Name: Saphenous 베인 통해 심장 찔린로 쥐에서 혈액을 그리기 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-08-23T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 27 s
Description: 배우세요 쥐에서 대퇴정맥과 심장천자를 이용한 혈액채취 기법을. 마취 없이 소량 채취와 대량 채취가 가능하며, 약동학 연구에 필수적인 윤리적 동물실험 방법입니다.

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Saphenous 베인 통해 심장 찔린로 쥐에서 혈액을 그리기 참고 : 모든 절차가 연구소의 동물 관리 및 사용위원회의 승인을 받아야합니다. 1. saphenous 정맥의 혈액 추첨 <ol><li> 이 절차는 마취없이 수행하고 2 인 쥐를 처리 하나와 무승부를 수행 하나가 필요합니다. </li><li> 수건 밖으로 원추형을 확인하거나 뒷다리가 노출 떠나, 설치류 처리 장갑으로 쥐를 잡아. </li><li> saphenous 정맥을 볼 때까지 전기 트리머로 다리의 뒷면 면도. 어떤 머리가 찔린 사이트 접촉하지 않도록, 충분히 많은 영역을 쉐이브. 거리에 찔린 사이트에서 비 면도 머리카락을 유지하는 비 향기 손 로션의 소량을 사용합니다. </li><li> saphenous 정맥 팽창 아웃 (인간이나 대형 동물에서 혈액을 그릴 때 지혈대를 사용하여 유사한)를 확인하기 위해 다리의 바닥에 압축 지점을 확인합니다. 찔린 20G 바늘을 사용하여 정맥하고 microvette를 사용하여 나오는대로 혈액을 특종. 다리로 펌핑하는 것은 더 많은 혈액을 그리는 데 도움이 될 것입니다. 당신은 충분한 혈액을 수집하면, 출혈을 멈추게하기 위해 펑크 사이트에서 깨끗한 압축을 보유. </li></ol> 2. 심장 관통하여 혈액 추첨 <ol><li> 이 절차는 마취가 필요하며 터미널입니다. 동물은 즉시 심장 펑크의 끝에 euthanized해야합니다. </li><li> 23G1 바늘로 5 ML의 주사기를 준비합니다. </li><li> 깊이 쥐 anesthesize하고 자발적인 운동 부족, 느린 호흡 속도 및 자극 (예 : 발가락을 곤란 등)에 응답의 부족으로 마취를 확인하십시오. 장시간 마취를 보장하기 위해 절차를 수행하는 동안 쥐의 코에 휘발성 마취에 배어 종이 타월을 포함하는 주사기 배럴을 넣으십시오. </li><li> 당신에게서 멀리 직면하고 자사의 뒷면에있는 쥐를을 놓으십시오. </li><li> 당신이 오른손잡이 경우, 어떤 압력을 적용하지 않고, 가장 낮은 갈비의 수준에서 왼쪽 검지 손가락을 넣으십시오. 마음이 온도 이상 ~ 1cm, 약간 오른쪽에있는 것입니다. </li><li> 45도 각도에서 주사기를 들고, 바늘에 와서 혈액 한 방울 두 갈비와 시계 사이에 바늘을 삽입합니다. 이것은 마음에 있다고 표시됩니다. 귀하의 주사기를 이동하지 않고, 주사기를 채우기 위해 플런저에 당기십시오. 주사기가 가득되면, 바늘에서 신중을 분리하고 튜브에을 비웁니다. 주사기 그런 다음 더 많은 혈액을 그리기 위해 바늘에 다시 연결할 수 있습니다. 그것은 120~180그램 랫 혈액의 50-10 ML을 그릴 수 있어야한다. </li><li> 즉시 쥐를 안락사. </li></ol>

