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DOI: 10.3791/2609-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
프로토콜은 두도 설립 모터 조정 작업 가속화 로타로드 및 수평 막대, 최근 옥스퍼드에서 개발 된 두 개의 테스트, 정적로드 및 병렬 막대를 위해 제공됩니다. 이 테스트는 모터 잠재적으로 자신의 권리에 대한 관심의 손상뿐만 아니라, 행동의 다른 지역의 시험에서 가능한 변수 인를 검색 할 수 있습니다.
이 절차의 전반적인 목표는 생쥐의 운동 협응을 측정하는 것입니다. 이것은 가속 로터 로드에 대한 첫 번째 테스트를 통해 수행됩니다. 다음 운동 협응은 오날 바에서 테스트됩니다.
동물은 또한 정적 막대에서 테스트 할 수 있습니다. 마지막으로, 평행봉의 성능을 측정할 수 있습니다. 궁극적으로 마우스가 운동 협응에 장애가 있는지 여부를 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.
일반적으로 이 기술을 처음 접하는 개인은 다음 모든 테스트에 대해 장치에 마우스를 올바르게 배치하는 것이 어렵기 때문에 어려움을 겪을 것입니다. 실험하기 5분에서 20분 전에 쥐를 실험실로 데려와 완전히 깨어 있는지 확인합니다. 이곳의 로터 로드 장면은 옥스퍼드 대학교에서 제작했습니다.
막대는 직경이 3cm이고 표면에 일련의 평행한 융기가 있어 쥐가 더 효과적으로 잡을 수 있습니다. 양쪽에 있는 플랜지는 마우스가 막대를 떠나는 것을 방지합니다. 지름은 30cm, 간격은 6cm입니다.
막대는 장치 바닥에서 30cm 떨어진 곳에 고정되어 있습니다. 시험을 시작하기 전에 낙상을 완화하기 위해 바닥에 부드러운 패딩 표면이 배치됩니다. 분당 4회전의 시작 속도와 분당 20회전의 가속 속도를 설정하여 로터 로드를 준비합니다.
시작하려면 마우스의 꼬리를 잡고 수평 아래 45도 각도로 막대 쪽으로 들어 올립니다. 동물이 막대에 거의 닿을 때 동물을 빠르게 풀어줍니다. 또는 마우스를 은못 위로 내릴 수 있으며 다웰은 동물을 막대로 옮기는 데 사용됩니다.
막대에 마우스를 올려 놓고 10초 후에 가속을 시작하고 마우스가 떨어지는 속도를 확인합니다. 마우스가 5초 전에 떨어지고 실험자의 잘못된 배치로 인한 것일 가능성이 있는 경우 결과를 기록해서는 안 되며 마우스가 10초 이전에 떨어지면 시험을 다시 시작해야 합니다. 시간을 기록하고 동물이 두 번 더 시도하도록 합니다.
10초 이상 머무르는 동물의 경우 동물이 떨어지는 속도를 기록합니다. 때때로 쥐는 걷기를 멈출 수 있으며 결과적으로 일부는 결국 떨어지기 전에 막대 주위를 공격할 수 있습니다. 이 발생의 속도를 기록하는 것이 유용합니다.
성능은 시도 간의 평균 속도로 계산됩니다. 예를 들어, 10초 전에 한 번 떨어진 마우스는 분당 12회전할 때까지 계속 켜져 있습니다. 두 번째는 4 더하기 12를 2로 나누면 분당 8회전합니다.
수평 막대는 추락, 사지 강도 및 조정력을 측정하며 직경 2mm의 막대가 가장 일반적으로 사용됩니다. 직경이 더 큰 바는 더 세련된 성능 점수를 제공할 수 있습니다. 38cm 길이의 황동 막대는 나무지지 기둥에 의해 벤치 표면에서 49cm 위로 고정됩니다.
막대는 약간 함께 당겨진 지지대의 노치에 장착될 때 장력으로 유지됩니다. 2mm 막대로 테스트를 시작합니다. 마우스의 꼬리를 잡고 장치 앞의 벤치에 놓습니다.
빠르게 밀어 넣으십시오. 뒤로 약 20cm 정도 뒤로 움직여 몸체를 바에 수직으로 빠르게 정렬합니다. 동물을 들어 올려 4개의 구멍만 있는 중앙의 수평 막대를 잡을 수 있도록 합니다.
정지 시계를 시작하는 동시에 꼬리를 놓습니다. 마우스가 막대를 잡지 못하고 실험자의 배치가 원인일 수 있습니다. 넘어진 것을 기록하지 말고 잠시 휴식을 취한 후 동물을 다시 테스트하십시오.
