우스의 전형적인 행동 억제 사이의 유사한 직접 모델이 있습니다. 직경 68mm, 길이 20cm의 플라스틱 파이프로 터널을 제작하십시오. 한쪽 끝을 12mm MDF로 만든 플러그로 밀봉하십시오.

다음으로, 굴착 튜브의 개방단에서 1 cm 떨어진 지점에 90도 각도로 구멍 두 개를 뚫습니다. 각 구멍에 5 cm 길이의 기계 나사를 삽입하고 단단히 조입니다. 이제 튜브는 바닥에서 약 3 cm 높이로 들어 올려져야 합니다.

한쪽 끝에 먹이 펠릿 200 grams를 채우고, 이를 홈 케이지에 배치하여 하룻밤 동안 적응시킵니다. 마우스를 그룹으로 사육하는 경우, 사회적 촉진 효과로 인해 적응이 더 빠르고 철저하게 이루어집니다. 하지만 개별 사육된 마우스에 대해서도 기초 테스트를 수행해야 합니다.

이어서, 굴 파기 행동을 측정하기 위해 비식품 물질을 사용할 수도 있습니다. 점토 공, 완두콩 자갈, 모래 등이 그 예입니다. 동물이 환경에 적응한 후, 기저선 테스트를 수행하기 위해 오후 4시경에 테스트 케이지에 굴 파기 재료를 가득 채워 넣으십시오.

48시간 간격으로 두 번의 기저선 테스트를 수행하는 것이 권장됩니다. 2시간 후, 굴 안에 남은 물질의 내용을 풍량 측정 용기에 비워 그 무게를 측정하십시오.

빌리지 않은 재료를 튜브에 다시 넣고 다음 날 아침에 홈 케이지에 다시 배치하십시오. 튜브를 제거하고 테스트를 위해 남아 있는 재료의 무게를 측정하십시오. 마지막 기선 측정 후 최소 48시간이 지난 뒤에 이 절차를 반복하십시오.

C 57 black six 마우스는 보통 처음 2시간 동안 약 70 g을 파내며, 밤새 약 200 g을 파냅니다. 해마 손상 마우스는 흔히 5 g 미만을 파냅니다. Pion 질환은 리포폴리사카라이드와 마찬가지로 굴 파기 행동을 억제합니다.

굴파기 행동 측정은 질환이 유발된 뇌 균질액을 주입한 후 10~12주에 파킨슨병을 감지할 수 있는 반면, 임상 증상은 22주가 되어서야 나타납니다. 굴파기 행동은 균주 간의 차이와 칼륨 이온 채널 서브유닛의 녹아웃(knockout)에 민감한 것으로 밝혀졌습니다. 둥지 짓기 행동을 측정하려면 개별 케이지를 준비하고 바닥에 0.5 centimeters 두께의 베딩 재료를 깔아줍니다.

각 케이지에 '네스트'라고 불리는 5cm 정사각형의 압축 면 솜을 넣어 줍니다. 암기 시작 약 1시간 전에 각 네스팅 케이지에 마우스를 한 마리씩 넣고, 다음 날 아침에 결과를 평가합니다.

찢어지지 않은 둥지 재료의 무게를 측정하고 5점 척도로 둥지를 평가합니다. 둥지 재료가 거의 손대지 않은 상태일 때 1점을 부여하며, 둥지 재료의 90% 이상이 찢어진 거의 완벽한 둥지에는 5점을 부여합니다. 수컷과 암컷 모두 둥지를 만드는데, 이는 체온 조절뿐만 아니라 번식과도 관련이 있기 때문입니다.

C57BL/6 마우스 수컷과 암컷의 둥지 생성 점수는 동일한 범위에 있습니다. 단일 집단 내에서 대조 비교를 수행하지는 않았으나, 대부분의 C57BL/6 마우스는 둥지 생성 점수가 4~5점입니다. 그러나 해마에 병변이 생기면 중앙값 점수는 2점 정도로 낮아집니다.

3점을 초과할 가능성은 낮습니다. 저장 행동을 측정하기 위해, 물병을 넣고 저장 튜브가 부착될 측면에 구멍을 뚫어 홈 베이스로 사용할 상자를 준비하십시오. 40 mm 직경의 튜브 주위에 45 cm 길이의 철망을 말아서 저장 튜브를 만듭니다.

Allen 클립이나 와이어 트위스트로 고정하십시오. 그런 다음 40 millimeter 검은색 튜브 10 centimeter 길이에 밀어 넣어 맞춥니다. 다음으로, 준비된 호딩 튜브를 앞서 준비한 박스에 연결하고 근위단(proximal end)을 탈착 가능한 나무 마개로 막으십시오.

종이 보관 상자에 판지 터널과 홈 케이지에서 사용한 오염된 베딩을 준비합니다. 저장 튜브로의 접근이 차단되었는지 확인하십시오. 나중에 적응 과정을 거치도록 마우스를 이른 시간에 상자에 넣고, 저장 튜브를 제거한 뒤 원위단에 크고 작은 먹이 펠릿을 혼합하여 총 100 grams를 채웁니다.

암기(dark phase)가 시작되기 직전에, 나무 마개를 제거하여 다음 날 아침에 마우스가 저장 튜브(hoarding tube)에 접근할 수 있도록 합니다. 이 단계에서도 타이밍은 그리 중요하지 않습니다.

홈 베이스 박스에 저장된 먹이 펠릿을 수집하여 무게를 잽니다. 암컷 C 57 black six 마우스를 사용합니다. 저장된 양의 중앙값은 약 50에서 70 grams 정도가 될 것입니다.

해마 병변은 저장 행동을 강하게 억제하는 반면, 전전두엽 피질 병변은 약한 영향만을 미칩니다. 이 영상을 시청한 후에는 집단 내에서 종 특이적 행동을 평가하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다.