Name: 마우스에 모터 조정을 측정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-05-29T12:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 7 s
Description: 학습하세요 마우스의 운동 조정을 측정하는 방법을 가속 로타로드, 수평 막대, 정적 막대, 평행 막대 테스트를 통해. 이 프로토콜은 신경학적 질환에서 운동 장애를 식별하는 데 활용됩니다.

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옥스포드 대학의 오픈 액세스 자금을 제공하는 웰컴 트러스트 (Wellcome Trust). 로버트 집사는 Wellcome 트러스트 부여 WT084655MA에 의해 자금 옥스포드 OXION 그룹의 구성원입니다.

1. 기구 모든 테스트 들어, 부드러운 패드 표면은 떨어져 모든 쥐를 완화하는 장치의 바닥에 배치됩니다. NB는이 장치의 어떤 부분을 모호하게하지 위해 도면에 표시되지 않습니다. 쥐의 수백의 테스트 기간 동안, 정상 및 돌연변이 모두, 우리는 일반적으로 30-50센티미터 높은 등의 기기에서 떨어지는로 인한 부상을 관찰 적이 없다. 또한, 각 시험 마우스 사이에 장비를 청소하고 소독해야합니다. 1.1 로타로드 거기에 시장에이 장치의 여러 상용 버전이 있지만, 일부는 모터 불균형을 (오히려 지구력 이상) 감지하는 적절한 속도로 가속하는 데 실패와 같은 단점이 있습니다. 또 다른 일반적인 오류는 막대 떨어 뜨리거나 뛰어 경향이 쥐의 결과로, 기초 위에서 충분히 높지 않을 것입니다. 그림 1의 로타로드는 디자인되었다옥스퍼드 약학 대학의 부서의 기술 섹션으로 저자. 막대 30cm 기기의 기초 위에 지원되는 직경 3cm이다. 표면은 생쥐 (그림 2) 효율적으로 그립 할 수 있도록, 세로 축을 따라 평행 한 능선의 일련의 깔쭉 깔쭉하게된다. NB 능선의 깊이는 중요한 내용이고 마우스는 좋은 그립을 얻을 수없는 경우 테스트가 매우 어렵게 될 것이다 반면에, 그립이 너무 좋은 경우 마우스를 수동적으로 잡고 막대의 주위에 &quot;수레 바퀴&quot;것입니다 그것합니다. &quot;아마추어 로타로드 메이커&quot;의 경우는 쥐에 대한 적절한 크기의 마디 나무 dowelling 상업적으로 사용할 수 있다는 것을 알고하는 것이 유용 할 수 있습니다, 그것은 물론 사용하기 전에 좋은 방수 코팅제로 치료해야합니다. 시작 속도는 4 회전, 20 회전 / 분에 가속 속도로 조정됩니다. 최대 속도는 40 RPM입니다. 두 막대를 떠나는 마우스를 방지 플랜지. 그들은 직경 30 센티미터 (이 있습니다아마)은 20cm로 줄일 수 있습니다. 그들의 분리는 6cm (최대)로 설정되어 있지만 그들은로드에 돌아 경향이 경우 하위 어른 생쥐 작은 조정해야 할 수도 있습니다. 1.2 배 가로 막대 (그림 3) 바는 황동으로 만들어진, 38cm 길이, 양쪽 끝에 나무 지원 기둥에 의해 벤치 표면 위 49cm를 개최 하였다. 열은 무거운 나무베이스에 고정되어 있습니다. 세 개의 막대 직경 사용할 수 : 2, 4, 6mm. 2mm 바는 우리가 사용하는 표준입니다, 그러나 많은 마우스는 이것에 최대 점수에 도달합니다. 따라서 큰 직경의 막대는 마우스이 너무 잘 잡을 수 없기 때문에, 테스트를 수정하는 시도에 포함되었습니다. 1.3 정적로드 다양한 두께 (35 ROD (1), 28, 22, 15, 9 (막대 5) mm 직경)의 다섯 나무 은못 또는 막대는 각 60cm가 긴 막대가 수평으로 돌출되도록 실험실 선반 G-클램프에 의해 고정되어 에 공간 (그림 4). 끝벤치 근처 막대의 마크에게 결승선을 나타 내기 위해 끝에서 10cm가 있습니다. 바닥에서 막대의 높이는 60 cm입니다. 짧고 덜 자세한 검사가 필요한 경우에만 최대, 최소 및 중간 막대를 사용하십시오. 반 Dellen 등. 14 생쥐에서 헌팅턴의 질병의 진행을 평가하는 단 하나의 막대를 사용했습니다. 