Name: 쥐의 강도를 측정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 17 s
Description: 배우세요 쥐의 근력 측정 방법으로 거꾸로 된 철망 테스트와 무게 들기 테스트를 사용합니다. Mus musculus를 이용하여 운동 장애 연구에 활용할 수 있는 신뢰할 수 있는 근력 평가 기법을 익히세요.

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옥스포드 대학의 오픈 액세스 자금을 제공하는 웰컴 트러스트 (Wellcome Trust). 로버트 집사는 Wellcome 트러스트 부여 WT084655MA에 의해 자금 옥스포드 OXION 그룹의 구성원입니다.

1. 기구 1.1 Kondziela의 반전 스크린 테스트 거꾸로 화면 1 mm 직경 와이어 (그림 1)의 12mm 사각형으로 구성된 철망 광장 43 cm입니다. 그것은 4cm 깊은 나무 구슬 (다른 측면에서 등반에서하려고 시도 가끔 마우스를 방지하는) (그림 2)에 의해 둘러싸여 있습니다. 1.2 무게 시험 일곱 무게 장치를 구성합니다. 각 얽힌 좋은 계기 스테인리스 철사, 국내 주전자에있는 석회암 스케일 형성을 방지하는 데 사용되는 &quot;스케일 콜렉터&quot;의 공의로 구성되어 있습니다. 이것의 무게는 작습니다 (7g)하지만 각각의 스케일 콜렉터 스틸 체인 링크, 약 13 g의 무게 각각의 시리즈에 연결되어 있습니다. 링크의 수는 1에서 7까지 범위. 자신의 무게 때문에이다 : 20, 33, 46, 59, 72, 85 및 98g (그림 3, 4). 2. 프로시저 모든 테스트를 위해, 그들은 제대로 깨어 보장하기 위해 테스트하기 전에 실험 실내 50-20 분에 마우스를 가져옵니다. 일반적으로 근육의 강도와 흥분의 정상 수준으로 복귀 복구 할 수 있도록하기 위해, 각 모터 시험 후 홈 케이지에 반환하여 마우스를 놓습니다. <ol><li> Kondziela의 반전 스크린 테스트 </li><li> 절차 : 장소 와이어 메쉬 스크린의 중앙에 마우스, 마우스의 머리가 먼저 감소와 함께, 2 초에 거꾸로 위치로 화면을 회전 stopclock를 시작합니다. 꾸준히 40-50센티미터 패드 표면 위의 화면을 누릅니다. 마우스가 떨어지면 시간을 참고하거나 60 초 기준 시간에 도달 할 때를 제거합니다. 이상 기준 시간은 어떤 실험에 유용 할 수 있습니다. </li><li> 거꾸로 화면을 채점 : </li></ol> 1-10 초 사이에 떨어지는 = 1 11-25 초 사이에 떨어지는 = 2 26-60 초 = 3 사이에 떨어지는 60 초 = 4 이후 하락 또는, 2 분 동안 예를 들면 : 1-10 초 사이에 떨어지는 = 1 11-25 초 사이에 떨어지는 = 2 26-60 초 = 3 사이에 떨어지는 61-90 초 = 4 사이에 떨어지는 90 초 = 5 이후 하락 3. 무게 시험 꼬리의 중간 /베이스에 마우스를 개최하고 실험실 벤치에 누워 첫 번째 무게 (20g)를 파악 할 수 있도록 내려. 그것 forepaws와 와이어 스케일 콜렉터를 장악으로 중지 시계를 시작하고 링크를 벤치 명확 때까지 마우스를 올립니다. 3 초의 홀드 기준입니다. 마우스가 3 초 미만의 무게를 떨어 경우, 무게를 개최 시간을 확인합니다. 약 10 초 동안 마우스를 올려 다시 한 번 무게에 그것을 시도하십시오. 그것은 세 번 실패하면, 그 시험을 종료하고, 마우스는 최대 시간 / 달성 무게가 할당됩니다. 그것은 3을 가지고 있다면 초 그 다음 무거운 무게에 그것을 시도하십시오. 이 3 초이 리프트되는 경우에 당신이 후, 다음 무거운 무게에서 테스트첫 번째 무게에 모든 cagemates을 테스트했습니다. 다시 말하지만, 그것은 3 초 동안 체중을 유지하기 위해 세 번의 기회가 주어집니다. 최종 합계 점수가 유지되는 시간 (초)을 곱한 전체 3 초 개최 무거운 체인 링크 수의 제품으로 계산됩니다. 무거운 무게는 3 초 전에 떨어 뜨린 경우 적절한 중간 값이 계산됩니다. 따라서 3 초 5 - 링크 무게를 잡고 마우스 만 6 링크 무게를 들어 올릴 수없는이 (5 × 3) = 15의 점수가 할당됩니다. 그것은 1 초 6 링크 체중을 유지하면 점수 (5 × 3) + (1) = 16. 가끔 마우스가 적절히 장치를 그립 동기되지 않을 수 있습니다. 이것은 일반적으로 오래된 동물에서 발생합니다. 이 문제는 철사 공의 매력적인 거리에 그것을 가져 오기 전에 긴 시간 동안 꼬리 쥐를 잡고 최소화 할 수 있습니다.