<ol><li>Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C. J. W. M., Boere, H. A. G., Hesp, A. P. M., Van Lith, H. A., Schurink, M., Beynen, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sampling+from+the+retro-orbital+plexus%2C+the+saphenous+vein+and+the+tail+vein+in+rats%3A+comparative+effects+on+selected+behavioural+and+blood+variables%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables.</a> Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).</li>
<li>Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R. F., Reinhardt, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collecting+blood+from+rodents%3A+a+discussion+by+the+laboratory+animal+refinement+and+enrichment+forum%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Technology+and+Welfare%22%5BJournal%5D)">Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum.</a> Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).</li>
<li>Angelow, O., Schroer, R. A., Heft, S., James, V. C., Noble, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+two+methods+of+bleeding+rats%3A+the+venous+plexus+of+the+eye+versus+the+vena+sublingualis%5BTitle%5D)+AND+%22Jounal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis.</a> Jounal of Applied Toxicology. 4, 258-260 (2006).</li>
<li>Beeton, C., Wulff, H., Barbaria, J., Clot-Faybesse, O., Pennington, M., Bernard, D., Cahalan, M. D., Chandy, K. G., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+blockade+of+T+lymphocyte+K%2B+channels+ameliorates+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%2C+a+model+for+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad%22%5BJournal%5D)">Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis.</a> Proc. Natl. Acad. , 13942-13947 (2001).</li>
<li>Beeton, C., Pennington, M. W., Wulff, H., Singh, S., Nugent, D., Crossley, G., Khaytin, I., Chen, C. Y., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+effector+memory+T+cells+with+a+selective+peptide+inhibitor+of+Kv1.3+channels+for+therapy+of+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases.</a> Mol. Pharmacol. , 1369-1381 (2005).</li>
<li>Beeton, C., Wulff, H., Standifer, N. E., Azam, P., Mullen, K. M., Pennington, M. W., Kolski-Andreaco, A., Wei, E., Grino, A., Counts, D. R., Wang, P. H., LeeHealey, C. J., Andrews, B. S., Sankaranarayanan, A., Homerick, D., Roeck, W. W., Tehranzadeh, J., Stanhope, K. L., Zimin, P., Havel, P. J., Griffey, S., Knaus, H. G., Nepom, G. T., Gutman, G. A., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kv1.3+channels+are+a+therapeutic+target+for+T+cell+mediated+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. , 17414-17419 (2006).</li>
<li>Beeton, C., Barbaria, J., Devaux, J., Benoliel, A. -M., Gola, M., Sabatier, J. -M., Bernard, D., Crest, M., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+blocking+of+voltage-gated+K%2B+channels+treats+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+and+inhibits+T-cell+activation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation.</a> J. Immunol. , 936-944 (2001).</li>
<li>Devaux, J., Forni, C., Beeton, C., Barbaria, J., Beraud, E., Gola, M., Crest, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myelin+basic+protein-reactive+T+cells+induce+conduction+failure+in+vivo+but+not+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro.</a> Neuroreport. , 317-320 (2003).</li>
<li>Beeton, C., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+and+monitoring+of+adoptive+delayed+type+hypersensitivity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. 8, (2007).</li>
</ol>

saphenous 정맥에서 혈액을 그리기 것은 마취없이 혈액 소량을 얻을 수있는 편리한 방법입니다. 반복 샘플링이 필요한 경우, 한 쥐에서 너무 많은 피를 뽑아서하지 않도록 규정을 확인하십시오. 심장 바늘로 혈액을 그리기 것은 혈액의 다량을 얻을 수있는 편리한 방법이다 그러나 이것은 터미널 절차입니다. 동물은 혈액 추첨의 끝에 euthanized해야합니다. 이러한 기술은 (살아있는 동물에 대한 모든 기술 등) 첫번째 동물이 제대로 처리하고 불필요한 고통 및 / 또는 고통의 대상이 아니라는 것을 평가할 수있을 것입니다 수의사 또는 수의사 기술자의 존재에서 수행되어야합니다.

<table><tbody><tr><td>20G 1/2 바늘</td><td>도구</td><td>BD Biosciences</td><td>305176</td><td>복제정맥 천자용</td></tr><tr><td>Microvette 300</td><td>도구</td><td>Sarstedt Ltd</td><td>20.1308.100</td><td>복제정맥 혈액 채취용</td></tr><tr><td>전동 트리머</td><td>도구</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>CLP-32130</td><td></td></tr><tr><td>23G 1 바늘</td><td>도구</td><td>BD Biosciences</td><td>305145</td><td>심장 천자용</td></tr><tr><td>5 ml 플라스틱 주사기, 슬립 팁</td><td>도구</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-826-12</td><td>심장 천자용</td></tr></tbody></table>