1.4 병렬 바 직경 두 개의 평행 한 철근 길이 1 m와 4mm는 자신의 끝 (그림 5)에서 나무 지원 기둥에 의해 떨어져 30mm를 (자신 센터)에 고정되어 있습니다. 막대는 바닥에서 60cm입니다. 2. 순서 모든 테스트를 위해, 그들은 완전히 깨어 있도록하기 위해, 테스트를하기 전에 실험 실내 50-20 분에 마우스를 가져옵니다. 일반적으로 근육의 강도와 흥분의 정상 수준으로 복귀 복구 할 수 있도록하기 위해, 각각의 모터 테스트 후 홈 케이지에 반환하여 마우스를 놓습니다. &lt;/ P&gt; 2.1 로타로드 4 회전, 가속 속도 20 RPM / min의 시작 속도 로타로드를 설정합니다. 꼬리 마우스를 잡고, 그리고 회전 막대에 배치, 그것은 똑바로 숙박 앞으로 걸어 가지도록 회전 방향에서 멀리 직면. 이 마우스가 수평 아래 45 °의 각도로 막대쪽으로 가져 가면 할 수있는 가장 쉬운 방법입니다, 위에서 마우스를 낮추기 위해 시도하는 것은 그것의 뒷 다리를 확산하고 플랜지의 가장자리를 잡고 발생합니다. 거의 막대를 터치하면 빨리 쉽게 막대를 잡을 수 있도록 단지 앞으로 상사와 막대 위의 마우스를 놓습니다. (아마 더 쉽고 안정적​​) 기술은 얇은 (10 ~ 15 ㎜) 맞춤을 사용하는 것입니다. 한 손으로 마우스를 잡고, 긴 축에 평행 다보에 대한립니다. 다보는 그것을이 해제되면 로타로드 그립에 더 많은 시간을 제공하기 위해 30 °에 대한 마우스의 머리를 아래쪽으로 기울어있다. 일 사이에 마우스와 맞춤을 낮출E는 로타로드의 플랜지, 한 번 회전 막대에 막대를 잡고 앞으로 걸어 나갈 것이다, 이는 마우스에서 멀리 노크를 아래로 당깁니다. 10에서 초 막대에 마우스를 배치 한 후 (마우스가 앞으로 직면만큼 : 그렇지 않으면, 그것은 가속을 시작하기 전에 앞으로 얼굴을하지 때까지 기다려) 가속을 시작하고, 마우스가 탈락되는 속도를 확인합니다. 그것은 10 초 전에 떨어지면, 가을의 시간을 기록하고 10 초 지점 이후 처음으로 하락 속도를 기록, 총 세 번, 다시 시도하십시오. 그러나 기록해서는 안 실험자에 의해 가난한 게재로 인한 5 초 전에 떨어진다. 가을에 평균 속도 자료이며, 오히려 최대 속도를 사용하는 것보다,이 마우스는 성능을 지원할 것이라고 가정 실패한 실행하는 동안 수신 여분의 연습 수정합니다. 따라서 10 초 전에 떨어지는 마우스를 한 번 누른 다음 12 RPM까지 두 번째 점수 (4 +12) / 2 = 8 회전에 유지됩니다. 두 번 누른 다음 떨어지는 마우스10 RPM 점수 (4 +4 +10) / 3 = 6 회전을 위해에 머물고. 마우스가 10 그립에 실패하면 초 세 번 그것을 4 회전의 점수를 할당합니다. 한 가지 문제는 쥐들이 수동적으로 재주 라운드, 대부분의 결국 떨어져 있지만, 그래서 때로는 앞으로 걸어 중지하고 단단히 대신 막대를 잡을 것입니다. 따라서 최초의 역전이 발생하는 경우에도 속도를 유의하는 것이 유용 할 수 있습니다. 가능한 해결책은 큰 직경 이하의 뚜렷한 능선과 막대를 사용하는 수 있습니다. 2.2 수평 막대 마우스가 좁은 2mm 모음을 파악하는 데 가장 쉬운 방법을 발견하면,이 하나를 먼저 테스트하는 것이 좋습니다. 꼬리 마우스를 잡고, 장치의 앞 벤치에 배치, 20cm (이것은이 막대에 수직 정렬)에 대해 빠르게 뒤로 밀어, 급속 제기하고 함께 중앙 지점에서 수평 막대를 파악하자 그 forepaws 만, 동시에 stopclock을 시작, 꼬리를 놓습니다. 이 C효율적으로 달성하기 어려운, 꼬리가 갑자기 해제되면 일부 마우스 그립보다, 그들은 여전히​​ 지원 느끼면 그립에 실패 할 수 있습니다. 하나의 앞발이 열을 만지는 때까지 마우스를 막대의 끝 열 중 하나, 또는 시간에 도달하기 전에 기준 포인트는 바에서 가을이다. 최대 시험 시간 (마감 시간) 30 초입니다. 마우스가 제대로 처음 바를 파악하는 데 실패하고이 실험의 기술에 기인하는 것으로 나타나는 경우, 오히려 마우스보다, 다시 시도 (다른 하나 또는 두 개의 마우스를 테스트하는 동안 짧은 휴식 후)이 가을에 기록하지 않습니다. 