쥐가 5초 전에 넘어졌을 때, 이것이 실험자의 잘못된 위치 때문이 아닌 것 같으면, 5초 이상의 점수를 얻기 위해 최대 3번까지 반복한다. 마우스가 떨어지는 시간 또는 최대 테스트 시간이 30초인 열 4명이 건드릴 때까지의 시간을 기록하고 가장 좋은 점수를 datu Right로 취하여 수평 막대에 점수를 매깁니다. 질량이 1초에서 5초 사이에 떨어지면 6초에서 10초 사이에 1점을 얻습니다.
11초에서 20초 사이에 2점을 얻습니다. 21초에서 30초 사이에 3점을 득점합니다. 4점을 득점하면 30초 후에 떨어지거나 30초까지 바에 머물러 있습니다.
5점을 얻고, 마우스도 끝에 닿으면 5점을 얻습니다. 테스트 중 언제든지 4개의 포트로 지원합니다. 2mm 막대에서 5점을 받으면 잠시 휴식을 취한 후 더 두꺼운 막대에서 동물을 테스트할 수 있습니다.
4mm 및 6mm 막대의 채점 시스템은 2mm 막대의 채점 시스템과 동일하며 최종 점수는 누적 합계입니다. 따라서 2mm 막대에서 5점을 받은 마우스가 13초 후에 4mm 막대에서 떨어집니다. 5 더하기 8과 같은 점수입니다.
이 운동 협응 테스트에서는 바닥에서 60cm 떨어진 실험실 선반에 G 클램프로 부착된 직경 35, 28, 22, 15 및 9mm 길이의 다양한 두께의 나무 다우 또는 막대를 G 클램프로 부착합니다. 결승선을 나타내기 위해 벤치 근처 끝에서 10cm 떨어진 곳에 표시가 있습니다. 먼저 선반에서 반대쪽을 향하는 가장 넓은 막대의 맨 끝에 마우스를 놓고 동물이 선반 쪽으로 방향을 잡는 데 걸리는 시간과 총 이동 시간을 기록합니다.
방향 설정 중에 마우스가 거꾸로 뒤집혀 막대 아래에 달라붙으면 임의로 최대 점수인 120초에 할당합니다. 동물은 다른 막대에 대해 테스트되지 않으며 최대 운송 가치도 받습니다. 방향 설정 후 마우스가 떨어지거나 최대 테스트 시간인 120초에 도달하면 더 좁은 막대에서 테스트하지 마십시오.
방향 지정 후 막대를 가로지르는 동안 마우스가 거꾸로 뒤집힌 경우에도 최대 점수가 할당되며, 마우스를 홈 케이지로 되돌리고 테스트하기 전에 휴식을 취하도록 합니다. 다음으로 작은 막대입니다. 앞서 보여준 것처럼 동물을 더 작은 막대에 올려 놓습니다.
마우스가 5초 전에 떨어지면 마우스를 교체하고 최대 두 번 더 시도할 수 있습니다. 막대를 뒤집을 시간 또는 마우스가 떨어질 때까지의 시간을 기록하십시오. 평행봉을 설정하기 위해 길이가 1미터, 직경이 4mm인 두 개의 막대가 나무 지지대에 30mm 떨어져 있습니다.
기둥은 바닥에서 60cm 위에 있습니다. 마우스를 두 막대의 중앙에 놓고 세로 축이 막대에 수직인 위치에 놓습니다. 양쪽 앞 모공은 한 바에 있어야 하고 양쪽 뒷모공은 다른 바에 있어야 합니다.
점수는 정적 막대의 점수와 유사합니다. 마우스가 시작 위치로 90도 방향을 향할 때까지의 시간과 끝 지지대 중 하나에 도달할 때까지의 시간의 두 가지 측정이 수행됩니다. 마찬가지로, 동물이 거꾸로 뒤집히지 않도록 방향 전환과 이동이 이루어져야 하며, 그렇지 않으면 최대 시간이 할당됩니다.
동물이 5초 전에 넘어진다면 아마도 잘못된 위치 때문일 수 있으므로 동물을 다시 테스트해야 합니다. 정적 막대는 원래 가정 케이지에서 환경 풍부 화 여부에 관계없이 돌연변이 마우스의 질병 진행을 모니터링하는 데 사용되었습니다. 농축 프로그램은 막대의 운동 기능 장애의 발병을 극적으로 지연시켰고, 이는 뒷다리 불량 걸음의 발병을 지연시키는 것과 병행되었습니다.
신경학적 정신의 일반적인 징후인 긁힌 감염된 마우스는 16주차부터 수평 막대 성능의 감소를 보였으며, 18주차부터 로터 로드 테스트에서 주입 후, 최소 19주차부터 정적 막대의 성능이 감소했습니다. 해마 병변은 운동 능력의 측정에 영향을 미치지 않았지만, 1 2 9 s 2 개의 SV 마우스는 C 57 black six 변형률에 비해 로터 로드와 정적 로드에 비해 손상되었습니다. 이 기술은 헌팅턴병 연구자들이 헌팅턴병 돌연변이 마우스의 환경 풍부화 효과를 연구할 수 있는 길을 열었습니다.
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