<ol><li>Bulfield, G., Siller, W. G., Wight, P. A., Moore, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((K.J.X+chromosome-linked+muscular+dystrophy+%28mdx%29+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">K.J.X chromosome-linked muscular dystrophy (mdx) in the mouse.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 81, 1189-1192 (1984).</li>
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</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

인간 모터 시스템에 영향을 미치는 많은 질병의 마우스 모델을 지속적으로 개발, 따라서 생쥐의 힘의 좋은 분석이 필수적되고있다. 예를 들면 근육 영양 장애, 파킨슨 질환과 헌팅턴 무도병의 다양한 형태를 포함. 강도 분석은 척수 또는 말초 신경 손상 후 신경 재생의 모델에서 사용을 찾을 수 있습니다. 산업 및 자동차 사고가 인간에게 상당한 장애를 일으킬 계속하지만, 많은 임상 연구는 현재 신경 성장 인자에 따라 치료 가능한 도로를 조사하고있다. 근육은 개별적으로 작동하지 않습니다. 그들은 다른 근육의 제약과 골격 시스템 내에서 신경 근육 학 접합 및 작업을 통해, 두뇌, 지역 이상 척추 반사에 의해 활성화됩니다. 따라서, 시스템의 복잡성이 깨어 동물의 근육 힘의 생체 분석의 의미는 현재의 상태 평가 및 EFFE에 필수적이다모든 추정 치료의 CTS. 생쥐는 본능적으로 강한 그립 소재를 잡고, 따라서 뮤스 musculus는 근력과 가능한 치료의 장애를 평가하기에 이상적인 모델 동물이다.

평신도 사람, 생쥐의 강도를 측정하는 생각은 모순 어법의도 뭔가 터무니 나타날 수 있습니다. 그러나 집 / 실험실 쥐가 뮤스 musculus라는 것을 이유없이하지 않습니다. 그들은 실제로 쥐보다 큰 매우 높은 강도 / 무게 비율을 보유하고 있습니다. 예를 들어, 성인 마우스도 쉽게 만 앞 또는 뒤의 발을 사용하여 자신의 체중을 지원할 수 있으며, 거의 성인 실험실 쥐가이 작업을 수행 할 수 있습니다. 마우스는 생물 의학 연구에서도 큰 역할을하고있다. 그들은 사람의 운동 장애, 체세포와 기원 중추 신경계 모두를 모델링하는 데 사용할 수 있습니다. 후자의 예는 다발성 경화증, 척수 성 근위축증, 파킨슨 병, 헌팅턴의 질병 근 위축성 측방 경화증 반면 전자는 상속 근육 영양 장애 1과 중증 근무력증의 30 개 이상의 형태를 포함. 이 모델의 경우, 그들의 모터 적자의 전체 평가는 특정 테스트를 포함해야합니다강도.