마우스가 5 초 전에 하락이 분명히 실험에 의한 불량 게재로 인한없는 경우&gt; 5 초 점수를 얻기 위해 시도에서 세 번까지 반복합니다. &gt; 5 초 두 번째 시도에서 세 번째 재판을하지 않으면. 데이텀으로 최고 점수를보십시오. 만 반복 1&gt; 5 초 점수 자체를 지원하기 위해 실패하는 마우스. 트리플 바 버전을 사용하는 경우 첫 번째 2mm 줄에 마우스 점수 5 경우, 다른 하나 또는 두 개의 마우스를 테스트하는 동안, 그것은 그 짧은 휴식 기간 후, 두꺼운 막대 테스트 할 수 있습니다. 4, 6 개 mm 막대에 대한 채점 시스템은 2mm 줄과 동일하며, 최종 점수는 누적 합계입니다. 따라서 마우스가 2mm 줄에 점수 5 만 5 +3 = 8 13 초 점수를 후 4mm 바에서 떨어진다. 2.2.1 수평 막대를 채점 : 처음 두 간격은 마우스가 처음 그들이 떨어질 가능성이있는 작업을 마스터 한 번으로 마지막 두 미만 : 1-5 초 = 1 사이에 떨어지는 6-10 초 사이에 떨어지는 = 2 11-20 초 사이에 떨어지는 = 3 21-30 초 사이에 떨어지는 = 4 30 후 떨어지는 초 = 5 = 5 떨어지지 않고 바 지원에 하나 앞발을 배치 4, 6mm 막대의 선택적 사용과 같은 NB는 우리가 아직 광범위한없는 우리의 프로토콜에 새로운 추가그들과 함께 경험한다. 2.3 정적로드 넓은로드 (끝에서 코 끝 하나 머리의 길이가 이상적입니다)의 끝에서 마우스를 놓습니다. 오리엔테이션 시간 (선반으로 시작 위치에서 180 °를 동쪽을 향하게하는 데 걸리는 시간)와 소요 시간 (선반 끝 (막대 선반 끝에서 10 센티미터 마크 이상 코)로 여행하는 데 걸리는 시간 두 조치를 취할 것. 방향이 수직 체류 마우스에 의존, 그것은 거꾸로 돌고 막대 아래의 미약 한 경우, 임의로 (통계 목적) 120 초 최대 오리엔테이션 점수를 할당합니다. 그것은 작은 막대에 테스트하지 않습니다, 또한 전송 시간은 분명히 더 나은 거꾸로 매달려하는 동안 천이 하나 이상의 조정됩니다 수직 천이 마우스와 같은 최대 값이됩니다. , 오리엔테이션 후, 마우스로 떨어지거나 그것의에서 테스트하지 않는 최대 시험 시간 (임의로 120 초에서 설정)에 도달하면1MW보다 작은 PV 시스템로드. 통계 목적으로 떨어지는 할당 생쥐는 그들이 다시 좁은 막대에서 떨어질 거라고 생각 될 때, 특정 막대에 대한 이후의 사람에 대한 120이 할당됩니다. 마우스를 거꾸로 켜지면, 또한이 이벤트를 주목, 성공적인 대중 교통뿐만 아니라 방향을 위해 그것은 막대에 수직으로 유지해야합니다. 그렇지 않으면 최고 점수를 할당합니다. 이 막대 나 폭포의 끝에 도달 한 후 마우스를 제거하십시오. 하나의 막대에 테스트 한 후 다른 마우스를 테스트하는 동안 휴식을 홈 케이지에 마우스를 반환합니다. 그 다음 작은 크기의 막대에 배치하고 다시 같은 방법으로 테스트합니다. 마우스가 5 초 이상을 위해에 빠진 후로드를 떨어질 경우 테스트를 중지합니다. 그것은 초 교체하고 세 가지 시험의 최대 또 다른 시도를 (5 초 내에 떨어지는 실험에 의한 결함이 게재로 인해 수 등), 허용하고, 최상의 결과를 사용하여보다 5 떨어졌다합니다. 2.4 병렬 바 t에서 마우스를 놓습니다바의 그것의 종축에 수직과 두 개의 막대 그는 중앙, 두 앞발 하나의 줄에 있어야합니다, 다른 줄에 두 뒷다리 발. 점수는 정적로드에 대한 유사합니다. 그 이후에 최종 지원 중 하나에 도달 할 때까지 마우스가 90 시작 위치 °, 시간을 방향을 설정 할 때까지 걸리는 시간이 두 조치를 취할 것. 마우스를 거꾸로 켜지면, 또한이 이벤트를 기록합니다. 테스트 방향과 교통이 거꾸로 돌리지 않고 달성해야 정적로드는, 그렇지 않으면 최대 시간이 할당됩니다. 합리적으로 건강한 마우스보다 5 초에 빠지게하는 것은 드문, 이런 일이 일어날 않는 경우 아마도 가난한두기 때문이다. 따라서 결과를 버리고 마우스를 다시 테스트합니다.