saphenous 베인 통해 심장 찔린로 쥐에서 혈액을 그리기

Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture

설치류에서 혈액을 그리기 것은 체외 및 생체내 연구 모두에서 다수가 필요합니다. 혈액의 사이트는 설치류에 많은 아르 그립 : 역전사 궤도 부비동, 경정맥 정맥, 상악 정맥 saphenous 정맥, 심장. 각 기술은 장점과 단점을 가지고 있으며, 일부 (예, 복고풍 - 궤도 네델란드 그립) 일부 국가에서는 더 이상 승인하지 않습니다. 그리기 혈액에 대해 서로 다른 기술의 논의를 사용할 수 1-3아르. 여기, 우리는 쥐가에서 혈액을 그리기위한 두 가지 기술, 그 구체적인 애플 리케이션을 각각 제시한다. 그것이 제대로 이루어집니다 제공 saphenous 정맥에서 혈액 그릴은 동물의 최소한의 손해를 유도하고 마취가 필요하지 않습니다. 이 기술은 반복이 플라즈마 화학 또는 혈액 카운트 6 결정, 4,5 pharmacokinetic 연구에 필요한 등, 혈액 소량의 그립 수 있습니다. 심장 찔린 하나의 동물에서 혈액의 대량의 수집가 (혈액의 최대 10 ML 150g 랫에서 얻을 수 있습니다) 수 있습니다. saphenous에서 혈액을 그릴 때하는 것은 충분히 많은 샘플을 제공하지 수있는 터미널 절차로서이 기술은 따라서 매우 유용합니다. 우리가 체외에서 T 림프구 4-9 라인 성장 쥐의 특정 변형에서 혈청의 충분한 양을 필요로 할 때 우리는 심장 소중히 사용합니다.

혈액 연구 다수에 필요한 그리는, 화합물의 pharmacokinetics 프로필을 공부 예를 들어. saphenous 정맥 또는 심장 관통하여 혈액 그릴 : 여기, 우리는 두 가지 기술을 사용하여 쥐에서 혈액을 그리는 방법을 보여줍니다.

Saphenous 베인 통해 심장 찔린로 쥐에서 혈액을 그리기

설치류로부터 혈액을 채취하는 것은 수많은 인비트로(in vitro) 및 인비보(in vivo) 연구에 필수적입니다. 설치류의 채혈 부위는 다음과 같이 다양합니다: ...

안녕하세요, 저는 Christine Beaton입니다. 저는 캘리포니아 대학교 어바인 캠퍼스 생리학 및 생물물리학과 George Chen 교수님 연구실의 보조 연구원입니다. 이제부터 보실 영상은 연구실의 대학원생인 Adriana Garcia와 함께 진행하였습니다.쥐로부터 혈액을 채취하는 두 가지 기술을 보여드리겠습니다. 먼저 보여드릴 기술은 복제정맥(saphenous vein)에서 혈액을 채취하는 방법입니다. 이 기술은 마취 없이 쥐로부터 적은 양의 혈액을 채취하고자 할 때 매우 유용합니다.예를 들어, 적은 양의 혈액이 필요하지만 정기적인 간격으로 채혈해야 하는 약동학 연구를 수행하는 경우가 있습니다. 다음으로 보여드릴 두 번째 기술은 심장 천자를 통한 채혈입니다. 이는 최종 단계의 기술이므로, 채혈 후 쥐를 희생시켜야 합니다.하지만 이 기술의 장점은 수 밀리리터에 달하는 훨씬 더 많은 양의 혈액을 얻을 수 있다는 점입니다. 따라서 해당 부위를 정리한 후, 털이 날려 튜브에 들어가거나 혈액을 응고시키는 것을 방지하기 위해 주로 일반 스킨 로션을 바릅니다. 그런 다음 엄지손가락으로 압박점을 주어 정맥이 약간 돌출되게 하면, Adriana가 정맥을 천자합니다. 이때 정맥이 움직여 제대로 찌르지 못하는 경우가 있으며, 그럴 때는 다시 천자합니다.이제 정맥을 천자했으므로 혈액 방울이 일정 간격으로 나오며, 이를 마이크로 튜브로 받아냅니다. 이 과정을 어세이에 필요한 충분한 양의 혈액이 모이거나 더 이상 혈액이 나오지 않을 때까지 반복합니다. 쥐의 상태와 천자의 정확도에 따라 뇌에서 얻을 수 있는 혈액의 양이 달라집니다. 더 많은 혈액이 나오도록 유도하기 위해 다리를 펌핑해 줍니다.이것이 일반적인 정맥 혈액 채취를 통해 얻는 혈액의 양입니다. 이제 kaun을 수행하는 방법을 보여드리겠습니다. 이 절차를 위해 실제로 필요한 것은 5 mL 플라스틱 팁 시린지 하나와 23 gauge 바늘뿐입니다.쥐가 alane으로 깊게 마취된 상태에서, 쥐가 깨어나지 않도록 alane을 적신 Kim wipe가 들어있는 시린지 마스크를 씌웁니다. 저는 오른손잡이이므로, 자세를 잡기 위해 왼손 검지를 명치 높이에 둡니다. 그런 다음 심장 위치를 찾기 위해, 약 1cm 위쪽이자 약간 오른쪽 방향으로 시린지를 약 45도 각도로 삽입합니다.심장 내에 위치한다면, 혈류가 일정하게 유지되어야 합니다. 심장 내에 있지 않다면, 더 깊게 들어가거나 더 표면

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

쥐에서 혈관의 만성 catheterization는 종종 일정 기간 동안 또는 직접 의식 혈압 측정을위한 혈액 샘플을 얻을, 물질의 관리가 필요합니다. 의식이 동물에서 혈압의 쥐 및 해당 측정의 대퇴 동맥 catheterization을 증명합니다.