쥐의 강도를 측정

Measuring the Strength of Mice

Kondziela 7 반전 스크린 테스트를 고안 1964 년에 발표했다. 그것은 모든 사지를 사용하여 근력 테스트입니다. 대부분의 일반 마우스는 쉽게이 작업에 최대 점수, 그것은 빨리하지만, 구분 총 화면입니다,이 문서에서 설명하는 가중치 테스트는 근력의 정밀한 측정을 제공합니다. 이 역 스크린 테스트보다 더 많은 등급 데이터를 제공합니다 시중 장치의 여러 가지 변형 게이지 기반의 조각은 있지만, 자신의 비용은 강도 테스트 전문하지 않는 많은 실험실의 범위 저쪽에 넣어 수 있습니다. 따라서 2000 년에 저렴하고 간단한 장치는 저자에 의해 고안되었다. 그것은 &quot;모피 수집가&quot;물때가 경수 지역에 구축 방지를위한 판매 미세한 와이어 메쉬의 공에 부착 증가 길이의 체인 링크의 일련의로 구성되어 있습니다. 우발적 인 관찰 마우스는 매우 밀접하게 이러한 그립 할 수 것으로 나타났습니다, 그래서 그들은 그립 Poin입니다 같은 이상적인 입증무게 리프팅 장치를위한 t. 상업 강도 미터 일반적인 오류가 막대 또는 다른 그립 기능은 마우스의 최대 그립을 발휘 할 수있을만큼 얇은 것입니다. 일반적으로, 얇은 선이나 막대, 더 나은 마우스는 작은 발톱 잡을 수 있습니다. 어떤 시험으로 동기 부여 요인이 잠재적 역할을 할 수 있지만, 이것은 힘의 순수한 테스트입니다. 규모 수집가의 사용은, 그러나, 동기는 대부분 정상 젊은 성인 쥐 매우 높은 것으로 나타나는 동기 부여 문제를 최소화하는 것 같다.

예상 결과 Contet 등. 2 129S2/sv 마우스는 C57BL / 6 마우스의 무게 시험에 유사하게 수행 것을 보여 주었다. 여성 C57BL / 6 마​​우스 득점 약 15, 129 그들은 70g의 주위에 약 5 체인 링크를 리프트 수 있음을 의미 마우스 17. 이것은 높은 값입니다 일반적으로 2-3 체인 링크 (점수 6-9, 33~46그램) C57BL / 6 쥐 5에 의해 해제됩니다. 이러한 차이는 아마도 이러한 생쥐받은 얼마나 많은 처리와 같은 요인과 실험자의 기술의 세부 사항에 관련이 있습니다. 무게 시험 또는 반전 된 화면 4로도 측정 해마의 병변은 강도에 영향을 미치지 않았다. 프리온 (스크래피) 병에 걸린 마우스는 감염 후 6 18주으로 반전 스크린에 손상되었다. 다소 수평 바의 손상 및 C57BL / 6 마우스에 상대적 로타로드하지만, C57BL/10 마우스는 역도 5에 손상되지 않았다. T에 대한 녹아웃 마우스여성은 후자의 3 남성보다 높은 점수하지만 그는 KATP 채널의 subunit Kir6.2는 거꾸로 화면 또는 역도 테스트에 손상되지 않았다. 이 예외적이었다; 일반적으로 무거운 남성이 여성보다 더 큰 강도를 표시합니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. 거꾸로 화면. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 2"> 그림 2. 거꾸로 화면에서 마우스의보기를 닫습니다. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 3"> 그림 3. 무게, 20g에서 98g까지. <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig4.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 4">

근력의 적자는 운동 신경 질환과 같은 여러 임상 상황에서 발생합니다. 거꾸로 화면과 역도 테스트는 조정 등의 요인 최소한의 영향으로, 거의 독점적으로 여기에서 생쥐의 측정 강도를 설명했다.