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동작은 동작에 의해 매니페스트를 만들고, 행동은 신체의 조정 등의 모터 기술을 필요로합니다. 동물 행동의 역사에서 최초의 실험 중 하나는 콜린 스튜어트, 미국 11 클라크 대학에서 박사 학생에 의해 수행되었다. 그는 드럼에 넣어하여 쥐의 활동을 측정하고 설정 횟수를 계산. 이러한 초기 장치는 아마 로타로드에서 동물의 외부에 산책하는 반면 쥐, 드럼 내부의 쥐에 의해 주도 된의 움직임이었다 스튜어트 장치에 불구하고, 바퀴와 현재 사용 로타로드 테스트를 실행의 전신이었다 하는 회전 드럼 또는 막대 모터 구동됩니다. 던햄와 미야 (1957) 7에서 사용하는 원래의 막대 집합 속도를했지만, 요즘 가속 버전 (존스와 로버트 1968) 9 이용하실 수 있습니다. 설정 한 속도 로타로드의 단점은 가난한 조정과 일부 동물에서 떨어질 것입니다시작에 머물 않는 사람들을위한 반면에, 테스트는 곧보다는 자체 조정보다 지구력 측정을 시작합니다. 파라 메트릭 해석을 배제하기 위해 같은 데이터 포인트의 결과 바이 모달 분포는 충분히 이상 할 수 있습니다. 가속 로타로드를 사용하는 경우, 그것은 같은 10 초에 머물고으로 설정 기준이 달성 된 경우에만 가속화 경우 특히 데이터 분포는 가우스가 될 가능성이 높습니다. 이 모터의 피로 성능에 중요한 역할을하지 않도록 가속 속도는 조정될 수있다; 마우스 현저히 로타로드에 단지 2-3 분 시간이 지나면 피로 될 가능성이 있습니다. &quot;문자열 테스트&quot;1 &quot;, 옷걸이 테스트&quot;또는 가로 막대는 앞발 힘과 조화를 측정합니다. 인용 두 별명은 개발을 참조하십시오, 원래 문자열이 사용되었지만, 저자는 성능이 종종 옷걸이, 따라서 미래의 실험자은 금속 막대를 사용하여, 문자열이 얼마나 긴장에 아주 많이 의존 언급. 우리는 막대를 꽉 쥐는 쥐의 능력의 직경에 반비례 것을 발견하고, 표준으로 2mm 막대를 사용했습니다. 무게 테스트 ( &quot;마우스의 강도를 측정&quot;조브 프로토콜 참조) 주전자 모피 / 스케일 콜렉터의 매우 미세한 와이어가 강한 동물들이 자신의 체중보다 더 들어 올릴 수있는 그런 좋은 그립을 확보 할 수 있습니다. 시험의 감도를 향상 그러나, 큰 직경의 수평 막대를 사용하면 장점이 될 수 있으며, 단 2 밀리미터 바를 가장 일반적인 C57BL / 6 마​​우스는 천장의 성능에 도달합니다. 따라서 우리는 최근 3 바 장치를 채택, 그들은 지원하는 컬럼의 꼭대기를 잘라 노치에 맞로 막대를 쉽게 교환 할 수 있습니다. 그들은 단지 지원이 약간 (그림 3 참조) (장궁과 문자열 등) 함께 그려 노치에 맞로 바는 긴장 (특히 중요 2mm 바 딱딱한 만들려면)에서 개최됩니다. 정적로드 또는 빔이 자주 사용되었다조정을 측정 할 수 있지만 추가 동기는 항상로드를 통과하는 동물을 설득하기 위해 사용되었다. 