혈액 샘플링, 마약 관리 및 의식 검사 중 혈압과 심장 박동을 측정 대퇴 동맥혈과 정맥 Catheterization

혈액 샘플은 생체 내 생리학적 상태나 질병의 바이오마커를 평가하는 데 유용합니다. 여기에서는 쥐의 측면 꼬리 정맥에서 혈액을 샘플링하는 방법론을 설명합니다. 이 방법은 최소한의 통증과 침습성으로 빠른 샘플을 제공합니다.

쥐의 측면 꼬리 정맥에서 혈액을 샘플링

여기, 비 취 쥐 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 간단한 꼬리 정 맥 혈액 샘플링 방법을 설명 합니다. 이 방법은 혈액에 직접 노출의 위험을 감소 하 고 단일 venipuncture에서 여러 샘플을 채 취하고 단순화 합니다.

진공 혈액 수집 시스템으로 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈액 컬렉션 반복

여기, 선물이 쥐 하 정 맥에서 혈액 샘플을 수집 하는 프로토콜.

쥐에서 혈액 샘플 컬렉션의 대체 방법으로 빵 꾸 하 정 맥

상세한 미세외과 기술은 동일한 동물에서 순차적 혈액 수집을 위한 장기 경정맥 캐뉼레이션 래트 모델을 확립하기 위해 입증된다. 생리학적 및 혈액학적 파라미터는 래트의 회복 단계 동안 모니터링되었다. 이 모델은 동물 스트레스를 유발하지 않고 경구 투여된 폴리페놀의 약동학 연구에 적용되었다.

경구 투여 약물의 연속 혈액 샘플링을 위해 쥐에서 영구적 인 경정맥 절개술을 확립하는 미세 외과 기술

본 프로토콜은 미세투석 기술을 사용하여 쥐 심장 혈액의 실시간 및 동적 수집을 위한 간단하고 효율적인 방법을 설명한다.

비침습적 미세투석 기술을 통한 쥐 심장의 동적 연속 혈액 추출

여기에서 우리는 쥐 모델에 대해 빠르고 쉽고 신뢰할 수 있는 채혈 대안을 제공하는 프로토콜을 제시합니다. 우리는 문맥에 따라 세 가지 다른 혈액 샘플링 방법을 설명합니다: 마취 또는 의식이 있는 동물에 대한 꼬리 정맥 천자, 마취 하에 등쪽 음경 정맥 천자.

쥐 모델에서 혈액 샘플링을 위한 수정된 꼬리 정맥 및 음경 정맥 천자

여기에서는 마취 없이 쥐에서 빠르고 안전하며 반복적인 채혈을 가능하게 하는 효과적인 쥐 제한과 쇄골하 정맥 천자 방법의 조합을 제시합니다.

의식이 있는 쥐의 쇄골하 정맥 혈액 샘플링

쇄골하 심장 천자는 마우스에서 말기 혈액을 채취하는 간단하고 신뢰할 수 있는 방법입니다. 조작이 쉽고 고순도 샘플을 보장합니다.

쥐에서 쇄골하 천자를 통한 심장 혈액 수집

자연 킬러 세포 lymphocytes의 작은 인구입니다. 여기 StemCell Technologies에서 키트를 사용하여 부정적인 선택에 의해 인간의 혈액에서 이러한 세포를 분리하는 방법을 보여줍니다. 얻은 세포 따라서 절차의 번호를 사용 준비가 가능한 및 항체에 의해 훼손되지 않은, 그리고.

StemCell 기술에서 RosetteSep 키트와 함께 인간의 피를에서 NK 세포의 농축

배우세요 쥐에서 대퇴정맥과 심장천자를 이용한 혈액채취 기법을. 마취 없이 소량 채취와 대량 채취가 가능하며, 약동학 연구에 필수적인 윤리적 동물실험 방법입니다.

Saphenous 베인 통해 심장 찔린로 쥐에서 혈액을 그리기

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