Kondziela7는 1964년에 반전 스크린 검사(inverted screen test)를 고안하여 발표하였습니다. 이는 네 가지 사지를 모두 사용하는 근력 검사입니다. 대부분의 정상 쥐는 쉽게 ... 점수를 얻습니다.

본 절차의 목적은 두 가지 서로 다른 테스트를 사용하여 생쥐의 근력을 측정하는 것입니다. 첫 번째 테스트에서는 생쥐를 녹색 와이어 메시 위에 올려놓은 다음 이를 뒤집어 떨어질 때까지의 시간을 기록합니다. 두 번째 테스트에서는 생쥐가 강철 체인 링크에 연결된 와이어 메시 볼을 잡게 합니다.추가적인 체인 링크를 연결하고 동물이 버틸 수 있는 총 무게를 기록합니다. 최종적으로, 마우스 간의 근력 차이를 밝혀내는 결과를 얻을 수 있습니다. 이 방법은 인간의 운동 장애를 연구할 때 유용하게 활용될 수 있습니다.운동 능력 저하에 대한 완전한 평가에는 근력에 대한 구체적인 검사가 포함되어야 합니다. 우선, 실험 동물을 테스트 시작 5~20분 전에 실험실로 데려와 적응시킵니다. 역방향 스크린은 직경 1mm의 와이어로 구성된 12mm 격자 형태의 43cm 정사각형 와이어 메시입니다.그 주변은 4 cm 너비의 나무 트림으로 둘러싸여 있어, 마우스가 반대편으로 기어 올라가는 것을 방지합니다. 마우스가 다치는 것을 방지하기 위해 스크린 아래에 부드러운 것을 배치하십시오. 마우스가 적응하면, 와이어 메시 스크린의 중앙에 마우스를 놓으십시오.스톱워치를 시작하고 2초에 걸쳐 스크린을 역방향으로 회전시킵니다. 마우스의 머리가 아래로 향하게 하여, 먼저 패드가 깔린 표면 위 40~50 cm 높이에서 스크린을 안정적으로 유지합니다. 마우스가 떨어지는 시점의 시간을 기록하거나 마우스를 제거합니다.60초의 기준 시간에 도달했을 때입니다. 역전된 스크린에서의 수행 능력을 점수화하기 위해, 동물이 떨어지는 데 걸리는 시간에 수치 값을 할당합니다. 예를 들어, 1초에서 10초 사이에 떨어지면 1점을 부여하며, 26초에서 60초 사이에 떨어지는 경우도 마찬가지입니다.점수가 3점인 경우, 동물을 홈 케이지로 돌려보냅니다. 테스트 후 수년 전, 제 학생 중 한 명이 마우스의 모습이 다소 지저분해 보인다고 언급하여, 저는 털을 좀 정리해 주는 것이 좋겠다고 생각했지만 브러시를 찾을 수 없었습니다. 하지만 가정용 전기 주전자의 석회질을 제거하는 데 사용되는 스테인리스강 와이어 볼을 발견했습니다.제가 이 와이어 볼로 그녀를 털어냈을 때, 그녀가 그것을 꽉 잡고 격렬하게 버텼고, 저는 여기서 근력 테스트가 이루어지고 있다고 생각했습니다. 마우스의 근력을 측정하기 위해 중량 테스트를 사용하기 전, 실험 동물이 중량을 구성하기 위한 테스트 환경에 적응했는지 확인하십시오. 무게가 약 7 g인 가는 게이지의 스테인리스 스틸 와이어 볼로 시작하십시오. 가정용 전기 주전자의 보풀 제거기가 이상적입니다.그 다음 미세 와이어 뭉치를 각각 약 13g인 일련의 스틸 체인 링크에 연결하여 수집합니다. 본 예시에서는 최대 7개의 링크를 연결하여 총 중량이 20, 33, 46, 59, 72, 85 및 98g이 되도록 합니다. 첫 번째 무게추를 실험대 위에 올려놓으며 테스트를 시작하십시오.다음으로, 마우스의 꼬리 기부를 잡고 마우스가 와이어 메시(wire mesh)를 움켜쥘 때까지 낮춥니다. 마우스가 앞발로 와이어를 잡으면 스톱워치를 작동시키고, 링크(link)가 벤치에서 떨어질 때까지 마우스를 들어 올립니다.마우스는 3초 동안 무게를 유지해야 합니다. 성공하면 동물을 홈 케이지로 돌려보내고 다음으로 더 무거운 무게로 테스트합니다. 그 후 나머지 동물들에 대해 테스트를 진행합니다.첫 번째 무게 테스트에서는 네 개의 앞발만을 사용하여 와이어 볼을 잡아야 합니다. 만약 뒷발까지 사용하여 볼을 잡는다면, 마우스와 무게추를 내려놓고 테스트를 종료한 후 몇 초 뒤에 다시 시도하십시오.마우스가 적절하게 움켜잡지 못하는 경우 이는 동기 부여의 부족일 수 있으며, 무게추를 제시하기 전에 꼬리를 조금 더 오래 잡고 있어 각성 수준을 높임으로써 동기를 강화할 수 있습니다. 마우스가 3초 이전에 무게추를 떨어뜨리면 무게추를 떨어뜨린 시간을 기록하십시오. 마우스를 약 10초 동안 휴식시킨 후 동일한 무게추로 테스트를 반복하십시오.테스트가 종료되었습니다. 동물이 세 번째로 무게를 지탱하지 못하면 동물을 홈 케이지로 돌려보내고, 동물이 3초 동안 유지할 수 있었던 가장 무거운 무게를 기록합니다. 총점은 3초 전체 동안 유지한 가장 무거운 체인의 고리 수에 유지 시간을 곱하여 계산합니다.예를 들어, 마우스가 5개 연결 무게추를 3초 동안 유지했으나 6개 연결 무게추는 들어 올리지 못한 경우, 5 곱하기 3인 15점으로 산정합니다. 가장 무거운 무게추를 3초 이전에 떨어뜨린 경우에는 적절한 중간값을 계산할 수 있습니다. 만약 6개 연결 무게추를 1초 동안만 유지했다면, 5 곱하기 3 더하기 1인 16점을 부여할 수 있습니다.대부분의 사람들은 생쥐를 작고 보잘것없는 생물로 생각하지만, 사실 작은 크기 대비 체중당 근력 비율이 매우 높으며, 라틴어 명칭인 mu musculus는 매우 적절한 이름입니다. 생쥐는 본능적으로 물체를 매우 강하게 움켜잡는 특성이 있습니다. 따라서 mu musculars는 근력 장애를 평가하기 위한 이상적인 모델 동물이며, 근력 장애의 잠재적 치료법을 테스트하는 데 사용될 수 있습니다.