그들은 같은 집에 케이지, 밝은 빛에서 피난처, 또는 음식 (그들은 배고픈 만들어진 경우) 등 원하는 목표에 도달 할 수있는 수평 빔을 협상. 그러나 시험의 유형을 조사하는 과정에서, 나는 쥐가 자발적으로 캔틸레버로드의 &quot;열기&quot;끝을 둘 때 돌아서, 그리고 그들은 지원 끝에 도달 할 때까지 그것을 통과 할 것을 발견했습니다. 이 기술은 지원 끝에 도달하려고하는 높은 막대의 끝 부분에 배치되는 것 마우스의 타고난 반응으로 훈련 (이전에 언급 한 테스트 변종 필요)에 대한 필요성을 제거합니다. 이, 물론, 동기 변화가 성능에 영향을 미칠 수있는 문제를 제거하지 않는 한 항상이 유형의 프로 시저와 가능성이다. 골판지 터널은 현재 많은 가정 케이지 환경 농축에 사용되지만 그 disad현재 상황에서 유리한 동물이 불가피 로타로드에 균형을하는 데 필요한 기술을 흉내 낸, 그들의 긴 축을 흔들 수있는 실린더 밸런싱 실시 될 것입니다. 따라서 가정 케이지 농축은 잠재적 행동 표현형을 마스크 할 수 있습니다, 예 농축가 14만큼 헌팅턴의 질병 표현형의 개량이다. 또한 동물들은 높은 정적 빔을 따라 걷는 경우와 같이,이 터널의 긴 축을 따라 걷는다. 그러므로 나는 높은 평행봉의 쌍을 지어 한 바 있고 다른 hindpaws, 그들은 이전에 발생하지 못했을 상황에 forepaws와 중간에 마우스를 두었다. 쥐 시험을 통과 똑바로 유지하면서 병렬 막대의 끝 지원에 도달했다. 다소 유사한 장치는 스크래피에 의한 모터 장애 13의 발전을 평가하기 위해 마우스 케이지에 배치 평행봉의 연속이었다. 우리는 지금 수백을 테스트 한옥스포드에서 모터 작동을 위해 마우스. 이러한 약리 대리인, 또는 인간에서 조직의 수동 전송 (플라즈마) 등 다양한 치료를 받았지만, 대부분의 유전자 동물을 수정했다. 어떤 동물은 더 많은 조정 작업, 기타 그 반대의 경우도 마찬가지보다 강도 저하되었다. 어떤 마우스보다 같은 정적로드 및 병렬 바, 다른 반대 정적 기판에보다 로타로드에 손상되었습니다. 다른 치료와 돌연변이 차동 생쥐의 운동 기능에 영향을 미칠 수있는 방법을 특성화하는 방법에 대해 설명 본 기사와 &quot;생쥐의 강도를 측정&quot;첨부 조브 프로토콜) 그래서. 외에도 로타로드에서 여기에 설명 된 장치는 간단 저렴하고 운동 능력을 테스트하는 전문되지 실험실에 특히 적합합니다. 미세 규모의 보행 분석, 좁은 통로 시스템은 잉크 목욕을 한 후 종이 걸어 마우스를 설득 같은 이전 방법보다 훨씬 더 복잡한 시스템이지만, expensiv입니다장치의 전자 조각. 이러한 테스트의 모든 근육의 분명 최소한의 정도가 마우스의 사지를 사용하여 간단하게 필요한 있지만, 오히려 강도보다 조정을 측정하도록 설계되어 있습니다. 강도 평가의 경우, 반전 화면 프로 10보다 등급 측정이 필요한 경우, 가중치 테스트 또는 자동화 (조브 프로토콜 &quot;생쥐의 측정 강도&quot;의 설명 참조) 해당하는 바 풀, 더 적합합니다, 또는. 예외는 성공적인 성능을 위해 힘과 조화를 모두 필요로하는 수평 막대 테스트입니다.

마우스에 모터 조정을 측정

Measuring Motor Coordination in Mice

마우스는 점점 더 크게 선택 행동의 동물로 쥐를 교체, 행동 신경 과학에서 사용되고있다. 같은 감성이나인지 등의 행동 양상을 평가하기 전에, 그러나, 그것은 예를 들어, 돌연변이 또는 lesioned 마우스 모터 기능과 같은 평가를 할 수 있는지 여부를 확인하는 것이 중요합니다. 이러한 모리스 물 미로 같은 미로 작업을 필요로하는 강도와 조정,에 성능은 물론 오히려인지, 장애보다, 모터에 의해 마우스에서 손상 될 수 있으므로 선택적으로 전자에서 후자를 해부하는 것이 필수적입니다. NMDA 길항제 물 미로의 성능이 악영향을 위해 표시되었습니다에 의해 예를 들어, 감각 손상이 발생했습니다. 모터 조정은 전통적으로 동물이 그것의 긴 축에 대한 회전 수평 막대에 배치되는, 로타로드 검사로 마우스 및 쥐에서 평가되었으며, 동물 똑바로 유지하고 떨어지지을 전달 걸어해야합니다.두 세트 속도와 로타로드의 가속 버전을 사용할 수 있습니다. 다른 세 개의 시험은 고정 장치에이 글 (가로 막대, 정적로드 및 병렬 바) 모든 측정의 조정을 설명했다. 수평 막대는 특히 바로 앞 발에 쥐가 처음 그립 막대로 앞발의 적절한 성능을위한 힘이 필요합니다. 성인 쥐와 같은 정적로드 및 병렬 바 (개인 관찰)와 같은 시험에서 잘 수행하지 않습니다, 그들은 덜 쥐보다 조정이 나타납니다. 난 단지 그러나 수컷 쥐를 테스트해야하고, 남성의 마우스는 일반적으로 덜 잘 조율 여성보다 같습니다. , 라틴어 이름, 뮤스 musculus, 전적으로 적절한 것 쥐보다 무게 비율 : 마우스는 높은 강도를 가지고있는 것 같습니다. 로타로드는 발 고장 시험 12 패션쇼 (Noldus) 15 장치의 변화는 일반적으로 쥐 모터 조정을 평가하는 데 사용됩니다.

예상 결과 정적로드는 원래 함께 또는 자신의 홈 케이지 14 환경 농축하지 않고, 돌연변이 생쥐에서 헌팅턴의 질병의 진행 상황을 모니터링하는 데 사용되었다. 농축 프로그램은 극적으로, 신경 손상의 일반적인 기호를 걸쇠로 걸는 뒷발의 발병 지연 평행 한 막대에 모터 기능 장애의 발병을 지연. 스크래피에 감염된 생쥐는 적어도 주 19 8 (이전 테스트가 수행되지 않았습니다)에서 18 주에서 로타로드 테스트에서 16 주 후 주입의 수평 막대 성능 저하, 정적 봉을 보였다. KATP 채널의 subunit Kir6.2 KO 마우스는 고정 막대와 가로 막대에 장애가 있지만 로타로드 4 하였다. 해마 병변은 운동 능력 5의 측정에 영향을 미치지 않습니다,하지만 129S2/Sv 마우스는 C57BL / 로타로드 및 정적로드 3 6 변형에 상대적으로 손상되었다. C57BL/10 마우스는 C57BL / 6 쥐 6보다 더 모터의 성능을 가지고,하지만하지 129S2/Sv 마우스와 같은 정도. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/2609/2609fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. 로타로드. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/2609/2609fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 2"> 그림 2. 로타로드의 마디로드의 세부 사항. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/2609/2609fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 3"> 그림 3. 트리플 수평 막대의 홈에서 개최 된 바는 기본 2mm 하나입니다;. 4 6mm 바있다 (이해를 돕기위한 목적으로 만) 그 아래에 압정으로 고정. 실제로, 한 번에 하나의 줄은 노치 지원으로 홈을 판다. <img alt='"그림' files> 그림 4. 정적로드를 통과하는 마우스. <img alt="그림 5" src="/files/ftp_upload/2609/2609fig5.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 5"> 그림 5. 병렬 막대에 마우스. 패딩은 데모 용으로 만 생략되었습니다.

프로토콜은 두도 설립 모터 조정 작업 가속화 로타로드 및 수평 막대, 최근 옥스퍼드에서 개발 된 두 개의 테스트, 정적로드 및 병렬 막대를 위해 제공됩니다. 이 테스트는 모터 잠재적으로 자신의 권리에 대한 관심의 손상뿐만 아니라, 행동의 다른 지역의 시험에서 가능한 변수 인를 검색 할 수 있습니다.

행동 신경과학 분야에서 마우스의 사용이 점차 증가하고 있으며, 이는 상당 부분 랫(rat)을 대체하여 행동학자들이 선호하는 동물 모델이 되었음을 의미합니다. 행동의 특정 양상이 ...