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

프로토콜은 두도 설립 모터 조정 작업 가속화 로타로드 및 수평 막대, 최근 옥스퍼드에서 개발 된 두 개의 테스트, 정적로드 및 병렬 막대를 위해 제공됩니다. 이 테스트는 모터 잠재적으로 자신의 권리에 대한 관심의 손상뿐만 아니라, 행동의 다른 지역의 시험에서 가능한 변수 인를 검색 할 수 있습니다.

마우스에 모터 조정을 측정

Electronic von Frey 측정은 염증 사건 전후에 지속적으로 가해지는 압력 자극에 대한 설치류의 기계적 인출 임계값의 변화를 빠르고 정확하게 측정할 수 있기 때문에 고전적인 von Frey 필라멘트에 대한 효과적이고 개선된 대안입니다.

전자 폰 프레이 장치를 사용하여 생쥐의 뒷발에서 촉각 감도의 변화를 측정합니다.

신경 근육 질환에 대한 임상 시험에서 일차 결과 측정은 일반적으로 근육의 기능을 향상시킬 수있다. 따라서, 마우스 모델에서 임상 적으로 전치 근육 성능에 잠재적 인 치료 화합물의 효과를 평가하는 것은 매우 중요하다. 우리는 여기서이 문제를 해결하기 위해 여러 기능 테스트를 설명합니다.