이 실험 과정의 전반적인 목표는 마우스의 운동 협응력을 측정하는 것입니다. 이는 먼저 가속 회전봉(accelerating rotor rod)에서 테스트를 수행함으로써 달성됩니다. 그다음으로, 밸런싱 바(onal bar)에서 운동 협응력을 테스트합니다.동물을 정지봉(static rods)에서 테스트할 수도 있습니다. 마지막으로, 평행봉에서의 수행 능력을 측정할 수 있습니다. 궁극적으로, 이를 통해 마우스의 운동 조정 능력에 장애가 있는지 여부를 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.일반적으로 이 기술이 처음인 실험자는 모든 후속 테스트 과정에서 마우스를 장치 위에 정확하게 배치하는 것에 어려움을 겪을 수 있습니다. 마우스가 완전히 깨어 있도록 테스트 시작 5~20분 전에 실험실로 이동시키십시오. 여기에 사용된 로타로드(rotor rod) 장치는 옥스퍼드 대학교에서 제작되었습니다.봉의 직경은 3cm이며 표면에는 마우스가 더 효과적으로 잡을 수 있도록 일련의 평행한 홈이 파여 있습니다. 양측의 플랜지는 마우스가 봉에서 벗어나는 것을 방지합니다. 플랜지의 직경은 30cm이며 서로 6cm 떨어져 있습니다.로드는 장치의 바닥면에서 30 centimeters 떨어진 곳에 고정합니다. 실험을 시작하기 전, 낙하 시 충격을 완화하기 위해 바닥에 부드러운 패드 표면을 배치합니다. 로터 로드의 시작 속도를 분당 4회 회전으로, 가속도를 분당 20회 회전으로 설정하여 준비합니다.먼저, 마우스의 꼬리를 잡고 수평선 아래 45도 각도로 막대 쪽으로 들어 올립니다. 동물이 막대에 거의 닿았을 때 빠르게 놓아줍니다. 또는, 마우스를 다우엘(dowel) 위에 내린 후 다우엘을 사용하여 동물을 막대로 옮길 수 있습니다.마우스를 로드 위에 올린 후 10초 뒤에 가속을 시작하고, 마우스가 떨어지는 속도를 기록하십시오. 만약 마우스가 5초 이전에 떨어졌고 이것이 실험자의 부주의한 배치 때문인 것으로 보인다면, 해당 결과는 기록하지 않아야 하며 마우스가 10초 이전에 떨어질 경우 시도를 다시 시작해야 합니다. 시간을 기록하고 동물에게 두 번 더 시도할 기회를 주십시오.10초 이후에도 버티는 동물의 경우, 동물이 떨어지는 속도를 기록하십시오. 때때로 생쥐가 걷기를 멈추고 결과적으로 봉 주변에서 몇 차례 요동치다가 결국 떨어질 수 있습니다. 이러한 현상의 속도를 기록하는 것이 유용합니다.성능은 각 시도 간의 평균 속도로 계산합니다. 예를 들어, 마우스가 한 번은 10초 이전에 떨어졌고, 그다음에는 분당 12회 회전할 때까지 버틴 경우, 두 번째 점수는 (4 + 12) / 2로 계산하여 분당 8회 회전이 됩니다.수평 바 측정법은 뒷다리의 근력과 협응력을 측정하며, 일반적으로 직경 2mm의 바가 가장 많이 사용됩니다. 직경이 더 큰 바를 사용하면 더욱 세분화된 수행 점수를 얻을 수 있습니다. 길이가 38cm인 황동 바는 나무 지지대를 통해 벤치 표면으로부터 49cm 높이에 고정됩니다.바를 약간 오므려진 지지대의 홈에 끼워 장력을 유지합니다. 2mm 바로 테스트를 시작하십시오. 생쥐의 꼬리를 잡고 장치 앞 벤치 위에 놓습니다.빠르게 밀어줍니다. 몸체가 바와 수직이 되도록 뒤쪽으로 약 20 centimeters 빠르게 이동시켜 정렬합니다. 동물을 들어 올려 네 개의 구멍만으로 중앙의 수평 바를 잡게 합니다.스톱워치를 동시에 작동시키며 꼬리를 놓습니다. 마우스가 바를 잡지 못하고 그것이 실험자의 배치 때문이라고 판단되는 경우, 낙하 기록을 제외하고 잠시 휴식을 취하게 한 뒤 동물을 재테스트하십시오.마우스가 5초 이전에 떨어지고, 이것이 실험자의 배치 실수로 인한 것이 아님이 분명한 경우, 5초 이상의 점수를 얻기 위해 최대 3회까지 반복합니다. 마우스가 떨어질 때까지의 시간 또는 마우스가 기둥에 네 번 잘못 접촉할 때까지의 시간을 기록하며, 최대 테스트 시간은 30초로 하고 가장 좋은 점수를 가로바 점수로 기록합니다. 마우스가 1초에서 5초 사이에 떨어지면 1점으로, 6초에서 10초 사이에 떨어지면 2점으로 기록합니다.11초에서 20초 사이에는 2점을 부여합니다. 