의 기능적 성능을 평가<em&gt; MDX</em&gt; 마우스 모델

만성 전립선 염 / 만성 골반 통증 증후군의 전임상 모델을 유도하기 위해 신생아 산모의 분리, - 우리는 생애 초기 스트레스 패러다임을받은 남성 C57BL / 6 마​​우스의 전립선에 perigenital 기계적 감도와 비만 세포 활성화를 측정한다.

신생아 모자 분리의 마우스 모델에서 Perigenital 감도 및 전립선 비만 세포 활성화의 평가

마우스를 모델 시스템으로 사용하여 인간 질병과 관련된 유전자군을 이해하기 위한 역유전학 접근 방식을 제시하고 후속 마우스 표현형 분석 일정을 설명합니다. 관심 유전자인 HtrA2에 결함이 있는 마우스가 파킨슨병 증상을 보였기 때문에 표현형 분석 요법은 신경학적 결함을 식별하는 데 중점을 둡니다.

노화의 인간의 질병에 관여 유전자를 연구에 사용 된 유전자 변형 마우스에 대한 표현형 요법

행동 테스트 질병 또는 동물의 웰빙에 대 한 치료의 phenotypic 효과 평가 하기 위해 전 임상 시험에 사용 됩니다. 세계적으로 모터 기능 평가, 우리는 일반적인 운동, 근 력, 및 조정에 대 한 테스트를 선택: 오픈 필드 테스트, 메쉬 테스트 및 rotarod 테스트, 각각.

행동의 배터리 테스트 사정 일반 운동, 근육 강도, 그리고 조정 마우스

우리는 출생 후 하루에 일방적인 경 동맥 폐색을 수행 7-10 CD-1 신생아 hypoxic-허 혈 성 (HI) 모델을 만드는 새끼 마우스와 뇌 손상의 영향을 조사. 우리는 운영 되지 않은 정상 쥐에 비해 이러한 마우스 neurobehavioral 함수 공부.

신생아 Hypoxic-허 혈 성 뇌 손상의 마우스 모델에서 Neurobehavioral 평가

우리는 전신 마 취를 사용 하 여 프로시저 동안 쥐에 복지를 평가 하기 위해 프로토콜을 개발. 복지의 수준 뿐만 아니라 glucocorticoid 대사 산물 분석 했다 나타내는 행동 매개 변수의 시리즈. 프로토콜은 과학, 동물 중심 방식에서 심각도의 정도 추정 하는 일반적인 보조로 사용할 수 있습니다.

일반 마 취 기계를 사용 하 여 프로시저에 대 한 마우스에 웰빙의 체계적인 평가

Tameness 동물에 인간 (active tameness) 활성 접근에서 인간 (수동 tameness) 회피 응답의 감소와 증가 포함 한다. 여기, 우리는 3 행동 테스트 (활성 tameness, 수동 tameness, 및 숙박-에서-손을 테스트) 마우스의 능동 및 수동 tameness를 별도로 측정에 대 한 상세한 프로토콜을 설명 합니다.

마우스에서 별도로 측정 능동 및 수동 Tameness

무릎 근간근의 정량화는 노화, 질병, 부상 및 재활에 대한 기능적 적응을 이해하는 것이 필수적입니다. 생체 무릎 확장 이소메트릭 피크 파타닉 토크에서 반복적으로 측정하는 새로운 방법을 제시합니다.

마우스에서 무릎 엑스텐서 근육 기능의 생체 측정

본 프로토콜은 동물 모델에서 정적 및 동적 사다리를 사용하는 저항 훈련 및 테스트를 설명합니다.

동물 모델에서 정적 및 동적 사다리를 사용한 저항 훈련 및 평가를 위한 프로토콜의 다양성

배우세요 쥐의 근력 측정 방법으로 거꾸로 된 철망 테스트와 무게 들기 테스트를 사용합니다. Mus musculus를 이용하여 운동 장애 연구에 활용할 수 있는 신뢰할 수 있는 근력 평가 기법을 익히세요.

쥐의 강도를 측정

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