21초에서 30초 사이에는 3점을 부여합니다. 30초 이후에 떨어지거나 30초까지 바에 매달려 있는 경우에는 4점을 부여합니다.5점을 부여하며, 마우스가 끝부분에 닿았을 때도 5점을 부여합니다. 테스트 중 어느 때라도 네 개의 포트로 지지하십시오. 2mm 바에서 5점을 획득하면, 짧은 휴식 후 더 두꺼운 바에서 동물을 테스트할 수 있습니다.4mm 및 6mm 바에 대한 채점 방식은 2mm 바와 동일하며, 최종 점수는 누적 합계로 계산합니다. 따라서 2mm 바에서 5점을 얻고 4mm 바에서 13초 후에 떨어지는 마우스의 경우, 5점에 3점을 더해 총 8점이 됩니다.이 운동 조정 테스트에서는 지름이 각각 35, 28, 22, 15, 9 mm이고 길이가 60 cm인 다양한 두께의 나무 봉을 G 클램프로 실험실 선반에 고정하며, 선반의 높이는 바닥에서 60 cm가 되도록 합니다. 벤치와 가까운 끝부분에서 10 cm 지점에 결승선을 나타내는 표시를 합니다. 테스트를 시작하려면 마우스를 가장 굵은 봉의 반대쪽 끝에 선반을 등지고 놓은 뒤, 동물이 선반 쪽으로 방향을 틀어 이동하는 데 걸리는 시간과 총 이동 시간을 기록합니다.오리엔테이션 과정 중 마우스가 거꾸로 매달려 봉 아래에 매달려 있는 경우, 임의로 최대 점수인 120초를 부여합니다. 해당 동물은 다른 봉에서는 테스트하지 않으며, 이동 값 또한 최대치로 부여합니다. 마우스가 오리엔테이션 후 떨어지거나 최대 테스트 시간인 120초에 도달한 경우, 더 좁은 봉에서는 테스트하지 않습니다.마우스가 방향을 잡은 후 막대를 가로지르는 동안 몸을 뒤집은 경우에도 최고 점수를 부여하며, 이 경우 마우스를 홈 케이지로 돌려보내 휴식을 취하게 한 후 테스트를 진행하십시오. 그다음으로 작은 막대를 준비합니다. 앞서 설명한 방식대로 동물을 더 작은 막대 위에 올리십시오.마우스가 5초 이전에 떨어지면, 마우스를 다시 올려놓고 최대 2회 더 시도합니다. 로드를 반전시키는 데 걸리는 시간 또는 마우스가 떨어질 때까지의 시간을 기록합니다. 평행봉을 설치하려면 길이 1m, 직경 4mm인 바 2개를 나무 지지대 위에 30mm 간격으로 고정합니다.바(bar)를 바닥에서 60 centimeters 높이로 설치합니다. 마우스의 장축이 바와 수직이 되도록 두 바의 중앙에 놓습니다. 두 앞발은 한쪽 바에, 두 뒷발은 다른 쪽 바에 놓여 있어야 합니다.점수 산정 방식은 고정 막대 실험과 유사합니다. 마우스가 시작 위치에서 90도 방향으로 몸을 틀 때까지의 시간과 끝부분 지지대 중 하나에 도달할 때까지의 시간이라는 두 가지 측정값을 기록합니다. 마찬가지로, 방향 전환과 이동은 동물이 몸을 뒤집지 않은 상태에서 이루어져야 하며, 그렇지 않을 경우 최대 시간이 할당됩니다.동물이 5초 이내에 떨어지는 경우, 이는 배치 불량으로 인한 것일 가능성이 높으므로 재시험을 실시해야 합니다. 정적 로드(static rod)는 원래 홈 케이지 내의 환경 풍요화 여부에 따른 돌연변이 마우스의 질병 진행 상황을 모니터링하는 데 사용되었습니다. 환경 풍요화 프로그램은 로드에서의 운동 기능 장애 발현을 극적으로 지연시켰으며, 이는 뒷발의 불량한 움켜쥐기(poor clasping) 발현 지연과 병행하여 나타났습니다.신경학적 손상의 일반적인 징후로, 감염된 마우스는 주입 후 16주부터 수평바 테스트 성능이 저하되었으며, 18주부터는 로타로드(rotor rod) 테스트에서, 최소 19주부터는 정적 로드(static rods) 테스트에서 성능 저하를 보였습니다. 해마 병변은 운동 능력 측정치에 영향을 주지 않았으나, 1 2 9 s two SV 마우스는 발생 이후 로타로드와 정적 로드 테스트에서 C 57 black six 계통에 비해 능력이 저하되었습니다. 이 기술은 헌팅턴병 연구자들이 헌팅턴병 돌연변이 마우스에서 환경 풍부화의 효과를 연구할 수 있는 길을 열어주었습니다.

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